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GE公司凝胶选择指南2011 GE Healthcare 凝胶选择指南凝胶选择指南 20112011 Sephadex Sepharose Sepharose CL Sepharose FF Superose Sepharose HP Superdex Sepharose Big beads Streamline Sepharose XL Capto Mabselect SuRe,Xtra Dextrin Sepharose HP Streptactin Sepharose HP Ni Sepharose HP Glu...

GE公司凝胶选择指南2011
GE Healthcare 凝胶选择指南凝胶选择指南 20112011 Sephadex Sepharose Sepharose CL Sepharose FF Superose Sepharose HP Superdex Sepharose Big beads Streamline Sepharose XL Capto Mabselect SuRe,Xtra Dextrin Sepharose HP Streptactin Sepharose HP Ni Sepharose HP Glutathione Sepharose HP Protein G Sepharose HP Protein A Sepharose HP SOURCE Mabselect Glutathione Sepharose 4B Sephacryl 1960 1970 1980 1990 2000 Mono beads HiTrapTM 20 years 内容 技术资料 HiScaleTM columns 如何选择凝胶 凝胶过滤预装柱 离子交换预装柱 亲和预装柱 疏水预装柱 反相预装柱 工艺开发用层析柱 SOURCE 高速低反压介质(填料) 凝胶过滤填料 离子交换填料 亲和层析填料 疏水层析填料 whatman反相层析填料 在位清洗和消毒 可自行装填的实验室用层析柱 直接回答实验室和工业规模的层析和过滤技术问题 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 1 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 2 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 3 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 5 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 6 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 8 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 11 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 12 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 14 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 16 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 17 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 20 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 23 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 26 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 27 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 28 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 29 ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 30 1 *注意:手册中标价为参考价格,本公司保留无需通知随时调整价格的权力,有关事宜请向您所在地 销售人员垂询。 为了满足近年生物技术进入产品化的收成期需要,GE Healthcare 相继推出了 许多特别适合生产应用的BioProcess 凝胶,它们的特点是: 高重复性:适用于实验室至大规模工业生产的工艺放大。 高物理、化学稳定性:易于清洗、消毒及再生,所以介质寿命特长。 高动力载量、流速快:易于装于生产柱内,缩短生产周期和次数。 每种凝胶均有完整的文献、档案及Regulatory Support File。 在下游纯化中,可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时,去除各种污染物。 《去除――内毒素》 ■内毒素又称热原。含脂肪A、糖类 和蛋白,是带负电的复合大分子。 内毒素的脂肪A 部份有很强的疏水性。 但在高盐下会凝集,无法上疏水层析。 利用疏水层析试验盒(17-1349-01)可选 择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。 内毒素与阴离子交换介质Q 或DE AE Sepharose Fast Flow有较强结合。可 洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或 NaOH去除。 利用CNBr 或NHS Sepharose FF 可偶联 内毒素底物如LAL,PMB,自动成亲合层 析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚 体,凝胶过滤层析可有效地将之去除。 《去除――蛋白中的核酸》 ■大量核酸增加样本黏度,令区带扩 张,反压增加,降低分辨率和流速。药 审和食检对核酸含量也有严格限制。 胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。 