血塞通分散片的生物利用度评价

血塞通分散片的生物利用度评价 作者:张富昌 赵文军 刘明灯 宋铁珊 目的探讨超临界选择性萃取雪莲活性成分的可行性，报道超临界萃取挥发油的产 率以及成分，预测提取物生理作用。方法以萃取率为指标对萃取压力，萃取时间， 萃取温度做单因素考察，并对10 MPa和20 MPa萃取压力下提取物做GC-MS分 析。结果适宜的萃取条件为:20 MPa，45?，动态萃取2.5 h，新疆雪莲挥发油的 超临萃取率(2.49%)比水蒸气法 (0.08%)高，并且选择性好。结论此研究为雪 莲的综合开发奠定了基础。 新疆雪莲; 超临界萃取; 轻质组分 基金项目:科学院西部行动项目()资助课题 Supercritical Carbon Dioxide Extraction and GC-MS of Volatile Components from Saussurea involucrate Abstract:ObjectiveTo discuss the feasibility of solution extracting active components of Saussures involucrate by supercritical carbon dioxide.Establish a method for further medical application studying and developing of the Saussures involucrate.MethodsSupercritical fluid extraction(SFE)ability was investigated.Main extraction efficiency effects:pressure(10-30MP),temperature(30,55?) and time(0.5, 3 h) were determined.Volatile constituents were analysed by GC-MS.ResultsThe Appropriate highest yield of volatile components was 2.56%,much higher than vapor distillation way.The best results were obtained:pressure 20MP,temperature45?,time 2.5 h.ConclusionThe total essential oil were separated and identified. Key words:Saussurea involucrate; Volatile components; Supercritical fluid extraction(SFE); 新疆雪莲Saussurea involucrate Kar.et Kir又名雪荷花，为菊科风毛菊属多年生 草本植物，主要分布在天山海拔3 000,4 000 m的高山雪岭上,1,。天山雪莲具 有除了传统的预防治疗风湿性关节炎、经血不调、阳痿、跌打损伤等疾病外, 还应 用到食品,美容, 戒毒, 癌症防治等领域,是一个广为大众接受的中药材,2,。超临界 流体萃取技术(supercritical fluid extraction，SFE)是一种新型分离技术，具有萃取温 度低，速度快等诸多优点,3,。有关雪莲的超临界萃取并 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 未见报 道，本文探讨超临界CO2选择性萃取雪莲活性成分的可行性，明确最佳萃取条 件，报道超临界萃取新疆雪莲的产率以及成分，预测提取物生理作用，为雪莲这一 珍贵民族药材的进一步开发奠定基础。 美国PE公司联用分析仪; 型超临界萃取装置，江苏南通华安超临界萃取有限公司生产。雪莲采样于新疆阜 康，经新疆中药民族药研究所李晓瑾研究员鉴定为天山野生雪莲。CO2为食品 级，He为色谱纯。 2.1 天山雪莲的超临界提取将雪莲干燥后全草(地上部分)120 g粉碎、过40 目筛后加入2 000 ml超临界CO2萃取池中，以萃取压力，萃取时间，萃取温度3 因素分别做单因素实验:参数设置范围为压力10,25 MPa;萃取池温度35, 55? ，解析压力固定4.2 MPa，温度40? ;动态萃取30,120 min;CO2 流量固定在20 L/h 。计算萃取率并结合检测结果考察最佳提取条件。 2.2 提取物的分析条件色谱柱: μl);色谱柱程序升温条件:柱温60?(10 min)，3?/min升温至150?,2.3? /min升温至270?(42.83 min) ;载气He，流速:16psi;接口温度280? ;离子源温度200? ;电离电压70 eV;扫描质量范围30,550 amu。 