《皮革生产过程控制分析》讲稿

皮革生产过程把握分析绪论一、皮革分析检验的任务和作用将分析化学理论和基本的分析方法应用于皮革生产中，就成了我们的皮革分析检验，它着重争辩皮革生产工艺中化学分析方法和物理检验技术。在工业生产中，要贯彻执行 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 化，提高产品质量，降低成本，合理使用原材料，在生产过程中，要把握工艺条件，保证生产顺当进行，这些任务很大程度上都需要通过“分析检验”工作供应数据来完成，那么皮革分析检验则是为皮革生产供应牢靠数据，以正确把握皮革生产工艺条件，保证生产顺当进行。而且还要提高皮革质量，合理使用原材料，降低成本。在皮革生产过程中要用到很多我们称之为原材料的东西，诸如制衣需要布料、造纸需要麦草、制陶需要陶土一样，我们制革也要用到很多原材料，如，酸、碱、盐、酶等，所用这些原材料往往由于存放时间较长，其含量发生了变化，如酶软化所用的酶制剂，往往由于出厂后经过长期存放和长途运输等缘由而使酶软效果降低，所以在使用前必需进行原材料的分析检验；配好的铬鞣液、甲醛鞣液必需测定Cr2O3、甲醛含量，然后才能确定鞣制时鞣液的用量（操作液的分析检验）；成品革是否符合质量要求则要对它的物理化学指标进行分析检验（成品分析检验）；一个新工艺、新 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 的可行与否。可通过半成品及成品的分析检验。如测皮质含量，太低表示在制作过程中损失过多，若含量太高，则皮革板硬，说明该方案仍需改进（确定新工艺方案）。皮革厂家流出的污水，需通过化学分析检验把握流出状况，以便进行污水处理，消退污染（污水分析）。总之皮革分析检验工作贯穿于整个生产过程的始终，它在把握生产正常进行和保证产品质量方面有着“眼睛”和“哨兵”的作用，为科学争辩、技术创新和新产品开发供应依据，不敢说它有心脏一样的重要地位，但最其马可以称作是左膀右臂，试想一个人假如没有眼睛或失去了左膀右臂是多么困难，那么制革行业假如没有分析检验这个“眼睛”和“哨兵”，也就象人没眼睛一样糟糕。对于我们大家来讲他更是一种工具，新材料、新方案的接受、创新教育都离不开分析检验这个工具。对于一个专业的每门课程，都有他各自的重要性，作用有大、有小，但只能相互补充、相互协调，而不能相互取代，就象一个生物体的各个器官一样，缺一不行。二、内容按排基本按工艺流程进行：原材料分析：酸、碱、盐、酶等操作液分析：铬鞣液、灰液等污水分析检验：铬、硫、COD等半成品、成品革理化分析。学会以上内容的方法，操作技术、了解各检验方法的测定意义、目的、原理，以便在参与工作中能够正确适用这些方法，解决生产中的技术问题和进行科研工作。三、皮革分析检验的特点1．精确     度取决于生产的要求，依据被测物质的含量打算误差范围，皮革分析检验属于工业分析的范畴。百分之几到千分之几工业分析的公差范围被测组分含量(﹪)公差(用相对误差来表示)80~90(99)0.4~0.3(0.1)40~800.6~0.420~401.0~0.610~201.2~1.05~101.6~1.21~55.0~1.60.1~12.0~5.00.01~0.150~20大值—小值相对误差=——————×100﹪平均数例如：皮质分析，误差小于0.7﹪。（在含量小于40﹪时）。2．由分析对象打算取样方法3．保证精确     度的状况下在短时间内完成。四、皮革分析的学习方法和基本要求实践性很强的科目，试验时数约占总学时的2/3，所讲内容只有通过试验才能融汇贯穿，得以消化把握，所以学习本课程的大部分时间，要在试验室度过，所以特殊留意理论联系实际，并在此基础上加强基本操作的训练。学问在于积累对于这门课显得更为重要，就是留意平常的学习。对于每一个项目的测试，每一个试验、每一个方法都要把握它的基本理论、测试条件及有关计算。试验前应做好予习工作，明确每个试验的目的。要求认真阅读操作规程，明白每一步骤的意义和相关关系，订好试验方案，做到心中有数。在试验中留意观现象，认真思考，做具体记录。试验后准时小结，写出报告心得体会，不断总结阅历、教训，提高试验技巧，最终应达到对结定资料自行阅读后，能理解基本原理，抓住关键问题。具有独立进行分析的力量，同时通过对本课程的学习，可以使同学们把握一些基本的分析方法，将理论和实践紧密地联系起来，获得分析问题和解决问题的力量的训练。培育严峻 认真，实事求是的科学态度和精密细致地进行科研的技巧技能，为将来从事各项专业工作和科研工作打下良好的基础。报告要求：目的、原理、试验操作、记录、数据处理、计算的结果、争辩。试验室要求：1．按时到、遵守试验室纪律。2．不抽烟、不唱歌、不串门、不胡闹。3．进试验室时应检查所需东西是否带齐：钥匙、课本、笔记本、试验记录本、预习报告、上次的试验报告本等。4．试验前考察：提问或抽查方式，记入平常成果。5．试验结束后应登记试验结果，方能离开，报告一次交清。6．打扫卫生。个人卫生：整理仪器、擦桌子；值日生：扫地、拖地、整理仪器药品、洗水池等。 Na2S含量的测定一、概述1．Na2S的性质Na2SM=78.05粉粒状。Na2Sּ9H2OM=240.2无色或微紫色棱柱形晶体。一般市售Na2S含Na2S50~60﹪。硫化碱、臭碱、火碱。Na2S+2H2O＝NaOH+NaHS强碱性，故使用应戴手套加以防护，防止对皮肤及眼睛腐蚀。Na2S+2H+==2Na++H2S↑有毒而易燃故Na2S放置应与酸分开2Na2S+2O2+H2O=Na2S2O3+2NaOH空气潮解使浓度降低。S2-极易被空气中的氧氧化为Na2S2O3或Na2SO4。2．Na2S在制革生产中的作用那么Na2S在制革生产中到底有什么作用呢？