白色链霉菌

放线菌 白色链霉菌 中文学名：白色链霉菌 拉丁学名：Streptomyces albus[1] 分类：链霉菌属，白色链霉菌种 形态特征：孢子丝紧密或松敞螺旋形，含10-50个孢子。孢子球形至卵圆形，表面光滑。 性状特征： 蔗糖硝酸盐琼脂：气丝絮状至粉状，白色至雪白色。基丝无色。在大部分培养基内无可溶色素。 葡糖天冬素琼脂：气丝白色(而非如瓦氏记载灰色变为微褐色)。基丝无色。 甘油天冬素琼脂(ISP)、无机盐淀粉琼脂(ISP)：气丝白色或黄白色。基丝反面无色至淡黄色。 淀粉琼脂：气丝白色。基丝无色至淡黄色。 营养琼脂：一般无气丝。 酵母精麦芽精琼脂(ISP)、燕麦粉琼脂(ISP)：气丝白色或黄白色。基丝反面无色至淡黄色。 马铃薯块：气丝白色。基丝地衣状，乳脂色。 明胶液化强，无可溶色素。牛奶胨化快。淀粉水解随不同菌株而异。硝酸盐还原。不产生类黑色素、酪氨酸酶和H2S。有时有特征性霉味。 利用D-葡萄糖、D-木糖、D-果糖、D-甘露醇；对L-阿拉伯糖、棉子糖利用报道不同；不利用蔗糖、鼠李糖和肌醇。 根据文献记载，一些菌株产生抑制革兰氏阳性细菌和分枝杆菌的白放线菌素(acti-nomycetin)，另一些菌株产生抑制革兰氏阳性和阴性细菌、酵母和丝状真菌的硫藤黄菌素(thiolutin)或者其他抗生素，如多烯抗生素——内霉素(endomycin)，广谱抗生素——阿尔玛菌素(almarcetin)、杀稻病菌素(imoticidin)等。白色链霉菌也是ε-聚赖氨酸的产生菌。 生理生化实验： 一、淀粉水解 淀粉培养基（pH7.2） 蛋白胨 10g NaCl 5g 牛肉膏 5g 可溶性淀粉 10g 琼脂 15g 水 1000ml Lugol（卢哥氏）碘液 二、硝酸盐还原试验 资料①　 　 （1）原理：硝酸盐还原反应包括两个过程：一是在合成过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化为氨基酸和细胞内其他含氮化合物；二是在分解代谢过 程中，硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。能使硝酸盐还原的细菌从硝酸盐中获得氧而形成亚硝酸盐和其他还原性产物。但硝酸盐还原的过程 因细菌不同而异，有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐，如大肠埃希菌；有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵；有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为 氮，如假单胞菌等。硝酸盐还原试验系测定还原过程中所产生的亚硝酸。 　　（2）培养基：硝酸盐培养基。 　　（3）试剂：甲液（对氨基苯磺酸0.8g+5mol/L醋酸lOOml；乙液（α-奈胺0.5g + 5mol/L醋酸lOOml）。 　　（4） 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ：被检菌接种于硝酸盐培养基中，于35℃培养l～4d.将甲、乙液等量混合后（约0.1m1）加入培养基内，立即观察结果。 　　（5）结果：出现红色为阳性。若加入试剂后无颜色反应，可能是：①硝酸盐没有被还原，试验阴性；②硝酸盐被还原为氨和氮等其他产物而导致假阴性结果，这时应在试管内加入少许锌粉，如出现红色则表明试验确实为阴性。若仍不产生红色，表示试验为假阴性。 　　若要检查是否有氮气产生，可在培养基管内加一小倒管，如有气泡产生，表示有氮气生成。 　　（6）应用：本试验在细菌鉴定中广泛应用。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。 资料② 原理：有的细菌能把硝酸盐还原为亚硝酸盐，而亚硝酸盐能和对氨基苯磺酸作用生成对重氮基苯磺酸，且对重氮基苯磺酸与α-萘胺作用能生成红色的化合物N-α-萘胺偶氮苯磺酸。 （一）适用于需氧菌的方法 培养基： 硝酸钾（不含NO2-）         0.2g 蛋白胨                      5g 蒸馏水                      1000ml 溶解，调节pH至7.4，分装试管。每管约5毫升，15磅高压灭菌15分钟。 