GB 16631-2008-T 高效液相色谱法通则

I(∶s 71 040 4o;71 o40 50 C04 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 16631-ˉ 2008 代 替 GB/T16631 1996 ??? ?效液相色谱法通则 for high performance liquid chromatographyGeneral rules 2008-06-18发 布 2009-02-01 实 施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会卩瑟Ⅱ} |Ⅱ △ ●’“ ↓ ,=初 . 故蛳 发 布 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T16631-2008 次目 o 水 、 试 剂 和 溶 剂 ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ 前 言 15 16 17 18 专 项 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 中涉及的项 凵 1 范 囿 2 规 范性引用文件 3 术 语和定义 t 高 效液桕色谱法概述 6 取 样及预处理的操作 ↑ 仪 器gd置 8 洗 脱剂 l。 仪 器安装的环境耍求和安含 11 测 景和试料的制备 12 分 析步骤 13 定 性 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 11 定 量分忻 分 了章分布的测量 qf备型液相色谱法 数捃质景的保证 ?? ??? ?? ? ????? ?? ? 9 色 谱 ∮ t和 +J填 料 ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ 5 6 8 lo 11 12 13 11 l^ 18 I9 19 21 23 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 1663卜 -2008 曰 本标准修改采丿Ⅱ日本丁业标准 J1sKO121— ⒛02《高效液相色谱法通则》(英文版)。 本标准根据 JIs K。 121-2002重 新起草 ,在 附录 Λ 中列 出了本标准章条编号与 JIs K012仁 - 2002章 条编号的对照一览表. 考虑到我国国情 ,本标准与 HS K0121— ⒛02的 t要差异如下 : 引∫Ⅱ了我国国家标准 GB/T90。 8-2007(本 标准第 2蕈 ); 删除了 GB/T9008-2007巾 已有的术语和定义(本标准第 3章 ); ——对试剂和溶剂规格分别进行 r规定(本标准的 52和 53)。 本标准代替 GB/T16631 1996《 柱液相色谱分析法通则》, 本标准 与GB/T1663⒈ 1996相 比主要变化如下 : 删除了 1996年 版标准的资料性附录附录 Λ、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E、附录 F、附录 K、 附隶 M、附录 N、附录 P; 增加 r第 3章 “术语和定 义”、第 5章 “水、试剂和溶剂”、第 6章 “取样及预处理的操作”、第 16 章“制锊型液相色谱 第` 17亭 “数据质量的保证”和第 18单 “专项标准屮涉及的项 日”; 修改 r标准名称(见 1996年 版和本版标准的封面); 修改了标淮范围(见 1996年 版和本版标准的第 1章 ); 修改了高效液相色谱法概述(1996年 版第 3章 ;本版第 1章 ); 修改了亻f关仪器配置的规定(1996年 版第 改串;本版第 7章 ); 修改丫有关洗脱剂的规定(1996年 版第 5章 ;本版第 8章 ); ——修改了布关色谱柱和柱填料的规定(1996年 版第 6荸 、笫 9章 ;本版第 9章 ); 修改 r仪 器安装的环境要求和安全要求(1996年 版附录 G、附录 H;本 版第 1°章); 修改 r有关测量/制 备前的准备丁作的规定(1996年 版第 7章 ;本版第 11章 ); 修改 r有关操作过程的规定(1996年 版第 8章 、笫 10章 、附录 J;本 版第 12章 ); 修改了亻f关 定性分析的规定(1996年 版第 11章 ;本版第 13章 ); 修改 r有关定量分析的规定(1996年 版第 12章 、附录 I';本 版第 11章 ); — 一ˉ修改了亻f关 分了量分布的测量的规定(1996年 版第 13章 ;本版第 15章 ). 本标准的附隶 Λ为资料性附录. 本标准由中国孑f油和化学I业 协会提出. 本标准由全国化学标准化技术委员会(SΛ C/TC63)归 II。 本标准山中国石油化工股份有限公司北京燕山分公司、中化化工标准化研究所负责起草。 本标准主要起萍人 :黄铃、徐泽峰 、杨建海 、魏静。 本标准于 1996年 12月 首次发布。 ?? 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T16631-— 2008 高效液相色谱法通则 1 范 围 本标准规定了使丹J高效液相色谱法进行的定性定量分析和提纯精制的通用规则 . 本标准适川于使用高效液相色谱法对无机 、布机化合物的定性定量分析及提纯精制,以及对高分子 化合物的分子量的测定的一般要求. 2 规 范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用△i成为本I·Tx准的条款。