复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准的研究

复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 的研究 西华大学学位论文独创性声明 作者郑重声明所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行研究 工作所取得的成果尽我所知除文中已经注明引用内容和致谢的地方外 本论文不包含其他个人或集体已经发 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 的研究成果也不包含其他已申请 学位或其他用途使用过的成果与我一同工作的同志对本研究所做的贡献 均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意 若有不实之处本人愿意承担相关法律责任 指导教师签名?弓诊 竺竺论文乎者签名设译 日期?彦? 日期叫‖? 西华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定在校 攻读学位期间论文工作的知识产权属于西华大学同意学校保留并向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版允许论文被查阅和借阅西 华大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索可以采 用影印缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文保密的论文在解 密后遵守此规定 指导教师签名号丁与沦 学蹙算文作者签名扳琵 日期加涉 日期卜一西华大学硕士学位论文 摘 要 复方祖师麻镇痛贴是在经验方基础上根据中医辨证施治理论并结合现代药效学试 验严格筛选由祖师麻莪术三棱三味中药组成的现代方剂此方经临床应用观察 具有祛风除湿破血行气祛风通络散瘀止痛的功效临床上可用于风湿痹症筋 骨疼痛跌打损伤等症疗效确切显著毒副作用小本文根据方中各药药效物质的理 化性质及药理学研究以传统中医药理论为指导依照中药天然药物研究指导原则的 规定运用现代制药技术并结合生产实际将其制成橡胶膏剂并研究该制剂的质量标 准以期为临床制备疗效好显效快毒副反应小使用方便并易于推广的中药新药 试验根据处方的功能主治和药物成分的性质采用单因素和正交试验考察相结合的 方法以瑞香素提取率姜黄素提取率和干膏得率为考察指标筛选出了相应的最佳提 取工艺即莪术三棱药材粉碎成粗粉祖师麻粉碎成细粉过目筛将上 述三味药材粉末混匀加倍量的乙醇回流提取次每次小时合并提 取液滤过滤液减压回收乙醇浓缩至相对密度?的清膏备用选择相 应的基质辅料并对其用量进行了筛选采用热压法依次经过炼胶烘料涂布合 膜切片等工艺 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 制得成品分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法对本品进行定性 鉴别及定量 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 确定了方中药物莪术三棱薄层色谱鉴别条件及君药有效成分瑞香素 的含量测定方法参照《中国药典》年版一部橡胶膏剂项下相关要求对本品的含膏 量耐热性粘附性及微生物限度进行了相应检查初步制定了该镇痛贴的质量标准 同时对本品进行了个月的初步稳定性考察 通过研究表明该镇痛贴的提取工艺和成型工艺简单合理稳定可行薄层色谱鉴别 及含量测定方法操作简单专属性好质量标准稳定可控成品性质基本稳定 关键词橡胶膏剂制备工艺质量标准瑞香素姜黄素高效液相色谱法 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 也 拓 酣 西华大学硕士学位论文 ?复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 目 录 摘 要 弓 言 一研究背景和立题依据 二中药经皮给药的研究概况 三处方中药物的研究进展 四立题意义 五创新点 第一章工艺研究仪器材料与试剂 仪器 材料 试剂 提取工艺的研究 药材的鉴定处方药物性质 指标成分的测定 单因素试验 正交试验优选最佳提取工艺 验证试验 分离纯化工艺 浓缩工艺 小结 成型工艺研究 剂型的确定 橡胶膏剂的组成 配方初步设计 基质辅料的选择 透皮促渗剂筛选 筛选结果西华大学硕士学位论文 制法 制备工艺流程图 第二章质量标准研究一 仪器材料与试剂 仪器 材料 试剂 性状 鉴别实验 莪术的鉴别三棱的鉴别 检查含膏量 耐热性一 粘附性 微生物限度 含量测定 指标成分的选择 色谱条件 对照品溶液的制备供试品溶液的制备 方法学考察第三章初步稳定性试验 结论与讨论结论 