色素蛋白的共振Raman和FT_Raman光谱
L i Zh en gq ian g, B u F en gqu an
(1. K ey L a bora tory f or S up ram olecu la r S t ru c tu re a n d S p ec t roscop y C h a n g ch u n
)130021
( 2. I n s t itu te of P rec l in ica l S c ien ces, N orm a n B e th a n e U n iv e rs ity of M ed ica l
), 130021 S c ien cesC h a n g ch u n
A bstra c t R e so n an ce an d F T - R am an sp ec t ra o f tw o ch rom op ho re - p re te in () . B ac te r io rho dop sin an d M yo g lo b in a re de te rm in edT h e re su lt s p ro ve th a t F T - R am an sp ec t ra m a in ly show ch a rac te r ist ic b an d s o f ch rom op ho re a s sam e a s
.R e so n an ce R am an sp ec t ra
细菌视紫红质是嗜盐菌紫膜中含有视黄醛生色基的色素蛋白, 它的功能是作为光驱
动的质子泵。由于视光醛的存在, 菌紫质在570有一可见吸收峰, 人们可以用共振 nm R a2
1 光谱方法, 对其在不同条件下生色基结构与功能特性之间的关系进行系统研究。肌m an
红蛋白是一种含铁卟啉的具有重要生理功能的蛋白, 在可见区420nm 有一个强的 S to re t 吸收带, 及500- 600nm 区域弱的 Q 带吸收, 因此也是共振 R am an 光谱研究的极好目标 2 分子。光谱作为一种新兴的光谱技术, 在生物大分子结构与功能研究中作 - F T R am an
用日趋重要, 我们将它用于上述两种蛋白研究之中, 试图了解光谱所代
表
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的结构特征。
() () 细菌视紫红质 北京生物物理所提供和肌红蛋白 购自 公司的共振 S igm a R am an
光谱测量在 2光谱仪上进行, 详细条件见图注示。两种色素蛋白Jo b in Y vo n H G S R am an
功率为 的 F T - R am an 光谱测定在 B ru k e r R F S - 100上进行, 激发光波长为1064nm ,
100。mW
() 比较图1中曲线 和曲线 我们可见菌紫质的共振 曲线 和 R am an , -a b R am an a F T
() 光谱 曲线 并无明显不同, 与共振 b F T - R am an 的谱带主要来自生色团视黄醛分子, R am an 光谱相比较, 只是个别峰间的比例略有变化, 而没有主体蛋白振动模式的干扰。图
2中曲线 和 分别代表肌红蛋白的共振 和 光谱, 在 , - - a b R am an F T R am an F T R am an
?245?
3 () 没有蛋白主体振动膜式的干扰。我们也曾经研究过辣根过氧化物酶 含卟啉基团的 F T
4 - 光谱也主要反映了卟啉的 光谱特征。因此我们认为, 用 - R am an R am an F T R am an光谱方法, 可以研究含生色团蛋白的生色基部分的光谱特征。由于 F T - R am an 光谱具有 较高的灵敏度和短的操作时间, 可以避免生物样品变性和热致失活, 在有关配体底物与
蛋白相互作用研究中, 可以避免荧光背景的干扰, 可以与共振 光谱相互补充, 运 R am an 用于含生色基的蛋白质分子的结构与功能研究之中。
514. F ig. 5nm , 1 Curve a. Re sonan ce Ram an specr tra of bac ter iohodop s in w ith exc ita t ion of
60.mW
.Curve b FT- Ram an Spec tra of bac ter iorhodop s in
F ig. 60mW. 2Curve a. Re sonan ce Ram an spec tra of m yog lob in w ith exc ita t ion of 413. 1nm ,
. - Curve bFTRam an spec tra of m yog lob in
参考文献
1 李正强, 博士学位论文, 吉林大学, 1994年12月
, . . . ; ; , 2 Sp iro TGE dIn B io lo g ica l A pp lica t io n o f R am an Sp ec t ro scop yW ilryN ew
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?246?
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