儿是注 日期的引用文件 、其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或 修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成 协议 离婚协议模板下载合伙人协议 下载渠道分销协议免费下载敬业协议下载授课协议下载 的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.儿 是不注 日期的引用文件,其最新版本适川于本标准。 G吖 T9008 液 相色谱法术语 柱 色谱法和平面色谱法 3 术 语和定义 (;l;/T9008确 立的以及下列术语和定义适用于本标准。 3 1 高 效 液 相 色 谱 仪 high performance⒒ qu记 chromatogΓ aph 进行高效液相色谱分析的仪器。 32 分 析 物 analyte 样;、宀或样品溶液中存在的待分析的H标 组分 , 33 样 品 溶 液 sampIc solution 枰品溶解在其屮的溶液或提取∫Ⅱ于分析的溶液. 试 样 溶 液 tcst sample soIu‘ on 用 于测试 的样砧溶液本身或预处理过的样品溶液 泵 p刂mp 驱动流动相 (洗 脱剂 )的 设备。 自 动 进 样 器 automatic阳 mple iIlJccttlr,auto sampkr 白动将试样溶液接连地注射进到液相色谱仪的住子中的设备, 柱 箱 column c】 ,mpartmcn1 色谱柱置于其中的容器。 色 谱 柱 管 chroma1ographic‘ ubc 柱填料被填充在其中的圆形柱含,其两端装配有过滤器等部件。 35 36 34 37 ?? 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/r 16631-— 2008 39 对 称 因 子 ” mmet” factor 辰征色谱峰的对称程度的因了.由 下列方程得到: S=W1i,礻 /2F 式中,S一 对称因子; W“ .,片一 从 峰基线测得的 l/20峰 高处的峰宽度; ∫ 从 峰顶点 向记录纸的水平轴划垂直线 ,与 W00∶ 峰^ 宽线桕交,峰 的前侧 的距离定 义 为 '; WO。 ,,和 ∫唯位相同. 3 10 柱 前 衍 生 化 precoIumn deriVatiza1ion,prccolumn labeIing 样品组分在进到色谐柱之前,与衍生试剂反应进行衍生化的过程。 3 11 柱 后 衍 生 化 pⅡ toolumn dco哂 tLation,postCol1IIII】 I Iabdi吒 样滔宀纽分在色谱柱分离之后,加衍生试剂到洗出液中进行衍生化的过程。 3 12 标 准 溶 液 refereⅡ ce stllutlon 共特征值如浓度或分 r豆/L已 知的并确定足以用作液相色谱分析的标样的溶液。 3 13 分 离 模 式 separation mode L耍 曲液相色讠氵鲁分肖机,m.进彳i分类的操仵模式。 3 14 稀 释 标 准 溶 液 d"uted rcrerence soiⅡ t|,1t 被稀fft成一定浓度的标准溶液。 3 15 混 合 标 准 溶 液 mixcd rerOrence soIution 通过混合一种以~卜标准溶液或稀释标准溶液制备的含规定浓度样品组分的溶液。 3 16 内 标 物 IIlternal s】 andard 内标法屮用作标样的物质, 3 17 分 子 量 分 布 molcclllar wtight d` tribution 与分子量有多分散性的化合物有关。表示了各种分子作为分子量函数的量. 3 18 ‘卜 刍殳 frac1ionation 通过色谱柱分离和洗脱取得分析物的操作。 3 19 流 分 fraction 通过分级操仵分离得到的溶液. 2 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T16631— 2008 3 20 方 法 确 认 method vaI记 atIOn 汪叨使用高效液相色谱的分析方法适合分析 日的的各种测试. 4 高 效液相色谱法概述 41 液 相色谱法(I'C)足 ⋯种具有下述特征的物理和化学分离分析方法.它 使用液体作为流动相 ,每 种分析物在色谱柱的固定相和流动相问的相互作用存在差别,这种差别被利用来分离混合物。流动相 被加压传送以取得短时问内的高效分离的液相色谱分析方法被称为高效液相色谱法(H PLC)。 用于高 效液相色谱法的设各被称为高效液+H色 谱仪< 42 I￡ 可应用于测定非挥发性或耆热不稳定性化合物 ,这 些化合物难 于用气相 色谱法测定。囚为 LC的 扩散速度比气相色谱法慢 ,所以其分离能力比气相色谱法差。虽然 LC的 分离能力没有气相色谱 法高,但是它炅有优良的定量能力和容易得到分离的化合物的流分的特点。LC不 仅可应用于一般有 机化合物,而 ⅠL也 可应丿Ⅱ丁离子化合物、大然产物、聚合物以及其他广泛领域。 43 通 过综合分析高效液相色谱法所使用的冂定相和流动相 町^以认识其各种分离机理。表 l列出了 高效液桕色谱法的分类及其分离机理的特点、典型柱填料及其用途. 表 1 III’ LC:分 类和分离机理特点 、典型柱填料及其用途 44 HPI C的 基本配置如图 1所 示 .H PLC由 下列部件纽成:流动相提供单/L(液 体泵)、进样器、色谱 柱和柱箱 、检测器、数据处理机和记隶仪.流 动相的流速山泵设定, 定 体积的流动相被传送到进样器 , 冉到色谱柱.