【doc】杂色曲霉素体外对人胃粘膜的致癌作用

【doc】杂色曲霉素体外对人胃粘膜的致癌作用 杂色曲霉素体外对人胃粘膜的致癌作用 .杂色曲霉素体外对人胃 粘膜的致癌作用 谢同欣张祥宏严霞王凤荣 ?341- 摘要河北省赞皇县是胃癌高发区,我们以往的研究表明该地区胃癌高发与杂 色曲霉毒素密切相关为进一步探讨杂色曲霉毒素对人胃粘膜的致癌作用,干本研 究中,用该毒素处理体外培养的人胎儿胃粘膜.处理后l8天,经流式细胞 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 显示 胃粘膜组织S期,GM期细胞数和细胞增殖指数增大;接种于7一射线处理的新生 sD大鼠皮下可存活生长,形态学呈重度不典型增生.结果表明杂色曲霉毒素对人胃 粘膜有致癌作用. 关键词守色曲霉丧癌变; 河北省赞皇县是胃癌高发区,胃癌年平均死亡 率为59/10万,我们以往研究结果显示该地区胃癌 高发与粮食和胃{葭内污染的杂色曲霉及其毒素有关 系【卜.在奉研究中,用杂色曲霉素(Sterigmato- cystin,ST)处理体外培养的人胎儿胃牯膜,观察毒 素对人胃粘膜的致癌性,从而进,步探讨人类胃癌 的病因. 1材料和 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 I1人眙儿胃粘膜组织培养健康母体水囊弓I产 胎儿1倒,胎龄4.5月.己肝病毒表面抗原阴性.产 后15小时在无菌条件下取胃粘膜组织,用pH7.2 PBS冲洗,将其切成约2x3mm太小的组织块.移 入25m|(玻璃培养瓶内,每瓶10块,加入5mi199 培养基(日本日水制药株式会社).其中含新生小牛 血清l0.胰岛素10~g/m1.氢化考的按0.腿/ ml,青霉素lOOu/ml,链霉素lO0~g/ml,于37?下 培养. 1.2实验分组及处理于实验的第4天,将培养 的胃牯膜分为3组,1组和2组为实验组.加杂以 曲霉素(Sterigmatocy~tin,Sigma),最终浓度为 ]~g/ml和3~g/ml,第三组为对照组,不加任何受 ,将含毒素的培养基弃掉,换 试物.作用24小时后 新鲜培养基继续培养至加药后第lB天,取组织块 进行下列研究. 1.3流式细胞样品制备及测量取对照组和杂色 室 国家自然科学基盘(青年)资助项目39300154 作者单位:050017石家庄,河北医学院基础所病理 喁,敢锿知圃 曲霉素3~/ml处理组的组织块.用机械(网搓)法 {|I备流式细晦样品.主要步骤:将组织块在200目 的铜网上搓,并用PBS向下j巾洗细晦.离心收集细 胞,经400目阿过滤PBS洗涤制戚单细晦悬液, 溴化乙嚏染色.采用美国BD公司生产的FACS420 型流式细晦仪进行DNA测量,仪器光漂为2W氩 离子激光器,激发波长为488nm,工作功率为 300roW,所获数据输入HP一300cow.sort30计算机, 应用BD公司提供的相应软件程序进行 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 处理. 1.4组织块动物皮下接种将出生当日SD大鼠 的仔鼠用5.5Gry射线照射处理.第二天取实验和 对照各组的组织块,每组3块,分别接种于3只仔 鼠皮下,密切观察,lB天后处死动物,取接种部位 组织,l0福尔马林固定.石蜡包埋,连续切片, HE染色,光镜下观察接种组织的病理形态. 2结果 2.1组织培养过程中形态观察 将胃牯膜组织块接种于培养瓶后,第二天贴壁 良好,第三天便见细胞自组织块局围长出,第四无 形戚明显的细胞晕.加杂色曲霉素处理后,1/~g/ml 剂量组中组织块周围的部分细胞内出现颗粒,与对 照组比较,未见其他明显变化.而3~g/ml剂量组中 细胞内有明显颗粒,还可见空泡,有少量细晦脱落. 1周后细胞逐渐恢复,组织块向外增生的细胞明显 增多,增生活跃. 2.2斑式细胞分析结果 本实验中,用流式细胞仪分析了杂色曲霉素 3.~g/ml处理的和对照组的胃粘膜细胞.结果见附 表由表可知,经杂色曲霉素处理后.S期细胞在细 ,I2 第 一年 ? 9一" 1, 342 咆周期分布中比例明显增加,即进入S期的细胞数 增多,细咆增殖指数PI(ProliferationIndex)也明显 增高,细胞增殖旺盛. 