中华人民共和国国家标准
GB 5413.31—2013
2013-11-29 发布 2014-06-01 实施
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定
GB 5413.31—2013
I
前 言
本标准代替 GB/T 5413.31—1997《婴幼儿配方食品和乳粉 脲酶的定性检验》。
本标准与 GB/T 5413.31—1997相比，主要变化如下：
——修改了标准的名称；
——增加了尿素溶液的贮存条件；
——增加了纳氏试剂的贮存条件；
——增加了判定结果的时限规定。
GB 5413.31—2013
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食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定
1 范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中脲酶的定性检验。
2 原理
脲酶在适当酸碱度和温度条件下，催化尿素转化成碳酸铵。碳酸铵在碱性条件下生成氢氧化铵，
与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用生成棕色的碘化双汞铵。
3 试剂和材料
注：除非另有说明，本方法所用试剂均为
分析
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纯，水为 GB/T 6682规定的三级水。
3.1 试剂
3.1.1 尿素（H2NCONH2）。
3.1.2 钨酸钠（Na2WO4·2H2O）。
3.1.3 酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）。
3.1.4 硫酸（H2SO4）。
3.1.5 磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
3.1.6 磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.7 碘化汞（HgI2）。
3.1.8 碘化钾（KI）。
3.1.9 氢氧化钠（NaOH）。
3.2 试剂配制
3.2.1 尿素溶液（10 g/L）：称取尿素 5 g，溶解于 500 mL水中。保存于棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏，
有效期为 1个月。
3.2.2 钨酸钠溶液（100 g/L）：称取钨酸钠 50 g，溶解于 500 mL水中。
3.2.3 酒石酸钾钠溶液（20 g/L）：称取酒石酸钾钠 10 g，溶解于 500 mL水中。
3.2.4 硫酸溶液（50 mL/L）：吸取硫酸 25 mL，溶解于 500 mL水中。
3.2.5 磷酸氢二钠溶液：称取无水磷酸氢二钠 9.47 g，溶于 1000 mL水中。
3.2.6 磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾 9.07 g，溶于 1000 mL水中。
3.2.7 中性缓冲溶液：取磷酸氢二钠溶液 611 mL，磷酸二氢钾溶液 389 mL，两种溶液混合均匀。
3.2.8 碘化汞-碘化钾混合溶液：称取红色碘化汞55 g，碘化钾41.25 g，溶于250 mL水中。
GB 5413.31—2013
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3.2.9 纳氏试剂： 称取氢氧化钠144 g溶于500 mL水中，充分溶解并冷却后，再缓慢地移入1000 mL
的容量瓶中，加入碘化汞-碘化钾混合溶液250 mL，加水稀释至刻度，摇匀，转入试剂瓶内，静置后，
用上清液。此试剂需棕色瓶保存，冰箱中冷藏，有效期为1个月。
4 仪器和设备
4.1 电子天平：感量为 0.01 g。
4.2 旋涡振荡器。
4.3 恒温水浴锅：40℃±1℃。
5 分析步骤
取试管甲、乙两支，各称入 0.10 g试样，再吸入 1 mL水，振摇 0.5 min（约 100次）。然后分别
吸入 1 mL中性缓冲溶液。向甲管（样品管）吸入 1 mL尿素溶液，再向乙管（空白对照管）吸入 1 mL
水。两管摇匀后，置于 40℃±1℃水浴中保温 20 min。从水浴中取出两管后，各吸入 4 mL水，摇匀，
再吸入 1 mL钨酸钠溶液，摇匀，吸入 1 mL硫酸溶液，摇匀，过滤，收集滤液备用。取上述滤液 2 mL，
分别吸入到二支 25 mL具塞的比色管中。再各吸入 15 mL水，1 mL酒石酸钾钠溶液，和 2 mL纳氏试
剂，最后用水定容至 25 mL，摇匀。5 min内观察结果。
6 分析结果的
表
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述
分析结果按表 1进行判断。
表 1 结果的判断
脲酶定性 表示符号 显示情况
强阳性 ++++ 砖红色混浊或澄清液
次强阳性 +++ 桔红色澄清液
阳性 ++ 深金黄色或黄色澄清液
弱阳性 + 淡黄色或微黄色澄清液
阴性 － 样品管与空白对照管同色或更淡
7 检出限
该方法为定性法，检出限为 0.7 U。
浙公网安备 33021202002483