泵 输送流动相 的流速范围通常在 001mL/min~10mL/min.常 用往复式柱塞泵 (见 图 2).当 使Fll梯度洗脱法时 ,使用 l~4个 单元泵或耆一个梯庋器。 ‘∫离d1理 4丰 点 典型柱填料 月J 途 分配色谱(包 拈反拊l分配 色讠篝、正相分师J色 谱以及灰 桕离 r对 色ln’) ● 分 离是基 ∫田定相和 流动相闸分配平衙. ● 各 种柱填料和符种济i 动杆l的结含应川广泛 化学 键 含型 硅 胺 (or)s, NH耸 )、多孔聚舍物等 ● 范 围从低分子量到 高分j量 物质的分离 。 ● 同 系物的分离 吸附包店 ● 分 离fL鏖f浴 质在无 机氧化物 罔定 +l上 的吸 附 平衡。 ● 非 极性有机溶剂用作 流动朽l 砖胶、氧化铝 、工氧化钛 、 碳等 ● 极 性化合物和异构 体的分离 尺寸排阻色谱 (分 子筛分 色谱 、凝 胶过 滤 色诮 、凝 胶 渗透色谱 ) ● 分 离是基 寸聚合物填 料窄孔的分子筛分. ● 操 作条件温和 ● 亲 水聚合物填料和合 成 的 聚 含 物 填 料 有 不 同 应用 葡 聚糖 凝 胶 ,琼 脂 糖 凝 胶 ,聚 苯 乙烯 凝胺 ,聚 甲基 内烯酸酯凝胶等 ● 蛋 白、酶等 的分 离 纯化及脱盐 (亲 水聚合物 填料)。 ● 合 成 聚合物的分子 量分 级 (合 成 聚 舍 物 填 料) 离 子交换色谱 〈包括离子 排斥色谱和离子色谱) ● 分 离是基十离子交换 剂 和l离子溶 质 闸 的静 电相 互作用ˇ ● 应 川广泛 离子交换树脂 ● 离 子型物质的分离 分析 ,脱 盐 ,盐 交换 亲合色谱 ● 分 鹞是雄于衍生 自生 物组织的分子识别能力 。 ● 选 择件极高 酶、肽、糖等组合 ● 生 理活性物质 的浓 缩 、分离和稀制 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T 16631— 2008 数龆处犟机 IPLC的 基本舀二(示t囡 ) ˉˉ -进 洋疹,色谙拄 图 2 住 虫式柱塞泵的基本配二(示忠图) 45 通 常用微母注射器量取一定体积的样品溶液 ,注人迸样阀,扳动阀钮将样品溶液注人色谱柱.有 时使用 自动进样器按序列 自动进多个样品。 46 HPI'C使 川的柱填料其有相对均匀的颗粒尺寸 ,拉径一般在 1um~20〃 m之 llll,填料被装填在内 径 l mm~12mm的 不锈钢或塑料的色谱柱管屮,住 长一般几十陲米或者更短.填 料的粒径和柱 子的 尺寸根据其用途而有所不同. 47 分 析物被色谱柱分离,然后基于共物理、光学 、r乜、化学及其他特性被检测器检测,H PI￡ 的典型 检测器足紫外可 lt光检测器。通常这种检洲器的流迪池体积在 饣 l`L~20uI'之 问,它测量被分离后的 分析物在一定波 Κ下的吸光度(吸 收强度)。其他检测器包括示差折光指数检测器、荧光检测器 、电化学 检测器 、电导检测器、质谱仪等。HPLC使 用的典型检测器的特点列于表 2.当 需要选择性检测或 g/I' 量级以下的高灵敏度检测H刂,依赖于分析物特征使用不同的检测器, 48 如 果分析物不能直接检测或者高灵敏检测不可能实现,则 nr使用柱前衍生化或柱后衍生化.前 者 4 图 1 表 2 HPLc使 用的典型检测器及其特点 检测器 最小检测 灵敏度/g 选择性 温度的影响 流速的髟响 梯度洗脱 吸光度检测器〈UV/V【 s检 测器) 荧光检测器(F1~D) 示差折光检测器(ItlD〉 电化学检测器(ECD) 电导检测器‘CL)〉 质谱(Ms〉 l0 1· 10 1Ⅱ lO~- 10_l′ l() )Ⅱ ∷ l tl_ˉ 有(吸 光物质) 右〈荧光物质) 无 有(氧 化还原物质) 有(离 子) 尢 ?? ??? ? ? ????? 可用 可用 不 ρ∫用 可用 不宜 可用 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 16631-2008 是分析物在进到色谱柱之前进行的衍生化 ,而后者是分析物被色谱柱分离之后衍生试剂同洗脱液进行 混合进行的衍生化 令 49 检 测器得到每个分折物的响应并转化成电信号,然后送到数据处理机 .记 录检测器得到的信号对 时间作图得到如图 3所 示的色谱图.数 据处理机基于得到的色谱图进行各种参数运算 ,对 分析物进行 定性定量分析.当 使用保甜值对分析物进行定性时,厂Π其保留值(保 留时问等)同 相lnl条仵下的标准样 品的保留值进行 比较,当 使川质谱或=极 管阵列检测器对分析物进行定性时,用分析物的谱图同标样 的谱图进行比较.当 进行定量分析时,从色谱图得到峰面积值或峰高值 ,将其代人山含分析物的标准溶 液制得的标准曲线迸行定量测定。 410 另 -方面 ,也有可能通过收集与色谱图上色谱峰相对应的流出液对分离的分析物进行等分收集 , 进行提纯 ,即制备型液相色谱泫 , 俅m体 积〈伙″Ri fH〉 图 3 色 谱图和每个参数的名称 5 水 、试荆和溶剂 51 水 本标准使用的水应足通过蒸馏或离了交换等方法精制的水 ,或者通过反渗透、蒸馏 、离子交换等方 法结合精制的水 ,水 质不应十扰分析。 52 试 剂 试剂应足分析纯试却J或质量更好的试剂.试 剂不应干扰分析。 53 溶 剂 溶剂应足 HPLC级 的产品或质量相当或更好的产品。它们不应f扰 所使用的检测器的性能. 6 取 样及预处理的操作 高效液相色谱分析要求按样宀宀的分析 H的 选择合适的取样方法.根 据样品形式和分祈 日的,样宀宀 可直接进高效液相色谱仪 ,或者对分析物进行萃取、衍生、浓缩等预处理。 