附表ST处理后胃粘膜细胞在周期各时相的 分布()及PI 23组织块动物皮下接种 皮下接种组织块后18天处死动物,切取接种 部位皮肤,发现对照组有1只动物有2ram节结, lvg/ml和3#g/ml剂量组各有2只动物有3~4mm 结节.镜下观察,对照组接种的组织完全消失,局部 结节为肉芽箍痕组织(图1)l~g/ml剂量组的结节 也为肉芽瘢痕组织,经连续切片,未找到接种的胃 牯膜组织3糟/剂量组2个结节中可见存活生长 的胃牯膜组织,存活生长的是胃牯膜腺体,细胞层次增多为3,4层,而且腺体极不对称.可见腺体一 悃I细胞层次增多以至如乳头状,细胞态形不一,有 圆形椭圆形,极向消失.细胞大小不等,细胞核 增大,核浆比例增大,核仁明显.可见核分裂象.腺 体结掏和细咆形态都具有明显异型性,为重度不典 型增生的表现(图2) 3讨论 组织,器官培养可控制实验因素,便于观察, 在研究肿瘤病因,组织癌变,癌的提润生长,环境 致癌物的检测,组织损伤及修复等方面的应用越来 越广泛,特别是人体组织的培养克服了动物实验与 人类之间种属之间的差异,更受到高度重视,目前 人们还在努力探索人体组织培养的方法和技术[5, 6]本研究采取人眙儿胃牯膜组织培养韵方法,并 结合动物皮下接种.探讨杂色曲霉素对人胃牯膜的 致I毫性 实验中观察组织块周围细胞的变化,可间接判 断毒素对组织中细胞的作用.加毒素后周围的细胞 内有颗粒和空泡出现表明有毒性反应. 流式细胞分析显示,毒索处理后胃粘膜S期和 G.M期细胞比例增加,PI增高,说明毒素改变了细 胞的一些生物学特性,导致增殖加快国际上已推 荐将致癌物作用后,细胞增殖活跃作为评价致癌性 的一种方法】困而本实验结果提示,杂色曲霉素 对人胃牯膜有致癌作用 体外培养的人体细咆的遗传性状比较稳定,很 十瘤防治研究i996年第船卷第6期 少发生自发转化】本实验中,将胃枯膜组织接 种于动物盛下,对照组的组织不能存活,完全消失. 而杂色曲霉毒索处理的组织可生长,并呈现癌前病 变,即重度不典型增生,表明这是毒素作用的结果. Harris等_9]曾用多种致癌物于体外处理多种上皮组 织进行恶性转化实验,结果诱导了上皮组粤{细胞增 生或癌前病变以往我们曾用杂色曲霉毒索诱导了 人胃组织细胞形成转化灶,DNA呈异倍体及抑癌 基因P超表达_.110],本次实验又从组织学水平证明 该毒索对人胃牯膜有致癌性.结合以往对胃癌高发 区研究的结果进行分析,作者认为杂色曲霉毒索可 能是胃癌高发区胃癌的重要病因(奉文图见封4) 参考文献 1谢同歇,张样宏,王凤荣,等.胃癌高发区胃癌患者胃涟 内杂色曲霉提取液的遗传毒性研究.肿瘤,1990,10t4 — 6 2谢同欣,王凤荣,谭步赦,等杂色曲霉素诱发小鼠呻 腺癌和胃腺不典型增生.中华肿瘤杂志,1990,1221— 23. 3谢同欣,王凤荣高泽立,等.胃癌高发区河北省赞皇县 胃癌发生与真菌的关系的研究.见:中国科学技术协会 首届青年学术年告论文集(医科分册).北京:中国科学 技术出敝社,1998l43—47. 4谢同欣,王凤荣,严茬,等.杂色曲霉提取液体外对^ 旺胃细胞的作用中华医学杂志,1993,7378—80. 5柯扬,宁涛,王球,等.^胃粘膜上皮细融系GES一 1的建立盈其生物学特性-中华肿癌杂志,1994.16(1) :7—10. 6DeJongPM,vanSterkenburgMA,HessselingSC,et alCil[ogenesisLnhumanbronchialepithelialcellscul— turedBttheair—liqaidinterface.AmJRespirCellMo1 ?ol,l994,10:271—277 7WardJMandItoNDetopmentof_lewmedium—tcrrn b[oassaysforcarcinogens-CRncerRes.1988,48(17) l505 8Ba[L,MiharaK,KondoY.eta【[mmortalizatlonof normalhuman[[bmblastsby4nit~quinoline1'oxide. IntJCanr,1993,53(3)451一}56. 