3.1 考察萃取压力对超临界提取率的影响(固定其他条件:萃取温度50?，分离釜温度30?，分离釜压力4.2 MPa，CO2流量20 L/h，提取时间为3.5 h)压力一般是影响萃取率的主要因素，为此，首先进行考察压力对萃取率的影响因素，固定萃取温度50? ，选择10,30 MPa之间 5种压力进行筛选，其与萃取率的关系详见图l。 由图1可知，当压力在20 MPa以下时，随着压力的增大萃取率增加较快，超过20 MPa再增加压力变化不大。但具体哪个压力下为好，还要结合其选择性，萃取物生理活性等才能判定。 3.2 考察萃取时间对超临界提取率的影响(固定萃取压力为20 MPa，萃取温度为50?，30 min取一次样，其他条件同上。)萃取开始初,由于与溶质未达到良好接触,萃取量较少,随萃取时间延长,传质达到良好状态,单位时间的萃取量增大,直至达到其最大值,此后由于萃取对象中待分离成分含量减少提取量增加逐渐缓慢，综合考虑2.5 h为好。见图2。 图1 萃取率与萃取压力的关系(略) 图2 萃取率与萃取时间的关系(略) 3.3 考察萃取温度对超临界提取率的影响(固定萃取压力20 MPa，萃取时间2.5 h，其他条件同2.2项)温度对萃取率的影响:当萃取压力固定为20 MPa，CO2流量固定为20 L/h时，温度对萃取率的影响详见图3，由图3知， 温度对超临界溶解能的影响较为复杂。温度升高，可使超临界流体的密度降低， 溶解度下降。相反，温度的升高又可使物质分子运动加剧，利于溶质容积之间的相互扩散，减小传质阻力，使溶解度增加。综合来说温度影响不是很大，以45?为佳。 目的 通过犬血浆中Rg1的tmax、Cmax、AUC来评价血塞通分散片的生物利用度。方法采用高效液相色谱法测定犬血浆中Rg1药物浓度，血药浓度用3P97程序处理，用非房室模型计算药动学参数。结果 血塞通分散片和血塞通片中Rg1的主要药动学参数如下:t1/2(55.66?13.64)和(75.32?16.70)min，tmax(56.7?5.2)和(31.7?4.1)min，ρmax(15.49?3.14)和(28.07?1.97)μg?ml-1，AUC(0?4 h)(1 502.45?271.95)和(1 543.93?157.07)μg?min-1?ml -1。以血塞通片计血塞通分散片相对生物利用度为(106.7?27.6)%。结论 血塞通分散片的生物利度优于血塞通片 。 血塞通片; 血塞通分散片; 药动学; 生物利用度 Bioequivalence Assessment of Xuesaitong Dispersible Tablets Abstract:ObjectiveTo assess the bioequivalence of Xuesaitong dispersible tablet . MethodsPlasma concentrations were determined by HPLC, 3P97 was used to process main pharmacokinetics parameters. ResultsThe main pharmacokinetics parameters of panax notoginseng tablet were as follow: t1/2(55.66?13.64)and(75.32?16.70)min，tmax(56.7?5.2) and(31.7?4.1)min，Cmax(15.49?3.14) and (28.07?1.97)μg?min-1?ml-1，AUC(0?4 h)(1 502.45?271.95) and(1 543.93?157.07)μg?min-1?ml-1.The relative bioavailability of Xuesaitong dispersible tablet was (106.7?27.6)%.ConclusionThe bioavailability of Xuesaitong dispersible tablet is superior to Xuesaitong tablet. Key words:Xuesaitong tablet; Xuesaitong dispersible tablet; Pharmacokinetics; Relative bioavailability 中药血塞通片临床上主要用于心脑血管疾病、神经系统疾病的治疗,1,2,。为了使其能更快产生疗效，南通市精英医药生物技术开发公司开发了血塞通分散片。 体外研究表明血塞通分散片崩解迅速，在37?水温条件下，30,40 s已全部崩解，有效成分溶出快。为了考察其在体内是否也能达到快速释药的目的，我们选择了三七总皂苷中含量较高的有代表性的单体成分Rg1,3,作为质量控制指标，以驯服犬作为研究对象，研究其口服血塞通分散片后，犬体内血药浓度时间关系，计算口服用药的PNS有效成分药代动力学参数，为血塞通分散片的研制以及今后的临床合理用药提供科学依据。 