61 取 样 取样应根据分析 日的、样品性质及测试项 日使川最佳方法进行 ,考虑具有佯舶代表性及能区分每个 样品特征的差异.如 果亻r专项标准,则按该标准迸行取样操作。为了防止曲于老化之类的外部因素引 起的变化 ,预处理和进样的过程应尽可能快地进行。如果样品需要贮存 ,耍预先确认样品不会囚为贮存 和转移运输发隹变化,如 果在初步试验和实际测定时样品量和分析物浓度存在较大差别 ,则设定的条 件将无效。如果怀疑样品发生了变化 ,则要采取栩应对策D。 用于取样和样品贮存的容器和器具不应含 I) 例 如 ,生 物样品分析物可能被酶和微生物分解 ,或 者被代谢产物和增殖污染.在 这样 的情况下 ,应 采取诸如添 加防腐剂、低温贮存 、调节 pII值 、过滤 、热处理、「燥等对策 .防 腐剂可能影响分析物和色谱图,应 引起注意 . ?? ? ?? 组分B倮 留体积(时问) 幻l分^倮 钾体积(时F:l) 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T16s31-2008 有任何吸附样品或溶解于样品的物质。贮存容器应贴上必要的警示标签。如果为了保证数据的可靠性 需要迸行重复测定 ,则桕同样品必须lnl时在两处或两处以 L的 取样点抽取。 62 预 处理 样品在进高效液相色谱仪之前 ,应针对分析 H的 、样品性质和测试项 日使用最合适的方法进行预处 理.预 处理 -般 可改善特性 、精密度、灵敏度等,消除测量的干扰物质,保护色谱柱和仪器免予损坏 ,简 化测定操作过程 ,以及使分析物保持稳定。 预处理包括下列过程 :称重、蛋白质脱除、萃取(液液萃取、田相萃取、溶剂蒸馏 、超滤分离、超临界流 体萃取等)、净化(液 液萃取、固相萃取等)、脱水、脱盐 、浓缩、定容、衍生、标准物加人 、溶剂调整(衍生化 、 溶解在适于进样的溶剂中)等 等.如 果有专项标准,则按该标准进行预处理,如 果加人内标物,在 色谱 图上内标物应与样品基质很好地分离。其保 留时问应与 日标组分的保 留时问差别不大.如 果使用质 谱 ,与内标物的分离不一定是必需的。样品应溶解在少量其淋洗能力等于或小于流动相的溶剂 中.溶 剂9I能 影响稳定性和 日标组分的分离 ,因此应谨慎选择。必要时,使用 02um~05‘ lm的过滤膜对样 品进行过滤以除去不溶物。预处理有可能引起来 白试剂、容器、环境等的污染,引起杂质的混人以及分 析物的损失 ,应引起注意. 7 仪 器配置 71 流 动相供应单元 输送流动相(洗脱剂)到 色谱柱的供应单元 ,主要山下列部件组成 : 711 洗 脱荆储液器 洗脱剂储液器应使用不影响流动相(洗脱剂)化学组成的材料制成 ,洗 脱剂储液器应防止在使州过 私中环境囚素对流动桕的污染 ,如熬发变质等。 712 脱 气器 脱气器被用来连续脱除溶鼾在流动桕(洗脱剂》u的空气 ,以免忖l△=仪器内温度压力变化引起的气 泡问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ,从i何保证稳定的流速和估 ;J背 景 . 713 供 液泵 以精确流速将流动相(洗脱剂)输 送到色谱柱的柬必须满足下列要求 : a) 流 速范围宽 ; b) 流 速精度高; c) 流 量脉动低; d) 在 较宽的压力范a·l内具有稳定的输液能力; c) 与 液体接触的材料具有优异的化氵Ⅱ隋性 , f) 易 于更换流动相。 714 梯 度洗脱单元 梯度洗脱单元 由控制器和浪合器组成,控制器可以连续改变混合流动相(洗 脱剂)的 组成而混合器 将获得均匀的浪合溶液。混合比的设定范围要宽,浓度要精确。 72 进 样器 进样器的材料和构造应确保所进的样品没有吸附保留,进样重笈性好.如 果用 自动进样器 自动进 行许多试样的进样 ,那么它应具有以下基本功能 :重复性、定量进样准确性 、保留小、极小的样品量等等 . 如果有预期的用途需要 ,则 应加 L冷 却 功能,以 便增加制备好 的样 灿数量和降低样 品组分 的分解 和蒸发。 具有样品预处理功能或柱前衍生化功能的自动进样器也可能用到。 73 分 离单元 731 色 谱桂 根据分折 日的,使川本标准第 9章 叙述的色谱柱.从 进样器到色谱柱人 口的流路和从色谱柱出口 6 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 16631-2008 到检测器的流路应使用死体积尽可能小的管路 ,以免样肖宀谱带扩散。 可使用保护柱来防止分析柱性能损坏。 732 色 谱柱箱 使"j色谱柱箱可提高分离分析的稳定仕从而确保分析精度令色谱柱箱应具有温度控制功能。控制 温度 叮优化色谱柱性能、增强分离选择性以及防止柱温受环境温度变化的影响. 74 检 测器 洗脱剂从色谱柱进人检测器的微流池 ,检测器按照不同原理以流动相作为背景检测分析物的浓度 或体积.常 用检测器的特点见表 2. 741 吸 光度检测器 吸光度检测器检测样舀宀组分在紫外可见光区的吸光度。按分析物的吸收特性确定吸收波长。常用 的吸光度检测器类型是分光光束通过流动池中的样品组分 ,到 二极管阵列检测器,产生光谱,测量各波 κ下的吸光度变化。通过使用各波长下的色谱图和衍个组分的保留时问rT以获得定性分析结果和峰组 分纯度的确认 。 742 示 差折光指数检测器 样甜I组分的流出引起流动相折光指数改变.这种改变被检测器以折光指数之差进行检测, 743 荧 光检测器 荧光检测器捡测样宀宀屮某个组分受到激发光激发在特定波长 卜的荧光强度.为 F设 定最佳波 长和 定性确认峰组分 ,/l些荧光检测器具有进行激发、激发产生的荧光波 Κ扫描以及灾光光谱采集等功能, 744 电 化学检测器 电化学检测器检测样品组分在加有特定电lI;的 △作电极 卜迸行氧化还原反应产生的电流. 745 电 导检测器 电导检测器捡测流动相溶液和样宀宀组分之闷电导的芹别, 746 质 谱检测器 质谱检测器将从色谱柱流出的样品组分进行离f化 ,然后按照质荷比检测这些离子。 747 其 他类型检测器 其他类型检测器包括 下列检测器: a) 红 外光谱检测器(IR); b) 旋 光度检测器(oR),圆 二色检测器(CD)· c) 火 焰离子化检测器(Π D): d) 放 射 检 测 器 (R1); c) 介 电检测器 ; ￡) 化 学发光检测器(包括生物发光×CLD); g) 原 了吸收分光光度检测器(ΛA); h) 电 感耦合等离子体发射光谱检测器(ICl’ΛEs); i) 高 频等离子体质谱检测器; j) 热 检测器; k) 光 散射检测器; l) 黏 度检测器| rIl) 离于电极检测器 ; n) 超 声波检测器; o) 核 磁共振仪检测器。 75 数 据处理机 数据处理机显示色谱图和计算得到的定垦结呆.计 算可通过制备校准曲线 ,用浓度对保留时问 、峰 7 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/I 16631-2008 高、峰面积等作图.有 些数据处理机真有光谱分析功能. 76 附 件 根据分析 H的 ,如果必要,应提供下列附件; a) 计 算机(用 于工作站 ,用于数据处理和仪器控制); b) 路 径切换阀(柱切换 、循环、反冲等); c) 流 分收集器 ; d) 柱 后反应器. 8 洗 脱荆 8I 洗 脱剂的选择 应按分离模式或检测模式选择洗脱剂 ,以满足要求。 811 要 求 洗脱剂应满足下列要求 : a) 能 合适地分离分析物 ; b) 不 会化学的或物理的破坏卡t填料 ; c) 能 溶解样品而没有破坏; d, 适 合检测器 ; c) 脱 除l+i体物质2); f) 脱 气讠。 812 按 分离模式选择(见表 3) 表 3 按 分离摸式选择洗脱剂 2) 为 r脱除固体物质 ,洗脱剂通常应通过孔径 05um或 更小的膜进行过滤。如果使用粒径为 3um或 更小 的柱 填料,使 用的过滹膜的孔径应是粒径的 VI0砭 3) 如 果高效液相色谱仪具有脱气装置,则不必预先脱气. 分离摸式 洗 脱 剂 备 注 吸附色谱 己烷 戊炕 二氯 叩烷、乙醚 舁丙醉 、甲醇,以 及其他具有不 同极饣L的 南机溶剂 ,n∫混含使川 冫t脱 剂极性越商、洗脱能力越镘。分离选择性随 洗脱剂的极性 改变 .除 此之外 ,还 随氢键 、可受性 和偶极作用而改变 分配色谱 正相色谱 反相色谱 反 相 离 子 对色谱 己烷 、戊烷 工氪 叩烷 、乙醚、 舁丙醇 、屮醇 ,以 及其他具有不 丨司极性的有机溶剂 ,可 混合使用 洗脱剂极〃E越 高,洗 脱能力越强.分 离选择性 由 分析物在洗脱剂和固定相 中的溶解性决 定。除此 之外,还 随氢键 、可受性和偶极作丿H而 改变 甲醇 、乙腈 、THF° 、和其 他 有 机溶 剂 lnl水 或 缓 冲 溶 液混 合 使用 洗脱剂极性越低 ,洗 脱能力越强。分离选择性 Rl 分折物在洗脱剂和 囚定杆I屮 的溶解性 决定.除 此 之外 ,还 随氢键 可受It和 偶极作用而改变 ‘如果 分析物是离子型化含物 ,洗 脱剂 的 pH值 将严重影 响保留/分 离。在离子型化含物电离的 pH值 下 ,保 留很弱,rn在非电离的 pH值 下 保留变强 能同要 分析 的 r9=∫ 形 成 离卡 对的缓冲溶液被制备,加 人疏水 试剂作 为对 离子.这 样 的缓 冲 漭液l,l甲 醇、乙腈 、tHP和 其他 有机溶剂混合使用 有机溶剂的混合 比越大,洗 脱能力越强.作 为离 子对色谱的洗脱剂 ,调 整离子对 试剂浓度和 pH值 很重要 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 1663卜 -2008 表 3(续 ) 分离摸式 洗 脱 中 J 备 注 离子交换色谱 离子排阻色谱 缓 冲溶液被使用 ,其 缓 冲能力 使得分析物 的电荷差别 在一定 的 pH值 卜最 人.通 常 忉始洗 脱 剂 的 浓 度 足 20mmol/I'~ 50in moˇ L 在羧酸或 其他弱酸的情况下, 便廾J水 或 l nvn,l/I~10ⅡrInˇ 1 的酸的水溶液 〈pH值 为 2~3), 在弱 碱 △f化台 物 情 况 下,主 要 用水 初始洗脱剂是分析物在该 pH值 卜电离的缓冲溶 液,分 析物被保 留.然 后 ,氯 化钠 和其他碱 以梯 度 或线性增 加添加 浓度 的方式加 人 到缓 冲溶 液 中. 另外,缓 冲溶液的 ρH值 将改变 ,以 便使分析物朝非 电离方向转化.反 之,洗 脱剂 出可能是在该 pH值 下分析物不电离的缓冲溶液 ,并 且分析物可通过只 是移动被分离 。如果树脂型离子交换剂被使 用,除 了离 r交 换外还可能 存在疏水作用、氢键 、尺寸排 除等。囚此 ,加 人有机溶剂可调整分离 般ˉ地 ,如 果分折物被 电离,洗 脱就快 ,如 果不电 离,洗脱就慢.通 常,洗 脱剂的 pH值 应选择 以使分 柝物问的电离速度nJ差最人 在其中分析物 有可能 lnl配 体偶 含的洗脱 剂应 ln 色谱柱保持平衡 样 品进到色谱柱 然后离子强度 和 pH值 将改变 .这 娃 -种 非特定洗脱 .另 外,游 离的过筮配体或苁相似物质溶液应被使∫Tl这 是 ˉ 亲和色i普 | | 刂|水 尺 排阻色谱 伙用的缓冲溶液的 pH值 和离 r强 度适 寸分析 物 和配体 相Ι 作川 .