生物安全课件PPT课件

临床实验室生物安全和职业防护黄石人福医院检验科一、临床实验室生物安全的重要性二、临床实验室生物安全相关术语和定义三、临床实验室生物安全操作技术 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 四、临床实验室仪器设备的使用五、临床实验室标本的安全操作六、临床实验室医护人员职业暴露处理原则一临床实验室生物安全的重要性涉及病原微生物实验室生物安全法律法规与监督管理法律:中华人民共和国传染病防治法法规:病原微生物实验室生物安全管理条例、医疗废物管理条例规章:传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法、传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法、人间传染的病原微生物名录 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 :《实验室生物安全通用要求》（GB19489－2008）、《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（WS233－2002）、《生物安全实验室建设技术规范》重硬件，轻软件把生物安全当做科学实验之外的“行政”任务谁来强制执行？目前存在的普遍问题经血或体液传播的职业暴露经皮肤或粘膜暴露HIV、HBV、HCV感染为主传播方式：针刺或其他锐器损害病毒入皮肤抓伤、皮损、擦伤、烧伤病毒因意外溅入眼、鼻、口三种病毒不会经空气传播HBV、HCV和HIV职业感染的相对危险性病毒HBVHCVHIV健康工作者的血清阳转率（%）3－351－280.12－0.4每ml血中病毒颗粒数102－10810－10610－103针头刺伤的传播概率6－300.75－100－3美国CDC全球卫生保健人员被针刺伤病种 传染力 流行率 (中国)HBV 30% 14%HCV 6% 4.1%HIV 0.3% <0.1%备注：传染力是感染快慢的表示流行率是指流行的普遍程度HIV职业暴露平均感染率皮肤破损0.33%（0.2-0.5%）粘膜接触0.09%（0.06-0.5%）临床实验室发生HIV职业暴露疾控中心医院妇产科护士检验科实验室感染取决于病原微生物自身性质：毒力、感染量、侵入途径感染对象状况：免疫状况（性别、种族、年龄、怀孕、免疫耐受、免疫抑制、疾病等）实验室安全防护措施力度（生物安全）：安全操作技术、安全设备、实验室设施的安全构造实验室感染传播链及其控制手段容器中的病原体泄漏预防接种感染途径/感染剂量传播个人防护装备易感宿主规程/设备潜伏期传染病监测危害评估的原则病原微生物危害程度不同的实验活动病原微生物危害程度分类主要依据微生物的致病性。致病性越强，导致的疾病越严重，其等级越高微生物的传播方式和宿主范围。它们可能会受到当地人群已有的免疫水平、宿主群体的密度和流动、适宜媒介的存在以及环境卫生水平等因素的影响当地所具备的有效预防措施。包括：通过接种疫苗或给予抗血清的预防（被动免疫）；卫生措施，例如食品和饮水的卫生；动物宿主或节肢动物媒介的控制当地所具备的有效治疗措施。包括：被动免疫、暴露后接种疫苗以及使用抗生素、抗病毒药物和化学治疗药物，还应考虑出现耐药菌株的可能性不同的实验活动的危害对于同一病原微生物而言，从事不同的实验活动，操作者接触微生物的数量、浓度、可能的感染途径是不同的，一旦暴露，其后果也是不同的对于不同的实验活动均应进行危害评估，以指导操作者采取合适的生物安全防护操作一次可产生各种严重程度微生物气溶胶的活动根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫学病原体筛检的防护标准应该是病原体危害程度分类实验活动BSL级别各类肠道致病菌3类（VC2类）BSL-2各类呼吸道致病菌3类（TB2类）BSL-2各类条件致病菌3类BSL-2乙型肝炎病毒3类BSL-2丙型肝炎病毒3类BSL-2爱滋病病毒2类BSL-2梅毒螺旋体3类BSL-2二、临床实验室生物安全相关术语和定义生物安全由动物、植物、微生物等生物给人类健康和自然环境可能造成不安全的防范；包括由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响所采取的有效预防和控制措施。实验室生物安全避免危险生物因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩散并导致危害的综合措施。生物危险生物因子将要或可能形成的危害，是伤害概率和严重性的综合。又称生物风险。生物危害由人为操作或人类活动而导致生物体或其产物对人体健康和生态环境的现实损害或潜在风险。这里的危害包括对操作者，其他相关人员、环境和其他生物的危害。气溶胶悬浮于气体介质中的粒径一般为0.001-100微米的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。