去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点 中国临床康复 第 !"卷 第 #$ 期 !""#$"%$!&出版 !"#$%&% ’()*$+, (- .,#$#/+, 0%"+1#,#2+2#($3 ’),4 56 5789 :(,; ? 去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点! 谢 肇 !!李起鸿 !!孟 萍 #!谭祖键 ! !基础研究! 解放军第三军医大学西南医院!’骨科!!老年科!重庆市 (""")* 谢 肇!!男!’+#% 年生!安徽省颖上县人!汉族!!""( 年解放军第三军 医大学毕业!博士!主治医师!主要从事骨质疏松治疗的研究" 通讯作者!李起鸿!...
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D=;6 96K8:B=
材料
关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料
力学参数由应力$应变
曲线获得& #骨形态计量学检查指标’骨小梁面积百分数W cLV./94#代
表骨量(骨小梁厚度WLV.L@4%骨小梁数量WLV.e4#骨小梁分离度WLV.G74$$
血% 尿生化指标的测定’ 血清钙% 磷# 尿钙% 磷# 尿肌酐# 均采用
XfQgM/e 自动生化
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
仪$ 血清骨钙素%血清碱性磷酸酶%血清抗酒
石酸酸性磷酸酶%尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明$
结果!纳入动物 !" 只#均进入结果分析$ !去势组大鼠股骨骨密度明显
低于假手术组h分别为!".’##i"."!#)#!".’+&i"."!%) T 2 C;!E@ j "."&k#
腰椎骨密度尤其显著h分别为!".’+"i"."’’)#!".!&’i"."!+) T 2 C;!E@
j "."’k$ "去势组大鼠股骨最大载荷与假手术组相比显著降低h分别为
!+(.()i*.+#)#!’"+.(+i’!.(’) e#@ j "."&k#腰椎最大载荷降低尤其显
著h分别为!+*.%&i*.’+)#!’’*.*!i’&.%() e#@ j "."’k$ #去势组大鼠骨
小梁面积百分数W cLV./94%骨小梁厚度WLV.L@4%骨小梁数量WLV.e4 与假
手术组相比显著降低 W去势组分别为 (.%*i".%##(#.!+i+.+##".#(i"."*#
假手术组分别为 %.%(i’.%###".+’i).*"#’.!#i".!##@ j "."’4( 骨小梁
分离度 WLV.G74 显著增高 W分别为 ! )"".*&i(*".’"#’ ’’!.!%i#&.*’E@
j "."’4$ $血%尿生化指标显示’骨吸收大于骨形成$
结论,[BD:89 大鼠去卵巢 * 周成功建立了绝经后骨质疏松模型# 骨量与
骨结构的一些参数可能存在某种关系$
主题词!骨质疏松#绝经后(模型#动物(骨密度
G 引言
随着老龄化社会的到来#绝经后骨质疏松症的防
治已成为一个迫切的社会问题$雌性大鼠卵巢切除造
成的骨质疏松模型正确模拟了女性雌激素低落引起
的骨质疏松特征#是研究绝经后骨质疏松症的优秀模
型h’k$ 既往研究多从骨密度%骨强度等方面对模型进行
评价#本文在观察骨密度与骨强度的基础上#对骨质疏
松模型的骨结构进行大体观察和定量分析# 并对骨密
度与骨结构的可能关系进行探讨$
H 材料和方法
设计
领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计
!随机分组设计对照动物实验$
单位!解放军第三军医大学西南医院骨科$
材料!实验于 !""!$"+ 2 !""($"’ 在解放军第三军
医大学动物研究所及中心实验室完成$ 选择鼠龄 # 个
月清洁级雌性未孕 [BD:89 大鼠 !" 只# 体质量 !!"l
!#" T#由第三军医大学动物研究所提供$ 所有动物在
同等条件下饲养#自由饮水和摄食#动物饲料由第三军
医大学动物研究所提供$ !"只大鼠随机数字表法分为
去势组和假手术组#每组 ’"只$实验仪器与试剂’骨形
!"