讨论 参考文献 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果一 致 谢 西华大学硕士学位论文 引 言 一研究背景和立题依据 风湿病也称痹证痹病是一大类疾病的总称所涉及到的疾病名称超过种 其共同特点是具有运动系统慢性疼痛的临床表现风湿是指主要侵犯关节肌肉骨 骼及关节周围的软组织如肌腱韧带滑囊筋膜等部位的疾病古代很多典籍对风 湿都有记载和描述如内经》日风寒湿三气杂至合而为痹大概是中医对风湿 最早的概念中医认为是由于风寒湿热等外邪侵袭人体闭阻经脉引起的在现 代医学中它并不是指某一种特定的疾病而是一类疾病的总称包括滑囊炎强直性 脊柱炎粘附性肩囊炎骨性关节炎银屑病关节炎风湿热类风湿性关节炎红斑 狼疮巨细胞性动脉炎多发性肌炎腱鞘炎纤维肌痛风湿性心脏病等在这里要与 狭义上的免疫性风湿性疾病区别开来多数风湿病难以根治往往需要长期甚至终身 服药但仍是可以治疗的通过正规系统的用药绝大多数的患者可以控制病情 缓 解症状预防残疾提高生活质量和挽救生命目前西医对风湿性疾病的治疗主要以肾 上腺皮质激素及非甾体抗炎药为主配合抗代谢药及免疫调节剂给予相应的非甾体抗 炎药进行治疗如扶他林莫比可乐松天新利德西乐葆万洛等新型的非甾体 类抗炎药如临床上用清风痛宁治疗风湿性疾病 类风湿性关节炎又称类风湿是一种病因尚未明了的慢性 全身性炎症性疾病可能与内分泌代谢心理社会环境的差异及遗传因索等有关 以慢性对称性多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现属于自身免疫炎性疾病 该病好发于手腕足等小关节反复发作呈对称分布早期有关节红肿热痛和功能 障碍晚期关节可出现不同程度的僵硬畸形并伴有骨和骨骼肌的萎缩极易致残 跌打损伤在日常生活中极其常见泛指人因跌打磕碰等原因而受的伤以疼 痛肿胀为主要症状刚损伤时若立即用药物洗治患处血管会加剧扩张水肿渗血 不仅会增强疼痛感而且还极易造成软组织粘连和局部功能减弱因此损伤后应立即 冷敷使受损部位血管收缩并减少出血肿胀和疼痛到损伤的第三四天再采用 药洗或 贴敷连用数日便可收到止痛消肿的效果 风湿类风湿跌打损伤等给人类带来了极大的痛苦特别是风湿性疾病缠绵难 愈目前尚无根治此类疾病的药物西医治疗本病主要为非甾体抗炎药免疫抑制 剂及激素其长期用药的副作用与其治疗作用一样不容被忽视近年来我国医学界应用 现代科学方法进行理论研究和临床实践发掘和创立了许多新治疗方法其中中药治疗复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 有了很大进展在风湿病的治疗方面中药可以发挥其同病异治异病同治的 特点与毒副作用小的优点从而达到标本兼治的功用而西药造价昂贵副作用大目 前对此尚无有效办法治疗风湿类风湿的药物首选纯中药制剂因此开发出具有更 好疗效安全毒副作用小且价格合理的新的中药制剂以用于风湿痹症类疾病的治疗 已经成为国内外医药工作者所关注的问题 二中药经皮给药的研究概况 经皮给药系统 又称经皮治疗系统 系指皮肤贴敷方式用药药物以一定的速率通过皮肤经毛细 血管吸收进入体循环产生药效的一种给药方式包括应用于皮肤上产生吸收作用 的各种剂型如软膏硬膏搽剂微乳剂霜剂涂膜剂巴布剂等 中药经皮给药在我国已经有很悠久的历史了我国古代许多医籍中对中药复方的经 皮治疗都有记载如《内经》肘后备急方》《理瀹骈文》等名著特别是《理瀹 骈文》收集了多种透皮治疗的方法方剂达多首清代医家徐灵胎曾说 用膏贴之闭塞其气使药性从毛孔而入其腠理通经贯络或提而出之或攻而散 之较之服药尤为有力此至妙之法也中药经皮给药符合了中医内病外治的理 论对于经皮给药机理目前已有很多相关研究和报道如《素问皮部论》日皮者 脉之部也邪客于皮则腠理开开则邪入客于络脉络脉满则注于经脉经脉满则入舍 于脏腑也刘强等阐明是药物作用于特殊经络腧穴能迅速在相应组织器官产生较强 的药理效应起到单相或双相调节作用另外还有张钢钢等人阐明中药透皮给药疗法 一方面通过间接作用即药物对机体特定部位的刺激调整阴阳平衡以改善和增强机体 的免疫力从而达到降低发病率和缓解症状的目的另一方面即药物的直接作用当 药物作用于相应穴位之后通过渗透作用透过皮肤经过血管或淋巴管进入血液循环 到达脏腑经气失调的病所发挥药物归经和功能效应引总而言之经皮给药是经 过人体皮肤而非口服或以其他方式进入人体相对于口服药物来讲能够避免对胃肠的刺 激和肝脏的首过效应同时能够做到长时间的持续给药减少给药次数提高用药 安全 中药经皮给药剂型有溶液剂洗剂酊剂油剂软膏剂膏药橡胶膏剂糊剂 熨剂等剂型还有随着高分子辅料的应用而产生的涂膜剂膜剂凝胶剂巴布剂穴 位贴敷剂贴片剂等这些统剂型目前都得到广泛使用并取得很好的疗效其中橡胶 膏剂是目前国内应用最广泛市场占有量最大的经皮给药制剂国外橡胶膏剂的产生源 西华大学硕士学位论文 自于十八世纪国内橡胶膏剂的发展主要开始于上世纪六十年代国内的一些卫生材料 