Agilent 1100 HPLC仪系统(包括G1354A四元泵，G1322A在线真空脱气机 ，G1314A可变波长检测器，G1313A自动进样器，G1316A柱温箱，G1315B二极管阵列检测器;Agilent 1100化学工作站)。全自动高速冷冻离心机(韩国产); 旋涡混合器(上海医大仪器厂);AX205中国药品生物制品检定所，批号 ); 乙腈:色谱纯;驯服家犬12只(体重(10?0.5)kg，??各半，南通大学动物实验中心提供)。 2.1 给药方法与样品采集 驯服家犬随机分成两组:参比组口服血塞通片，剂量20 mg?kg-1;受试组口服血塞通分散片，剂量20 mg?kg-1，给药前禁食10h。给药前及给药后10，20，30，40，50，60，75，90，120，150，180，240 min从犬前肢隐静脉取血，肝素抗凝，3 500 r?min-1离心分离出血浆后，于-20?冰箱冷冻保存。 2.2 血浆样品处理及测定条件精密吸取血浆0.5 ml, 加入乙腈1.25 ml, 旋涡振荡30 s，低温离心机10 000 r?min-1 离心10 min，取上清液,0 μl注入HPLC色谱仪，测定人参皂苷,g1的峰面积。 色谱柱:柱(4.6 μm×150 μm, 5 μm);柱温30?;流动相A 80%纯化水，B 20%乙腈;流速1 ml?min-1;检测波长203 nm;对照波长300 nm。 2.3 Rg1血浆 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线的制备、色谱分析条件专属性考察、提取回收率及精密度实验、稳定性实验及相应的结果已进行过报道,4,，本处不再重复。 2.4 统计学处理 用3P97生物等效性评价程序处理，非室模型计算药动学参数。ρmax和tmax用实测值表示;MRT为平均驻留时间，AUC0?t用梯形法计算，AUC0??=AUC0?t+Ptn/λz。tn是最后一次可测质量浓度的取样时间，Ptn是测定的最后一点的血药浓度，λz是末端消除速度常数。t1/2用浓度-时间曲线末端计算(t1/2=0.693/Ke)。相对生物利用度F=(AUC0?t)t/(AUC0?t)c×100%计算。 2.5 生物等效性分析单剂量受试制剂和参比制剂的药动学参数AUC0?t和Pmax经对数转换后进行方差分析(ANOVA，SPSS 10.0)和双单侧t检验及90% 置信区间计算，tmax进行非参数检验，显著差异的标准为P，0.05,评价2种制剂的生物等效性。如果经对数转换后的(1-2α)置信区间分析结果AUC0?t和Cmax的90%可信限分别在80%,125%和70%,143%之内，则可判定受试制剂与参比制剂具生物等效性。 3.1 药-时曲线和药动学参数 12只受试犬口服单剂量的血塞通分散片和普通片的平均药时曲线见图1。主要药动学参数见表1。 表1 犬单剂量口服血塞通片和血塞通分散片的主要药动学参数值(略) 图1 犬单剂量口服参比和受试制剂(略) 3.2 生物等效性评价 AUC0?t和ρmax经对数转换后进行双侧t检验和置信区间法的生物等效性检验。结果见表2。 犬对血塞通分散片的吸收优于血塞通片。 表2 血塞通分散片和血塞通普通片的生物等效性(略) 目前，我国现有绝大多数中药制剂处于“头尾研究”状态，即给病人用药，经临床观察，总结出一个有效率，对于药物的体内过程、血药浓度常常很不清楚，这种停留在表面的研究模式极大地制约了中药新剂型研究、新药开发和走向国际市场。我国现行的新药审批条例规定西药必须做药物代谢动力学研究，但对中草药、复方制剂尚未作出进行药代动力学研究的规定;药代动力学的研究对指导新药 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 、改进药物剂型、评选高效长效、低毒作用的药物，指导临床用药等可发挥较大作用;因此进行中草药药代动力学研究是必然趋势。 对于《中国药典》及部颁标准收载的药物，改变剂型而不改变给药途径，测定生物利用度可免作临床验证。血塞通分散片的药代动力学研究将为我国中药口服制剂的药动学研究增添有益的资料。 【医院药学杂志，1999，19(1):36. ,2, 鹿小燕，张文高，周苏宁，等. 三七总皂苷治疗心血管病的基础与临床研究概况,J,.山东中医药大学学报，2000，24(6):468. ,3, 周迎春，赵怀清，梁 宁，等. 高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷,g1，Re,Rb1与三七皂苷R1含量,J,.沈阳药科大学学报，2003，20(1):27. ,4, 陈 霞，徐济良. 高效液相色谱法测定犬血浆中人参皂苷Rg1的浓度,J,.中国医院药学杂志，2007,27(2):36. 欢迎到访:更多资源查看: