人参皂甙对损伤脊髓诱发电位的影响

文章编号: 100322754 (2000) 0320162203 人参皂甙对损伤脊髓诱发电位的影响 刘景臣1, 　王　华1, 　尹　飞1, 　袁绍辉2 　　摘　要: 　目的　研究猫急性脊髓损伤 (SC I) 后脊髓诱发电位 (SCEP) 的变化规律及人参皂甙 (GS) 对其的影 响, 探讨 GS 对 SC I的作用, 旨在寻求治疗 SC I的新 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 。方法　采用改良A llen 氏重量打击法制作猫急性脊髓损 伤模型, 动物随机分组, 通过电生理及病理学方法, 研究 SCEP 的变化规律及 GS 对其的影响, 脊髓形态学的改变作 为进一步的佐证。结果　 (1) 损伤组伤后 SCEP 辐值随时间延长逐渐变小, 潜伏期逐渐延长; 治疗组波形则逐渐恢 复, 6h 全部恢复, 差异显著。(2)光镜下两组均有水肿、中心性出血, 神经元空泡变性, 核溶解或固缩, 尼氏小体消失, 部分神经纤维脱髓鞘或断裂, 损伤组最重, 治疗组均有不同程度的恢复。结论　GS 对 SC I有治疗作用。 关键词: 　人参皂甙; 　脊髓损伤; 　脊髓诱发电位 　　中图分类号: R 651. 2　　　文献标识码: A The effect of Gin senoside (GS) on sp ina l cord evoked poten tia l (SCEP) in sp ina l cord in jury　L IU J ing 2chen, W A N G H ua, Y IN F ei, et a l. (T he T h ird T each ing H osita l of N orm an B ethune U niversity M ed ica l S ciences, Chang chun 130031, Ch ina) Abstract: 　Objective　 In o rder to find new treatm en t fo r sp inal co rd in ju ry (SC I) , the change of SCEP and the effect of GS on it after SC I are studied. M ethods　T he acu te SC Imodelw as m ade by modu lated A llen , s w eigh t drop m ethod. A ll cats w ere divided in to group s at random. T he changes of SCEP and the effect of GS on it w ere observed by electric physio logy, patho logy and mo rpho logy m ethods. Results　 (1) In in ju red group the sw ing of SCEP becam e low er gradually and the laten t elongated gradually. T he shape of w ave recovered slow ly and resto red comp letely t ill 6h after in ju ry in treatm en t group. T here is sign ifican t difference betw een tw o group s. (2)U nder m icro scope, edem a, cen tric hemo rrhage, vesicle degenerat ion of neu ron, nuclei disso lu t ion and pykno sis, disappear2 ance of N issle bodies and dem yelinat ion o r fragm en t of som e neu rofiber all occu rred in bo th group. T hese changes w ere mo re serious in in ju red group than in treatm en t group. A ll an im als in treatm en t group recovered to a differen t ex ten t. Conclusion　GS p lays a therapeu tic ro le in SC I. Key words: 　Ginseno sides; 　sp inal co rd in ju ry; 　Sp inal co rd evoked po ten tia l 　　脊髓损伤 (SC I) 导致截瘫的根本原因 (除完全 横断外) 在于 SC I 后继发性病理改变使脊髓损伤从 可逆性损害发展成为不可逆性损伤。