主要用于脱毛：灰碱法或碱碱法R-S-S-R1+2Na2S→R-SNa+R1-SNa+Na2S2Ca（OH）2+2NaHS→Ca（SH）2+2NaOHR-S-S-R1+Ca（SH）2OH-2R-SH+CaS+S↓皮胶原在强碱作用下膨胀分散，HS-有还原性，可破坏角蛋白的双硫键并阻挡毛内新的交联键的形成，破坏护毛作用，大大加快脱毛速度。3．那么为什么要测定Na2S的含量呢？（1）原材料Na2Sּ9H2O易在空气中吸取CO2、O2、H2O等而转为Na2S2O3、Na2CO3、Na2SO4、NaOH等，从而降低Na2S的含量，使用前必需分析其含量，确定用量。（2）配制的脱毛浸灰液，脱毛效果的好坏直接与Na2S的含量有关，一般Na2S4~6g/L；灰碱涂灰脱毛要求Na2S浓度达8~13波美，使用前必需测定Na2S含量保证脱毛工序顺当进行。（3）脱毛后的废液，其残留的硫化物也要回收使用，削减污染，所以应测其含量供应数据，或进行三废处理。二、高铁氰化钾法测定浸灰液中Na2S含量的测定原理氧化-还原滴定法以K3[Fe（CN）6]为滴定剂，以Na2[Fe（CN）5（NO）]为指剂示，在碱性介质中接受先粗滴定，再后加指示剂精确滴定的方法，依据K3[Fe（CN）6]的用量和浓度计算Na2S的含量。1．化学反应原理S2-具有还原能性：在OH-中：S+2e-S2-E0=-0.48V在H+中：S+2H++2eH2SE0=0.141V在OH-中易被氧化，还原力量强。K3[Fe（CN）6]/K4[Fe（CN）6]E0=0.36VΔE0=0.36-(-0.48)=0.84VΔE0=0.36-0.141=0.219V在碱性介质中，电位差大，故反应在OH-中进行。Na2S+2K3[Fe(CN)6]OH-S↓+2NaK3[Fe(CN)6]还原剂氧化剂2．指示原理氧化还原法滴定指示剂（1）氧化还原指示剂是一些比较简单的有机化合物，它们本身具有氧化还原性，它的氧化型和还原型具有不同的颜色。如二苯胺磺酸钠、邻菲罗啉。（2）指示剂与氧化剂或还原剂发生显色反应某些试剂能与标准溶液或被测(滴)物质产生显色反应。就可以利用该试剂作指示剂。如淀粉指示剂（3）自身指示剂利用标准溶液本身的颜色变化的指示终点如KMnO4在此属于第（2）类(CN)5Na2S+Na2[Fe(CN)5(NO)]→Na4FeN=O‖S2-紫红色络合物在含有硫化物的灰液中加入亚硝酰铁氰化钠Na2[Fe(CN)5（NO）]，生成了紫红色的络合物。用K3[Fe（CN）6]滴定时，K3[Fe（CN）6]首先与溶液中游离的S2-进行反应，至到接近终点，游离S2-被氧化完，此时K3[Fe（CN）6]夺取络合物中S2-使络合物解体，紫色消逝，颜色发出突变指示终点。颜色变化：深紫色→浅紫→乳白色中透紫→几乎乳白→微黄（过量半滴的K3[Fe（CN）6]）。三、试剂1．0.1mol/LNaOH水溶液.(调整碱性)；2．0.1mol/LK3[Fe（CN）6]水溶液深红色单斜晶体赤血盐称取32.925gK3[Fe（CN）6]配成1000ml容量瓶。易分解放于棕色容量瓶中避光保存。基准物可直接配制。3．0.4%的亚硝酰铁氰化钠Na2[Fe(CN)5（NO）]·2H2O水溶液。棕色瓶保存。4gNa2[Fe(CN)5（NO）]·2H2O→1000ml。不稳定，在中水中渐渐变为绿色，现用现配。有毒，使用时当心。四、操作四层沙布过滤灰液1．粗滴定50mlH2O5ml0.1mol/LNaOH250ml三角瓶→K3[Fe（CN）6]滴定→淡黄→读取V110或25ml试液1ml指示剂深紫色2．精确滴定50ml煮沸过的H2O（赶走CO2）5ml0.1mol/LNaOH→K3[Fe（CN）6]快速滴定到(V1-0.5)ml10或25ml试液+1ml指示剂→连续用K3[Fe（CN）6]滴定到淡黄色。精确滴走两次：V2、V3留意：1．终点应认真观看，其次、三终点不能以第一瓶为参照。滴定应快速，测试液不能长时间暴露在空气中。2．指示剂即使在散射光的照射也能分解，所以应现配现用，且有毒，当心使用。3．加液次序接受水、NaOH、试液，削减S2-损失，但平行试验加液次序应全都。五、计算（M×V）Fe3+Na2S（g/L）=——————×78.052×V试依据化学反应式可知：Na2S+2K3[Fe(CN)6]OH-S↓+NaK3[Fe(CN)6]1molNa2S2molK3[Fe（CN）6]六、争辩1．介质选择。为什么选碱性介质？（四点理由）（1）S/S2-电对在碱性介质中电位低，S2-易被氧化即还原力量强。E0S/S2-=-0.48V（2）S2-+[Fe（CN）6]3+→S↓+[Fe（CN）6]4+能斯特方程：0.059[S]E=E0+————lg———n[S2-] [S2-]↑E↓对反应越有利；[S2-]↓E↑对反应越都不利。在酸性介质中S2-+2H+H2S↑[S2-]↓不利于反应，且H2S有毒。（3）S2-极易水解S2-+H2OHS-+OH-Kh=KW/Ka2=10-14/（7.1×10-15）=1.41很大加碱抑制水解[S2-]↑E↓有利于反应。（4）碱性介质是K3[Fe（CN）6]的平安介质K3[Fe（CN）6]+6H+3K++Fe3++6HCN↑(剧毒)所以使用K3[Fe（CN）6]非但不能在一般酸性介质中，而且还应与酸分开放置。总上所述，滴定反应在碱性介质中，且把握在PH=9～12。否则PH太高S2-→S有可能连续被氧化到SO42-。使计量关系打乱。2．为什么进行粗滴定，再后加指示剂精滴定？（1）在碱性介质中S2-极易被空气中氧所氧化：2Na2S+2O2+H2O→Na2S2O3+2NaOH造成S2-的损失，影响测定结果，所以必需削减灰液与空气接解时间，即进行粗滴定，再滴定时可依据初滴定数值，加快滴定速度，缩短滴定时间，提高测定确度。（2）S2-与Na2[Fe（CN）5(NO)]所生成的深紫色络合物的稳定性随时间的增长而增加，破坏困难，终点不明显，影响测定结果，所以接受后加指示剂的方法。依据初滴数据，提前在初滴数的0.5～1ml加入批示剂，缩短络合物存在时间，减小稳定性，变色敏锐，测定精确     。