核酸带阴电荷,在初步纯化时利用阳 离子交换介质如STREAMLINESP, SP Sepharose Big Beads,SP 或CM Sepharose FF,SP SepharoseXL结合 目标蛋白,可除去大量核酸。 核酸在高盐下会和蛋白解离,疏水层 析介质很适合用来结合目标蛋白,在 纯化蛋白的同时去除核酸。 利用核酸酶将核酸切成小片断,用凝胶 过滤做精细纯化时便很容易去除了。 《去除――病毒和微生物》 ■病毒和微生物可成为病原,应尽量减 除。结合不同层析技术,使用注射用水, 用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消 毒和在位清洗,皆可避免污染物增加。 ■病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋 白电荷相反的S/D (solvent/detergent) 处理,使病毒失活,如Triton和Tween。 再用适当的离子交换介质如C M Sepharose FF 结合目标蛋白,去除S/D。 ■其它污染物可以改变pH 和离子强度 使其从目标分子中解离或失活,凝胶 过滤介质Superdex 及多种吸附性介质, SOURCE 都是很好的精细纯化介质, 可去除多种微量污染物。 BioProcess M ed ia 图1 HiScale™ 层析柱能使用 1/16” (HiScale™ 16 and 26) 和 1/8” Valco 手 拧接头, 能更方便管路的更换。 图3 和端盖配套的扳手可以作为附件 选定。在装柱时使用扳手能更方便 进行装填,特别是对于那些高反压 填料的装填。 图4 使用QuickLock设计的卡口能 更快更方便的控制Adapter的移动。 QuickLock由两个卡簧组成, 这样增 加了使用的便利性以及稳定性。 图 6 “anti-rotator plate”设计的引入 使柱头在进行轴向压缩运动时不会 旋转,这样能增加装柱时的安全性 并且能延长Adapter的寿命。 图5 HiScale™ 由两个Adapter构成, 这样能实现更宽范围的装柱高度 (0-200 mm, 5-400 mm)。 货号 28-9644-41 28-9644-24 28-9645-14 28-9645-13 28-9644-45 28-9644-44 产品 HiScale™ 16/20 HiScale™ 16/40 HiScale™ 26/20 HiScale™ 26/40 HiScale™ 50/20 HiScale™ 50/40 空柱尺寸 内径(mm) 16 16 26 26 50 50 柱高(mm) 20 40 20 40 20 40 柱床高度(cm) 0-20 8-40 0-20 13-40 0-20 14-40 体积(ml) 40 80 106 212 393 785 HiScale™柱子的很多创新性设计简化和改善了柱子的功能性。 HiScaleHiScaleTMTM columns columns Anti rotator plate 非螺旋式位移(径向位移) 2 网孔尺寸 20μm尼龙 操作压力 20bar 新产品新产品 HiScale™是一种新型的耐压达到20Bar的玻璃空柱系列产品,其主要 应用于工艺开发和实验室级别的层析,和经典的xk系列空柱的构成 了完整的产品线。HiScale™柱操作简便并具有一致的可重复性。该 系列柱更加适合于新一代高流速填料如Capto™和MabSelect™系列, 与ÄKTA平台配合,用于生物分子的工艺开发与毫克到克级别的实验 室制备,配合AKTA avant用于工艺开发,更是锦上添花。 产品特点如下: 耐受的 压力更高,最高至20bar,与现代的BioProcess™介质的完 美配合 设计的非旋转活塞装置可以实现轴向压缩的方式装柱,同时不会 引起连接管路打结 柱头QuickLock机制,使柱头的操作和清洗更快方便快捷 标配有两个柱头对装柱高度提供了较高的灵活性 能适用于目前所有使用GE Healthcare的 XK柱的方法和应用 图2 通过创新设计的端盖的旋动, 能很轻松的实现Adapter的轴向运 动,从而实现柱床的轴向压缩, 这样的设计将使柱子的装填更加便 利。 价格 (人民币) 询价 询价 询价 询价 询价 询价 如何选择凝胶 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各 物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 《测定――分子量、PI》 ■当目标蛋白的物理特性如分子量、PI 等都不 清楚时,可用PAGE电泳方法或层析方法加以 测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很 适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交 换介质在多个含不同pH缓冲液的试管中,可 简易地测出PI,并选择纯化用缓冲液的最佳pH。 《选择――层析方法》 ■若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解, 可尝试几种不同的纯化方法: 一] 使用最通用的凝胶过滤方法,选择分离范 围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据 分子量将样品分成不同组份。 二] 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合 目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标 蛋白的底物、受体等自制亲和介质,再用以 结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。 三] 体积大的样品,往往使用离子交换层析加 以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品,可再用疏 水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗 脱的原理,洗脱样品又可直接上离子交换等 吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化 流程中。 《纯化――大量粗品》 ■处理大量原液时,为避免堵塞柱子,一般 使用Sepharose Big Beads、SepharoseXL、Sepharose Fast Flow 等大颗粒离子交换介质。