蛋 白质 等 的亲和色 谱常 I+丹 I二 氨氰酸缓 冲浴液 、磷酸缓 |冲 溶液 、酣酸缓 冲溶液苓 |雾ξ母学言龟 ξ毋 ::l晷 吾 的溶刹.在 此、聚苯乙烯凝胶被 用仵柱填料 ,则常用 THP,囚 为 其具 有相 近 的溶 解 作 川 参 数 , 如果分析物是极性 的,可 能使川 DMF和 英他极性溶剂 洗脱剂 屮加人 碱 以便 阻 1L lL 填料和分析物 问 的静 电作 用并 增加 离子 强度。在蛋 臼质 和其 他样 芯1的 情况下 ,pH佰 影 响穗 定性和空问构 型,可 能便用英他 合lE的缓冲溶液 种特定i先脱 尺 刂排 阻色谱 如果尺 丨排 阻色谱需 要在 100℃ 或更 高温度下 进行 ,则 可能使 Ⅱ` TCI;1.肖 溶剂 在窜温下 娃两体 时,分 析后应将 柱 卜保 留的溶剂用其他溶质置换. 溶剂置换时,流 速不能超过色谱柱的⊥作压力.不 必要的溶剂皆换将缩短色谱柱的使用寿命 如果分析物lnl柱填料存在疏水作用的可能性 ,在 色谱柱可接受的范围内 U∫在洗脱剂申加人甲醇或 其他极性有机溶剂 耐 水 尺 排阻色谱 THF四 氢呋喃; T(lB三 氯 苯 ; DMF工 叩幕 甲酰胺 . 81.3 按 检测器选择(见表 4) 表 4 按 检测器选择洗脱剂 洗脱剂的选择 通常选择的洗脱剂在检测波 Κ 卜是透光的或 只有微不足道 的吸收。使丹l没 有紫外吸 收的高纯溶剂 、水和试剂制备洗脱剂。一般情况下,溶 剂在短波 长有强的吸收, 些 缓冲 溶液在紫外区有强吸收 ,应 给予注息徊在梯度洗脱的情况下 ,洗 脱剂组成的变化 可弓起 吸收强度的变化 ,引起基线波动.在 检测波长下 ,使用的所有溶剂必须是足够透光的 吸9t捡狈刂器 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T16631-2008 82 洗 脱荆的制备 821 混 合洗脱剂的制备 鼓适合分离的洗脱剂通常用两种或更多种溶剂充分泥合制备 。除了尺寸排阻色谱,很 少使丹l单一 溶剂。关于混合洗脱剂的制备,应注意以下几点: a) 使 用能够完全混合的溶剂; b) 充 分搅拌以获得均匀组成, c) 混 合洗脱剂的组成可川室温下混合前的体形1比辰示。混合洗脱剂的体积不 定ˉ等于各溶剂体 积的总和。曲此,各溶刹的体积应分刖测量; d) 如 粜混合时溶液温庋改变,应冷却至室温 ; c) 当 有机溶剂和 缓 冲溶液或离子对试 剂混仑时 如`果产生沉 淀 的 呵能性很 高,应 使 用孔 径 o5um或 更小的过滤膜逃行过滤除去沉淀; D 依 赖十贮存条件,有些洗脱剂可能容易发生组成变化、化学变化、吸水等. 822 洗 脱剂脱水和溶剂的水饱和 如果样品组分遇水不稳定,或者像硅胶或其他一些对水很亲和的物质被用作同定相 ,应注意洗脱剂 中的水分 ,并J用 前应迸行脱水. 在吸附色谱法中,水分严重影响分离选择性,可便用用特定的水分饱和的溶剂制备洗脱剂。 8221 洗 脱剂的脱水 脱水应使用合适的千燥剂。醇类和乙胩 可以丹J3Λ 和 4A分 子筛脱水。 8222 溶 剂的水饱和 将有机溶剂同稍稍多于饱和水量的水滋合,在高于使用温度 5℃ ~10℃ 的温度 下充分搅拌 ,然后 扛使用温度 f搅 拌。静置分层后,取有机相层即制得 l00阢水饱和的溶剂。将其按一定 比例同完全脱 水的溶剂混合,即 可制得一定饱和度的水饱和溶剂, 8.23 洗 脱荆的 pH值 调节方法 在反相分配色谱屮,l忄加人少量的酸或碱来调节洗脱剂的 pH值 ,洗脱剂的 pH值 也可能由于空气 中的二氧化碳的溶解作用受影响。如果 pH值 严重影响分离,必 须使用缓 冲溶液,缓 冲溶液在所用的 pH值 范围内其有足够的缓冲能力.如 果用衤r机 溶剂l,l缓冲溶液混合制备洗脱剂,混 合 比将影响氢离 子浓庋 .但 是 ,混合前缓冲溶液的 pH值 通常应就是洗脱剂的 pH值 。 9 色 谱柱和柱填料 91 色 谱柱 911 色 谱柱的标记 色谱柱多种多样.色 谱柱的标记除了柱填料的名称外,还要指明色谱柱管的材料 、长庋和内径 . ]0 表 4(续 ) 检 。lJ 器 | 洗脱剂的选择 荧光检tl器 |试 蔫氍銎蚤嘉暑 发光波长和荧光波长下都不吸收 .使 H`没 有荧光 杂质 的高纯溶剂 、水 和 _L工 二 △ 二 △ _______ 示差折光指数捡lmJ器 | 洗 脱剂的折光指数应与分析物的折光指数有差别.应 充分搅拌洗脱剂便浓度差最小 电化学检恻器 | 便 用电化学惰性的高纯浴剂、水和试剂制备洗脱剂 — — — — — — — — Γ — ~~~~~— — — — — — — — — — — 化学发光检测器 | 苎 呷 剂在检测 波 κ△应 没有吸收。使 用 没有 发光 杂质 的高纯 溶剂 、水和试剂 制备 |洗脱剂 质谱 | 洗 脱剂应该是挥发性的。使用没有杂质的高纯溶剂、水 和klt剂制备洗脱剂 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 16631— 2008 g12 色 谱柱管的材料 用作色谱柱管的材料应布足够的强度 、有光滑的内表面、对洗脱剂和分析物惰性 .例 如布不锈钢、 聚醚醚酮(PEEK)、 玻璃 、衬玻璃不锈钢、石英管等。 913 色 谱柱的分类 依赖丁分析样品的类型、进样量和特点以及分析条件,色谱柱有不同的尺 寸.