LB培养基中所用抗生素终浓度:氨苄青霉素-50μg/ml;氯霉素-20μlgml;庆大霉素-15μg/ml;卡那霉素-30μg/ml;春日霉素-1000μg/ml;壮观霉素-100μg/ml;链霉素-30μg/ml;四环素-12μg/ml 抗生素的贮液和工作液浓度 ①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌; ②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌; ③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。 注意:镁离子是四环素的拮抗剂。对于以四环素为筛选抗性的细菌,应使用不含镁离子的培养基,如LB培养基。 下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度 氨苄青霉素 贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒) 羧苄青霉素 贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒) 氯霉素 贮液浓度 34 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存 工作浓度 25 μg/ml (严紧型质粒) 170 μg/ml (松弛型质粒) 卡那霉素 贮液浓度 10 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒) 链霉素 贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒) 四环素 贮液浓度 5 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒) 质粒类型: DNA construct Origin of Replication Copy number Classification Plasmids pUC vectors pMB1* 500–700 high copy pBluescript? vectors ColE1 300–500 high copy pGEM? vectors pMB1* 300–400 high copy pTZ vectors pMB1* >1000 high copy pBR322 and derivatives pMB1* 15–20 low copy pACYC and derivatives p15A 10–12 low copy pSC101 and derivatives pSC101 ~5 very low copy Cosmids SuperCos pMB1* 10-20 low copy pWE15 ColE1 10-20 low copy
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