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罗克沙尔固蓝-髓鞘

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罗克沙尔固蓝-髓鞘罗克沙尔固蓝- 改良KLUVER'S–髓鞘 目的:髓鞘是白色脂肪、无生命的物质存在于神经纤维周围形成一个绝缘和保护作用的鞘。 原理:罗克沙尔固蓝是酒精溶性与水溶性的阿尔新蓝极相似。对脂蛋白着染,染色机制是一种酸碱反应形成盐的过程。脂蛋白的碱基被替换成染料的碱基。 对照:正常的大脑皮质 固定:10%甲醛 技术:10μ石蜡切片。置于37℃恒温箱过夜。 设备:蒸馏水洗玻璃器皿和染色缸,60℃恒温箱。 试剂: 罗克沙尔固蓝液: 罗克沙尔固蓝Luxol fast blue 1.0 gm 95%酒精 alcohol ...

罗克沙尔固蓝-髓鞘
罗克沙尔固蓝- 改良KLUVER'S–髓鞘 目的:髓鞘是白色脂肪、无生命的物质存在于神经纤维周围形成一个绝缘和保护作用的鞘。 原理:罗克沙尔固蓝是酒精溶性与水溶性的阿尔新蓝极相似。对脂蛋白着染,染色机制是一种酸碱反应形成盐的过程。脂蛋白的碱基被替换成染料的碱基。 对照:正常的大脑皮质 固定:10%甲醛 技术:10μ石蜡切片。置于37℃恒温箱过夜。 设备:蒸馏水洗玻璃器皿和染色缸,60℃恒温箱。 试剂: 罗克沙尔固蓝液: 罗克沙尔固蓝Luxol fast blue 1.0 gm 95%酒精 alcohol 100.0 ml 10%醋酸acetic acid 5.0 ml 混合溶解,过滤,保存期1年。 警告:易燃性液体,避免接触和吸入。 0.05%碳酸锂: 碳酸锂Lithium carbonate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 1000.0 ml 警告:避免接触和吸入。 伊红Y溶液: 0.25%结晶紫: 结晶紫Cresyl Echt violet 0.25 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 10%醋酸 Acetic acid 1.0 ml 混合溶解,过滤。保存期2年。 警告:避免接触和吸入。 安全:穿戴手套、护目镜和白大衣。避免接触和吸入。在通风场所进行。 醋酸:摄入有中等程度的毒性,吸入影响靶器官为呼吸系统,对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。腐蚀性。 碳酸锂:对皮肤、眼睛有刺激性 酒精:对皮肤、眼睛有刺激性,摄入可引起胃肠刺激、恶心、呕吐、腹泻、致盲、死亡。过度吸入可能引起鼻和呼吸道刺激。 程序: 1. 脱蜡至95%酒精。 2. 罗克沙尔固蓝液60℃过夜。 3. 95%酒精稍洗。 4. 蒸馏水稍洗。 5. 0.05%碳酸锂液5 seconds. 6. 70% 酒精,10 seconds×2 7. 蒸馏水稍洗。 8. 重复 5 - 7 项直至蓝色的白质与无色的灰质对比分明。 9. 70% 酒精稍洗。 10.伊红 1 minute. 11. 蒸馏水稍洗。 12. 结晶紫1 minute。 13. 蒸馏水稍洗。 14. 95% 和无水乙醇脱水,二甲苯透明和封固。 结果: 有髓鞘神经纤维:蓝色 Neurophils pink 神经细胞:紫色 参考文献: Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd ed,1980, pp262-264, Battelle Press, Ohio Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡 罗克沙尔固蓝- 改良KLUVER'S – 髓鞘 对照:正常的大脑皮质 技术:10μ石蜡切片。置于37℃恒温箱过夜。 程序: 1. 脱蜡至95%酒精。 2. 罗克沙尔固蓝液60℃过夜。 3. 95%酒精稍洗。 4. 蒸馏水稍洗。 5. 0.05%碳酸锂液5 seconds. 6. 70% 酒精,10 seconds×2 7. 蒸馏水稍洗。 8. 重复 5 - 7 项直至蓝色的白质与无色的灰质对比分明。 9. 70% 酒精稍洗。 10.伊红 1 minute. 11. 蒸馏水稍洗。 12. 结晶紫1 minute。 13. 蒸馏水稍洗。 14. 95% 和无水乙醇脱水,二甲苯透明和封固。 结果: 有髓鞘神经纤维:蓝色 Neurophils pink 神经细胞:紫色 罗克沙尔固蓝液: 罗克沙尔固蓝Luxol fast blue 1.0 gm 95%酒精 alcohol 100.0 ml 10%醋酸acetic acid 5.0 ml 混合溶解,过滤,保存期1年。 警告:易燃性液体,避免接触和吸入。 0.05%碳酸锂: 碳酸锂Lithium carbonate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 1000.0 ml 警告:避免接触和吸入。 伊红Y溶液: 0.25%结晶紫: 结晶紫Cresyl Echt violet 0.25 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 10%醋酸 Acetic acid 1.0 ml 混合溶解,过滤。保存期2年。 警告:避免接触和吸入。 0.05%碳酸锂: 碳酸锂Lithium carbonate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 1000.0 ml 警告:避免接触和吸入。 日期: 技师: 使用限期: 罗克沙尔固蓝液: 罗克沙尔固蓝Luxol fast blue 1.0 gm 95%酒精 alcohol 100.0 ml 10%醋酸acetic acid 5.0 ml 混合溶解,过滤,保存期1年。 警告:易燃性液体,避免接触和吸入。 日期: 技师: 使用限期: 罗克沙尔固蓝液: 日期: 技师: 伊红Y溶液: 日期: 技师: 0.25%结晶紫: 结晶紫Cresyl Echt violet 0.25 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 10%醋酸 Acetic acid 1.0 ml 混合溶解,过滤。保存期2年。 警告:避免接触和吸入。 日期: 技师: 使用限期: 0.25%结晶紫 日期: 技师:
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