扩张柱床 吸附技术利用多种STREAMLINE介质,直接从 含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋 白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高 回收率,缩短纯化周期。 《纯化――硫酸氨样品》 ■硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品, 经处理过的样本处于高盐状态下,很适合直 接上疏水层析。若作离子交换,需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新的技术,随着介 质种类不断增多,渐被融入各生产工艺中。利 用HiTrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit 可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳 的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或 直接上其它吸附性层析。 《纯化――糖类分子》 ■固化外源凝集素如刀豆球蛋白、花生、大 麦等凝集素,可结合碳水化合物的糖类残基, 很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚 至亚细胞细胞器,纯化糖蛋白等。两种附 上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介 质,专为俘获整个细胞或大复合物,如膜囊等。 《纯化――膜蛋白》 ■膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。 离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者, 避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介 质,籍此除去去污剂。非离子性去污剂可以 疏水层析除去。新推出的膜蛋白纯化试剂盒 可轻松筛选出适合于组蛋白标签膜蛋白溶解 和纯化的去污剂。通过His Mag SepharoseNi 磁珠快速纯化得到的小包装细胞膜可溶解在 不同的去污剂中,溶解后可使用相同的去污 剂直接进行纯化。通过一系列方法如蛋白印 迹、凝胶过滤、或光散射可对结果进行分析 和评价。 《纯化――单抗、抗原》 ■单抗多为IgG。来源主要是腹水和融合瘤 培养上清液。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白 和宿主抗体等。Protein G和Protein A对IgG的 Fc区有专一性亲和作用,能一步纯化各种不 同来源的IgG。重组蛋白A 介质rProtein A Sepharose FF对IgG有较高的载量和专一性, 基团脱落更少。脱落的rProtein A 用离子交 换Q Sepharose HP 、Capto Adhere或凝胶过 滤Superdex 200,很容易去除。 2005年新推出了的MabSelect,是第一个使 用高流速琼脂糖凝胶 ( High flow Agarose) 作 为骨架的新型蛋白A层析介质,其刚性和传 质新能大大优于传统Fast Flow填料,使用更 高的流速而保持更高的载量,专为大规模抗 体纯化而设计,适合快速高效的进行抗体生 产和放大,已经成为单抗纯化和放大的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 介质。 Mabselect Sure 是唯一耐强碱的蛋白A亲和层 析介质,可以耐受0.1~0.5N的氢氧化钠,使 用高达0.5N的氢氧化钠进行在位清洗/消毒大 大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉 污染的风险,清洗效果更好,有利于延长介 质使用寿命,同时也大大降低了CIP/SIP的成本。 Mabselect Xtra 是高载量的亲和层析介质, 其动态载量超过41mg/ml介质(停留时间2.4 min)。在工艺生产过程中可以有效减少层析 柱的体积,从而降低生产成本。 为了进一步减少抗体分离纯化步骤,提高特 定杂质的去除效率,以满足日益增长的治疗 用抗体的生产需要,2007年初,GE Healthcare 推出了新型混合作用模式的强阴离子交换介 质: CaptoAdhere介质,专为治疗用抗体的分 离纯化而设计,其配基 ( N - B e n z y l - N - methylethanolamine) 综合了阴离子交换、氢 键和疏水等多种复杂的作用方式,对宿主蛋 白、脱落的蛋白A和聚集体有非常独特而高 效的去除能力。MabSelect SuRe的卓越性能 以及Capto Adhere的复合多除杂功能,使得 抗体纯化工艺由经典的三步层析(Mabselect SuRe+Capto S+Capto Q)转变为两步层析 (Mabselect SuRe+Capto Adhere)得以实现,这 样仅用两步层析就可以得到符合药用级质量 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 的高纯度抗体产品,大大缩短了工艺时 间,提高生产效率,同时增加了收率,降低 了生产成本。 ■血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处 理,在培养前除去IgG。 ■疏水层析Phenyl Sepharose HP 亦很适合纯 化IgG。可有效去除抗体中的聚集体。宿主 抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200 在精细纯化中去除。 ■纯化IgG 抗原最有效的方法是用活化偶联 介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF 偶联IgG,再进一步获取IgG 抗原。 ■ HiTrap IgM 是用来纯化融合瘤细胞培养的 单抗IgM,结合量达5mg IgM。HiTrap IgY 是 专门用来纯化IgY,结合量达100mg 纯IgY。 ■ KappaSelect 是专为纯化 Fab(kappa)片断 而设计的亲和介质,能有效地捕获 Fab,获 得高纯度和高产量的 Fab。 ■ HiTrap Igselect是特异性纯化人的IgG。 