厂引进橡胶膏剂技术生产伤湿止痛膏消炎镇痛膏和麝香壮骨膏等橡胶膏剂热压 法制备橡胶贴膏其厂房设计相当简单建设成本低设备投资少产品疗效好安全环 保适宜推广和应用近年来科研人员对橡胶膏剂的制备工艺质量标准以及临床应用 等进行很多相关方面的研究如左亚杰等人采用了正交设计法测定了挥发油 绿 原酸和大黄素的含量进而对跌打镇痛贴膏的提取工艺进行了优化陆莉萍等人采用 法对衡通贴膏中没药皂角刺续断乳香等进行了鉴别采用法测定了人 参皂苷确保产品质量的可控性安全性张勇等人对骨痛宁膏治疗膝骨性关节 炎的临床疗效和安全性进行了评价结果表明产品疗效确切安全无毒副作用不良 反应少 中药橡胶膏剂作为中药经皮给药制剂的一种在目前临床中使用的中药外用剂型占 是中药的一个重要的用药方式与散剂等传统内服剂型相比可避免首过效应 改善患者顺应性使用方便等与黑膏药相比环境污染小对人体的刺激性小使用 方便内在质量和临床疗效好而与目前研究较热的巴布剂相比巴布膏剂膏体与皮肤 密着性不好膏体易失水硬化或失去黏性且生产橡胶膏剂的工艺要比巴布剂的简单易 行更适宜于具有复杂系统特点的中药复方的外治剂型使得橡胶膏剂具有更大的竞争 优势 日前为止经皮给药的基础理论研究试验方法研究新技术研究临床研究 等都取得了很大的进展特别是多种新型辅料的应用研究和投入使用更促进 了经皮给 药制剂的发展同时拓展了经皮给药制剂市场无论是西药还是中药经皮给药研究都 是一个系统工程随着经皮给药的基础理论基质辅料质量控制体内药代动力学研 究等的深入相信经皮给药制剂一定会有更好的发展前景 三处方中药物的研究进展 复方祖师麻镇痛贴药物处方由莪术三棱祖师麻三味药材组成 祖师麻的相关研究进展 祖师麻又名祖司麻大救驾金腰带等是我国西北地区广泛使用的一种 中草药收载于《中国药典》年版一部其原植物来源在《陕西中草药》 山西中草药》《陕西中药志》等记载为瑞香科瑞香属植物黄瑞香 的根皮及茎皮入药中医认为祖师麻性味辛苦温小毒归肺心经复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 具有祛风除湿行瘀止痛的作用民间广泛用于治疗疼痛跌打损伤四肢麻木头痛 和胃痛风湿性关节炎和支气管炎等 图黄瑞香 祖师麻含有香豆素类二萜类木质素类黄酮类葸醌类及甾醇类等化学 成分现代研究表明祖师麻主要有效成分为祖师麻甲素即瑞香素 属香豆素类物质又称二萜类化合物其化学结构式见图瑞香素具有扩张毛 细血管镇痛镇静和抗炎等药理作用瑞香素在甲醇中略溶在乙醇中微溶 在水中不溶管玉珠等比较了水煎法乙醇渗漉法和甲醇渗漉法提取瑞香素的 效率结果表明浓度为的甲醇提取效果最佳但浓度为乙醇作溶媒更适合 工业化生产魏舒畅等对祖师麻提取液的超滤纯化工艺进行了研究表明了用 超滤技术纯化祖师麻乙醇提取液瑞香素保留率可达以上滤液澄明度好 除杂力度较大对祖师麻药材及其制剂的成分分析方面主要为对其指标成分 瑞 香素祖师麻甲素的含量测定且多采用高效液相色谱法进行分析检测目前 以祖师麻为主的已上市制剂有复方祖师麻片祖师麻关节止痛膏祖师麻注射 剂 黄瑞香注射剂等目前对祖师麻注射液复方祖师麻注射液的工艺研究较多有 研究报道祖师麻注射液的制备工艺影响有效成分瑞香素的含量醇提酸水解 法较传统的醇提法水煎法及水蒸汽蒸馏法能使有效成分瑞香素含量提高近 一倍 制剂的抗炎镇痛作用显著增强 西华大学硕士学位论文 图瑞香素分子结构式口 常见的外用制剂有祖师麻膏药刀部标和祖师麻关节止痛膏 部标种前者属于传统的黑膏药具祛风除湿活血止痛的功能 用于风寒湿痹瘀血痹阻经脉等证后者是以祖师麻为主加上冰片樟脑等制 成的现代橡皮膏功能主治与前者相近另有以祖师麻为君药的复方制剂祖师 麻 风湿膏明也属传统黑膏药《地方标准上升国家标准》 用于临床本课题所研究为以祖师麻为君药的新复方现代橡胶膏制剂 莪术的相关研究进展 莪术为姜科植物蓬莪术的根茎中医认为莪术性味辛苦 温归肝脾经具有行气破血消积止痛的功效主治血气心痛饮食积滞脘腹 胀痛血滞经闭痛经症瘕痞块跌打损伤等 图蓬莪术 莪术化学成分主要有挥发油姜黄素胡萝卜甙等姜黄素是莪术 的主要活性成分之一是一种黄色酸性酚类物质已被广泛用作色素食品添加 剂 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 及调味品由于其具有药理作用广毒性低而具有广阔的药物应用前景研究证 明?姜黄素具有抗肿瘤抗突变抗炎抗氧化活血镇痛保肝等广泛的药理 活性李林陆兔林等通过体外血小板聚集大鼠血淤模型血液流变性及凝血 试验表明莪术中的姜黄素类成分是其活血化淤主要活性成分 姜黄素是一个具有一二酮结构的多酚类化合物是目前唯一一种含有酚基 和醌基的天然药物如图研究表明姜黄素有显著的抗氧化和自由基清除活性 它能够增强抗氧化酶如超氧化物酶过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活 性 另有报道姜黄素已应用于风湿性关节炎的治疗但是由于姜黄素稳定性差 溶解度小体内生物利用度低用药量大而限制了姜黄素的推广使用如何改善 姜黄素上述缺点制备生物利用度高用药量低的高效强效制剂已经成为近 年来药剂工作者的亟待解决的课题姜黄素不溶于水溶于乙醇丙二醇易溶 于冰醋酸和碱溶液对还原剂的稳定性较强但对光热铁离子敏感耐光性 耐热性耐铁离子性较差且姜黄素在强酸强碱环境中稳定性较差但当? 