生物安全柜负压过滤排风柜。防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶。缓冲间设置在清洁区，半污染区和污染区相邻两区之间的缓冲密闭室，具有通风系统，其两个门具有互锁功能，且不能同时处于开启状态。三、生物安全实验室操作技术规范所有操作人员必须经过培训，通过考核，获得上岗证书；在开始相关工作之前，应对所从事的病原微生物及相关操作进行危险评估，根据国家对于各种微生物操作的危险等级划分和防护要求以及危险评估的结果，制定全面、细致的标准操作规程和程序文件，对于关键的危险步骤设计出可行的防护措施并对这些细节了然于胸；熟悉各级生物安全实验室运行的一般规则，掌握各种仪器、设备、装备的操作步骤和要点，对于各种可能的危害应非常熟悉；应掌握各种感染性物质操作的一般准则和技术要点。生物安全意识至关重要实验室的生物安全规范实验室的运行规范（SOP）仪器设备的使用规范针对感染性材料的操作规范个人防护用品的使用规范……1.初级防护:保护工作人员:实验室操作和技术-标准操作-特殊操作安全设备:初级屏障2.二级防护:保护环境设施设计和建筑:二级屏障生物安全原则安全设备（初级屏障）防护服实验室工作外套手套安全设备（初级屏障）人员防护设备面部保护眼部保护安全设备（初级屏障）高压灭菌锅洗眼/喷淋装置根据生物危害性和实验室防护能力，将实验室分为四级。其中，对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人，动物和环境不会造成严重危害。有有效的预防和治疗措施的为二级。BSL-1和BSL-2实验室实验室的进入工作人员的防护要求相关操作的指导原则实验区的管理原则实验室生物安全管理指导原则BSL-1BSL-2标准的BSL-2实验室除了满足BSL-1的要求以外，在门上增加了生物危险标志、II级生物安全柜。按国标（GB19489-2008）,还要配备高压蒸汽灭菌器、洗眼器（一）实验室的进入未经批准，任何人不得进入实验室工作区域。儿童不得进入实验室工作区域。可能增加获得性感染的危险性或感染后可能引起严重后果的人员不允许进入实验室。BSL-2实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，包括通用的生物危险性标志，标明传染因子、实验室负责人或其他人姓名、电话、以及进入实验室的特殊要求。实验室的门应保持关闭。工作人员进入动物房应当经过特别批准。与实验室工作无关的动物不得带入实验室。（二）工作人员的防护要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。（三）有关操作的指导原则严禁用口吸移液管,严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。应限制使用注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液外，注射针头和注射器不能用于移液或用作其他用途。实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情况，保存相关记录。污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果准备专门的污水处理系统。只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室（四）实验室工作区的管理原则实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。每天工作结束后应清除工作台面的污染。若发生具有潜在危害性的材料溢出应立即清除污染。所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须先清除污染。感染性材料的包装和运输应遵循国家和∕或国际的相关规定。如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。必须强调对污染的针头或利器的使用要非常谨慎。对易于通过气溶胶途径传播的微生物、具有增加工作人员暴露气溶胶或高度飞溅物的程序二级生物安全防护水平微生物操作必需在一级生物安全防护水平的基础之上，增加生物安全柜、高压灭菌器、安全离心机罩帽、防溅罩或面罩等。（五）生物安全管理的指导原则实验室负责人负责制订和采用生物安全管理 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 以及实验室安全或/和操作手册。实验室应能提供常规的实验室安全培训,并建立 制度 关于办公室下班关闭电源制度矿山事故隐患举报和奖励制度制度下载人事管理制度doc盘点制度下载 。实验室负责人（或生物安全负责人）要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，同时要求他们阅读生物安全或/和操作手册，并遵循标准的操作程序。