3．对本方法的评价优点：快速,Na2S试液测定结果精确     。适用于新脱毛液、原材料Na2S的含量分析。缺点：微量分析误差大，不能去除有机物、蛋白质分解物等有机物的干扰。脱毛废液、废水S2-的分析就不能用。 思考题1．如何配制0.1mol/L的K3[Fe(CN)6]标准溶液?2．测定固体Na2S(含Na2S在50~60﹪)，一般先将其配制成肯定体积肯定浓度的溶液，然后再移取25ml进行测定，请问用0.1mol/LK3[Fe(CN)6]滴定，则Na2S溶液的浓度应为多少范围较为合适?若配制在250ml容量瓶中，试确定Na2S试样的称量重量?并写出计算 公式 小学单位换算公式大全免费下载公式下载行测公式大全下载excel公式下载逻辑回归公式下载 。假如直接称量进行测定，又当称多少?如何计算?1．32.9250g→1000ml容量瓶2．解：1molNa2S2molK3[Fe(CN)6]1/2×0.1×25mmol0.1×25mmol0.05×25mmolMNa2S=0.05MW试=0.05×0.25×78.05/（50~60﹪）=（1.9～1.6）g(M×V)Fe3+×78.05×V容Na2S(﹪)=————————————×100%2×V试×1000×W试(M×V)Fe3+×78.05Na2S(﹪)=——————————×100﹪2×W试×1000 蛋白酶活力测定一、概述1．什么是酶？酶是一种生物催化剂，是由动植物体中提取或由微生物发酵而产生的，具有特殊催化功能的蛋白质。（1）催化速度快。牛肉2～3hr可在胃肠中被酶消化。20﹪HCL需4倍，100℃20多hr。（2）酶作用的特异性。专一性、选择性。通常被酶催化的物质称为该酶作用的底物。一种酶只作用一种底物：淀粉酶：只能催化淀粉水解→糊精、低聚糖；蛋白酶：只能催化蛋白质水解→氨基酸、肽；脂肪酶：脂肪→脂肪酸→甘油。（3）酶的化学本质是蛋白质。四级结构及性质。由很多不同种类的氨基酸按肯定挨次排列构成的多肽链。具有一、二、三、四级空间结构。激烈振荡、加热、紫外线、X-射线的照射，重金属盐作用，会转变结构。而（失活）变性，失去催化力量，这种现象叫做酶的失活；与H+、OH+成盐；两性；成色。2．影响酶催化反应的因素（1）底物浓度底物浓度低，酶的活性中心，没完全和底物结合，因此随底物浓度的增加反应速度加快，当C↑=CO饱合浓度时，酶的活性中心和底物作用完全。反应速度达到极限值——最大的反应速度。当C>CO　增加时，因酶活性中心已被占完再C↑，对V也无影响。故使酶催反应达到最大速度，必需给底物浓度的大约CO的作用条件。Vmax 底物浓度C饱和浓度C0（2）PH值的影响酶是蛋白质，属于两性物质，两个极性基。NH2NH3+∣∣R—C—COOHR—C—COO-∣∣HH不同的PH值都有不同的离解状态，而不同的离解状态又有不同的活力，而要使酶的活力最大，必需使活性基团处在最佳理解状态，而每一种酶要达到他的最大活力，必需处在它们最佳离解状态。也就是说必需把握一个最适合PH。每一种酶都有其自己的最适PH值。OD   PH最适PH实际应用中可依据酶的最适PH值不同将酶分为酸性、中性、碱性蛋白酶。酸性蛋白酶。最适PH在酸性范围内。如：3350蛋白酶PH最适2～4；7401蛋白酶PH最适3.0中性蛋白酶。最适PH在中性范围内。如：1398PH最适7～7.5；166PH最适7～8碱性蛋白酶。最适PH在碱性范围内。如：2709PH最适9～11；209PH最适9.5～11（3）温度的影响。T↗T最适速度加快。ODT最适↗蛋白酶受热失活V↘。每个酶都有最适温度。一般在40℃±。T最适T（℃）    （4）作用时间的影响K=dQ/dt直线Q（反应物的消耗量或生成物的生成量）t↗toV恒定to↗V↙to—反应初速度时间  tto结论：酶催化反应必需在反应初速度时间内，选择最适温度、最适PH，饱合底物浓度的条件下才能达到最大反应速度，即此时酶的活力最大。对于测定酶活力时，只有这样才能消退诸多因素的影响，比较各种酶活力的大小。（最大活力、可比性）。3．什么是酶的活力?酶催化底物进行反应的本事。酶催化底物反应在肯定时间内生成物越多或消耗的反应物量越大，则催化速度越快，活力越高。蛋白酶的活力定义：在肯定温度、PH值条件下，1g酶粉或1ml酶液，每分钟催化水解酪蛋白（或血红蛋白）所产生的酪氨酸的微克数，称为酶的活力。表示为：单位/g或单位/ml。通常人们爱讲多少个单位。如一般出厂酶活力为5万单位，即：50000μg/g=0.05g酪氨酸/1g酶粉。4．测定意义制革生产中，蛋白酶主要用于酶脱毛，利用酶催化作用，促使生皮毛囊及四周的蛋白质水解而使毛脱落。目前酶法脱毛所用的酶制剂种类也比较多。依据每种酶作用的条件不同，主要是最适PH不同而分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。其中酸性蛋白酶可用于毛皮的软化。在制革上则主要选用中性和碱性蛋白酶来脱毛。而这些酶在出厂后的长途运输及存放过程中，由于条件的变化、振荡、阳光等的作用，其活力要有所转变，故在使用之前必需测定其活力，作为计算酶制剂用量的依据，以达到预期的脱毛效果。即现测现用。二、测定原理酶催化1．酪蛋白酪氨酸 条件稳定有关条件，使酶作用底物肯定时间，测定底物酪蛋白水能所产生的酪氨酸的量，在相同条件下，所生成酪氨酸的量越多，说明酶催化水解力量越强，活力越大。有关条件：底物浓度C反应温度T反应PH值反应时间t措施：饱合浓度最适温度最适PH初速度时间内对酶而饱合的浓度恒温水浴缓冲溶液在此区间例：5370.5%酪蛋白40℃PH=3.010min27090.5%酪蛋白40℃PH=1010min13980.5%酪蛋白40℃PH=7.510min 那么水解产物酪氨酸的量如何测定呢？接受分光光度法测定。福林—酚法。2．显色福林试剂+酪氨酸→蓝色物质福林试剂在碱性条件下，易被还原性物质还原生成蓝色络合物质（钼蓝、钨蓝的混合物）。