补肾养经汤对雌性去势大鼠白细胞介素-2和白细胞介素-8含量的影响_138267

补肾养经汤对雌性去势大鼠白细胞介素-2和白细胞介素-8含量的影响_138267 补肾养经汤对雌性去势大鼠白细胞介素-2和白细胞介素-8含量的影响 [标签:来源] 【摘要】 目的研究补肾养经汤对雌性去势大鼠白细胞介素-2(IL-2)及白细胞介素-8 (IL-8)水平的影响。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 将大鼠随机分为假手术组和造模组。造模组造模后又分成补肾养 经汤高、中、低剂量组、去势空白组、六味地黄丸组，观察各组 IL-2，IL-8水平的变化。 结果手术组与假手术组比较，IL-2、IL-8的水平明显降低(P<0.05)，补肾养经汤中剂量组与 去势空白组比较，IL-2的水平明显增高(P<0.05);补肾养经汤各剂量组与去势空白组比较 IL-8的水平明显增高(P<0.05);IL-2与IL-8的水平呈一定的线性相关性，且呈正相关(0 【关键词】 补肾养经汤; 雌性去势大鼠; 白细胞介素-2; 白细胞介素-8 Abstract:ObjectiveTo study the effect of Bushenyangjing decoction on the contents of IL-2 and IL-8 of female castrate rats. Methods60 rats were divided into sham operated group and castrate group which was subdivided into high, middle, and low dose of Bushenyangjing decoction groups, LiuWeiDiHuang Bill group, and model group. Every group was carried out corresponding treatment. Then the levels of IL-2 and IL-8 in the serum of each group were observed. ResultsThe content of IL-2 and IL-8 in the serum of castrate group were lower than that of sham operated group (P,0.05). The level of IL-2 of middle-dose Bushenyangjing decoction group was higher than that of model group (P,0.05). The level of IL-8 of each Bushenyangjing decoction group was higer than that of model group (P,0.05). And there was a positive correlation between the levels of IL-2 and IL-8 (0,r,1,P,0.05).Conclusion Bushenyangjing decoction can increase the levels of IL-2 and IL-8 of castrate rats and regulate the immune function. Key words:Bushenyangjing decoction; Female castrate rat; IL-2; IL-8 多方面研究证实细胞因子影响卵泡的发育及闭锁，诱发免疫反应，并参与卵泡对促性腺 激素应答的作用,1,。研究推测，在卵巢功能活动中，白细胞介素-8(IL-8)可能发挥着重要 的调节作用，但到目前为止，尚无IL-8在POF中分布水平的报道，我们进行了该方对雌性去 势大鼠白细胞介素-2(IL-2)、IL-8含量影响的实验观察。现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物及条件 健康 SD雌性大鼠，3月龄，体重(200?30)g，60只，由泸州医学院实验动物中心提供;二级实验室。 1.2 试药与仪器补肾养经汤由菟丝子、女贞子、紫河车、当归、黄芪等组成的中药复方。成人每日剂量为76 g/60 kg体重，由泸州医学院附属医院中药药房熬取，批号20051120 ，浓度为1.5 g生药/ml;六味地黄丸，由吉林通化震林药业有限 责任 安全质量包保责任状安全管理目标责任状8安全事故责任追究制幼儿园安全责任状占有损害赔偿请求权 公司生产，批准文号:国药准字Z22023191。自动酶标仪(奥地利 anthos HT?型); GC-1200型γ放免计数器为中科院中佳光电分公司产品; BZY150k型自动煎药包装机为中韩合资天津三延精密机械有限公司产品。 1.3 模型建立 连续观察大鼠阴道脱落细胞变化2周，均有正常动情周期后开始本实验。从60只大鼠中随机留取10只作为假手术空白组做假手术:常规处理后，开腹并寻找到卵巢组织，取出部分脂肪组织后立即缝合切口;余下50只大鼠行双侧卵巢摘除术:大鼠麻醉成功后，取仰卧位固定于手术板上，剪去腹部被毛，消毒术区皮肤，沿下腹正中做纵行切口约2 cm，暴露卵巢及子宫角，行双侧子宫角结扎，剥离并剪除卵巢，缝合切口并消毒。大鼠术后每只予青霉素20万单位肌肉注射1次。