按 内径可以将色谱柱 分类如下 : a) 半 制 备 柱 :内 径 12mm~50mm(不 含 50mm); b) 通 用 柱 :内 径 3mm~12mm(不 含 1zmm); c) 半 微 柱 :内 径 1mm~3mm(不 含 3mm): d) 微 柱 :内径 l mm以F, 92 柱 填料 柱填料通常是相对均匀的颗粒 ,粒径范围 l um~20um,或者是具有问等效果的棒状连续体。填料 在I作 条件 卜具布物理亿学稳定性 . 柱填料材料 仃硅皎类的无机物、聚苯乙谛凝胶类的粢合物 ,以及川 ⒈述+l料作 母体在其表面⒈化学 键合石机分了的物质 ˇ 93 分 离方式和色谱柱填料 按照色谱柱填料和洗脱剂的纽合 ,HPLC有 多种分离方式。按分析物的化学 、物理特忤 ,合殂地选 择分离方式. 94 柱 性能 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 色谱柱条件可用峰型、理论板数、对称因子等参数评价 。色谱柱‖能以}辶寿命 、分离能力、选择性 、 截大样品负荷等参敬评价. 当卜r价 色谱柱性能时,应在 -定 条仟下进行 ,这些条件不受环境耵l仪器形响,保证获得重复性. 10 仪 器安装的环境要求和安全 101 环 境要求 安装高效液相色谱仪的房问一般应满足下列条件 : a) 温 湿度应在仪器规定的范围内且不会突然改变 ; b) 没 布震动和阳光直射 ; c) 沽 沽无尘 、无腐蚀性气体,袖良好的通风; d) 没 有强磁场和电场 ; c) lL源 电压 、容量和频率符合仪器规定 ,电压波动在土lO%以 内,没有频率波动; ￡) 提 供接地屯阻小于 lO0Ω 的接地点. 102 安 全 为安全 H的 ,应注意下列事项 : a) 分 析使川的祥品和化学试剂在处理时应注惫其爆炸性、易燃性、毒性或危害性.废 液应该按照 环保规定,在进行安令和无宙化处理后弃置。危险物质和有毒和有甯物质应该按照相关法规 进行处理⑺; b) 将 仪器J’【地 ; c) 当 使用压力容器内气体时,要遵从桕关规定。如果其容器置△=仪器附近,则容器应该 固定到基 座、墙璧 、实验台上等等,以免翻倒 ; d) 在 操作仪器前 ,耍彻底检查管路、按头等处足否漏液和漏气 ; 1) 当 处卿有薄有害化学试剂时,应穿戴防护服〈护 回镜 橡胶乎套和防蓐面员等)。 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 16631— 2008 c) 直 接接触仪器内郎有nT能引起电击。在检查和维修ε)时 ,应先切断电源; f) 有 些检测器使用光源灯 ,工作时会发射紫外线 ,因此在维护和更换灯时应戴护 日镜 .光 源灯 工作时发热 ,不得触摸; g) 仪 器有可能产FH电 磁干扰,或者受其他仪嚣的电磁干扰 ,应给 予沱意; h) 如 果直接用于接触生物样品(血 清 、血浆、组织 、尿样等),有 。f能引起感染.须 小心处理这些 样ln。 耍注意防止样品直接接触皮肤。 11 测 呈和试料的制备 ll l 样品的制备 样品进行制备。J改 善分析物的定性定量精度,稳定分析物不发生变化 ,保护色谱柱和仪器.样 品制 备包拆 :样品溶液的稀 释/浓 缩 、样 宀∫I溶液 中干扰物 的脱除、样 甜】溶液 中加人标 准溶 液、分析物的衍 生化等。 样品制备既要改善分析精度 ,也耍提高制备过程的效率。可使廾J白动进样器 、使用高压切换阀的柱 切换等方法来 自动进行样品制备, 如果样nn制备的条件有专项标准规定 ,则按该标准进行. 1111 样 品溶液的稀释或浓缩 为 r使分析物保持在合适的浓庋范围内,应对样品溶液顶先进行稀 f△c或浓缩(溶 剂稚取 、l+相萃取 等).在 试样溶液制各好后 ,应尽快进样分析。试样溶液应溶丁流动相. l112 样 品溶液中干扰组分的脱除 如果样品屮含有田体纽分、对色谱柱有不利影响的组分或者干扰定性定量分析的组分,应使川过滤 肷法σΠ孔径 O5unl或 更小的膜)、功能膜(超 滤膜)法 、田桕萃取 、溶剂萃取等方法制备试样溶液,脱除 先前的T扰 物质. ll13 样 品溶液中加入标准溶液 当使用内标法时,样汕溶液中要加人内标物;当使用标准标准加人法时,样 宀宀溶液中要加人标准溶 液或稀释±J准 溶液.因 此,试样溶液斋要进行制锊Φ。试样溶液制备时可使用混合的稀释标准溶液. ll14 柱 前衍生化 如果不能 卣按捡ll l分析物,或 者需耍高灵敏性或高选择性检测,或 者需要优化分离,可在试佯进色 谱柱前使试样中的H标 成分衍生化 ,柱 前衍生化有两种情形 :ˉ 种是加人试样溶液中分析物的衍生剂 , 乃 种 屉加人进行氧化、还原、分解等反应的试剂。 柱前衍生化可通过 白动迸样器具备的功能 自动进行 ,这样的功能包括 :加人试剂、混合反应液体、控 制反应时闷、注射反应液体等:` ll2 分 析检测器的选择 Hl’l'C检测器检测从色谱拄流出的流动桕中的分析物 ,完成定性定量分析.检 测器各种各样 ,应 根据实际试样选择合近的检测器.一 些检测器的类型见 74。 113 柱 后衍生化 分析物通过色谱柱分离后 ,衍生试剂、pH值 调节溶液等 与流出物混合,将其加热、光照或通过像非 ∷ 田 定酶色谱柱之类的一个反应器,使其经过衍生反应之后再检测。当山⒈下述原囚而使选择性的、高灵 l/k的检测成为不i刂能时才应川柱后衍生,这些原囚包括 :分析物结构完整不能检测、检测灵敏度低 、残余 5) 女 n果仪器使用锂电池,不 当处理 叫能引起爆炸。 ω 加 人标准溶液不应在试样溶液屮产生沉淀或化学反应 ,例 如形成络合物 ,这 些事先应进行确认. 7) 依 赖∫反应参数 女n试利的数鼓 加人的fJ、混舍作用的次数 、反应温度 反应时问等,适 定钓柱前衍生试剂是 有限的。 