而酪氨酸所含的酚羟基具有还原性，可在碱性条件下将福林试剂还原成蓝色物质。蓝色的深浅与酪氨酸的多少成正比。那么蓝色的深浅如何确定呢？通常是通过比色测其消光度来确定。HO——CH2—CH—COOH∣（酪氨酸）NH23．朗伯-比尔定律及其应用当一束单色光（波长肯定）通过有色溶液时，溶液的质点要吸取一部分光能，光强减弱。若有色溶液的浓度C不变，液层厚度L越厚，由于增加了溶液的质点，对光的吸取愈多，即光的强度减弱越多。若L不变，C增大，同样光被吸取的也愈多。且通过实践证明，有色溶液对光的吸取程度，也叫消光度与溶液的浓度C及液层厚度L的乘积成正比。这就是光的吸取定律。即朗伯-比尔定律。公式表示如下：E=KＣL=lg（I0/I）E——吸光度、消光值A或光密度ODK——比例系数或消光系数。其大小与有色溶液的性质。入射光的波长以及溶液的温度有关。测定时，溶液性质肯定，选用此溶液最大吸取波长，固定溶液的温度，则K为一个常数，且一般都选用同样厚度的比色皿，即液层厚度在整个测定中保持不变。则K*L也为一个常数。则：OD=KLC=K′C这就是说对于一种有色溶液的测定，选用最大吸取波长，固定比色皿厚度，在肯定温度下，光密度OD与有色溶液的浓度成直线关系。结合前面所讲的，蓝色的深浅，与蓝色物质的浓度成正比，与酪氨酸的多少成正比，而消光度又与有色溶液的浓度成正比，所以被测组分的浓度（在此为酪氨酸的浓度）与消光度OD成直线关系。OD=KC组分[X]→[RX]→OD[X]OD另：OD=KCL=lg（Io/I）=－lg（Io/I）=－lgT其中T=I/Io叫透光度或透光率一般分光光度计读盘上常有OD光密度和T透光度两种读数OD=－lgT。而测定时一般都用消光度，然后计算其浓度。由于消光度与有色溶液的浓度成正比，是直线关系，而透光度T的负对数才与溶液的浓度C成正比；留意：为了保证测定精确     性必需：①选择λmax有色溶液对于不同波长的光选择吸取。必需在有色溶液的最大波长吸取处。只有在最大波特长，浓度较小的转变，可引起OD较大的转变，灵敏度高。不同的有色溶液最大波长不同，如测定酶活力，钼蓝、钨蓝的最大吸取波长为680nm，我们在此波长下测定。②OD值的范围OD值通常落在0.2～0.6范围，因OD=0.43时测定误差最小，(可计算出)可通过试样称量，转变溶液浓度，或选择不同厚度的比色皿来调整OD值的范围。即然OD=KC组分，只要知道K，即OD与被测组分浓度的对应关系(直线斜率)，要测某组分先测OD值，即可计算出组分含量。那么OD与组分浓度的对应关系如何确定呢?即如何确定K，即如何制作这条直线。4．制作标准曲线在比色分析中，应用朗伯－比尔定律进行测定，首先配制一个已知系列浓度的标准溶液，分别显色测其光密度OD值。得到系列对应的光密度值。然后以OD为纵坐标，浓度为横坐标作图，得到一条过原点的直线，称为标准曲线，它反应了OD与组分含量的对应关系。然后测定未知有色溶液的OD，在标准曲线上找出与被测溶液浓度相对应的C值。通过计算可求出被测溶液组分的含量。如：要测水解产生的酪氨酸的量，首先用酪氨酸配成不同浓度的标准溶液。显色测OD值.然后作图或求出直线斜率K，再进行计算。综上所述，可以总结福林酚法测定蛋白酶活力的方法 要点 综治信访维稳工作要点综治信访维稳工作要点2018综治平安建设工作要点新学期教学工作要点医院纪检监察工作要点 ：用分析纯的酪氨酸配成不同浓度的标准溶液，在肯定条件下（温度、PH、时间）与福林试剂反应显色，再在分光光度计上测定光密度OD值。绘出标准曲线。然后，称取肯定量的酶制剂试样，配成适当浓度的溶液，以过量的酪素为底物在肯定温度、PH条件下与上述酶液作用。水解反应进行肯定时间后，加入三氯醋酸，终止水解反应，并使未水解的酪素沉淀，过滤，水解产物就留在滤液中，移取滤液，加入碳酸钠中和过量的三氯醋酸，调整PH为碱性，加入福林试剂，显色后在分光光度计上测出光密度OD与标准曲线比较，计算出被测酶制剂的活力。三、试剂本次试验所用试剂较多，对于主要试剂重点把握其配制方法和作用。1．福林试剂——显色剂——一种杂多酸两个或两个以上的酸酐组成的酸叫多酸。含有相同酸酐的多酸叫同多酸。如：H2Cr2O7→H2O·2CrO3而多酸中含有不相同的酸酐时称为杂多酸。如：磷钼酸H3[P（Mo3O10）4]、磷钨酸H3[P（W3O10）4]福林试剂就是杂多酸磷钨酸和磷钼酸的混合物，是磷酸作为原酸，PO43-中的O2-完全被作为配位酸根的Mo3O102-和W3O102-所取代，形成了以原酸PO43-的成酸原子P为中心原子，其它酸根Mo3O102-、W3O102-作为配位体的配位酸磷钼酸、磷钨酸。一种络合物。杂多酸的制备只需将相应的组分在酸性条件下混合并给以肯定的条件，如加热、煮沸等。福林试剂的制备，就是制备杂多酸的过程。MoO42-、WO42-离子在PH降低到酸性范围，则易形成多酸根离子Mo3O102-、W3O102-。 Na2Wo4·2H2O100gNa2MoO4·2H2o25g回流Li2O450gH2O100ml———→10hr+H2O50ml→混匀+溴水—→15`85﹪H3PO450mlΔΔ浓HCL100ml→冷却→黄色→过滤→金黄色滤液入棕色试剂瓶。用时按1∶2稀释。可长期保存。杂多酸只有在酸性条件下才是稳定的，在碱性条件下杂多酸中的配位酸根很简洁被还原成各自元素的还原产物而呈现不同的颜色。如：福林试剂与酪氨酸成钼蓝和钨蓝。HO——CH2—CH—COOH所含的酚羟基具有还原性，可在碱性条件下将福林∣还原性NH2试剂还原。加入Br2将福林试剂中的还原性物质氧化得很洁净。2．10﹪三氯醋酸CL3CCOOH水溶液，调整PH，终止酶促反应；3．0.55M碳酸钠溶液。中和过量的三氯醋酸，调PH为碱性利于显色；4．缓冲溶液维持酶催反应的在最适PH下进行。测定不同种类的酶，则选用不同体系的缓冲溶液。以供应最适PH。