人促卵泡素（FSH）说明书
人促卵泡素(FSH)试剂盒使用说
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本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 96T
0.5U/L -16U/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中促卵泡素(FSH)含量。 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人促卵泡素(FSH)水平。用纯化的人促卵泡素 (FSH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH)， 再与 HRP 标记的促卵泡素(FSH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗 涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测 定吸光度(OD 值)，通过
标准
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曲线计算样品中人促卵泡素(FSH)浓度。 试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶 2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(32U/L) 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板 9 标准品稀释液 12 孔×8 条 1.5ml×1 瓶 4 样品稀释液 10 说明书 6ml×1 瓶 1 份 5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
12 密封袋 6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 1 个 标本要求
1(标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20?保存，但应避免反复冻融
2(不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
16U/L 5 号标准品 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 8U/L 4 号标准品 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 4U/L 3 号标准品 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 2U/L 2 号标准品 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 1U/L 1 号标准品 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
然后再加待测样品 10µl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37?温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37?避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
操作程序
总结
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:
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1(试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2(浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3(各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4( 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
大于标准品孔第一孔的 OD 值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5( 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6(底物请避光保存。
7(严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8(所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9(本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1(试剂盒保存:;2-8?。
2(有效期:6 个月
浙公网安备 33021202002483