实验室内应备有可供取阅的安全或/或操作手册。所有实验室人员必须经过培训，了解所从事工作的危险、掌握有关的管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 。如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗，并建立健康档案。实验室人员应接受与所操作生物因子或实验室内潜在的因子相关的免疫接种或检测。四、临床实验室仪器设备的使用仪器相关危险II级生物安全柜的使用注意空气流动方向，使用高能灯替代酒精灯定期做清洁，使用前后使用紫外线灭菌II级生物安全柜的气流方向二、离心机的使用离心分类转头转速（rpm）微速离心～15,00低/高速离心2,000～20,000超速离心～120,000离心可能造成的伤害途径离心机机械故障实验器材故障，如离心管等产生气溶胶；操作者失误。对于高致病性病原微生物，必须要高度警惕离心过程中产生的气溶胶风险。－大型离心机上应加装负压罩，以及时吸出离心机排出的气体，并排至实验室的过滤通风系统，在BSL-3及以上级别实验室尤其要注意。－微型离心机则可放在安全柜内离心，但要注意其对安全柜气流的影响。－如果不能在安全柜内离心也无负压罩，则必须将密封的转头在安全柜内打开。－所有的离心管必须带盖密封，其开启应在安全柜内进行。生物安全转头样品瓶外套是转头的一部分样品瓶可于安全柜内打开保证漏出的样品保留在瓶内三、搅拌器、振荡器、混匀器和超声波破碎仪的使用使用的管子、盖子、杯子或瓶子都应该保持完好，无裂隙、无变形。盖子、垫圈应恰好配套，保持完好。在混匀、振荡和超声波破碎过程中，器皿内的压力会增大，含有感染性材料的气溶胶可能会从容器和盖子间的空隙逸出。推荐使用塑料的，特别是聚四氟乙烯（PTFE）器皿，因为玻璃可能会破裂，释放出感染性物质，而且可能伤及操作者。当使用匀浆器、振荡器和超声波破碎仪时，应有防护装置，在生物安全柜里操作。使用涡旋振荡器时，必须在生物安全柜内操作，并且操作的容器必须为密闭的，以避免产生气溶胶和发生液体溅洒。在操作结束后，应在生物安全柜里开启容器。操作人员使用超声波破碎仪时，应有耳部听力保护装置。四、组织研磨器的使用使用玻璃的研磨器时，应戴上手套，手里再垫上一块柔软的纱布后操作。塑料（PTFE）的研磨器更安全。组织研磨器应该在生物安全柜里操作和开启。五、冰箱和速冻器的使用和保养冰箱，低温冰箱和固体干冰盒要定期除霜和清扫。其中所有的安瓿，冻存管等在储存过程中已破裂的要及时拿走。在清扫的过程中应佩戴面部保护装置并戴手套，清扫后，抽屉内表面应消毒处理。所有保存在冰箱里的容器等，都应该有清楚的标签，并且标签上有内容物的科学命名，储存日期和储存人姓名。无标签的和过期的材料应高压灭菌后丢弃。对于冰箱内的储存物应有详细的目录除非有防爆措施，严禁将易燃液体保存在冰箱里，冰箱的门上应张贴这方面的注意事项。六、冻干机的使用对于高致病性病原微生物应在BSL-3或以上级别实验室进行冻干。冻干机排出的气体要经过HEPA过滤并将排出管道插入装有消毒液的容器中。对于冻干高致病性病原微生物产生的冷凝水应收集入消毒液容器中并高压灭菌处理。冻干机的机舱恢复到室温后用适宜的消毒液擦拭。实验室内标本的安全操作（一）标本容器用于装盛感染性标本的容器可以是玻璃的，但为了保证安全，最好采用塑料制品（根据实际需要而定）。标本的容器应当坚固，不易破碎，盖子或塞子盖好后不应有液体渗漏。所有的标本都应存放在容器内。容器应正确地贴上标签以利于识别，标签上应有样品名称、采集日期、编号等必要的信息。样品的有关表格和/或说明不要绑在容器外面，而应单独放在防水的袋子里，以防止发生污染而影响使用。（二）标本的实验室内运输为防止发生意外渗漏或溢出而威胁操作者的安全，在实验室内运输标本时，应使用金属的或塑料材质的第二层容器（如盒子）加以包裹，在第二层容器中应该有标本容器的支架，将标本容器固定在支架上，以使其保持直立。第二层容器应耐高压或者能抵抗化学消毒剂的腐蚀，以便定期清除污染。封口处最好有一个衬圈，以防止发生渗漏。（三）标本的接收大规模接收标本的实验室应在一个专用的房间或区域进行。对于病原已知的按国家规定可在BSL-2操作的病原微生物或未知的感染性材料，最低应在一个专用区域或房间接受，并在生物安全柜内打开外包装，操作人员应穿防水的防护服，戴生物安全专用口罩和眼罩、手套。按国家规定需要在BSL-3或以上级实验室操作的病原微生物或标本，应按国家规定的防护等级，在相应级别的实验室的安全柜内打开，并采取相应的防护措施为保证安全。不应在普通的BSL-1实验室接受标本。（四）标本包装的打开接收并打开标本包装的人员应受过防护培训（尤其是处理破裂的或渗露的容器）并应知道所操作标本的潜在的健康危害，操作时要采取合适的防护措施。所有标本应该在生物安全柜里打开包装，同时备有消毒剂以便随时处理可能出现的标本泄漏。