如：测定537酸性蛋白酶选用PH=3.0的缓冲溶液柠檬酸—柠檬酸钠缓冲溶液PH=3.0A液：0.1mol/L柠檬酸。21.01gC6H8O7·H2O→1000mlCH2—COOHHO—C—COOHCH2—COOHB液：0.1mol/L柠檬酸纳。29.4gNa3C6H5O7·2H2O→1000ml用时，A∶B=18.6∶1.4混合即可。弱酸—弱酸盐缓冲体系PH=Pka1-lg（C酸/C盐）=3.13-lg（C酸/C盐）柠檬酸Pka1=3.13Pka2=4.76Pka3=6.40如测2709蛋白酶，最适PH=9～11，则选用硼砂—氢氧化纳缓冲溶液(PH=10)。A液：0.055mol/LNa2B4O7·8H2O。19g→1000ml水溶液B液：0.2mol/LNaOH。8g→1000ml水溶液使用时取A液50mlB液43ml+H2O→200mlNa2B4O7+7H2O===NaOH+4H3BO3H3BO3+H2O===B(OH)4-+H+一元弱酸Ka=5.6×10-10弱酸—弱酸盐缓冲体系PH=PKa-lg（C酸/C盐）=9.24-lg（C酸/C盐）如测1398蛋白酶选用0.02mol/L的磷酸盐缓冲溶液A液：0.2mol/LNaH2PO4溶液。31.2gNaH2PO4·2H2O→1000mlB液：0.2mol/LNa2HPO4溶液。71.7gNa2HPO4·12H2O→1000mlA液28ml+B液72ml，+H2O到1000ml，PH=7.2；A液16ml+B液84ml，+H2O到1000ml，PH=7.5。弱酸—弱酸盐缓冲体系PH=PKa-lg（C酸/C盐）[H2PO4-]=7.21-lg————[HPO4=]Ka2=6.17×10-8四、操作手续(一)制作标准曲线为了确定光密度OD值与酪氨酸之间量的关系1．配制100mg/ml酪氨酸标准溶液分析纯酪氨酸105℃烘干至恒重。用直接法精确     称取0.1000g于50ml小烧杯，用0.1mol/L的HCL溶解并定容到100ml容量瓶中。→1μg/ml=1000mg/ml(保存在冰箱中)。移取10ml上述溶液，用0.1mol/L的HCL溶解并定容到100ml容量瓶中。→100μg/ml。2．系列浓度的酪氨酸标准溶液配制取干燥试管编号按下表操作。管号酪氨酸浓度（μg/ml）加100μg/ml酪氨酸的量（ml）加蒸馏水的量（ml）00010110192202833037440465505566064  用5或10ml刻度移液管移取由于6号管浓度较大，显色后颜色太深，测量不准，偏离吸取定律较大，所以往往只做到5号，应使测量值在0.2～0.6范围内。解释：（1）为什么酪氨酸要干燥至恒重？在此酪氨酸作为基准物，所以应干燥至恒重，防止含有水份带来误差。（2）为什么称取酪氨酸的量为0.1000g？为了作图描点在轴上好表示，故期望系列浓度取整数，这样更精确     ，故称取酪氨酸的量应为0.1000g，削减误差。（3）为什么酪氨酸用盐酸溶解？凡有需制作标准曲线的试验，为了削减误差，总是尽可能的使制作标准曲线时的条件与实际测定条件全都，消退因条件差异所带来的误差，提高测定精确     度。酪氨酸是两性物质，酸碱均可用溶，而为什么在此用盐酸不用碱呢？正是考虑上述缘由，由于酶催化酪蛋白水解反应是用来终止的，酪蛋白水解的酪氨酸是处在酸性介质中的，用酸溶解刚好前后介质全都。3．系列浓度的酪氨酸显色并测OD值从上述配制的系列浓度的酪氨酸标准溶液中各移取1ml于干试管中分别加5ml0.55mol/LNa2CO3，福林试剂1ml，摇匀放入40℃水浴上显色10分钟，应显蓝色，冷却到室温。用0号管调零，1cm的比色皿，680nm波长下测OD值。说明：（1）所加各试剂均用刻度移液管移取，保证体积一至。（2）显色后需冷却到室温，由于K值受温度的影响。（3）每一个点均测两份平行试样，误差ΔOD≤0.01，这样算来共用3×6＝18支干试管。4．描点作图（1）画图求直线斜率的倒数K应为一条过原点的直线。各点OD取平均试样的平均值，为了便于后面计算。应求出K=ΔC/ΔOD（μg/mlOD）即OD为一个单位时所相当的酪氨酸浓度。（2）计算求K依据各点所测平均OD分别求出K=C/OD取K=（K1+K2+K3+K4+K5）/5（3）直接查取（4）电脑做图、计算、使用四种方法均可使用，道理都一样。标准曲线所用仪器不同，试剂不同或其它条件的不同均会引起变动。故应定期校正。更换仪器、更换试剂。标准曲线应重新制作。同样实测应与制作标准曲线条件全都。仪器、试剂、比色皿厚度、操作等。留意：直线应落在一群点的中间，同时纵横坐标的比例，使直线处于坐标系的中间。（二）测定蛋白酶活力——实测1．底物配制测定酸性蛋白酶（如537）0.5﹪酪素配制称取酪素0.5g,加入约50mlPH=3.0的缓冲溶液搅匀调溶，然后在沸水中加热，到清楚透亮     冷却后再以上述缓冲溶液定容到100ml，若有泡沫，可加1～2滴无水酒精消退。置于4℃的冰箱中保存，超过5天另外配制。测定碱性蛋白酶（如2709）或中性蛋白酶（如1398）0.5﹪酪素配制0.5g酪素不必太精确，工业大平即可，(多点少点没关系)于小烧杯中，用0.5MNaOH润涨加相应的缓冲溶液，在沸水浴上溶解(透亮     液体)，冷却，用精密试纸检查调整PH为测酶的最适PH,（如PH=10；PH=7.5）然后用相应的缓冲溶液定容到100ml，置于4℃的冰箱中保存，超过5天另外配制。2．配置待测酶液精称酶粉0.5g加数滴缓冲溶液研磨5`(潮湿为止)，再加数滴缓冲液再磨5`，加缓冲液搅拌均匀、沉降，转移上层清液。如此反应3~4次，到酶液及全部残渣均转入容量瓶中，用缓冲溶液定容到200ml。摇匀过滤(8层干沙布)，滤溶液于干烧杯中，吸取滤液10ml，用缓冲溶液定容到100ml容量瓶中。实测时只需吸取二次定容后的酶液1ml那么实际用了所称量酶的几分之几呢?