时较为稳定对于姜黄素的提取由于莪术中的姜黄素在乙醇中有较好的溶解 能力谢辉等采用乙醇回流提取通过正交试验法对提取工艺进行优选结果 表明提取次数提取时间乙醇浓度及用量是提取的关键因素基于以上特点 可以考虑采用乙醇回流提取又由于其耐热性差需严格控制温度故本实验拟 采用水浴加热图姜黄素分子结构式 三棱的相关研究进展 的干燥 三棱为黑三棱科植物黑三棱 块茎三棱味苦性平入肝脾经具有破血行气消积止痛等功能是活血 化瘀的中药药对是中药方剂的最小配伍单位而三棱莪术就是应用频率位居 前茅的一个药对二者常常相须为用三棱莪术配伍使用出自经验良方》三 西华大学硕士学位论文 棱丸用于治疗血滞经闭腹痛当代的名老中医干祖望任达然等都十分推 崇这组药对李林等通过考察莪术与三棱配伍前后姜黄素的煎出率变化发现 二 者的配伍还能有效改善姜黄素的煎出效果可能是三棱对姜黄素存在保护作用 图黑三棱 僧 啦 目前研究发现三棱化学成分多样其主要成分有挥发油甾醇类黄酮类等 其中三棱总黄酮等成分表现出广泛的药理活性如抗血栓与抗血小板作用镇痛 及保护心脑血管作用抗肿瘤作用等胡旭光等通过研究不同三棱提取物的抗 凝血抗血栓与镇痛的药理作用阐明了三棱总黄酮可能是其主要的活性成分是发 挥其破血散结止痛的物质基础总黄酮溶于乙醇可采用乙醇提取 四立题意义 一项流行病学调查表吲引在岁以上的自然人群中风湿病的患病率为 有风湿病患者出现不同程度的残疾风湿病已经成为一类严重危害人类健康的多 发病疑难病目前尚未根治此类疾病的特效药物中药透皮给药是治疗风湿类疾病的 种良好途径因此对该领域的研究将具有很大的临床意义和市场价值 复方祖师麻镇痛贴就是针对广大的风湿疾病及相关病症的患者而研制的本品处方 由莪术三棱祖师麻三味药材组成祖师麻具有祛风通络散瘀止痛功效莪术与 三 棱常相须为用具有破血行气消积止痛的功效三味药材组合构成一全新的药物处方 对广大风湿疾病类患者具有很好的疗效目前该处方已申请国家发明专利 复方祖师麻镇痛贴的研制是基于目前国内外中药外用制剂发展的良好趋势以高 效的中药提取技术新型橡胶膏的基质处方技术为重点攻关方向探索镇痛贴的制备工复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 艺建立其质量控制标准对中药外用制剂的产业化发展以及中药橡胶膏剂质量体系 的完善都起到重要作用由于风湿类疾病的广泛存在及市场上对新型高效膏贴剂的迫 切需求而本品具有祛风除湿化瘀止痛的显著疗效该镇痛贴剂若研制成功必将取得 重大的社会和经济效益具有广阔的前景和应用价值 五创新点 新的复方中药制剂 复方祖师麻镇痛贴的处方是由祖师麻莪术三棱三味药材构成该处方是一临床 经验方由于其疗效显著将其研制成为现代中药制剂无疑会具有重要的临床意义和 潜在的市场价值中医认为祖师麻性味辛苦温小毒归肺心经具有祛风除湿 行瘀止痛的作用莪术性味辛苦温归肝脾经具有行气破血消积止痛的功效 三棱性味辛苦平归肝脾经破血行气消积止痛是活血化瘀的常用中药祖 师麻为方中君药莪术与三棱常相须为用三者互为补给辩证施治且具有协同增效 的作用效果独特而显著 通过前期的大鼠抗血栓试验和中性粒细胞与血小板粘附试验等药效学试验研究显 示莪术祖师麻三棱三者均有抗体内血栓形成降低血小板与中性粒细胞粘附率的 作用而且三药配伍中各药材使用量显著降低而药效作用不降显示三药配伍产生了 药效作用的加和性具有协同增效的作用通过对本药物组合对小鼠耳廓肿胀的影响及 大鼠足跖肿胀影响的考察都证实了本药物处方的显著的抗炎效果以上药效学研究都 说明本处方具有独特显著的疗效说明其具有进一步的研究意义和潜在的市场价值根 据方中各药药效物质的理化性质及药理学研究结合本方的功能主治拟将本处方研制为 橡胶膏剂 新型人工合成橡胶 橡胶膏剂中的橡胶为基质的主要原料对整个膏料层起骨架支撑作用具有弹 性 低传热性不透气和不透水的性能这些特性使其在橡胶膏剂中起到重要作用但是临 床使用中发现天然橡胶具有一定过敏性已有研究证吲橡胶中的过敏原为蛋白质 称为乳胶过敏原已有种乳胶过敏原被鉴定出来目前发现这些乳胶过敏原除了引 起接触性皮炎外还可引起过敏性休克等速发型过敏反应阱天然橡胶有标准胶以 不饱和状态异戊二烯为主合成橡胶有丁苯橡胶苯乙烯与丁二烯共聚丁基橡胶 异丁烯与异戊二烯共聚另外还有热塑型弹性体苯乙烯异戊二烯苯乙烯 热塑型弹性体苯乙烯丁二烯苯乙烯这些都是常用的药用橡胶基质 西华大学硕士学位论文 本课题选用了一种新型人工合成橡胶液体聚异戊二烯橡胶本品无溶剂轻微 气味低温仍能保持粘性且高温不易降解低表面张力低极性拒水性耐 丙酮不易燃降解温度高可参与橡胶交联反应具有绝缘性等特 