3 《纯化――重组蛋白》 ■重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构 想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物,扩 张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分 离。GE Healthcare提供三个快速表达、一步 纯化的融合系统。 一] GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽 S转移酶一起表达,然后利用Glutathione Sepharose 4B/4FF 作亲和层析纯化,再利用凝血酶或因 子Xa 切开。 二] 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A 的IgG结合部位融合在一起表达,以IgG Sepharose 6 FF 纯化。 三] 含组氨酸标记 (Histidine-tagged) 的融合蛋 白可用Chelating Sepharose /IMAC Sepharose 螯合Ni2+ 金属,在一般或变性条件 (8M 尿素) 下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap 试剂 盒提供整套His-Tag 蛋白的纯化方法。 《纯化――包涵体蛋白》 ■包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿 素中。高化学稳定性的Superose 12 及Sepharose 6FF 凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯 化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然 构象。Superdex 75、Q Sepharose FF 和Phenyl Sepharose FF 分别被发现有助包涵体蛋白的 复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高,复 性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质 很适合纯化复性前的粗品,并可以1M NaOH 重生。此方法纯化后的包涵体蛋白,复性回 收率明显提高。 《包涵体蛋白固相复性》 ■近年许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件 下固定(吸附)在层析介质上,一般用各种 Sepharose FF离子交换层析介质。去除变性剂 后,蛋白在介质上成功复性,再将复性好的蛋 白洗脱下来。固相复性避免了一般复性过程中 蛋白质聚体的形成,所以复性得率更高,而且 无需大量稀释样品,并将复性和初纯化合二 为一,大大节省时间及提高回收率。 ■固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating 金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表 达的组氨酸融合蛋白;以HiTrap Heparin肝素 亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的 含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预 装柱均可反复多次重复使用,比一般试剂盒 更方便、耐用。 《纯化――中草药有效成分》 ■中药的化学成分极其复杂。传统中药多是 煎熬后服用,有效成分多较为亲水,包括生 物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、 肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析 方法。如离子交换、分子筛、反相层析,更 容易分离到单一活性成分。Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶同时具备吸附性层析和分子筛功 能,例:如用甲醇分离黄酮甙,三糖甙先被 洗下来,二糖甙其次,单糖甙随后,最后 是甙元。Sephadex LH-20 可使用水、醇、丙酮、 氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物 的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、 萜类、甾类等。 如何选择凝胶 4 此 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 中常用缩写 柱子类型常用缩写: GL:玻璃材质, Tricorn柱形式 PE:Peek材质,Tricorn柱形式 ST:不锈钢柱 产品名常用缩写解释: Pg:Prep grade,制备级 HP:High Performance,高性能,填料平均颗粒大小约34um,颗粒细能带来高分辨率的分离纯化。 FF:Fast Flow,快流速,填料平均颗粒大小约90um,较HP颗粒粗,具有良好的分辨率及轻松实现规模扩大的分离纯化。 HR:High Resolution,高分辨率。 XL:高载量 Sephacryl S-1000 SF:Superfine,表示填料颗粒超细 Sephadex G-25(S,F,M):表示填料颗粒大小不同;S:Superfine,超细颗粒;F:Fine,细颗粒;M:Medium,中等颗粒大小; HS:High Sub,高取代,配基密度高 LS:Low Sub,低取代,配基密度低 ■生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐, HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结 构非常近似的生物碱。相反,黄酮、蒽醌、 皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中,在 HiTrap Q 阴离子交换柱上分离效果良好。 ■一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex, Sephacryl。若分子量在600KD 以下,并需更 高分辨率,可选择新一代的Superdex。