打开包装前应先仔细检查每个容器的外观、标签是否完整，标签、送检报告与内容物是否相符，是否有污染以及容器是否有破损等，要登记详细的报告单并记录处置方法。接受标本应由2人进行。（五）标本管或标本容器的打开标本管应该在生物安全柜里打开。必须戴手套。推荐使用眼部和粘膜保护装置[护目镜或面罩（头盔）]。防护服外应再戴一个塑料围裙。打开标本管的塞子时，应在手里先垫上一块纸或纱布再握住塞子，防止溅出。（六）消毒推荐使用次氯酸盐和高级消毒剂进行消毒。一般新配制的次氯酸盐溶液有效氯含量应为1g/L，但用于消毒溢出的血液，有效氯含量则应为5g/L。戊二醛可用于表面消毒。用于显微镜观察的薄膜和涂片的操作用显微技术检测固定并染色的血液、痰和排泄物等标本时，可能并未杀死涂片上的所有微生物和病毒，所以这些涂片等物品应用镊子来操作，妥善保存，并且在丢弃以前要消毒和/或高压灭菌。实验室操作与技术：采用机械式移液装置实验室操作与技术：洗手六、医务人员职业暴露后的处理原则健康监测1．应指定专人负责健康监测工作。应当具有与该实验室中所操作的病原微生物有关的传染病防治知识，及时调查、了解实验室工作人员的健康状况。2．常规监测开展实验室工作前对实验室人员进行健康体检并建立健康档案，对实验室人员进行定期临床检查，实行系统监测。采集本底血清标本并长期保存。健康监测3．实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入BSL-2以上级别的实验室工作出现下列情况，不应进入上述区域：患发热性疾病；感冒、上呼吸道感染、或其他导致抵抗力下降的情况；妊娠；已经在实验室控制区域内连续工作4h以上，或其他原因造成的疲劳状态。4．进入BSL-3及以上级别实验室工作的相关人员，应每日早、晚测量体温并观察相应症状；结束实验室工作后，应继续进行相应时段（相关疾病的平均潜伏期）的健康监测。一旦出现异常情况应立即报告实验室负责人，以便及时采取相应控制措施。实验室意外事件的处理原则造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室报告，由实验室负责人处理。例如实验过程中。由于标本、试剂意外溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，待消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行清理。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全2级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理活动，并检查处理效果。4实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂、离心机事故等，应立即关闭实验室，张贴禁止入内的标识。用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域，24小时再进行终末消毒，实验室负责人除立即采取对应措施外，应向上级部门报告，并填写意外情况登记与处理记录表。实验室工作人员在没有强毒微生物时，在实验室内受到意外伤害，如割伤、烧伤、烫伤等，在实验室内昏倒或发生身体严重不适，也有实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作，用消毒液清洗未破损的皮肤表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗。由在同一实验室内人员或派人迅速着装进入实验室，清除造成伤害的原因，清理实验材料，帮助受伤人员紧急处理并撤离实验室。受到伤害的人员应进行治疗并休息，在身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。实验室在经过整理，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用伤害事故可能导致被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、黏膜暴露等途径接触到感染性液体，或在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面，意外接种等情况，首先进行局部处理，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂和清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。暴露的黏膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。实验室负责人应向上级部门报告，对受伤害者进行隔离观察，同时根据情况预防性用药，并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。谢谢！