术后1周，开始连续观察各组大鼠阴道脱落细胞角化指数(CI)的变化，1次/d，连续5 d。以CI,50%定为性周期消失，即造模成功。假手术空白组以出现规律的动情期和动情间期变化者为符合实验要求。手术次日假手术组大鼠死亡1只，去势大鼠均健康。 1.4 分组及给药 将去势后大鼠50只随机分为5组，即去势空白组、六味地黄丸组、补肾养经汤高、中、低剂量组，每组10只;另外9只行假手术的大鼠设为假手术空白组。各组分别标号。给药剂量与方法:? 假手术空白组及去势空白组:予生理盐水1 ml/100 g体重;?六味地黄丸组:配制为浓度为1.44 g/ml混悬液，按1 ml/100 g体重灌胃，按等效剂量给药;?补肾养经汤低、中、高剂量组:分别按每100 g体重0.375，0.75，1.5 g给药，相当成人剂量的3，6，12倍。各组均为灌胃给药，1次/d，连续30 d。 1.5 标本的采集 末次给药24 h后，称重、麻醉、心脏取血、分离血清、-20?冰箱保存。 1.6 检测指标与方法 血清IL-2 及IL-8的测定方法:按试剂盒说明书操作。 1.7 资料统计与处理 所有数据均采用SPSS11.5统计软件进行处理，所测数据用?s 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示。进行方差齐性检验后，定量指标用One-Way ANOAY方差分析，组间比较采用LSD、S-N-K分析，相关分析采用tr检验。 2 结果 2.1 各组血清IL-2水平的变化F=4.891，与假手术组比较，去势空白组大鼠血清IL-2水平明显降低，经统计学处理差异显著(P=0.002，<0.01);补肾养经汤治疗后，各组IL-2水平均有升高趋势。其中，补肾养经汤中剂量组与去势空白组比较有显著差异(P=0.032，P<0.05);六味地黄丸对IL-2水平改变无明显影响(P=0.313，>0.05)。结果见表1。 2.2 各组血清IL-8水平的变化 F=4.599，与假手术组比较，去势空白组大鼠血清IL-8 水平明显降低。经统计学处理差异显著(P=0.000，<0.01);治疗后，补肾养经汤各组IL-8水平均有升高，其高、中、低剂量组与去势空白组比较有显著差异(P值分别为0.025，0.013，0.020);六味地黄丸对IL-8水平改变无明显影响，统计学分析无显著差异(P=0.332，>0.05)。结果见表1。 表1 补肾养经汤对去势大鼠血清IL-2，IL-8的影响(略) 与假手术组比较，??P<0.01;与去势手术空白组比较，?P<0.05，?P>0.05 2.3 血清IL-2、IL-8水平的相关性分析应用直线相关分析，r=0.386 (0 3 讨论 IL-2是一种主要由激活的T细胞产生的细胞因子，是非特异性免疫增强剂，具有促进淋巴细胞生长，提高吞噬细胞的活性，并刺激分泌免疫干扰素等多种功能，可提高辅助性T细胞数量和活性以增强整体的免疫功能，促进多种细胞因子及其受体的表达，同时阻断IL-2信号通路可导致淋巴细胞的过度增生和自身免疫性疾病，而不是免疫缺陷,2, ，所以可以推测IL-2的生理作用可能主要是一种免疫调节，在抑制自身免疫性疾病中具有重要作用。IL-2及其受体在垂体前叶存在，现在已有较多的研究证实，IL-2可调控垂体前叶细胞的分泌和增殖等功能,3, 。由此可见，IL-2可能从改善垂体的功能而改善卵巢功能。 子宫、卵巢动脉血流改变与卵巢循环及卵巢新生血管增加有关，与卵巢合成内分泌激素有密切关系。卵泡的生长及黄体的形成是依赖于新生血管形成的 ，血管形成对维持正常的卵巢生理起很重要作用,4,。而IL-8是强有力的促血管生长因子,5,，对于卵巢的血管生成具有重要作用。在有潮热的妇女中,IL-8的血清水平明显高于没有的妇女,6,,说明IL-8能扩血管，促进血液循环。研究表明,7,，血清IL-8浓度和血清E2浓度成正相关。这也说明了IL-8可能因改善卵巢血流，从而改善了其内分泌功能。IL-8可封闭肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的细胞死亡,8,，可以推测IL-8也可能在TRAIL途径的卵巢细胞的凋亡中起到抑制作用。IL-8在卵巢排卵过程中也起着重要作用，有研究表明应用IL-8抗体可抑制HCG诱导的排卵,9,。 IL-2的激活特性及人单核细胞中IL-2受体的结构具有很高的特异性，是单核细胞系有效的激活因子。单核细胞是诱导因子IL-8的主要来源，所以我们研究IL-2对IL-8的表达的效应。有研究表明，由IL-2刺激后IL-8 mRNA表达的增加是与血清中IL-8分泌增加密切相关的,10,。本实验研究也发现，IL-8在去势大鼠血清中的分布与IL-2的水平具有一定相关性，并且呈正相关。但还存在一些问题需要进一步研究，在我们的实验中，随着去势大鼠的IL-2和IL-8都呈下降趋势，但有报道指出:绝经5年内的妇女其血清IL-2的水平较绝经前妇女升高,11,。这种差异是否提示自然绝经的妇女其机体可能存在一种代偿性反应，尚待研究。且E2与IL-2，IL-8的相关性研究结果不一致，有报道,11,IL-2,IL-8的水平与体内雌激素的含量呈一种弱的负相关。还有报道,12,:雌激素替代疗法的病人IL-2明显下降。这些问题都需要进一步研究。 对年轻育龄大鼠进行卵巢摘除，与中医“肾阴不足，精血亏耗”的病机极其相似，治疗重在“补肾益精，养血益气”。《医学正传》:“月水全赖肾水施化，肾水既乏则经水日以干涸”。 