主要表现在细 胞脂膜结构的进一步破坏及膜两侧的离子失衡, Ca2+ 异常最为重要。脂膜结构破坏及膜两侧的离子 失衡均使细胞膜两侧电位发生改变, 脊髓诱发电位 (SEP ) 是细胞膜电位的综合体现, 因此它反映了 SC I 的程度[ 1～ 4 ]。人参皂甙 (Gin seno sides GS) 是人 参的主要有效成分, 主要药理作用为改善微循环、提 高组织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、影响前列腺素 (PGs) 代谢、Ca2+ 拮抗、抗氧化保护细胞膜的作用, 国内外大量实验已对其深入研究, 然而在治疗脊髓 损伤的应用研究方面未见报道[ 5 ]。 1　 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与方法 1. 1　动物与分组　采用杂种家猫 8 只, 雌雄不 分, 体重在 1. 95～ 4. 1kg, 平均体重 2. 88kg。随机分 为损伤、治疗两组, 各 4 只, 自身对照。 1. 2　脊髓损伤模型制作及脊髓诱发电位检 查[ 3, 6 ]　用 3% 戊巴比妥钠 1m lökg 腹腔注射麻醉, 气管切开插管, 同时给予 0. 5% 三碘季胺酚 4m gö kg, 接微型人工呼吸器。颈动脉插管监测动脉血压、 心率及心电。左股静脉插管输注 5% 葡萄糖溶液。然 后俯卧位, 手术切除 T 10、T 132L 1 椎板, 保留硬膜, 同 时显露右侧坐骨神经。40g 铜锤从 10cm 高处沿中空 玻璃管垂直自由落下砸伤垫有垫片的脊髓。致伤能 量为 400gcf, 垫片面积 45. 0mm 2、重量 0. 035g, 造成 中等程度以上的损伤, 然后缝合创口。损伤组及治疗 组于伤后 10m in 分别腹腔注射 0. 5% 吐温280 水溶 收稿日期: 1999211227; 修订日期: 2000203216 作者单位: (1. 白求恩医科大学三院, 吉林 长春 130031; 2. 辽源矿医 院骨科, 吉林 辽源 136200) ·261· J A pop lexy and N ervous D iseases, June 2000, V o l 17,N o. 3 液 3m lökg、3% GS 溶液 (以 0. 5% 吐温280 水溶液为 溶剂) 3m lökg, 以后每 2h 给半量。固定动物头和四 肢, 室温控制在 26℃左右, 保持肛温 38～ 39. 5℃, 呼 吸频率 30 次öm in、潮气量 80m löm in、心率 160～ 180 次öm in、血压 100mm H g 以上。双极银球记录电 极置于 T 10节段脊髓硬膜表面两后索, 刺激电极置 于坐骨神经上, 参考电极固定在切口筋膜组织上, 动 物接地。刺激方波由 SEN 23201 型电子刺激器输出, 刺激强度 1V、频率 1H Z、方波 0. 1m s、延迟 4m s、间 隔 6m s。前级放大 1000 倍、扫描速度 10m söcm , 记录 的电子信号输入电子计算机诱发电位自动记录装 置, 用诱发电位自动记录分析装置采样、叠加 10 次, 每只动物分别于伤前、伤后即刻、5m in、10m in、30、 1h 以后每隔 1h 记录 1 次至 6h, 每次记录检测 3 次, 每只动物自身对照。 1. 3　病理学检查　参照文献[ 7 ]进行。 2　结　果 2. 1　脊髓诱发电位变化　损伤组: SCEP 幅值 逐渐变小, 6h 仅存痕迹波, 波形变宽, 潜伏期 (波形 起点到锋电位顶点的水平距离)逐渐延长, 神经传导 速度减慢。伤后 3h、6h 幅值与伤前比较及两时点间 比较差异均非常显著 (P < 0. 01) , 说明诱发电位 6h 不但没有恢复, 而且继续加重。损伤组四只动物 6h 诱发电位均没有恢复, 恢复率为 0。