蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明转自：HYPERLINK"http://www.bioask.cn/html/980.html"http://www.bioask.cn/html/980.html在与蛋白相关的
检测
工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训
中，最关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中，我们要经常加入以防止。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，也是必不可少的。本文详细
总结
初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf
了常用的PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin胃、EDTA-Na2等以及NaF氟化钠、Na3VO4原矶酸钠、Beta-glycerophosphate甘油磷酸钠、Na2P2O4焦磷酸钠等的溶液配制、贮存液与工作液浓度及保存条件。一、蛋白酶抑制剂PMSF:特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。在水溶液中不稳定。在100%异丙醇，25C时稳定至少9个月。分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。溶解性：高度溶于水(1mg/ml)。4C一周稳定，分成小份，冷冻在-20C至少6个月。分子量：C20H38N6O41/2H2SO4:475.6C20H38N6O4x1/2H2SO4XH2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5ug/ml(1mM)。Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子X。溶解性：易溶于水(10mg/mI)或缓冲液(例如0.1Mtris,pH8.0)。pH约7~8的溶液在4C可保存1周，分装保存在-20C可至少保存6个月。避免反复冻融，pH>12.8的碱性环境可使其灭活。分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3uM)。Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇，过夜溶解可达到1mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。4C稳定一周，分装储存于-20C时可保存1个月。分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7卩g/ml(1pM)EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4C稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5mg/ml(0.5~1.3mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。二、NaFNaF是针对pSer/Thr氟化钠溶解性：溶于水分子量：41.99使用：贮存液5M，工作浓度10~20mM。三、Na3VO4Na3VO4是针对pTyr原矶酸钠分子量：183.91溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矶酸钠。原矶酸钠需要经过处理以后才能成为激活的矶酸钠，激活的矶酸钠才具有抑制去磷酸化的作用。原因：原钒酸钠有一定程度的聚合，使用前要激活使之变成单体才有最大抑制效价Na2P2O4焦磷酸钠溶解性：溶于水分子量：265.9使用：贮存液100mM，工作浓度1-2mM。Beta-glycerophosphate甘油磷酸钠溶解性：溶于水分子量：306.11使用：贮存液100mM,工作浓度25mM。使用：贮存液100mM,工作浓度1mM,-20度保存。原矶酸钠变成激活的矶酸钠的过程是：.100mM原矶酸钠激活储存液配制：取0.183克的原矶酸钠溶解于10ml的双蒸水中，加酸调节PH至10(颜色变黄)。.煮至无色.室温冷却.重调pH至10.重复⑴⑵⑶⑷直至溶液保持无色，并且pH稳定于10,分装100ul/管，每10ml裂解液加一管(1:100稀释)。
浙公网安备 33021202002483