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T 1663卜 -2008 物干扰大。 ll4 等 度洗脱 使用单一组成洗脱剂将分析物从色谱柱屮洗脱,通常采用单元泵 .其侍点是具有 良攵f的 保留时问重 笈怔 。 ll5 梯 度洗脱 梯度洗脱就是洗脱剂组成按时间程序改变,将分析物从色谱柱中洗脱。与等度洗脱相比,梯度洗脱 减少了洗脱时问,而 灶峰型更尖锐。洗脱剂组成可以呈线性、梯度或指数变化.通 常有两种梯度洗脱方 式 :一种是低压梯度洗脱,使川一个单 冗泵作为输送液体的设备,另 一种是高压梯度洗脱 ,需要多个 单尢泵 ^ ll6 馏 分制备 制备色谱的准备△作应满足如下条件 : a) 丿H于 制备色谱的样品溶液的准备: l) 进 样溶剂应能溶解样品且不改变分析物的性质。样品应溶解在溶解力等于或弱于洗脱剂 的溶剂中: 2) 样 A宀溶液巾颗粒物和不溶物质应事尤通过膜过滤等方法除去; 3) 样 品应先利用溶剂萃取等方法进行粗分。 b) 洗 脱剂的准俩: l〉 洗 脱剂对填充物应是侑性的 巳不影响样品的活性 ; 2) 洗 脱剂应适合丁样村(的等分ul收; 3) 洗 脱剂中的颗粒物或灰尘应事先迪过膜过滤等方法除,~, c) 制 备色谱装置: l) 与 液体按触部件n勺材料 ,如液体欠 、管线和色谱柱管应不被样宀宀或洗脱剂腐蚀 ,且不应污 y,●t佯洋宀禾l氵jt脱剂; 2) 设 备应足以耐受操作压力 ; 3) 相 应于所用色谱柱的尺 寸和流速 ,死体积应足够小 ; 彳) 检 测器的灵敏度应根据进样量迸行优化。 d) 色 谱柱的准备: 1) 填 料在操作条件下应当具有物理化学稳定性 ,由 于不可逆吸附和氧化造成 日标成分损毁 丿立很小 ; 2) 应 使用分析柱以小规模研究制备色谱条件 ,色谱柱应在优化条件下使用 ; 3) 等 分制各色谱柱的性能应在顽先确定的条件下得到确证。 12 分 析步骤 121 分 析条件的设定 以下项 日应按专项标准规定的条件进行设定建立: a) 流 动相的种类和流速(当使用梯度洗脱方法时,流动相的起始组成 、组成变化比、最终组成等的 各种程序); b) 色 谱柱的种类 ; c) 色 谱柱的温度 ; d〉 检 测器的灵敏哽; c) 数 据处理部分的条件(数据处理机、记录仪). 122 基 线稳定性的确认 当在 121所 规定的条件 卜运行时,应确认基线的波动对测定没右影响. 13 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com GB/T16631— 2008 123 进 样 使川微量注射器准确量取一定体积的样品,注人进样 阀,扳动阀钮快速进样.当 使用 自动进样器 时,设定合适的条件. 124 分 析步骤 如使用记录仪 ,在进样的同时,在记录仪的记录纸 卜标记进样点.调 整衰减 ,使得按组分的量将色 谱峰绘制得尽量人,但不超出记录纸。如使用数据处理机,要设定采样时问和其他采样参数。 125 色 谱图的记录 典型色谱图的编排 ,一般应当记录如下项 日: a) 检 测 日期和检测名称 ; b) 高 效液相色谱仪生产商及型号; c) 样 品名称 ; d) 试 样的制备方法以及进样量(uL或 mL); c) 柱 填料的种类或色谱柱的类型; f) 色 谱柱管的材质 、内径(mm)和 长度(mm); g) 柱 温(℃ ); h) 流 动相(洗脱剂)的 种类 ; i) 流 动相(洗脱剂)的流速(mL/min)及 柱前压力(Pa); j) 梯 度洗脱方法的分析条件; k) 检 测器类型和操仵条件 ; D 使 用化学反应时,反应液体和反应试剂的种类和流速(mI〃min)、流动桕和反应液体的混合 比 和反应条件; m) 数 据处理机类型和记隶条件; n) 其 他必须的项 H。 13 定 性分析 在桕 fl条件 卜分析标样和样宀宀,得到色谱图,将稀释标准溶液或混合稀释标准溶液的保 留数据9” 与样品中未知组分的保留数据进行比较,可进行定性分析。在这种情况 卜,为了确认未知组分峰的单一 性 ,可以改变分离条件进行测定 ,例如改变流动相和固定相 ;也可使川如下定性技术包括离线操作来进 行验证 : a) 使 用不lnl原理的多个检测器 ; b) 使 用工极管阵列检测器 ; c) 使 丹I质谱、红外光谱、发射光谱分析、核磁共振波谱及其他方法 ; d) 使 用化学反应或酶反应或类似方法。 14 定 量分析 141 测 定 为了进行测定 ,需计算色谱峰面积l⑴JD,通 过标准曲线法、内标法或标准加人法⑵进行测定。 8) 保 留数据是下述术语的通称 :保 留时问、保留体积、调整保留体积、特征保留体积 、相对保留值 、保留系数等等。 9) Fn样 条件 卜重复试验的保 留数据的分散性 ,其 杆l对标准偏差应小于等于 3%. 10) 可 用峰高代替峰面积. ll) 峰 面积的计算需根据峰型划合适的基线. 12) 当 可获得含适的内标物时,采 川内标方法.在 这种情况 卜,可 以修 正迸样误差或预处理误差 。标准加人法可 修正样品基质的影响,这 是其优点. 食品伙伴网http://www.foodmate.net ????? www.bzfxw.com ???? The standard is downloaded from www.bzfxw.com CB/T 16631-— 2008 l02 峰 高的测量 峰高就是用峰顶点的信号值减相同保留时间处基线的佶号值 ,或者从峰顶点朝记录纸的横坐标作 图与基线垂 良相交.从顶点到交点的lq。离 . 143 峰 面积测呈 峰面积(^ )是 从峰开始到峰结柬,峰的信号值和基线的信另值之差的积分 ;或 者峰高(尢)