万方数据
态计量学检查设备 !广东医学院骨生物学研究室 "!
#$%&&’()’* 全身双能量!+ 射线 "骨密度测定仪器
"法国 ), 公司#! -(./*0(1211 型万能材料机"重庆
大学生物力学实验室#! 0&3456. 7+82 型高级荧光
显微镜 "第三军医大学神经生物学教研室 #!
7’#,4%( 自动生化分析仪 "美国 #9:;<=>? 7>@ABC;
公司#! .(D8EF型放免 ?计数器"上海核福光电仪器有
限公司#! 6GDHIJ紫外可见分光光度计"上海分析仪器
总厂#! 血清骨钙素放免测试盒$羟脯氨酸测试盒$血清
抗酒石酸酸性磷酸酶测试盒$ 血清碱性磷酸酶测试
盒$肌酐测试盒"南京建成生物工程研究所#! 无机磷
测试盒$无机钙测试盒"波音特生物科技有限公司#!
设计!实施!评估者"设计为第一作者%实施为全
部作者%评估为第二作者%评估者经过正规
培训
焊锡培训资料ppt免费下载焊接培训教程 ppt 下载特设培训下载班长管理培训下载培训时间表下载
!
方法"去势组大鼠乙醚吸入麻醉%在严格的无菌
操作下%取腰椎后侧正中切口%椎旁钝性分离肌肉组
织%切开腹膜%进入腹腔! 完整切除双侧卵巢后撒上青
霉素粉%缝合皮肤%消毒伤口! 假手术组手术操作同
上%仅摘除少许卵巢周围脂肪组织%不切除卵巢!
标本制备&实验 E 周后两组动物统一开胸放血处
死! 处死前动物放置于代谢笼中收集 FJ K尿液%D12 L
保存待测! 12 M N &戊巴比妥钠 O B& N AM腹腔注射麻醉%
打开胸腔% 注射器穿刺右心室 IP2Q8P2 B&%F I22 ? NBR;
离心% 分离出血清DJ2 L保存% 待行各项生化指标测
定! 取出右侧胫骨剔净软组织%J L%J2 M N & 多聚甲醛
固定 JE K%磷酸盐缓冲液充分漂洗%122 M N & 乙二胺四
乙酸磷酸盐缓冲液!S$ HPJ" J L脱钙三四周%隔天换液
1 次! 脱钙完成后将右侧胫骨近侧干骺端常规制成石
蜡切片%光镜观察骨小梁结构! 左侧胫骨上 1 N O 放入
体积分数为 2PH 的乙醇溶液保存固定% 待行骨形态计
量学检查! 取出子宫经电子天平称量! 取出 &O椎体
剔净软组织%用剪刀小心剪上下椎间盘$棘突及附件%
并用细纱纸打磨成上下平面平行与纵轴垂直的三棱
柱%标本制取后用生理盐水纱布包裹%置于DF2 L低温
冰箱保存%进行椎体压缩实验! 取出右侧股骨剔净软
组织%标本制取后用生理盐水纱布包裹%置于DF2 L低
温冰箱保存%准备进行股骨三点弯曲实验!
测定指标 &!骨密度&给予 12 M N & 戊巴比妥钠
O B& N AM 腹腔注射麻醉% 当大鼠呈稳定的昏睡状态达
到 I BR; 以上时% 放置与 #$%&&’()’* 双能 + 射线
骨密度仪的探头下%应用小动物软件进行腰椎和股骨
的扫描%测定骨密度值! 在去势后的 J%8%E 周分别进
行骨密度测定’E 周时%两组间腰椎$股骨骨密度均出
现了显著性改变% 见表 1% 随即处死动物进行各项检
查! "椎体压缩测试& 将磨制好的椎体置于实验机
!-(./*0(1211 型万能材料机%美国 "上%取加载速度
1 BB NBR; 进行测试%其结构力学参数由载荷D变形曲
线获得%材料力学参数由应力D应变曲线获得! #骨形
态计量学检查指标&骨小梁面积百分数! T/UP%?"%代
表骨量’骨小梁厚度!/UP/K"$骨小梁数量!/UP("%骨小梁
分离度!/UP.S"! $血$尿生化指标的测定&血清钙$磷%
尿钙$磷%尿肌酐%均采用 7’#,4%( 自动生化分析
仪! 血清骨钙素$血清碱性磷酸酶$血清抗酒石酸酸性
磷酸酶$尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明!
主要观察指标"大鼠股骨骨密度$骨强度$骨形态
计量学指标$血$尿生化指标$子宫质量!
统计学分析" 由第一作者采用 .5.. 12P2 进行数
据处理%数据以 !"#表示%行双样本 $检验!
! 结果
FP1 实验动物数量分析 纳入动物 F2 只% 均进入结
果分析%无脱落!
FPF 两组大鼠股骨骨密度比较 见表 1! 去势组大鼠
股骨骨密度与假手术组相比显著下降!% V 2P2I"$腰椎
骨密度下降尤其显著!& V 2P21"!
FPO 两组大鼠股骨骨强度比较 见表 F! 去势组大鼠
股骨最大载荷与假手术组相比显著降低!& V 2P2I"’腰
椎最大载荷降低尤其显著!& V 2P21"!
FPJ 两组大鼠股骨形态计量学指标比较 见表 O! 去
势组大鼠骨小梁面积百分数 ! T/UP%?"$ 骨小梁厚度
!/UP/K"$骨小梁数量!/UP(" 与假手术组相比显著降低
!& V 2P21"’骨小梁分离度!/UP.S" 显著增高!& V 2P21"!
骨形态计量学指标与椎体最大载荷线形回归结
果W !假手术组线性回归方程WT/UP%?XD1IP281Y2P22O
HJP/UP/KZT /UP%? X2PEHE Y2P2IJJP/UP(ZT /UP%? X18POE
DHPHHP/UP.SP "去势组线性回归方程 WT/UP%?XFP281
Y2P2IEEP/UP/KZT /UP%? XD2P28JI YHPII1P/UP(ZT /UP%?
XHPF1HD2P22128P/UP.S
FPI 大鼠胫骨上 1 N O 光镜观察结果 假手术组骨小
梁排列密集%小梁厚度宽$间距小%骨小梁之间的连接
表 1 两组大鼠骨密度测定结果比较 !!’([)X12[M N @BF"
组别 腰椎骨密度 股骨骨密度
与假手术组相比"C& V 2P2I"U& V 2P21
去势组
假手术组
2P1\2]2P211 U
2PFI1]2P2F\
2P188]2P2F8C
2P1\I]2P2FH
表 F 两组大鼠腰椎#股骨最大载荷测定结果比较 !!’([)X12[("
组别 腰椎最大载荷 股骨最大载荷
与假手术组相比"C& V 2P2I"U& V 2P21
去势组
假手术组
\EPHI]EP1\U
11EPEF]1IPHJ
\JPJO]EP\8C
12\PJ\]1FPJ1
表 O 两组大鼠股骨形态计量学静态参数的比较 !!’([)X12"
组别
与假手术组相比"C& V 2P21
去势组
假手术组
J8PF\]\P\8C
82P\1]OPE2
F O22PEI]JE2P12C
1 11FPFH]8IPE1
JPHE]2PH8C
HPHJ]1PH8
2P8J]2P2EC
1PF8]2PF8
骨小梁面积百分数
"T/UP%?#
骨小梁厚度
"/UP/K#
骨小梁分离度
!/UP.S"
骨小梁数量
!/UP("
-..( 18H1DI\F8 #( F1D1JH2 N *
***+,-./01+/23 0456678976:(;)<+=23 谢 肇!等!去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点!"
万方数据
!""# $%&$’()*% +# *$’$,&- ./ ! !!!"#$%&’()*+, !"#$%& *--%’ &( *() * $-+ * *0,
较多!见图 $1" 去势组骨小梁排列稀疏!数量减少!小
梁明显变细#间距加宽!骨小梁出现较多的空白区域!