性异戊二烯橡胶与天然橡胶在分子结构与微观结构高顺式含量 上基本相同是近似于天然橡胶的合成橡胶异戊二烯橡胶较天然橡胶有以下优 点质量均一纯度高混炼加工简便颜色浅近于无色透明膨胀及收缩小 流动性好本品的应用能够避免使用天然橡胶所致的过敏性同时由于本品为 液 态状在生产过程中不需要溶解相对固体橡胶而言节省了工序 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 第一章工艺研究 仪器材料与试剂 仪器 数显恒温水浴锅江苏省金坛市医疗仪器厂 电热恒温鼓风干燥箱黄石市恒丰医疗器械有限公司 旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂 循环式真空泵郑州杜甫仪器厂 型电子天平 高效液相色谱仪日本岛津 紫外检测器日本岛津 色谱柱天津市深航科技仪器有限公司 型紫外可见分光光度计美国公司 超纯水仪密理博中国有限公司 型数控超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司 型溶剂过滤器天津市津腾实验设备有限公司 水相有机相微孔滤膜天津市津腾实验设备有限公司 微孔滤头天津市津腾实验设备有限公司 系列强力真空搅拌机秦皇岛欧路化工机械有限公司 药用涂布机南京涂布科技有限公司 材料 莪术三棱祖师麻等药材 四川省中药饮片厂 姜黄素对照品 中国药品生物制品检定所 中国药品生物制品检定所 祖师麻甲素对照品 芦丁对照品 中国药品生物制品检定所 液体聚异戊二烯橡胶 日本可乐丽公司 立德粉松香液体石蜡等 成都金鸿桥实业有限公司 试剂 甲醇 色谱纯 成都科龙试剂厂 乙腈 色谱纯 成都科龙试剂厂 乙醇 分析纯 成都科龙试剂厂 西华大学硕士学位论文 提取工艺的研究 药材的鉴定 试验所用药材莪术三棱祖师麻均购于四川中药饮片公司按《中国药典》 年版一部有关各项规定分别对莪术和三棱药材进行鉴定各项检验结果均符合药典要 求参照年版药典对祖师麻药材进行鉴定各项检验结果均符合药典要求 处方药物性质 本处方具有破血行气祛风通络散瘀止痛的功效用于风湿痹痛等症处方 中三味药材均是祛风镇痛的良药经过精心选配组方而成在提取工艺中应将组方 原则药效物质理化性质与相似相溶原理相结合针对提取溶媒极性来选择指标物 质 综上所述本处方药材主要有效成分中的瑞香素与姜黄素均不溶于水可溶于乙醇 所以以乙醇为基本溶媒采用加热回流提取 指标成分的测定 为了提高药材处方中有效成分的提取率本试验采用了单因素筛选及正交设 计法以姜黄素提取率瑞香素提取率以及干膏收率为考察指标对药材处方的 提取方法进行了优化首先对各有效成分建立其定量检测方法 该处方由祖师麻莪术三棱三味药材组成分别对处方药材中的有效成分 祖师麻中的瑞香素莪术中的姜黄素建立其高效液相色谱的测定方法对三棱中 的总黄酮建立紫外可见分光光度的测定方法 瑞香素的测定 ?测定波长的确定 扫描取瑞香素对照品溶液进样用二极管阵列检测器在波长 范围内扫描如图复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 图瑞香素对照品的全波长扫描图 结果对照品溶液在处有最大吸收与文献报道中瑞香素的检测波长 接近结合文献报道祖师麻中瑞香素的含量测定条件选择在处测定提取液中 瑞 香素的含量 ?色谱条件 结合文献报道祖师麻中瑞香素的含量测定条件并加以调整最后确定条件为 色谱柱为流动相为乙腈一水含磷酸 流速为柱温?检测波长为 ?对照品溶液的制备 取瑞香素对照品适量精密称定置容量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度 精密量取置容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀即得每含瑞香素 ?供试品溶液的制备 取单因素试验或正交试验所得样品溶液适量用微孔滤膜过滤即得 ?阴性溶液的制备 称取处方缺祖师麻的其余药材乙醇回流提取微孔滤膜过滤即得 ?方法专属性 分别精密吸取瑞香素对照品溶液供试品溶液阴性溶液各止注入液相 色谱仪测定结果表明瑞香素对照品供试品溶液图谱在左右 出现瑞香素色谱峰阴性对照无干扰高效液相色谱图见图 图瑞香素对照品溶液 图供试品溶液 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 图阴性溶液 ?线性关系考察 将瑞香素对照品溶液稀释倍得 的溶液进样儿 并测定测得峰面积依次为 以峰面积 为纵坐标进样量为横坐标绘制标准曲线见图瑞香素在一 之间线 一 性关系良好回归方程为 图瑞香素标准曲线 西华大学硕士学位论文 姜黄素的测定 ?检测波长的确定 取姜黄素对照品溶液进样用二极管阵列检测器在波长范围内 扫描如图 图姜黄素对照品的全波长扫描图 结果对照品溶液在处有最大吸收 《中国药典》年版一部页姜 黄中姜黄素含量测定条件为 因此选择供试品溶液在 处测定提取液中 姜黄素的含量 ?