治疗组: 伤后幅 值曾一度变小, 潜伏期没有明显变化, 给药后 1h 内, 幅值逐渐恢复, 两时点与伤前及两时点间比较差异 均不显著 (P > 0. 05)。治疗组 4 只动物 6 小时诱发 电位完全恢复, 其恢复率为 100%。SC I后 SCEP 幅 值的变化情况见表 1, 表明 GS 对 SC I有治疗作用。 表 1　脊髓损伤后脊髓诱发电位幅值 (ΛV ) 损伤组 治疗组 伤　前 伤后 3h 伤后 6h 2. 58±0. 38 0. 45±0. 07 0. 20±0. 04 2. 40±0. 34 2. 87±0. 34 2. 84±0. 35 　　2. 2　病理学改变　光镜下损伤组 3h 明显水 肿, 广泛出血, 中央管结构破坏, 有组织坏死, 神经元 空泡变性, 部分核固缩及溶解 (见图 1) , 尼氏小体消 失。6h 除上述改变外, 白质中有炎性细胞浸润形成 的血管套, 神经纤维断裂和脱髓鞘改变 (见图 2)。治 疗组 3h 中央管仍有部分破坏和出血, 少部分神经元 空泡变性, 核固缩或溶解 (见图 3)。尼氏小体基本恢 复正常结构, 无脱髓鞘改变。6h 上述改变进一步减 轻, 神经胶质细胞增生, 呈现损伤修复的改变。 图 1　3h 损伤组: 显示损伤区脊髓中央管结构破坏, 灰质内有组织坏 死, 神经元有变性萎缩和组织广泛出血。 (H 2E 染色, 100×) 图 2　6h 损伤组: 显示脊髓白质区神经纤维有脱髓鞘改变, 白质周围 有中性白细胞和淋巴细胞渗出形成的血管套。 (H 2E 染色, 200×) 图 3　3h 治疗组: 显示脊髓损伤区中央管部分破坏及管内有出血, 管 周组织亦有坏死和出血。 (H 2E 染色, 100×) 　　3　讨　论 3. 1　关于脊髓诱发电位的几点探讨　实验室 采用静电屏蔽、动物接地, 减少了外来静电干扰, 叠 加 10 次基本上滤掉了杂波, 使真正的诱发电位明显 地显现出来。若叠加次数多, 延时长, 存在波形不能 反应刺激即刻诱发电位变化的缺点; 在 T 10节段脊 髓背侧只记录到一个峰电位, 它仅表示一些上行传 导 束的电活动, 一般在刺激感觉神经纤维所在脊髓 中枢上 2 节段头侧各点所记为传导性脊电图[ 8 ]。本 实验观察到的正是这一种, 因此只得到了一个峰电 位; 损伤即刻脊髓诱发电位幅值变小而没有消失是 符合电生理改变的, 其理由是: (1) SCEP 虽然反应 脊髓总体的电活动, 但其生理基础是两侧离子浓度 的改变, 是细胞动作电位的综合体现, 而损伤即刻膜 ·361·中风与神经疾病杂志　2000 年 6 月　第 17 卷　第 3 期 两侧离子浓度几乎没有改变, 膜两侧离子浓度变化 需有一个反应时间。(2)自由基对膜的损害作用也需 要一个反应时间[ 1, 2 ]。 (3)即使全瘫的动物亦有少部 分存在电位。(4) SC I的病理变化总是从灰质扩展到 白质, 也可以出现诱发电位与脊髓损伤造成的病理 改变之间的差异性。脊髓诱发电位与灰质没有关系, 只要白质中保留很少一部分完整有髓纤维就可以有 神经电活动而诱发出一种波形。(5)脊髓背柱纤维对 打击力有很强的耐受性[ 3 ]。 (6) SCEP 可以由电紧张 性扩布及容积性传导引起, 使 SCEP 变化复杂化。 3. 2　人参皂甙治疗 SC I 的机制及其意义　GS 治疗 SC I 的机制考虑是 GS 能够改善组织微循环、 提高组织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、影响前列腺 素 (PGs) 代谢、Ca2+ 拮抗、抗氧化保护细胞膜的作用 有关[ 5 ]。以往大量研究治疗 SC I多为毒副作用极大 的药物, 临床应用少或用药剂量及时间受到限制。 GS 毒副作用极小, 常为日常生活中延年益寿的补 品而应用, 为人参皂甙临床应用及开发提供了广阔 的前景。 参考文献: [ 1 ]戴力扬, 徐印坎. 脊髓损伤与脂质过氧化[J ]. 国外医学 创伤与 外科基本问题分册, 1989, 3: 1602163. [ 2 ]戴力扬, 徐印坎. 脊髓损伤实验研究的进展与展望[J ]. 中华神经 外科杂志, 1988, 4 (2) : 1162119. [ 3 ]马　迅, 马景昆, 凌志恒, 等. 应用脊髓和皮质体感诱发电位评价 实验性脊髓损伤[J ]. 中华骨科杂志, 1990, 10 (2) : 1302133. [ 4 ]杜晓冰. 钙离子在细胞损伤中的作用[J ]. 国外医学 生理病理科 学与临床分册, 1990, (4) : 1872189. [ 5 ]王本祥. 