(即稀释倍数为多少呢)（10/200）×（1/100）=1/2000故稀释倍数为2000用了酶粉W/2000(g)此次操作关键有两点：称量重量与稀释倍数、研磨时间。（1）稀释倍数与称量重量的原则是以测定水解时酪氨酸的光密度在0.4±（0.2~0.4），即0.2~0.6范围之内。称量重量与稀释倍数相互联系，要么固定称量，转变稀释倍数，来测OD。要么固定稀释倍数转变称量重量，以使OD落在范围内。一次测定时通常是固定称量重量。而转变稀释倍数，尤其是转变其次次稀释倍数。这样比较便利。多次测定常接受转变称量重量，固定稀释倍数。（2）研磨时间酶制剂是粗制品，颗粒大小不均。又有杂质及不溶物混在一起，尤其是填料能吸附一部分酶体，故需研磨浸提。使酶的活性基团充分暴露出来，故研磨浸提程度不同。基团暴露程度不同，活力也不同。关键是第一、二次，故用力准时间应力求均衡精确     ，最终的残渣也占体积，故需全部转移进去定容。3．测定酶催化酪蛋白酪氨酸 条件底物酪素液40℃水浴予热。取9支干试管编号，按下表挨次操作，所用试液均用刻度移液管精确     移取。   空白管0平行管1平行管2酶液（ml）11110﹪三氯乙酸（ml）300酪素（ml）222现象白色↓无无操作40℃水浴保温10分钟10﹪三氯乙酸（ml）033 现象白色↓白色↓白色↓操作取出摇振后室温下静置数分钟过滤接滤液1`1`2`干试管0``1``2``移取滤液（ml）1110.55MNa2CO3（ml）555福林试剂（ml）111操作40℃水浴保温10分钟取出冷却至室温，用空白对比管0``调零，测1``、2``平行管，误差不大于0.01。解释：（1）三个顺列试管0为空白管，1、2为平行试样管，即一样的东西。0号先加入CCL3COOH使酶不能催化酪素水解。而1、2号管使酶作用底物10`以后再快速加入CCL3COOH终止反应，故0号一开头就有白色↓，而1、2管10`后加CCL3COOH后产生白色↓酪素。（2）为了便于过滤保证滤液透亮     洁净，应使↓沉静片刻颗粒分散变大，滤纸应是干燥的。（3）滤液中所含酪氨酸，即酶催化酪素产生的水解物是处在酸性介质中，与制作标准曲线全都。（4）为什么不以蒸馏水为空白呢?在比色分析中，常需利用空白溶液(又称参比或对比溶液)调整仪器的消光度为0。以消退显色溶液中其它有色物质的干扰，抵消比色皿和试剂对入射光的影响。常用的空白有三种：蒸馏水空白、试剂空白和平行操作空白。若所用操作试剂无色，对测定没影响。则可用蒸馏水作空白调零。而我们这次均用了平行操作空白。即没有反应实测的实测。以消退溶剂、各种试剂、水、器皿和操作条件带入的误差。比照实测时，底物在配制溶液过程中以及以后的操作中，难免产生微量的水解，或多或少却不行避开。此水解产生的酪氨酸。并非由酶催化而产生，故应扣除掉这部分。用平行测定空白即上述溶液为空白，即可做到这一点，也可消退其它因素带来的影响。所以，空白也是有颜色的，肉眼看不见的浅蓝色。1、2号肉眼所观的颜色深浅应全都，否则确定不平行。（4）前后两个10分钟有什么不同？前要精确     ，后可以多，但不行少。五、计算两份平行试样结果平行后（ΔOD≤0.01）取平均值计算：1g酶粉或1ml酶液每分钟水解酪蛋白产生酪氨酸的μg数。单位/g=（K·OD·6·N）/（10·W）=（6·K·OD·N）/（10·W）OD：实测水解底物时所产生酪氨酸的光密度K：当OD值为1单位时所代表的酪氨酸的浓度（酪氨酸μg/ml/OD）K=C/OD=1/K′6：过滤以前水溶液的总体积为6ml，酪氨酸就处于体积为6ml的溶液中。N：稀释倍数。在此N=2000W：酶粉重（g）。10：反应时间为10分钟。六、留意事项本次试验属于微量分析，麻烦，细碎，故要特殊细心操作，严格把握条件、温度、反应时间等，否则很难平行，最终在报告中应标明测定条件。 胰酶的测定一、概述1．胰酶的性质食用动物的新颖胰脏→清洗→切碎→脱水干燥→粉碎→脱脂→浸提→干胰酶粉剂.胰酶是白色或黄色的无晶形粉末，有微弱的肉类物臭味，在水中缓缓溶解（但不完全），不溶于醇和醚中。是从猪、牛、羊等食用动物的胰脏中得到的一种水解酶类，可以促进某些蛋白质的水解的反应。在中性或弱碱性条件下，即PH=7.8~8.7活性强。遇到少量无机酸或大量的碱即降低活性，经煮沸则快速分解而变性。2．胰酶在制革生产中的应用一种常用的酶软剂（混合酶类）胰酶在原料皮脱灰后进行软化。胰酶中所含的弹性蛋白酶，可以分解弹性蛋白质，防止成革粒面消灭碎玻璃花纹，提高产品质量。胰酶软化时，对皮内一些蛋白质进行不同程度的消解，可除去皮内残存的脏物、毛根分解产物、纤维间质等，有利于皮纤维进一步分散，促进鞣剂与皮胶原的结合，以使成革具有松软性、丰满性和良好的透气性。胰酶中还含有一些脂肪酶可连续脱脂。3．为什么要测定胰酶活力？酶软化是制造软革很重要的操作，但胰酶浓度过高。皮内胶原纤维损失大，致使成革造成松面。为了达到正常的软化目的，必需在软化之前，测定含量即活力，以便正确确定其含量。4．定义胰酶能催化酪蛋白水解，而且胰酶量越多，被水解的酪蛋白就越多。肯定量的胰酶，促化的酪蛋白越多或生成的分解产物越多，其胰酶的活力越大。与蛋白酶活力不同的表示是，胰酶活力是用在肯定条件下底物的消耗量来表示。即：在肯定的PH和时间内1g胰酶能使酪蛋白完全水解的克数，即胰酶能使酪蛋白转化的力量。以倍数来计量：×克酪蛋白/g酶粉，叫×倍。出厂胰酶活度一般为25倍。二、测定原理;醋酸盐指示剂法（富尔德—哥劳斯法）把握胰酶的最适条件PH=8~9、T=40±1℃，用定量的酪蛋白和不同量的胰酶作用，水解肯定的时间后，用醋酸盐(或醋酸)指示剂调整反应液PH达到酪蛋白的等电点(PH=4.6)四周，未被水解的酪蛋白呈白色沉淀折出，而水解产物则不沉淀。据此，则可找到恰好使定量的酪蛋白完全水解的最小胰酶用量。依据胰酶的体积和浓度，即可计算出胰酶对酪蛋白的转化倍数，即胰酶的活力。三、试剂1．1.24∶50硼酸水溶液。（0.4mol/L）H3BO4PKa=9.24弱酸；2．