试剂： 甲液    对位氨基苯磺酸         0.8g 5N醋酸溶液            100ml 乙液    α—萘胺               0.5g 5N醋酸溶液            100ml 方法：接种细菌后37℃培养4天，沿管壁加入甲液二滴与乙液二滴，当时观察。阳性者立刻呈红色。 （二）厌氧菌硝酸盐培养基法 培养基： 硝酸钾（不含NO2-，化学纯）    1g 磷酸氢二钠                     2g        葡萄糖                         1g  琼脂                           1g 蛋白胨                         20g 蒸馏水                         1000ml 加热溶解，调整pH至7.2，过滤，分装试管，15磅高压灭菌15分钟。 方法：接种后作厌氧培养，试验方法和结果观察同上法，但培养1～2日即可。 三、硫化氢实验  资料① （1）将配制好的含半胱氨酸培养基灭菌后分装试管，每管4~5cm，灭菌备用。 （2）将普通滤纸剪成约0.5~0.6cm宽的纸条，用浓度为50~100g/L的乙酸铅将纸条浸透，烘箱烘干后放入培养皿内备用。 （3）将菌液接种于半胱氨酸培养基内，用无菌镊子夹取一乙酸铅纸条悬挂于接种管内，下端接近培养基表面但不接触液面，上端用棉塞塞紧，以未接种菌液的培养基作为空白对照，将试管置于40摄氏度恒温培养箱培养24h，观察纸条颜色变化。 （4）结果：滤纸变黑为阳性；不变为阴性。 （5）半胱氨酸培养基： 胰蛋白胨 10g 牛肉浸膏 3g 酵母提取物 5g NaCl 5g 半胱氨酸 0.4g 葡萄糖 2g 蒸馏水 1L 调pH7.2~7.4 资料②  原理：有些细菌能分解含硫氨基酸，产生硫化氢（H2S），H2S会使培养基中的醋酸铅或氯化铁形成黑色的硫化铅或硫化铁。 方法1：醋酸铅琼脂法 培养基： 肉汤琼脂                    100ml   10％硫代硫酸钠溶液（新配）  2.5ml 10％醋酸铅溶液              3ml 三种成份分别高压灭菌，前二者混合后待凉至60℃，加入醋酸铅溶液，混合均匀，无菌分装试管达5～6cm高，立即浸入冷水中，使冷凝成琼脂高层。       方法：用接种针蘸取纯培养物，沿管壁作穿刺，孵育于37℃ 1～2天后观察，必要时可延长5～7天。培养基变黑色者为阳性。 或将细菌培养于肉汤、肝浸汤琼脂斜面或血清葡萄糖琼脂斜面，在试管的棉花塞下方挂一约6.5×0.6cm2的浸蘸饱和醋酸铅溶液（10g醋酸铅溶于50毫升沸蒸馏水中即成）且已干燥的滤纸条，于37℃培养，观察7天，纸条变黑者为阳性结果。 方法2：三氯化铁明胶培养基法 培养基： 硫胨（Thiopeptone）         25g          明胶                       120g 牛肉膏                     7.5g          氯化钠                     5g 蒸馏水加至                 1000ml 上述成份灭菌后趁热加入5ml灭菌的10％氯化铁溶液。立即以无菌操作分装试管，达5～6cm高，迅速冷凝成高层。      方法：穿刺接种，培养于37℃观察7天，培养基变黑色者为阳性。 四、石蕊牛乳试验 原理：紫乳培养基中的主要成分为干酪素、乳糖及指示剂等。由于各种细菌对这些成分的作用不同，引起培养基的变化也有不同，观察的主要变化为： 产酸：主要从乳糖产生酸，指示剂变酸色（石蕊为红色，溴甲酚紫为黄色）。 酸凝或加有产气：产酸，并有牛乳的凝固（pH4.7以下）；如有气体形成，则凝块中有裂隙，在魏氏梭菌则呈“暴烈发酵”。 凝乳酶产生：很少或无酸产生，牛乳凝固。 胨化：部分或大部分牛奶变清亮。 产碱：细菌产生蛋白酶可将干酪素分解产生胺或氨，使培养基的pH进一步升高，呈深紫色。 培养基：加石蕊的酒精饱和溶液于新鲜脱脂牛奶中，使达浅紫色，分装于小试管，用流动蒸汽灭菌，每天1次，每次1小时，共3天。接种细菌后，培养及观察一周。 石蕊酒精溶液的制备：8g石蕊在30ml40％乙醇中研磨，吸出上清液，再如此用乙醇操作两次。加40％乙醇到总量为100ml，并煮沸1分钟。取用上清 液，必要时可加几滴1N盐酸使达艳紫色。现在多应用溴甲酚紫代替石蕊，即于100ml脱脂乳中加入1.2ml的1.6％溴甲酚紫的乙醇溶液。 方法：将细菌接种于紫乳培养基中，37℃培养1～7天后观察结果，根据细菌的种类不同，可呈现上述一种或几种现象。