一般 植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多 糖。综合利用分子筛及离子交换层析有助进 一步获各组份纯品。另外,多糖药物需去除 可引起过敏反应的蛋白质,传统Sevag方法 用丁醇脱蛋白需反复数十次。阴阳离子交换 法可以一、两步快速去除多糖中残存的蛋白 质。SOURCE 5、15、30RPC反相层析也很适 合各种中药有效成分的检测、分离和放大制 备。由于中药的成分非常复杂,SOURCE 反 相层析可用范围为pH1-14,并可用1M NaOH, 1M HCL 清洗、再生。比传统硅胶反相层析更 易于工艺优化及在位清洗,寿命也更长。 《纯化――肽类》 ■肽类的来源有天然萃取,合成肽和重组肽 三种。肽容易被酶降解,但可从有机溶剂或 促溶剂中复性,所以多以高选择性的反相层 析如SOURCE 30RPC、SOURCE 1 5RPC、 SOURCE 5RPC、Whatman的HPLC柱,或离子 交换Minibeads、Monobeads 作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过 滤预装柱,能配合反相层析做出更精美的肽 图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤 Superdex 30 PG。 《纯化――核酸、病毒》 ■核酸的纯化用于去除影响测序或PCR 污染 物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬 菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸 大分子,和质粒DNA 一样,可用分离大分子 的Sephacry S-1000 SF、Superose 或Sepharoce 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白,再配合离子 交换如Mono Q、SOURCE Q 分离核酸。 《纯化――寡核苷酸》 ■寡酸苷酸多应用在反义 (anti-sense) DNA、 RNA 测序、PCR 和cDNA 合成等研究。合成 后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的 Mono Q 或快速低反压的SOURCE Q 在pH12 下可去除副产物,并避免凝集和保护基的脱 落。载量大大高过反相层析,可用做大量制 备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱 ProRPC去除。 《脱盐、小分子去除》 ■使用凝胶过滤介质Sephadex G10,G15,G25, G50等去除小分子,效率高,处理量可达床体 积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的 洗脱液,就可以去除该填料分离范围上限以下 的小分子,简单直接。由于只是去除小分子, 柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分 种至半小时完成。Sephadex G25 系列介质专 为蛋白质脱盐而设计,预装柱H i T r a p Desalting(5ml) 可用针筒操作。HiPrep Desalting (26ml)可在数分钟为多至10ml 样品脱盐。 《疫苗纯化》 ■使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗, 去除培养基中的杂蛋白,处理量可大于床体积 10%。柱高一般40-70cm,整个过程约半至一小 时。目前使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂 犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗 等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR, 如甲肝疫苗等。 《纯化――血浆蛋白》 ■阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常 广泛,结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化 后期用DEAE saphrose FF或者新一代的Capto DEAE吸附二聚体等杂质从而达到提高产品 纯度的目的,同样也可以在白蛋白纯化过程 中使用阴离子交换吸附PKA以及触珠蛋白,在 凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的MacroCap Q 可以增加载量和回收率,使用传统的DEAE sephardex A-50纯化凝血酶原复合物(PCC) 也是非常经典的方法。亲和层析在血浆蛋白 纯化中的应用主要有:使用heparin sepharose 6FF纯化AT III和凝血因子IX,使用VIII select纯化 凝血因子VIII,使用a-1Antitrypsin Select纯化 a-1-antitrypsin,使用Mabselect系列捕获免 疫球蛋白。 《抗生素聚合物分析》 ■中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲 松钠需要找出聚合物占产品的白分比,规定 使用SephadexG10 凝胶过滤法测定。 《纯化――基因治疗用病毒载体》 ■ SOURCE 15Q 《纯化――基因治疗用质粒》 ■ Q Sepharose XL,SOURCE 15Q,STREAMLINE Q, Sephacryl S500,Plasmidselect 凝胶过滤预装柱 5 17-5176-01 17-5174-01 28-9205-04 17-5175-01 28-9065-61 17-1139-01 17-1140-01 17-1068-01 17-1070-01 17-1069-01 17-1071-01 17-5173-01 17-5172-01 17-1165-01 17-1194-01 17-1166-01 17-1195-01 17-1167-01 17-1196-01 28-9356-04 28-9356-05 28-9356-06 28-9356-07 17-1408-01 17-5087-01 17-5087-02 17-0851-01 1.8 1.8 1.8 1.5 1.5 