0.1mol/LNaOH水溶液；3．硼酸盐液。弱酸—弱酸盐缓冲溶液；1.24∶50的H3BO420ml+2ml0.1mol/LNaOHPH=PKa+lg[H2BO3-]/H3BO3理论上PH=7.64实际上PH=6~74．13.6﹪NaAC水溶液（1.66mol/L）；5．60﹪醋酸溶液；6．醋酸盐缓冲液(指示剂)13.6﹪NaAC(1.66M)与60﹪HAC(10M)等体积混合PH=PKa+lg[NaAC]/[HAC]=3.95≌4四、操作1．配制底物酪蛋白精称0.2g细酪蛋白于小烧杯中，加20mlH2O，移取5ml0.1mol/LNaOH，40℃水浴上加热约30分钟，搅拌使之溶解，移入100ml容量瓶，加5mlH3BO3溶液，并定容到刻度。（PH=8.5）2．胰酶溶液的配制研钵中精称胰酶0.1g，（先加3~5滴研磨，再补加15~17滴）加1ml硼酸盐溶液，浸泡3~5分钟，研磨到无大块胰酶，转移定容到500ml容量瓶，用H2O定容。3．粗测取5支带刻度的干燥试管编号1234567移取酪蛋白溶液（ml）5555555移取胰酶溶液（ml）4.03.53.02.52.01.51.0移取蒸馏水（ml）1.01.52.02.53.03.54.0总体积（ml）10101010101010充分振荡摇匀，40℃水浴保温1hr加醋酸盐指示剂（10滴）    ↓↓↓依次滴加醋酸盐缓冲液0.5ml(10滴)，边滴边观看刚加入时丝状液体是否转为白色↓，若缓冲溶液到了试管底部还不消灭↓，说明酪蛋白已水解完全，有↓产生，证明酪蛋白没有全部水解，找出刚不产生↓的胰酶ml数。即使5ml酪蛋白完全水解的最少胰酶量。4．精确测定刚不↓～↓之间，梯度为0.1ml。如上表中2.0ml刚↓，则取2.5～2.0ml。编号123456移取酪蛋白溶液（ml）555555移取胰酶溶液（ml）2.52.42.32.22.12.0移取蒸馏水（ml）2.52.62.72.82.93.0总体积（ml）101010101010充分振荡摇匀，40℃水浴保温1hr滴加醋酸盐指示剂（10滴）  ↓↓↓↓操作同上，找出刚不产生↓的胰酶量记为U2。五、计算酪蛋白的g数（W酪/100）×525×W酪X=——————=—————————=———————（倍）胰酶的g数（W酶/500）×U2W酶×U2六、留意事项及争辩1．酪蛋白、胰酶、水按比例加入以后肯定要使其混合均匀，否则将造成试管底部的酪蛋白没有水解，使测定结果不精确     。2．水浴加热，使整个液面都进入到水中。3．试管的粗细程度。试管不行太粗或太细。即好摇匀又好观看。且粗细全都。4．配制好的胰酶和酪蛋白溶液在室温20℃以下，存放24hr有效，室温高于20℃时胰酶4hr有效，酪蛋白8hr有效。5．配制酪蛋白与蛋白酶活力测定时配制酪蛋白有什么不同，为什么？精称。由于是以底物的消耗量来表示活力的，要加入计算。操作条件缓和。加NaOH润涨，40℃水浴加热30`，作用条件缓和，防止酪蛋白自身水解过多，又没有方法校正。6．产生白色↓必需是现加现看，不能放置过久，否则酪氨酸也↓出来了。7．与酪蛋白测定相比使蛋白质沉淀的方法有什么不同？使蛋白质沉淀的方法：PH=PI；盐析；溶解度不同等。  复习碘量法一、概述利用I2的氧化性和I-的还原性进行滴定的方法。.I2在水中溶解度格外小，0.00133mol/L，没有I2直接溶在水中的。一般：I2+I-→I3-，增大溶解度。为了简洁起见，仍写作I2。I2+2e→I-E0=0.545VI2有比较弱的氧化性，能够与较强的还原剂作用。I-是中等程度的还原剂，能与氧化剂作用生成I2。直接碘法：碘滴定方法以碘液为滴定剂，滴定还原性的物质I2+SO2+2H2O==2I-+SO42-+4H+E0I2/I-=0.545VE0SO42–/SO2=0.17V，反应能够进行。由于象SO2这这类还原性的物质不是很多，而且I2即使生成三碘络离子，也是简洁挥发的，而使浓度转变，因此直接碘法应用不多。间接碘法：滴定碘法适用于电位比I2/I-高的氧化性物质，在肯定条件下，氧化性物质将I-氧化成氧化成I2，再用Na2S2O3滴定I2，依据Na2S2O3消耗量和浓度计算机氧化性物质的含量。碘起中间介质作用。基本反应：2I-—2e→I2I2+2Na2S2O3══Na2S4O6+2NaI能用于测定：Cu2+，CrO42-，Cr2O72-，IO3-，BrO3-，AsO33-，SbO43-，CLO-，CLO3-，NO3-，NO2，MnO4-，MnO2，H2O2等离子的测定，因此滴定碘法应用格外广泛。二、滴定碘法的条件1．介质选择。只能在中性或弱酸性介质中进行。在碱性介质能发生下列反应：碘的歧化反应:3I2+6OH-══IO3-+5I-+3H2OS2O32-+4I2+10OH-══2SO42-+8I-+5H2OIO3-+S2O32-+4OH-══2SO42-+I-+2H2O计算关系打乱。如此不能在碱性介质中进行。在强酸性溶液中发生下列反应：Na2S2O3歧化反应S2O32-+2H+==SO2+S↓+H2O4I-+4H++O2（空气中）====2I2+2H2O所以只能在中性或弱酸性介质中进行滴定碘法。2．防止I2挥发及I-被空气中的氧氧气的方法防止I2挥发：（1）加入过量的KI（一般加入理论值的2～3倍）生成三碘络离子。I2+I-→I3-；（2）反应在室温下进行。2I--2e→I2（3）使用碘量瓶，随时塞好塞子，滴定前用水冲洗瓶塞（碘挥发于瓶塞上）。滴定开头时不要猛烈摇动瓶子。防止I-被空气中的氧氧气：（1）避光放置，由于阳光照射可促进I-被O2氧化。（2）尽快滴定，不要人为的拉长滴定时间，削减I-与空气的接触时间。操作要连续。3．淀粉的使用方法接近到滴定终点时再加，否则淀粉吸附I2多且牢，变色不敏锐，测定误差大。4．Na2S2O3标准溶液的配制及标定以K2Cr2O7为基准物。Na2S2O3为什么不能直接配制？