见图 $2"
*3% 血!尿生化检测结果 两组之间血钙#血磷含量
差异无显著性 4- 5 -3-(6!与假手术组相比!去势组血
清骨钙素#抗酒石酸磷酸酶#血清碱性磷酸酶显著升
高 7- 8 -3-$9!见表 ,$与假手术组相比!去势组 *, :
尿钙 .肌酐#尿磷 .肌酐#尿羟脯氨酸 .肌酐显著升高
4- 8 -3-$9!见表 ("说明骨吸收#骨形成均增强!骨代谢
呈高转换状态!其结果导致骨无机盐#有机质代谢的
负平衡!骨量减少"
*3& 大鼠子宫质量测量结果 去势组大鼠双侧子宫
明显缩小!子宫质量与假手术组比较显著减少;分别为
%&-<=>%<0$&!%$&)<*>$(<,& ?@!- 8 -<-$A!说明去卵巢
后雌激素显著减少"
! 讨论
绝经后骨质疏松是指由于雌激素低落导致骨吸
收B形成均增强! 骨吸收大于骨形成最终导致骨量减
少!骨组织微结构退行性变7松质骨骨小梁变细#断裂#
数量减少$皮质骨多孔#变薄9为特征!以致骨的脆性增
高及骨折危险性增加的一种全身代谢性骨病 ;*A" 本文
结果显示!所选用的大鼠在去卵巢后 0 周子宫重量较
对照组显著降低7- 8 -3-$9" 模型大鼠的骨密度#最大
载荷显著降低7- 8 -3-(9" 骨结构定性及定量分析均显
示骨微结构明显退行性变" 血尿生化结果显示’骨形
成#吸收均增强!分解大于形成" 说明本实验选用的 %
月龄雌性未孕 CDEF1G 大鼠去卵巢后 0 周绝经后骨质
疏松症模型建立成功"
骨密度是骨矿代谢中量化骨量的重要指标" 本文
结果显示去势组腰椎骨密度较股骨骨密度下降更明
显!分析可能源于松质骨与皮质骨雌激素受体表达的
差异’松质骨雌性激素受体明显高于皮质骨!雌激素
的低落对皮质骨的转化率影响较低!松质骨转化率明
显增高!所以松质骨骨密度的减少大于皮质骨;=A" 去势
大鼠椎体最大载荷降低大于股骨最大载荷的变化幅
度! 可能股骨骨密度下降小于椎体骨密度的下降#雌
激素的缺乏会导致大鼠成年后股骨横截面积增加 ;,A"
按照力学原理!骨分布离中心越远!骨的整体强度越
大!并且与这种距离的平方成正比!即股骨可随其皮质
的净扩大而使其力学性能得到一定程度的代偿! 而这
一特点在椎体则不具备! 这也可能是股骨的力学性能
变化没有椎体明显的另一个原因"
早期认为骨强度主要由骨的矿物质含量决定!但
骨密度与骨强度有时并不完全一致! 骨量降低并不一
定发生骨折;(A" H22IEIJ 等;%A发现骨密度对整体骨强度
的影响仅占 ,-KL(-K!骨密度并不能完全反映骨强度
高低" 近年来的研究发现骨的结构对骨强度具有较大
影响!且较骨量更重要;&A" 因此!在骨质疏松的诊断和
治疗中对骨结构变化的把握具有重要意义" 本文结果
中骨结构的大体观察显示!去势组骨小梁排列稀疏!数
量减少!小梁明显变细#间距加宽!骨小梁出现较多的
空白区域" 骨结构的定量分析显示!随着骨吸B骨形成
的脱偶联’骨吸收大于骨形成!骨小梁逐渐变细#穿孔#
断裂#断端变钝至消失导致骨小梁厚度%M23M:骨小
梁%M23#&显著增加显著降低!骨小梁游离度%M23"N&!
显著提高!反映骨量的骨小梁面积百分比%KM2