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 3 1.5 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.3 0.15 0.15 - Superdex Peptide 10/300 GL Superdex 75 10/300 GL Superdex 75 5/150 GL Superdex 200 10/300 GL Superdex 200 5/150 GL HiLoad 16/60 Superdex 30 pg HiLoad 26/60 Superdex 30 pg HiLoad 16/60 Superdex 75 pg HiLoad 26/60 Superdex 75 pg HiLoad 16/60 Superdex 200 pg HiLoad 26/60 Superdex 200 pg Superose 12 10/300 GL Superose 6 10/300 GL HiPrep 16/60 Sephacryl S-100 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-100 HR HiPrep 16/60 Sephacryl S-200 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-200 HR HiPrep 16/60 Sephacryl S-300 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-300 HR HiPrep 16/60 Sephacryl S-400 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-400 HR HiPrep 16/60 Sephacryl S-500 HR HiPrep 26/60 Sephacryl S-500 HR HiTrap Desalting 5 x 5 ml (Sephadex G-25 S) HiPrep 26/10 Desalting 1 x 53 ml (Sephadex G-25 F) HiPrep 26/10 Desalting 4 x 53 ml Pre-packed Disposable PD-10 (30 支) (Sephadex G-25 M) 10/300 10/300 5/150 10/300 5/150 16/600 26/600 16/600 26/600 16/600 26/600 10/300 10/300 16/600 26/600 16/600 26/600 16/600 26/600 16/600 26/600 16/600 26/600 16/25 26/100 26/100 14.7/50 24 24 3 24 3 120 320 120 320 120 320 24 24 120 320 120 320 120 320 120 320 120 320 5 53 53 8.3 13-15 11-15 11-15 13-15 13-15 22-44 22-44 22-44 22-44 22-44 22-44 8-12 11-15 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 25-75 15-90 90 90 50-150 100-7,000 3,000-70,000 3,000-70,000 10,000-600,000 10,000-600,000 <10,000 <10,000 3,000-70,000 3,000-70,000 10,000-600,000 10,000-600,000 1,000-300,000 5,000-5,000,000 1,000-100,000 1,000-100,000 5,000-250,000 5,000-250,000 10,000-1,500,000 10,000-1,500,000 20,000-8,000,000 20,000-8,000,000 40,000-20,000,000 40,000-20,000,000 1,000-5,000 1,000-5,000 1,000-5,000 1,000-5,000 肽及其它小分子的半制 备和高性能分析纯化 蛋白、肽、核苷酸及其 它小分子的半制备和高 性能分析纯化 蛋白、DNA 片段及其它 小分子的半制备和高性 能分析纯化 肽及其它小分子的制备 纯化 蛋白、肽、核苷酸及其 它小分子的快速制备 纯化 蛋白、DNA 片段及其 它小分子的快速制备 纯化 蛋白、肽、寡核苷酸及 多糖的半制备和高性能 分析纯化 蛋白、肽、寡核苷酸、 核酸及多糖的半制备 和高性能分析纯化 蛋白及肽的制备纯化 蛋白,如:血清蛋白(白 蛋白)的制备纯化 蛋白,如:膜蛋白和血清 蛋白(抗体)的制备纯化 多糖、具延伸结构的大分 子如蛋白多糖、脂质体< 25,000 bp DNA 限制片段 < 25,000 bp DNA 限制片段 如DNA 限制片段 快速脱盐/缓冲液交换 制备和高低分子量的 分离 快速脱盐/缓冲液交换 制备和高低分子量的 分离 一次性组脱盐/缓冲液 交换制备 1.2 1.5 0.7 1 0.8 1.7 4.4 1.7 4.4 1.7 4.4 1.5 1 1 2.7 1 2.7 1 2.7 1 2.7 1 2.7 15 40 40 - 18417 18306 18955 18306 13643 26747 47124 26747 47124 26747 47124 18306 18306 5740 7207 5740 7207 5740 7207 6733 8972 6733 8972 2322 7132 22931 2340 货号 预装柱 内径× 床高 (mm) 柱 体积 (ml) 平均 颗粒 (μm) 球蛋白 分离范 围(D) 特性 耐反压 (MPa) 最高 流速 (ml/min) 价格 (人民币) 一]Superdex 预装柱高分辨率首选! 二]Superose 预装柱分离范围最宽广! 三]Sephacryl 预装柱经济高效,选择最多! 四]Sephadex 预装柱脱盐、缓冲液交换首选! 