Na2S2O3细菌作用Na2SO3+S↓ Na2S2O3+CO2+H2O→NaHSO3+NaHCO3+S↓空气中2S2O32-+O2→2SO42-+2S↓因此，配制前蒸馏水要煮沸，冷却后再配制，杀死细菌，赶走O2、CO2。在配制好的溶液中加Na2CO3调成弱碱性，抑制细菌的生长，0.02g/100毫升，放置一个星期之后，待浓度稳定后，过滤标定。长期放置后也应过滤标定。基本反应：Cr2O72-+6I-+14H+═══2Cr3++3I2+7H2O3I2+6Na2S2O3═══3Na2S4O6+6NaI反应摩尔比：1molK2Cr2O73molI26molNa2S2O36（CV）Cr2O72-=（CV）Na2S2O36（CV）Cr2O72-CNa2S2O3=————————VNa2S2O36WK2Cr2O7×1000CNa2S2O3=——————————MK2Cr2O7VNa2S2O3    铬鞣剂铬含量的测定一、概述铬盐是使用最广泛的一种鞣剂。铬盐常以两种价态存在，即Cr3+与Cr6+，在鞣制过程中，只有三价碱式铬盐才具有鞣性，如Cr(OH)SO4。由铬盐配制成的铬鞣液其铬含量多少，对皮革质量有着重要影响，因此对所用铬鞣液必需分析其含量，以计算鞣剂用量。对于鞣后铬液同样也要进行分析。以观看在鞣制过程中，皮革吸取铬量的状况，并为废液循环使用供应依据，达到节省红矾和削减环境污染的目的。铬含量通常用Cr2O3g/l或Cr2O3%表示测定铬含量的方法一般用碘量法：Cr3+氧化剂Cr6+KII2Na2S2O3Cr3+翠绿色（C·V）Na2S2O3H+依据Na2S2O3的体积和浓度计算铬含量。依据所选用的氧化剂的不同可分为：Na2O2+2H2O→H2O2+2NaOH本质还是H2O2法，一回事。Na2O2法OH-介质H2O2法OH-介质KMnO4法H+介质 我们只介绍用得比较多的Na2O2法测定铬鞣剂中的铬含量。HO-二、Na2O2法测定原理H2O2 在碱性介质中Na2O2将Cr3+Cr6+为什么要选择碱性介质？在H+介质中：Cr2O72-+14H++6e═2Cr3++7H2OE0=1.33VH2O2+2H++2e═2H2OE0=1.77VO2+2H++2e═2H2O2E0=0.682VE0H2O2/H2O>E0Cr2O72-/Cr3+氧化 H2O2Cr3+Cr6+ E0Cr2O72-/Cr3+>E0O2/H2O2还原H2O2Cr6+Cr3+ 比较电位差：ΔE01=1.77-1.33=0.44V；ΔE02=1.33-0.682=0.648V；ΔE02>ΔE01。所以，在酸性介质中发生如下反应：还原H2O2Cr6+Cr3+ 氧化还在反应首先发生在电极电位最大的两个电对之间，故此在H+中发生的是H2O2作为还原剂将Cr6+还原成Cr3+，在试验室中配制少量的铬鞣液就是用这个原量，用H2O2还原红矾在H+成三价铬鞣液。在OH-介质中：CrO42-+2H2O+3e═CrO2-+4OH-E0=-0.12VHO2-+H2O+2e═3OH-E0=0.88VO2+H2O+2e═HO2-+2OH-E0=-0.08VH2O2═HO2-+H+OH-H2O比较电极电位：E0HO2-/OH->E0CrO42-/CrO2-ΔE0=0.88-（-0.12）=1.00V氧化Cr3+Cr6+H2O2结论Cr2O72-在H+中有较强的氧化性；CrO2-在OH-中有较强的还原性。所以在减性介质中H2O2可作为氧化剂将Cr3+氧化成Cr6+。上述争辩是从化学热力学观点争辩的，动力学上的因素未加考虑，但试验证明，酸性介质和碱性介质中的反应是的确存在的，说明动力学上是可行的。H2O2综上所述，我们选用在碱性介质中：Cr3+Cr6+反应如下：CrO2-+4OH--3e═CrO42-+2H2O×2HO2-+H2O+2e═3OH-×32CrO2-+3HO2-═2CrO42-+H2O+OH-3H2O2+3OH-═3HO2—+3H2O2CrO2-+3H2O2+2OH-═2CrO42-+4H2O2NaCrO2+3H2O2+2NaOH═2Na2CrO4+4H2O通常铬液以Cr(OH)SO4代表Cr（OH）SO4+NaOH═Cr（OH）3↓+Na2SO4+)Cr（OH）3+NaOH═NaCrO2+2H2O2Cr（OH）SO4+6NaOH═2NaCrO2+2Na2SO4+4H2O2NaCrO2+3H2O2+2NaOH═2Na2CrO4+4H2O2Cr（OH）SO4+3H2O2+8NaOH═2Na2CrO4+2Na2SO4+8H2ONa2O2氧化Cr（OH）SO4Na2O2+2H2O═H2O2+2NaOH×32Cr（OH）SO4+3H2O2+8NaOH═2Na2CrO4+2Na2SO4+8H2OCr（OH）SO4+3Na2O2+2NaOH═2Na2CrO4+2Na2SO4+2H2ONa2O2法测定铬鞣剂中铬含量的原理：用Na2O2(或在碱性介质中，用H2O2)将绿色的Cr3+铬液氧化成黄色的Cr6+的铬酸盐溶液，酸化后将碘化钾氧化释放出相当量的碘，再以Na2S2O3滴定释出的碘，以淀粉为指示剂，当蓝色消逝为终点，据Na2S2O3的用量及浓度计算出铬的含量。反应方程式：（1）氧化三价铬2Cr（OH）SO4+3H2O2+8NaOH═2Na2CrO4+2Na2SO4+8H2OCr（OH）SO4+3Na2O2+2NaOH═2Na2CrO4+2Na2SO4+2H2O（蓝绿色）（黄色）（2）多余的H2O2分解Ni2+2H2O22H2O+O2↑Δ（3）酸化2Na2CrO4+2HCL═Na2Cr2O7+2NaCL+H2O（黄色）（橙红色）（4）氧化I-Na2Cr2O7+14HCL+6KI═2CrCL3+3I2+6KCL+2NaCL+7H2O（橙红色）（茶褐色）（5）滴定2Na2S2O3+I2═Na2S4O6+2NaI留意溶液的颜色变化，及各溶液颜色所代表的物质。终点应为什么颜色？为什么？三、试剂Na2O2（浅黄色粉末）；1mol/L的NaO