色谱条件 参照《中国药典》年版一部页姜黄中姜黄素含量测定条件并结合其他的 文献报道最后确定色谱柱为流动相为乙腈一水含 冰醋酸流速为柱温?检测波长 ?对照品溶液的制备 取姜黄素对照品适量精密称定置容量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度 摇匀精密量取置容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀再精密量取 置于容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀即得每中含姜黄素 ?供试品溶液的制备 取单因素试验或正交试验所得样品溶液适量用微孔滤膜过滤即得 ?阴性溶液的制备 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 称取处方缺莪术的其余药材乙醇回流提取微孔滤膜过滤即得 ?方法专属性 分别精密吸取姜黄素对照品溶液供试品溶液阴性溶液各注入液相 色谱仪测定结果表明姜黄素对照品供试品溶液图谱在左右 出现姜黄素色谱峰阴性对照无干扰高效液相色谱图见图 图姜黄素对照品溶液 图样品溶液 西华大学硕士学位论文 图阴性溶液 ?标准曲线的绘制 将姜黄素对照品溶液精确稀释倍得的溶液进样 并测定得峰面积依次为 以峰面积为纵坐标进样量为横坐标绘制标准曲线见图姜黄素在 一 之间线性关系良好回归方程为 图姜黄素标准曲线 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 总黄酮的测定 ?检测波长的确定 取芦丁对照品溶液用紫外可见光分光光度计在处进行紫外扫描如 图 图 芦丁对照品紫外扫描图 可以看出对照品溶液在三个波长处均有吸收在 处波峰平缓波形较好含量测定较准确结合参考资料最终确定以为测定波长 ?测定条件 总黄酮的测定多采用分光光度法所以照中国药典版紫外可见分光光度法附 录在波长处对总黄酮进行测定 ?对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量精密称定置容量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度摇 匀即得每含芦丁 ?供试品溶液的制备 取单因素试验或正交试验所得样品溶液适量过滤即得 ?阴性溶液的制备 称取处方缺三棱的其余药材乙醇回流提取所得提取液过滤即得 ?方法专属性 西华大学硕士学位论文 精密量取芦丁对照品溶液供试品溶液阴性溶液各分别置容量瓶中 加硝酸钠溶液混匀放置加硝酸铝溶液摇匀放置 加氢氧化钠再加乙醇至刻度摇匀放置以相应试剂做空白对 照照中国药典版紫外可见分光光度法附录在波长处测定总黄酮 的吸光度测定结果如表 表总黄酮吸光度 结果显示对照品溶液供试品溶液阴性溶液在波长处均存在吸收三棱 阴性提取液有干扰由于莪术与祖师麻均含有总黄酮物质所以不将三棱中的 总黄酮作 为提取工艺的考察指标 小结 通过对瑞香素姜黄素总黄酮的专属性考察确立了提取工艺考察的指标成分 为瑞 香素和姜黄素摸索并建立了两者的检测方法以便下一步筛选考察提取工艺 单因素试验 试验分别考察各因素条件对各有效成分提取率的影响程度进而以姜黄素提 取率瑞香素提取率及干膏收率为评价指标选取药材粉碎度乙醇浓度乙醇 用量提取时间为考察因素设计单因素试验分别考察各因素条件对各指标的 影 响程度为正交试验确定各因素条件的最适范围 计算方法 ?姜黄素提取率 莪术药材中姜黄素含量测定莪术药材粉碎过目筛称取过筛粉末约 加倍量乙醇回流提取次每次滤过合并滤液定容至规定体积 取上述样品溶液适量用微孔滤膜 过滤按项下姜黄素测定条件进样 测定结果莪术药材中姜黄素的含量为 姜黄素提取率姜黄素提取量投料药材莪术中姜黄素含量×其中 投料药材中姜黄素含量为 以 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 ?瑞香素提取率 祖师麻药材中瑞香素含量测定祖师麻药材粉碎过目筛称取过筛粉末精 密加入甲醇称定重量超声处理放冷再称定质量 用甲醇补足减失的重量滤过精密量取续滤液置圆底烧瓶中加入 盐酸溶液加热回流立即冷却转移至容量瓶中加甲醇洗涤圆底 烧瓶洗液并入容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀即可取所得样品溶液适量用 微孔滤膜过滤按项下瑞香素测定条件进样测定结果祖师麻药材中 瑞香素的含量为 瑞香素提取率瑞香素提取量投料药材祖师麻中瑞香素含量 其中投料 药材祖师麻中瑞香素含量为 ?干膏收率测定 精密吸取定容后的样品溶液分别置于已干燥至恒重的蒸发设重量为 中水浴挥干残渣于干燥小时取出置于干燥器中放置半小时称重设 重量为计算 干膏收率××为正交试验各样品液定容体积 为投料药材干重 ?