[攻略]试验 改良半叶法测定叶片光合速--收回2
实验八 改良半叶法测定叶片光合速率
【原理】
植物进行光合作用形成有机物，而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加，但是，叶片在光下积累光合产物的同时，还会通过输导组织将同化物运出，从而使测得的干重积累值偏低。为了消除这一偏差，必须将待测叶片的一半遮黑，测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值，作为同化物输出量(和呼吸消耗量)的估测值。这就是经典的半叶法测定光合速率的基本原理。测定时须选择对称性良好、厚薄均匀一致的两组叶片，一组叶片用于测量干重的初始值，另一组(半叶遮黑的)叶片用于测定干重的终了值，不但手续烦琐，而且误差较大。“改良半叶法”采用烫伤、环割或化学试剂处理等方法来损伤叶柄韧皮部活细胞，以防止光合产物从叶中输出(这些处理几乎不影响木质部中水和无机盐分向叶片的输送)，仅用一组叶片，且无须将一半叶片遮黑，既简化了手续，又提高了测定的准确性。
【仪器与用具】
电子天平;烘箱1台;铝盒2个(或者用纸包);刀片1片;自带1把剪刀;有机玻璃(或硬塑料)模板1块;纱布或手帕1块;纸牌10个;锡纸10小条等。
【实验步骤】
1. 选择叶片 实验可在晴天上午7,8点钟开始。预先在茶山茶树上选定有代
表
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性的叶片(如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等应尽量一致)10张，挂牌编号。
2. 叶片基部处理 可用刀片将叶柄的外皮环割0.5cm左右宽，切断韧皮部运输。为了使经以上处理的叶片不致下垂，可用锡纸、橡皮管或塑料管包绕，使叶片保持原来的着生角度。
3. 剪取样品 叶基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，开始进行光合速率测定。一般按编号顺序分别剪下对称叶片的一半(中脉不剪下)，并按编号顺序将叶片夹于湿润的纱布上，保持黑暗，带回室内。带有中脉的另一半叶片则留在植株上进行光合作用。过4,5h后(光照好、叶片大的样品，可缩短处理时间)，再依次剪下另一半叶。同样按编号包入湿润纱布中带回实验室。两次剪叶的次序与所花时间应尽量保持一致，使各叶片经历相同的光照时数。
4(称重比较 将各同号叶片之两半对应部位叠在一起，用适当大小的模板和单面刀片(或打孔器)，在半叶的中部切(打)下同样大小的叶面积，将光暗处理的叶块分别放在105?下杀青10min，然后在80?下烘至恒重(约5h)，在
分析
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天平上分别称重，将测定的数据填入表1中，并计算结果。
表1 用改良半叶法测定光合速率的记载表
测定日期: 月 日 试验地点:
植物材料: 备注:
第一次取样时间:
第二次取样时间:
2取样面积(cm):
光合作用时间(h):
暗处理叶的干重(mg):
光照叶的干重(mg):
干重增量(光—暗)(mg):
5. 计算
22光合速率(mg/dm?h),[(光-暗)干重增量(mg)]?[叶片切块面积(dm)×光合时间(h) ]
上述是总光合速率的测定与计算，如果需要测定净光合速率，只需将前半叶取回后，立即切块，烘干即可，其他步骤和计算方法同上。
【注意事项】
1. 实验要选择晴天做，所用叶片要选择对称性好、厚薄一致、向阳、无病虫的功能叶。
2. 韧皮部要切割彻底，如果切割不彻底，部分有机物仍可外运，测定结果偏低。
3. 切割韧皮时，不要伤及木质部。
4.光照结束后，相同编号的两半叶要对应部位叠在一起，用适当大小的模板切割相同的叶片面积。
【思考
题
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】
1. 通过光合作用测定你能够解决什么理论和实践问题,
2. 改良半叶测定光合速率受哪些因素的影响,
3. 简要介绍测定光合速率的三种方法及原理。
4. 测定光合速率为什么要选择对称性好、叶龄、叶色、受光一致，无病虫害的功能叶,
5. 为什么将待测叶片编号,
6. 在改良半叶法中为什么要切割韧皮部,
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