9HardsCC'nu舳Hnta—ceLLscanoes re1~RrchCancerRes,1987,471. 10谢同欣,张样宏,严霞,等杂色曲霉素悻外对^目细 胞P53蛋白表达和DNA古量的影响.科学通报,1995 4O(14):l331. 肿窟防治研究1996年第23卷第6期?343- TheSterigmatocystlnCarcinogenesis |nCulturedHnmanGasttricMucosae XieTong—xin.etaI DepartmentofPathology,MedicalCollege ZanhuangcountyofHebeiProvinceinChinaisahighriskareaofstomachcan— eer?Ourpreviousstudiesshowedthatthecarcinogenesisofstomachinthisarea wascloselyassociatedwithsterigmatocystin(ST).Inthepresentstudy,cultured humanfetalgastricmueosaeweretreatedwithSTand18dayslatey,thegastric mucosaewereanalyzedwithfloweytometerandsubcutaneousIyinoculatedintothe r—rayirradiatedSDnewbornratsrespectively.Theresultsindicatedthatthecell numbersinSandG2MphasesincellcycleandProliferationIndexfromtheST, treatedmucosaeincreaseddramaticallycomparedwiththatfrommucosaeincontraI grouptandthemucosaeintheST—treatedexplantsinoculatedintotheratsappeared morphologicallysevereatypicalhyperplasiachanges,incontrast,theinoculatedex— plantsinthecontrolgroupdisappearedcompletely.Theseresultssuggestshowed thatSTmaybeacarcinogenforhumangastricmucosae. Keywords:Sterigmatocystin;Carcinogenesis;Gastricmueosa 第一届全国癌症康复与姑息治疗学术会议征文通知 由中国抗癌协会癌症康复与姑息治疗专业委员会主办的第一届全国癌症康复与 姑息治疗学术会议"定于1997年10月在安徽省黄山市召开,现将有关征文通知如 下: 一 ,会议主要内容 1?专题报告:拟请国内着名肿瘤学专家就国内外癌症康复和姑息治疗的进展做专 题报告. 2.学术交流:总结交流近年来我国在开展癌症康复与姑息治疗工作方面的成果和 经验 二论文内容 1.癌症疼痛的基础研究和临睐经验总结}2癌症的社会,心理康复经验交流;3. 癌症造口康复经验{4.癌症的护理{5.癌症的功雠(物理,体育等),营养康复经验; 6-晚期癌症姑息治疗的基础研究和临睐照顾. 三,征文要求 论文未在正式刊物上发表,全文在3500字以内并附600~800字中文摘要一份, 以方格搞纸书写,字迹清楚,注明作者姓名,单位,通讯地址和邮编.同时邮寄稿件处 }理费10元.经大会统一审稿后,录用稿件编入会议论文集并发给论文证书,择优在 国; }家肿瘤核心杂志上发表.来稿一律不退,请自留底稿.{ l四,截稿日期:1997年6月30日,以寄出邮戳为准1997年8月31日前发第二论{ }通知? !五,来稿请寄:安微省蚌埠市安徽省肿瘤医院李同度,刘爱国收,邮编:233004,; ;电话;(0552)3052555,(0552)2050118.i f中国抗癌协会{ ;癌症康复与姑息治疗专业委员会{ }一九九六年十月{' …………