吸醇率测定 植物药材都有不同程度的吸收溶媒的能力吸收溶剂量的大小将影响 提取的效果本实验采用乙醇回流提取因此要进行吸醇率的考察 按处方比例称取莪术三棱祖师麻三味药材共精密称定为加 乙醇倍量浸泡每隔半小时观察一次浸透心情况小时后药材已全部浸透滤 过对己完全浸湿的药材进行称量药材湿重为则吸醇率为 ×? 故确定在以下提取试验中第一次加醇提取时补足药材吸醇量即第一次提取 时多加 入约倍量的乙醇 药材粉碎度考察 莪术三棱祖师麻三味药材饮片按处方比例共称取提取条件暂定为 浓度的乙醇倍量水浴加热回流小时提取次另将莪术三棱祖师麻三 味药材分别进行租粉碎所得粗粉按处方比例共称取按上述提取条件进行平 行试 验最后分别收集提取液过滤定容按项下方法分别测定其中姜黄素和瑞香 素的含量并计算提取率按干膏率测定方法计算干膏率结果如表西华大学硕 士学位论文 结果显示将药材粗粉碎后提取效果要明显优于直接采用饮片提取姜黄素和 瑞香 素的提取率都有显著的提高由此可以确定药材需经粉碎再进行投料提取 从上表可以看出莪术经粗粉碎后姜黄素的提取率已达到了继续对莪术药材 进行粉碎其提取率也无太大提升而祖师麻经粗粉碎后瑞香素的提取率只有约鉴 于瑞香素的提取率还比较低所以还需要对祖师麻药材的粉碎度继续进行考察故将祖 师麻进行细粉碎打粉过目筛另外两味药材仍粗粉碎即可三味药材按既定比例 各称取共按上述提取条件进行平行试验收集提取液过滤定容测定结果如 表 表祖师麻药材粉碎度考察 结果显示将祖师麻打粉过目筛后瑞香素的提取率有明显的提高所以最后确 定莪术三棱采用粗粉祖师麻采用过目筛细粉 乙醇浓度的考察 莪术三棱祖师麻三味药材分别进行粉碎按处方比例共称取暂定提取条 件倍量乙醇水浴加热回流小时提取次分别采用浓度为 的乙醇进行平行试验收集提取液过滤定容按项下方法分别测定 其中姜黄素和瑞香素的含量并计算提取率按干膏率测定方法计算干膏率结果如表 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 结果显示乙醇浓度在范围内有较高的干膏收率在时为干 膏收率的顶点乙醇浓度在范围内有较高的姜黄素提取率时为 姜黄素提取率的顶点乙醇浓度在范围内有较高的瑞香素提取率 时为瑞香素提取率的顶点综上确定采用的乙醇浓度作为正交试验 的筛选范围 提取时间的考察 莪术三棱祖师麻三味药材分别进行粉碎按处方比例共称取暂定提取条 件的乙醇浓度倍量乙醇分别水浴加热回流小时进行平行试 验提取次收集提取液过滤定容按项下方法分别测定其中姜黄素和瑞 香素的含量并计算提取率按干膏率测定方法计算干膏率结果如表 表提取时间考察 结果显示干膏收率随提取时间的增长而变大提取时间在小时的时候 姜黄素提取率有较高的水平且在小时出现顶点提取时间在小时的时 候瑞香素提取率有较高的水平且在小时出现顶点综上确定采用小时 的提取时间作为正交试验的筛选范围 乙醇用量的考察 莪术三棱祖师麻三味药材分别进行粉碎按处方比例共称取按暂定提取 条件的乙醇浓度分别加入倍倍倍倍量的乙醇水浴加热回流垦型竺些鲨塑 小时提取次进行平行试验收集提取液过滤定容按项下方法分别 测定其中姜黄素和瑞香素的含量并计算提取率按干膏率测定方法计算干膏 率结果如 表 乙醇用量 倍量 一一一 倍彳百了覆 姜黄素提取率 瑞香素提取率 结果显示干膏收率姜黄素提取率瑞香素提取率在加醇量为倍倍 倍时均有较高的水平所以确定采用加醇量倍倍倍作为正交试验的筛选范 通过各单因素条件对提取结果的影响考察为正交试验确定了各因素条件的 最适 范围即莪术三棱药材粗粉碎祖师麻粉碎过目筛乙醇浓度采用 提取时间采用小时乙醇用量采用倍倍倍 正交试验优选最佳提取工艺 药材中莪术三棱进行粗粉碎祖师麻粉碎过目筛以乙醇浓度乙醇用量 提取时间提取次数为考察因素采用正交试验表安排正交实验以姜黄素提取 率瑞香素提取率和干膏收率为考察指标采用综合加权评分法进行数据分析优选 表因素水平表复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 各药材经粉碎后按处方比例称取共份每份 按表 正交设计的 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 加入各种浓度的乙醇加热回流提取过滤分别定容即得号正交试验样 品溶液按项下方法分别测定其中姜黄素和瑞香素的提取量并计算提取率按干 膏率测定方法计算干膏率结果如下 表 正交试验表 注干膏率以药材干重计 姜黄素提取率姜黄素提取量投料药材中姜黄素含量其中投料药材莪术中姜黄素含量 为岔 瑞香素提取率瑞香素提取量投料药材中瑞香素含量其中投料药材祖师麻中瑞香素含 量为 综合评分×姜黄素提取率姜黄素提取率瑞香素提取率瑞香素提取率×干膏 率干膏率 西华大学硕士学位论文 注肿 结果分析 以综合评分为考察指标由表中极差显示各因素作用主次为提取次数 提取时间乙醇用量乙醇浓度对各因素进行直观分析因素 因素因素因素影响因素 对实验结果影响大因素各水平之间差异具有显著性因素 不具有统计学意义综上所述最佳提取工艺确定为即用的乙醇倍 量每次提取小时提取次 验证试验 