17-5177-01 17-5178-01 17-5166-01 17-5167-01 17-5168-01 17-5169-01 17-5170-01 17-5171-01 17-5179-01 17-5180-01 17-1177-01 17-1179-01 17-5181-01 17-1178-01 17-1180-01 17-5182-01 17-1153-01 17-1154-01 17-1151-01 17-1152-01 17-1064-01 17-1066-01 17-1137-01 17-1138-01 17-6002-33 17-5162-01 17-5163-01 17-5053-01 17-5156-01 17-5054-01 17-5157-01 17-5055-01 17-5154-01 离子交换预装柱 货号 预装柱 内径× 床高 (mm) 柱 体积 (ml) 平均 颗粒 (μm) 每毫升 载量 应用/特性 耐反压 (MPa) 最高 流速 (ml/min) 价格 (人民币) Mini QTM 4.6/50 PE Mini STM 4.6/50 PE Mono QTM 5/50 GL Mono Q 10/100 GL Mono STM 5/50 GL Mono S 10/100 GL Mono PTM 5/50 GL Mono P 5/200 GL Mono Q 4.6/100 PE Mono S 4.6/100 PE RESOURCE Q 1 ml RESOURCE Q 6 ml SOURCE 15Q 4.6/100 PE RESOURCE S 1 ml RESOURCE S 6 ml SOURCE 15S 4.6/100 PE HiTrap Q HP, 5 × 1 ml HiTrap Q HP, 5 × 5 ml HiTrap SP HP, 5 × 1 ml HiTrap SP HP, 5 × 5 ml HiLoad 16/10 Q Sepharose HP HiLoad 26/10 Q Sepharose HP HiLoad 16/10 SP Sepharose HP HiLoad 26/10 SP Sepharose HP HiTrap lEX Selection Kit HiTrap ANXFF hS 5 × 1 ml HiTrap ANXFF hS 5 × 5 ml HiTrap Q FF 5 × 1 ml HiTrap Q FF 5 × 5 ml HiTrap SP FF 5 × 1 ml HiTrap SP FF 5 × 5 ml HiTrap DEAE FF 5 × 1 ml HiTrap DEAE FF 5 × 5 ml 4.6/50 4.6/50 5/50 10/100 5/50 10/100 5/50 5/200 4.6/100 6.4/30 16/30 4.6/100 6.4/30 16/30 4.6/100 7/25 16/25 7/25 16/25 16/100 26/100 16/100 26/100 7/25 7/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 0.83 0.83 1 8 1 8 1 4 1.7 1 6 1.7 1 6 1.7 1 5 1 5 20 55 20 55 1 1 5 1 5 1 5 1 5 3 3 10 10 10 10 10 10 10 15 15 15 15 15 15 34 34 34 34 34 34 34 34 90 90 90 90 90 90 90 90 90 6 mg 淀粉酶 5 mg 核糖核酸酶 65 mg HSA 65 mg HSA 75 mg lgG 75 mg lgG 5-10 mg 球蛋白 5-10 mg 球蛋白 65 mg HSA 75 mg HSA 45 mg BSA 45 mg BSA 45 mg BSA 80 mg 溶菌酶 80 mg 溶菌酶 80 mg 溶菌酶 70 mg BSA 70 mg BSA 55 mg 核糖核酸酶 55 mg 核糖核酸酶 60 mg BSA 60 mg BSA 55 mg 核糖核酸酶 55 mg 核糖核酸酶 7 支装 43 mg BSA 120 mg HSA 70 mg 核糖核酸酶 47 mg BSA 极高分辨、微量纯化和分析 极高分辨、微量纯化和分析 纯化和分析 纯化和分析 纯化和分析 纯化和分析 蛋白及肽的快速高分辨率 层析聚焦分离;适合作阴离 子交换(弱阴离子交换) 蛋白及肽的快速高分辨率 层析聚焦分离 纯化和分析 高速、高载量;适合放大 高速、高载量;适合放大 高速、高载量;适合放大 高速、高载量;适合放大 高速、高载量;适合放大 高速、高载量;适合放大 少量样品纯化,可使用注射器 少量样品纯化,可使用注射器 少量样品纯化,可使用注射器 少量样品纯化,可使用注射器 小/中试样品分离 小/中试样品分离 小/中试样品分离 小/中试样品分离 适合作工艺优化,凝胶选择 含有7 个1 ml 的预装柱: HiTrap Q FF、HiTrap SP FF、 HiTrap CM FF、HiTrap DEAE FF、HiTrap ANX FF (high sub)、 HiTrap Q XL、HiTrap SP XL 适合作工艺优化及实验室规 模蛋白制备,弱阴离子交换 适合作工艺优化及实验室规 模蛋白制备 同上 同上 2 2 3 10 3 10 3 2 3 10 60 5 10 60 5 4 20 4 20 5 13 5 13 4 4 20 4 20 4 20 4 20 18 18 4 4 4 4 4 4 4 1.5 1.5 4 1.5 1.5 4 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 3-11; [1-14] 3-13; [1-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 2-12; [1-14] 2-12; [1-14] 2-12; [1-14] 2-12; [1-14] 2-12; [1-14] 2-12; [1-14] 2-12; [2-14] 2-12; [2-14] 4-13; [3-14] 4-13; [3-14] 2-12 [1-14] 2-12 [1-14] 4-13 [3-14] 4-13 [3-14] - 3-10; [2-14] 2-12; [1-14] 4-13; [3-14] 2-12; [1-14] 15538 15538 16551 61576 16551 61576 18306 21370 23377 23377 10560 33648 14163 10560 33648 14163 1412 3492 1412 3492 22931 28410 22931 28410 3222 1672 3733 1672 3733 1672 3733 