肾气旺盛、冲任充盈，则月经按时而至;反之肾气亏损，冲任虚衰，则月经停止不潮。补肾 养经汤方由菟丝子、紫河车、女贞子、当归、黄芪等组成，调节机体内分泌和免疫是该方剂 药理活性的主要方面。现代药理研究表明，菟丝子可以增加下丘脑-垂体-卵巢促黄体功能， 而这种作用并不是由于它们直接刺激垂体促黄体激素的分泌，而是提高了垂体对LRH及卵巢 对LH的反应性,10,。黄芪对机体免疫功能有较好的调节作用。有报道黄芪多糖可使14,16 月龄小鼠脾细胞IL-2生成增多，反应性增强;当归对静止的脾细胞有轻微活化作用，促进脾 淋巴细胞的增高，对IL-2的产生亦有明显增强作用,具有免疫调节与恢复作用,13,。 【参考文献】 ,1, A Hoek, KY Van, MM D E-haan, et al. Analysis of peripheral blood lymphocyte subset, NK cells and delayed type hypersensitivity skin test in patients with premature ovarian failure,J,.Am J Reprod Immunol，1995，33 (6): 495. ,2, 李爱华，曹祥山(IL-2与CD+4，CD+25调节性T细胞的相关研究进展,J,.医学 综述，2007，13(9):652. ,3, 张庆红，朱运龙，胡玉珍，等.白细胞介素-2对大鼠垂体前叶细胞雌激素受体蛋 白含量和基因表达的影响,J,.生理学报，2000，52(6):487. ,4, Tan SL. Clinical aplication of doppler and three-dimensional ultrasound in assisted reroductive technology,J,.Ultrasound Obstet Gynecol, 1999,13(1):153. ,5, Tomio Iwabe,Tumor necrosis factor-alpha promotes proliferation of endometrioticstromal cells by inducing IL-8 gene and protein wxpression,J,. J-Clin-Endocrinal-Metab, 2000, 85(2):824. ,6, Yasui T, Uemura H, Tomita J.et al. Association of interleukin-8 with hot flashes in premenopausal, perimenopausal, and postmenopausal women and bilateral oophorectomized women,J,.Clin Endocrinol Metab，2006 ，91(12):4805. ,7, Abramov Y,Schenker JG,Lewin A, et al.Plasma inflammstory cytokine correlate to the ovarian hyperstimulation syndrome,J,.Hum Reprod,1996,11(7):1381. ,8, Abdollahi T, Roberson NM, Abdollahi A,et al. Identification of interleukin 8 as an inhibitor of tumor necrosis factorelated apoptosis-inducing ligand-induced apoptosis in the ovarian carcinoma cell line OVCAR,J,.Cancer Res, 2003, 63(15): 4512. ,9, 范瑞文(IFN和IL对卵巢生殖活动及胚胎附着的生理调控,J,.畜牧兽医杂志， 2001，20(2):13. ,10, GL Gusella, T Musso, MC Bosco, et al，IL-2 up-regulates but IFN-gamma suppresses IL-8 expression in human monocytes,J,.The Journal of Immunology. 1993， 151 (5):2725. ,11, Yasui T, Maegawa M, Tomita J,et al.Changes in serum cytokine concentrations during the menopausal transition. Maturitas,J,.2007，20，56(4):396. ,12, Stopińska-Gluszak U, Waligóra J, Grzela T,et al.Effect of estrogen/progesterone hormone replacement therapy on natural killer cell cytotoxicity and immunoregulatory cytokine release by peripheral blood mononuclear cells of postmenopausal women,J,.Reprod Immunol, 2006 Feb，69(1):65. ,13, 李炳茹，佘运初.补肾药对下丘脑,垂体,性腺轴功能影响,J,.中医杂志，1984， 25(7):63.