为了验证最佳工艺的准确性保证醇提工艺的合理和稳定按确定的提取工艺 进行平行次验证实验试验结果见表 表提取工艺验证试验结果 结果显示三次验证试验的结果基本一致且姜黄素提取率和瑞香素提取率均 在 以上说明所筛选出来的工艺合理可行稳定可靠具有可操作性和重现性 分离纯化工艺复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 本品为固体外用制剂无澄明度要求药液仅需除去固体微粒和大分子物质试 验 中采用醇提法进行提取药液中所含固体微粒和大分子物质较少故采用目尼 龙滤 布进行滤过以姜黄素含量瑞香素含量干膏收得率为考察指标比较了过滤前 后有 效成分的变化及除杂效果结果如表 表 分离纯化试验结果 注瑞香素含量和姜黄素含量仍以药材干重计 结果显示过滤前后瑞香素和姜黄素的含量无太大变化说明过滤不会对有效成分 的含量产生太大影响干膏得率由过滤后比过滤前下降了约个百分点说明过滤又 进一步除去了药液中的一些固体微粒和大分子物质从而使药液得到了进一步的纯化 浓缩工艺 提取的药液中由于含有姜黄素等对热不稳定的成分为了尽可能地减少这些成分的 损失考虑采用减压回收乙醇的方式进行浓缩其具体条件为温度为?真空度为 一浓缩至相对密度为?的浸膏试验过程中以姜黄素含量和瑞 香素含量为指标进行考察结果见表 表浓缩试验结果 注瑞香素含量和姜黄素含量仍以药材干重计 结果显示浓缩前后有效成分的含量无太大变化说明可以用减压浓缩的方式 将所 得的醇提药液浓缩为药物浸膏西华大学硕士学位论文 小结 通过对提取工艺的考察最后确定提取工艺为莪术三棱药材粉碎成粗粉 祖师麻粉碎成细粉过目筛将上述三味药材粉末按处方混匀加倍量 的乙醇回流提取次每次小时合并提取液滤过滤液减压回收乙醇浓 缩至相对密度的清膏备用 成型工艺研究 剂型的确定 贴膏剂系指药材提取物药材或和化学药物与适宜的基质和基材制成的供皮 肤贴敷可产生局部或全身性作用的一类片状外用制剂包括橡胶膏剂巴布膏 剂和贴剂等种类药物透过皮肤由毛细血管吸收进入全身血液循环达到有效血 药浓度并在各组织或病变部位起治疗或预防疾病的作用具有去除肝脏首过清 除效应避免药物化学与生物效应对胃肠道的刺激以及降低或避免副作用的发生 等一系列优势是一种简单方便和行之有效的给药方式 橡胶膏作为贴膏剂的一种具有疗效确切粘附性强不污染衣物携带使 用方便透皮吸收通过血液渗透无痛苦等优点在外用药市场中占有重要地位 并受到广泛关注和研究本品处方为临床发现的具确切疗效的中药新组方具有 祛风通络散瘀止痛的功效主要对风湿性疾病及相关疾病起治疗作用适合选 择外用剂型根据临床用药的需要及方中药味的性质并结合橡胶膏剂的一系列 优势及生产条件成熟成本较为低廉的特点选择橡胶膏剂作为该镇痛贴使用剂 型 橡胶膏剂的组成 复方祖师麻镇痛贴制备工艺和质量标准研究 配方初步设计 橡胶膏剂的膏料层主要由橡胶增粘剂软化剂填充剂等基质以及治疗药物 促渗物等组成药物浸膏已经乙醇回流提取工艺制得预试验发现直接以橡胶为骨架 材料加入一定量药物制备的膏剂出现了胶层不完整黏性较差硬度较高等问题故需 加入填充剂增粘剂软化剂等物质以这些基质的常用量为参考结合其所发挥的作 用对各基质进行用量的考察另外由于经皮给药对透皮速率的要求为了克服皮肤对药 物的屏障作用增加药物的透皮速度或增加药物的透皮量还需添加一定量的促渗物并 对其进行筛选 因此膏料层的配方初步制定为主药橡胶基质骨架填充剂增粘剂软化 剂促渗物 分别对其进行筛选优化处方确定各辅料用量范围应筛选出一个较理想的处方 使膏剂具有良好的涂展性保湿性黏着力适中并且过敏性刺激性降低本品背衬材 料选用无纺布膏面覆衬物选用价格较为便宜且对药物使用及功效无太大影响的传统材 料塑料瓦楞膜 基质辅料的选择 橡胶的选择及用量筛选西华大学硕士学位论文 橡胶是橡胶膏剂的主要基质对整个膏料层有骨架支撑作用同时对膏层的成型性 有重要作用本课题选用了一种新型人工合成橡胶液体聚异戊二烯橡胶本品的应 用能够避免天然橡胶所致的过敏性同时由于本品为液态状在生产过程中不需 要溶解相对固体橡胶而言节省了工序 对聚异戊二烯橡胶和药物浸膏的比例进行考察比较在不同比例条件下成型的难易 程度及胶层的完整度 表橡胶用量考察结果 注 牛斗表示成型难度较大斗表示难度依次降低 表示无拉 丝现象表示稍有拉丝现象表示拉丝现象较重 上述试验结果表明当主药与橡胶的质量比为的时候能够顺利的成型此时橡 胶能够起到较好的骨架支撑作用且膏面较为完整没有胶药不均匀的现象当比例为 时也能够顺利的成型但考虑应尽量保持较高的含药量以增强疗效减小施药面积 所以主药量与橡胶量的比例确定为 增粘剂的筛选 橡胶膏剂多用树脂作增粘剂其中松香为常用的增粘剂之一松香是一种天然树脂 以树脂酸为主要成分能溶于很多有机溶剂但不溶于水橡胶膏剂中应选用优质的松 香其软化点一般在最高不超过?酸价应控制在一较适宜 松香在基质中起粘合剂作用橡胶为骨架两者合理的比例对于基质尤为重要分 别以松香橡胶进行实验发现以 这个范围粘性较好结果如下 表松香用量考察结果