1672 3733 pH稳定性 工作 [清洗] 6 一]Minibeads 预装柱 超高分辨率分离 二]MonoQ 预装柱 高分辨率半制备 三]Source 15 预装柱 高流速半制备 四]Q、SP Sepharose High Performance 预装柱 方法探索和浓缩样品 五]SP、Q、CM、DEAE、ANX Sepharose Fast Flow 预装柱 快速初步纯化易于放大 离子交换预装柱 货号 预装柱 内径× 床高 (mm) 柱 体积 (ml) 平均 颗粒 (μm) 每毫升 载量 应用/特性 耐反压 (MPa) 最高 流速 (ml/min) pH稳定性 工作 [清洗] 7 17-5056-01 17-5155-01 17-5158-01 17-5159-01 17-5160-01 17-5161-01 28-9365-43 28-9365-44 28-9365-38 28-9365-40 28-9365-41 28-9365-42 28-9343-88 11-0013-02 11-0013-03 28-9078-09 17-5441-22 17-5441-23 28-9165-37 28-9165-40 11-0032-73 11-0032-75 28-4058-44 28-4058-46 HiTrap CM FF 5 × 1 ml HiTrap CM FF 5 × 5 ml HiTrap Q XL 5 × 1 ml HiTrap Q XL 5 × 5 ml HiTrap SP XL 5 × 1 ml HiTrap SP XL 5 × 5 ml HiPrep 16/10 Q FF HiPrep 16/10 SP FF HiPrep 16/10 Q XL HiPrep 16/10 SP XL HiPrep 16/10 DEAE FF HiPrep 16/10 CM FF HiTrap Capto IEX selection Kit HiTrap Capto Q 5 × 1 ml HiTrap Capto Q 5 × 5 ml HiTrap Capto ViralQ, 5 × 5 ml HiTrap Capto S, 5 × 1 ml HiTrap Capto S, 5 × 5 ml HiTrap Capto DEAE, 5 × 1 ml HiTrap Capto DEAE, 5 × 5 ml HiTrap Capto MMC 5 × 1 ml HiTrap Capto MMC 5 × 5 ml HiTrap Capto adhere 5 × 1 ml HiTrap Capto adhere 5 × 5 ml 7/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 16/100 16/100 16/100 16/100 16/100 16/100 7/25 7/25 16/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 7/25 16/25 1 5 1 5 1 5 20 20 20 20 20 20 1 1 5 5 1 5 1 5 1 5 1 5 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 90 75 75 75 75 50 mg 核糖核酸酶A > 130 mg BSA > 160 mg 溶菌酶 120 mg HSA 70 mg核糖核酸酶A > 130 mg > 160 mg溶菌酶 110 mgHSA 50 mg核糖核酸酶 动态载量大于100 mg BSA/ml胶 动态载量大于120 mg 溶菌酶/ml胶 动态载量大于90 mg 卵清蛋白/ml胶 动态载量在30 mS/cm 时大于45 mg BSA 同上 同上 同上 同上 蛋白的快速半制备/制备分离; 同上 同上 同上 高流速、高载量 高流速、高载量 高流速、高载量 耐受高盐 多位点,用作抗体穿透,一步 吸附HCP,DNA 等杂质 蛋白的初步分离纯化 包含5 个1 ml 的预装柱: HiTrap Capto Q、HiTrap Capto S、 HiTrap Capto DEAE、HiTrap Capto MMC、HiTrap Capto adhere 4 20 4 20 4 10 10 10 10 10 10 10 4 20 20 4 20 4 20 4 20 4 20 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.15 0.15 0.15 0.15 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 4-13; [2-14] 3-13; [2-14] 4-13; [3-14] 2-12; [4-13] 3-13; [2-14] 3-13; [3-14] 2-12; [1-14] 4-13; [2-14] 2-14 [2-12] 0.3 4-12 [4-12] 2-9 [4-12] 2-14 [2-12] 3-12 [2-14] 六]Capto 预装柱 满足高流速、高载量初步纯化的需要 HiTrap Capto IEX 选择试剂盒选择试剂盒 HiTrapTM Capto IEXTM Selection Kit 包括5 个1 ml的预装柱: Capto Q (强阴离子交换)、Capto S (强阳离子交换)、Capto DEAE (弱阴离子交换)、Capto MMC (多模式弱阳离子交换) 和 Capto adhere (多模式强阴离子交换)。 Capto 基架:基架:保留琼脂糖基架的亲水特性,增加刚性 高流速下的高载量可以提高生产能力 质量传递快可以增加回收率 处理大体积样品时可以缩短工艺时间 Capto MMC和Capto adhere由于与目标分子的多模式作用而 与传统的离子交换填料有不同的选择性。除了离子交换作用 外,此两种填料与目标物还存在疏水和氢键相互作用。 + O O S OH OH NH O O O _ O O N + OH OH OH+ Capto MMC ―― 多模式新型弱阳离子交换填料 蛋白可以高盐的条件下吸附 新的选择性 Capto adhere ―― 多模式新型强阴离子交换填料 有效除去: 聚合物/二聚体 DNA,病毒,脱落的Protein A 宿主蛋白 内毒素 基架 75 mm高流速琼脂糖 多模式弱阳离子交换配基 基架 75 mm高流速琼脂糖 多模式
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