人参研究进展[M ]. 天津科学技术出版社, 1991. 97299, 1252153. [ 6 ]华筑信. 脊髓打击致伤试验A llen 方法的讨论[J ]. 河北大学科学 通报, 1988, (3) : 2182223. [ 7 ]凌启波. 实用病理特殊染色及组化技术[M ]. 广东高等教育出版 社, 1987. 1492150. [ 8 ]包聚良. 急性脊髓损伤时的节段性脊电图观察[J ]. 中华骨科杂 志, 1992, 4 (1) : 46249. 文章编号: 100322754 (2000) 0320164201　　　中图分类号: R 743 L 2NNA 对大鼠脑缺血时脑组织含水量和乳酸含量的影响 张　洪1, 　幕容慎行1, 　刘友尧2, 　许国英1, 　吴秀丽1 　　研究一氧化氮合酶 (NO S) 抑制剂对脑缺血的作用, 选用 易于透过血2脑脊液屏障的N 2硝基左旋精氨酸 (L 2NNA ) , 观 察其对大鼠全脑缺血后脑组织含水量和乳酸含量的影响。 1　材料与方法 健康雄性 Sp rague2D aw ley (SD ) 大鼠 24 只, 体重 300± 20g, 由福建省神经病学研究所提供。随机分为脑缺血 10m in 组, 脑缺血 10m in+ L 2NNA (1m gökg)组和假手术组。实验当 日, 所用L 2NNA (Sigm a 产品) 按需要溶于 1m l 生理盐水, 配 成 pH 7. 0 溶液, 于缺血前 30m in 腹腔注射, 假手术组用 1m l 生理盐水。脑缺血模型采用改良的 Pu lsinelli方法。脑组织含 水量的测定采用干湿质量法, 脑组织乳酸的测定采用酶法。 实验结果以 ς±s 表示, 组间差别的显著性用 t 检验。 2　结　果 脑缺血后脑组织含水量和乳酸含量为 80. 79±0. 55% 和 26. 32 ± 1. 86Λmo lög 湿重 , 明显高于假手术组 ( 78. 23 ± 0. 52% 和 7. 68±0. 65Λmo lög 湿重) (P < 0. 01)。脑缺血前预 先给予L 2NNA (1m gökg) 可使脑缺血组织含水量和乳酸的 含量降为 79. 83±0. 5% 和 18. 78±1. 79Λmo lög 湿重 ( P < 0. 01) , 但仍高于假手术组 (P < 0. 01)。 3　讨　论 由于脑组织本身没有葡萄糖和氧气的储备能力, 在脑缺 血后容易产生酸中毒, 引起脑组织水肿和细胞坏死。脑缺血 后组织中乳酸浓度的高低与脑细胞内 pH 值降低程度相关, 乳酸含量在 21Λmo lög 脑重时, 可使 pH 下降 1 个单位, 致使 脑胶质细胞发生不可逆损害; 乳酸含量在 25Λmo lög 脑重以 上, 即使脑血流量恢复正常, 脑能量代谢、自发性脑电活动以 及体感诱发电位等均不能恢复, 并使脑水肿加重; 乳酸含量 低于 15Λmo lög 脑重时, 神经电生理机能及代谢才有恢复的 可能。因此, 脑缺血后控制和降低乳酸性酸中毒和脑水肿显 得尤为重要。本实验的结果显示脑缺血后脑组织含水量和乳 酸的含量明显增加, 预先给予NO S 抑制剂可明显降低脑缺 血后乳酸和含水量。 脑缺血缺氧导致组织中兴奋性氨基酸的大量释放, 通过 刺激N 2甲基2D 2天门冬氨酸 (NM DA ) 受体, 促使细胞内钙增 加, 通过激活NO S, 使NO 生成增多。过量的NO 具有抑制细 胞呼吸, 破坏DNA 结构, 使细胞膜发生脂质过氧化作用等, 进而使组织细胞发生变性、坏死, 组织酸中毒明显, 脑水肿加 重。NO S 抑制剂具有阻断由脑缺血时由兴奋性氨基酸介导 的NO 的神经毒性作用, 使缺血组织含水量和乳酸的含量下 降。本实验单纯用NO S 抑制剂并不能使脑缺血完全免于不 可逆损害, 也不能完全避免脑水肿的发生和发展。说明NO S 抑制剂不能完全对抗脑缺血的复杂的病理机制。一旦脑缺血 已经发生, 应该采用包括NO S 抑制剂在内的综合性治疗措 施, 才能发挥其更好的脑保护作用。 收稿日期: 1999207207; 修订日期: 2000202213 作者单位: (1. 福建医科大学附一医院福建省神经病学研究所, 福建 福州 350005; 2. 福建医科大学生化教研室, 福建 福州 350004) ·461· J A pop lexy and N ervous D iseases, June 2000, V o l 17,N o. 3