尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用论文

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尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用论文尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用表肿瘤，且有易复发的特征，5 a内复发的可能性为50%~70%，大多数肿瘤在1 a复发,1,. 早期发现，定期术后随访，检测复发是膀胱肿瘤成功治疗的关键. 目前 121_1临床上常用的诊断及复查方法为膀胱镜检查、尿脱落细胞检查及B超检查. 膀胱镜检查具有侵袭性，许多患者难以接受;尿脱落细胞检查及B超检查 ,. 近年来随着分子生物学的发展，尿核基质蛋虽非侵入性，但灵敏度不高,2 白22(NMP22)成为临床研究较多的指标之一,3,. 我们对自膀胱移行细胞癌患者进行了尿NMP22的检查，并进行手术后的复发与未复发的动态观察. 1对象和方法 1.1对象收治膀胱癌组患者45例，男35例，女10例;年龄29~81(平均55.7)岁. 其中行膀胱部分切除术12例，TURBT32例. 膀胱癌术后随诊3 mo~2 a. 术后20例复发，25例未复发，复发率44.4%. 均有血尿，行膀胱镜检+活检诊断为膀胱移行细胞癌，所有复发病例均经病理证实. 非膀胱癌泌尿系疾病30例，男16例，女14例. 年龄30~85(平均47.8)岁. 其中尿石症10例，泌尿系感染(单纯)6例，前列腺增生伴出血8例，前列腺癌1例，肾癌4例，尿道狭窄1例. 健康志愿者20例，男13例，女7例，年龄35~69(平均53.5)岁. 1.2方法所有尿样均在行膀胱镜检、导尿等腔内操作前于08:00~12:00一次性收集. 标本分2份: 1份查NMP22，1份行尿脱落细胞学检查. 查NMP22的尿样标本收集后避光保存，立即转入含有防腐剂的尿样收集瓶500 r/min离心15 min后取上清夜转入塑料试管中3~20?保存. 实验 NMP22试剂盒由美国Matritech公司生产，严格按试剂盒说明书操作，采用双抗体夹层免疫酶标法用酶标仪测得吸光度，建立标准曲线，取得样品NMP22的测定值(单位U/L). 115_1统计学处理:参照文献以10.0×103 U/L为NMP22检测临界值，所有数据采用SPSS统计软件包处理. 尿NMP22各组之间比较采用非参数秩和 121_1检验. Plt;0.05为有统计学差异. 2结果 2.1NMP22含量45例膀胱癌NMP22为7.9×103~158.0×103U/L，非膀胱癌泌尿系疾病MP22为2.1×103~17.1×103U/L，健康志愿者NMP22为1.4×103~10.3×103U/L，膀胱癌患者尿中NMP22浓度高于非膀胱癌泌尿系疾病和健康志愿者(Plt;0.05). 2.2NMP22与尿脱落细胞学以10.0×103U/L为NMP22检测阳性临界值，NMP22与尿脱落细胞学诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值有一定差异(表1)，NMP22敏感性高于尿脱落细胞学检查(Plt;0.01)，但特异性稍低. 表1NMP22和尿脱落细胞学敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值(略) 2.3NMP22在膀胱癌术后复发中的检测45例膀胱癌术后复发20例患者尿 NMP22中位数为30.7×103U/L，25例未复发患者尿 NMP22中位数为6.1×103U/L(Plt;0.01). 以10.0×103U/L为最适临界值，复发病例NMP22?10.0×103U/L者15例，NMP22lt;10.0×103U/L者5例;未复发病例NMP22?10.0×103U/L者5例，NMP22lt;10.0×103U/L者20例，敏感性75%，特异性80.0%. 3讨论核基质蛋白(nuclear matrix protein, NMP)是核基质的重要组成部分，有多种结构和功能，并且有较强的组织器官特异性,4,，最早于由Berezney等,5,报道. NMP22属于核基质蛋白的一种，又称为有丝分裂器蛋白. 是构成细胞核网状结构的一个组成部分，与DNA的复制、转录、RNA合成及基因表达的调控有关. NMP22为核有丝分裂装置蛋白(NuMAP)的一个亚单位. NuMAP与有丝分裂期间纺锤体的形成有关，其主要供能为在细胞有丝分裂末期使染色体正确、均匀地分配到子代细胞,6,. 因此，NMP22与细胞增殖活跃的组织关系密切. 据报道，体外培养的膀胱癌细胞内NMP22浓度较正常膀胱移行上皮细胞至少增加25倍,7,. 由于膀胱癌中NMP22在细胞凋亡中以可溶性复合物片断形式随尿排出，而这个被释放的片断可通过双单抗酶联免疫法予以测定，检测限达到pg级，这使得尿的NMP22成为膀胱肿瘤的特有标记物. Carpinito等,8,报道移行细胞癌患者组尿中NMP22浓度明显高于良性泌尿外科组和健康人群，初步认为NMP22作为一种筛选膀胱癌的瘤标在临床上是可行的. 我们用同样的方法检测了45例膀胱癌患者尿中NMP22浓度为38.7×103U/L，明显高于非膀胱癌泌尿系疾病组的8.7×103U/L和正常对照组的7.1×103U/L，结果再次证明NMP22是尿液中诊断膀胱移行细胞癌的良好标记物等,9,对187例血尿患者进行NMP22检测，以10.0×103U/L为最适临界值诊断膀胱癌的敏感性、特异性分别为61.2%和89.9%，而细胞学检查敏感性为35.4%. 本组NMP22检测采用10.0×103U/L为最适临界值敏感性与文献报道相似. 本研究表明NMP22具有较高的敏感性，明显高于尿脱落细胞学检查，可作为膀胱镜检查的辅助手段，对膀胱癌患者的筛查十分有利. 但其特异性偏低，其原因可能为某些感染、结石、异物、创伤等可引起尿路上皮损伤，引起细胞破损导致尿中NMP22升高，并且以10.0×103U/L这一标准为临界值亦使特异性有所下降. 因此相对于传统的尿脱落细胞学检查，尿NMP22的检查具有较高敏感性，但缺点是特异性不如尿细胞学检查，因此在临床上NMP22检测不可能完全替代细胞学检查，但可弥补细胞学检查对膀胱癌敏感性过低的不足，二者结合可提高临床早期诊断膀胱肿瘤的能力. 目前比较公认的临界值是Soloway等,10,提出的10.0×103U/L，以这一临界值监测膀胱肿瘤术后复发敏感性为70.0%，特异性为79.0%. 本试验以 10.0×103U/L为临界值检测术后复发结果与Soloway等,10,的试验结果接近. 本研究结果显示尿NMP22可作为膀胱肿瘤术后复发的常规监测方法. 根据膀胱肿瘤术后高复发特点，NMP2210.0×103U/L者应及时膀胱镜检查，避免漏诊. NMP22lt;10.0×103U/L者可协同B超及尿脱落细胞学检查密切观察随诊. 我们研究表明，与尿脱落细胞学和膀胱镜检查相比尿NMP22测定具有较高的敏感性和预测性，又是定量非侵入性的检查方法，因此我们认为检测尿液中 NMP22含量可作为膀胱癌诊断及监测复发的较好指标之一.

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