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质谱处理过程

质谱处理过程质谱处理过程：1)．用切胶笔切下目的条带，置于离心管中。2)．用50µl双蒸水洗两次，每次10min。3)．加50µl脱色液(50mM碳酸氢铵/乙腈(1:1))，37°C脱色20min。4)．重复步骤3，直至蓝色褪去。5)．加50µl乙腈使胶条脱水至白色，真空干燥10min。6)．加10mMDTT(用25mM碳酸氢铵配制)50µl，56°C水浴1h。7)．样品冷至室温，去除溶液，快速加30-40mMIAA(用25mM碳酸氢铵配制)50µl，置于暗室45min。8)．依次用25mM碳酸氢铵，25mM碳酸氢铵50%乙腈...

质谱处理过程：1)．用切胶笔切下目的条带，置于离心管中。2)．用50µl双蒸水洗两次，每次10min。3)．加50µl脱色液(50mM碳酸氢铵/乙腈(1:1))，37°C脱色20min。4)．重复步骤 3，直至蓝色褪去。5)．加50µl乙腈使胶条脱水至白色，真空干燥10min。6)．加10mMDTT(用25mM碳酸氢铵配制)50µl，56°C水浴1h。7)．样品冷至室温，去除溶液，快速加30-40mMIAA(用25mM碳酸氢铵配制)50µl，置于暗室45min。8)．依次用25mM碳酸氢铵，25mM碳酸氢铵50%乙腈各清洗胶条两次，每次10min,再用乙腈脱水至胶条变白，真空干燥10min。9)．将0.1µg/µl胰蛋白酶酶液用25mM碳酸氢铵稀释10-20倍，每管加2-3µl，短暂离心，让酶液与胶条充分接触，4°C放置30min。待酶解液被完全吸收，加25mM碳酸氢铵至总体积10-15µl，37°C过夜。10)．加入2µl0.1%TFA终止反应，振荡混匀，离心收集酶解液，点靶。

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