革兰氏阴性球菌课件

TaizhouUniversity第七章革兰阴性球菌奈瑟菌属Neisseria医学检验系TaizhouUniversity脑膜炎奈瑟菌N.meningitismeningococcusTaizhouUniversity奈瑟菌属（Neisseria） 奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛 人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌DNA序列有70％的同源性 主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎奈瑟菌有多糖成分脑膜炎双球菌TaizhouUniversity形态与染色 G-，0.6-0.8µm 肾形或豆形，成双排列，凹面相对； 病人脑脊液（CSF）中典型，多位于中性粒细胞内； 无鞭毛和芽胞；新分离株具有荚膜和菌毛TaizhouUniversity培养特性与生化反应 培养特性 专性需氧。营养 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 高。最常用的培养基是巧克力色培养基 生化反应 可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，数日后菌体自溶TaizhouUniversity抗原构造、抵抗力TaizhouUniversity致病性与免疫性 致病物质 荚膜 菌毛 内毒素 所致疾病 流行性脑膜炎（简称流脑） 人类是唯一的易感宿主 免疫性 6月～2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群TaizhouUniversity脑膜炎奈瑟菌鼻咽腔繁殖繁殖入血菌/败血症中枢神经系统主要侵犯蛛网膜暴发型脑膜炎微循环衰竭、内毒素休克、DICTaizhouUniversity儿童和成人的脑膜炎症状TaizhouUniversity微生物学检查法 标本 直接涂片镜检 如镜下见到中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，即可作出初步诊断 分离培养与鉴定 巧克力色血琼脂平板 快速诊断法　对流免疫电泳　SPA协同凝集试验脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)TaizhouUniversity脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)革兰阴性双球菌,肾形或豆形生物学性状形态染色：G-，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明“露滴样”菌落 专性需氧，5~10%CO2，35-37℃（＞40℃＜30℃均不生长）pH7.4~7.6 易产生自溶酶TaizhouUniversity生物学性状生化反应：氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖和麦芽糖抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)TaizhouUniversity氧化酶试验阳性：紫红色阴性：无色TaizhouUniversity 生化鉴定（光滑露珠样菌落）脑膜炎奈瑟菌的鉴定氧化酶：+DNA酶：-营养琼脂生长：-葡萄糖：+麦芽糖：+TaizhouUniversity防治原则 综合性预防 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风 流脑疫苗： 6个月-2岁接种两次，间隔1月 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗 青霉素、磺胺大剂量治疗脑膜炎接种TaizhouUniversity淋病奈瑟菌，淋球菌GonococcusTaizhouUniversity脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌 相似点： 生物学性状 差异： 荚膜：有荚膜（脑），分离初期有荚膜（淋） 质粒：很少有质粒（脑），有质粒（淋）； 所致疾病：引起脑膜炎（脑），引起泌尿生殖系统疾病（淋）。 感染部位不同，标本取材部位不同两者关系TaizhouUniversity形态与染色 革兰染色阴性，0.6-0.8μm 肾形、成双排列 有菌毛，无芽胞和鞭毛，新分离株有荚膜TaizhouUniversity男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）TaizhouUniversity男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）TaizhouUniversityTaizhouUniversity女性急性淋病患者阴道分泌物涂片（革兰染色）TaizhouUniversity培养特性生化反应 培养特性 需氧，营养要求高。常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板 生化反应 除葡萄糖外，不分解其它糖类与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型呈滴露样菌落TaizhouUniversity主要菌体表面抗原构造 菌毛 与粘附有关，免疫原性不强　 脂多糖抗原 经常变异，相应抗体不能防止再感染　 外膜蛋白 PI：主要外膜蛋白，将淋病奈瑟菌分为18个血清型 PII：吸附易感细菌的蛋白TaizhouUniversity致病物质 菌毛 脂多糖（内毒素） IgA1蛋白酶TaizhouUniversity所致疾病 淋病 人类是淋球菌唯一的天然宿主 成人淋病绝大多数通过性接触感染，是重要的性传播疾病（sexuallytransmitteddisease，STD） 新生儿淋球菌性结膜炎 “脓漏眼”TaizhouUniversityTaizhouUniversity微生物学检查法 标本 保暖（运送时35ºC保温）、保湿、立即送检 直接涂片镜检 分离培养与鉴定 巧克力色培养基快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术TaizhouUniversity**可编辑 生物学特性 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，G—，双球菌，咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛脓汁标本中急性病人：细菌位于中性粒细胞内慢性病人：细菌位于细胞外 培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌落 生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖（脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌鉴定依据： 1.涂片染色为革兰阴性双球菌； 2.巧克力平板上为半透明、灰白色、凸起滴露状菌落； 3.氧化酶及触酶均阳性； 4.只分解葡萄糖，产酸不产气； 5.血清学试验阳性。TaizhouUniversity防治原则 预防淋病应取缔娼妓、防止不正当的两性关系 新生儿1%硝酸银滴眼，或红霉素、四环素眼药膏 药物首选青霉素，但多有耐药性，应用新型青霉素族抗生素脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较 比较 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 生物学性状 形态结构 G－双球菌；有荚膜、菌毛(新) 同左 培养特性 高营养、5%CO2露滴状、自溶酶 高营养、5%CO2 生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖 只分解葡萄糖 抗原与分类 荚膜多糖群特异Ag外膜蛋白型特异Ag脂多糖Ag核蛋白Ag 菌毛蛋白Ag脂多糖Ag外膜蛋白Ag(PⅠ、PⅡ、PⅢ) 抵抗力 冷、热、干燥、消毒剂均敏感 同左 致病性 致病物质 荚膜、菌毛、内毒素 荚膜、菌毛、外膜蛋白、IgA1 所致疾病 流行性脑脊膜炎 淋病 防治原则 荚膜多糖疫苗 洁身自好小结化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus脓汁或喉拭子涂片、革兰染色、镜检血琼脂平板观察菌落特征及溶血情况生化反应、致病力试验及药敏试验病原性球菌的鉴别 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌，可初步诊断为淋球菌37℃24h葡萄球菌鉴别金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌色素金黄色白色α-溶血素+-血浆凝固酶试验+-耐热DNA酶试验+-甘露醇发酵试验+-致病力强弱或无脓汁标本找出两种菌落Gram染色甘露醇发酵试验 菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐 G+、链状完全溶血乙型链球菌不溶血丙型链球菌草绿色不完全溶血环甲型链球菌肺炎链球菌菊糖发酵试验-（紫色）+（黄色）胆汁溶菌试验-（混浊）+（澄清）喉拭子标本找出两种菌落Gram染色痰培养肺炎链球菌检验全程报道姚军微生物检验1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:3.传代后的纯培养物:3.传代后的纯培养物:传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.4.Optochin抑制试验:抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.可能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好.把杂菌带进去了.尽管如此,抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).5.生化反应:用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1滴.5%CO2,35℃培养18~24h后读取并记录结果.6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是阴性对照：7.药敏试验（K-B法）：7.药敏试验（K-B法）：思考题 一、填空题： 一、填空题：二、是非题：三、选择题：三、选择题：三、选择题：三、选择题：四、名词解释： 1、血浆凝固酶 2、葡萄球菌A蛋白问答题 1、如何从脓汁标本中检出金黄色葡萄球菌，请写出检验程序，鉴定依据？ 2、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的主要区别有那些？ 3、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特点？金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、霍乱弧菌。 4、流脑患者脑脊液革兰氏染色的镜下特征，如何分离培养及菌落特点？ 5、如何从脓液中检出乙型溶血性链球菌？ 6、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特点？肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、铜绿假单胞菌。