植物细胞有丝分裂的制片与观察一、实验目的1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征二、实验原理1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂2.在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动态变化3.染色体可被碱性染料着色，便于观察4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期三、实验仪器和药品1.仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、刀片、玻璃皿2.材料：大蒜3.药品：诺卡氏固定液1mol/L的HCl作为解离液、卡宝品红作为染色液四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定：实验前3-4d，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺有四层纱布的托盘里放入温度为25℃，一定湿度的培养箱中培养，每天换水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液（乙醇:冰醋酸=3:1）固定4~24小时。固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态，维持染色体的完整性，提高染色效果四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离目的：使组织中的细胞分离开操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中60℃水浴5min左右（c）解离时，细胞已死亡（a）解离充分是实验成功的必备条件注意：（b）解离过度，细胞结构被破坏解离液：1mol/L的HCl四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作漂洗液：清水（先置于清水中浸泡2min左右）目的：洗去解离液，便于染色次数：2-3次注意：若不漂洗解离过度（HCl作用）影响染色（HCl与碱性染料反应）（1）解离（2）漂洗备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离（2）漂洗（3）取材部位：根尖2-3mm注意：要去除根尖乳白色根冠（根尖分生区）成熟区伸长区分生区根冠根尖的结构**可编辑四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作（1）解离（3）取材（2）漂洗（4）染色操作：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8分钟后，盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。目的：使细胞分散开，有利于观察注意：染色时敲片的力度要适中染色剂：卡宝品红染液时间：6-8min（使染色体（质）着色）染色时间过长—细胞全被染色，无法观察染色时间过短—染色体颜色过浅，影响观察四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作解离→漂洗→取材→染色3.观察（1）低倍镜观察：找到分生区细胞特点：细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞（2）高倍镜观察：在低倍镜的基础上换用高倍镜（3）仔细观察：先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点（4）移动观察：慢慢移动装片，完整观察各个时期四、实验流程1.大蒜根尖培养及固定2.装片制作解离→漂洗→取材→染色3.观察低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察注意：a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细胞分裂的动态变化。c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多操作要点1.解离：培养好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol/L的HCl中60℃水浴5min左右2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3次，最后置于盛有清水的培养皿中3.取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白色的根冠4.染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8min后，盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载玻片随即用一次性筷子进行敲片。5.观察：首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。五、实验结果对比图间期前期中期后期末期后期与末期的过渡期六、实验结果展示前期中期后期末期六、实验结果展示间期后期中期末期1、盐酸的作用是什么？盐酸起解离的作用，杀死根尖细胞，溶解细胞间质，破坏胞间连丝，使细胞容易发生分离。2、清水漂洗的作用目的是什么？清水漂洗的作用即洗去材料中的解离液,便于染色。作用是使细胞中的染色体着色。因为染色体很容易被这样的碱性染料染色。3、卡宝品红的作用是什么？4、装片制作完成，轻轻按压的作用是什么？使细胞相互分离，在载玻片上平铺成一层，便于观察。七、作业1、实验过程中需要注意哪些事项？2、将实验结果以图片的形式呈现在实验
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中，若实验失败，请分析失败原因。3、根据实验结果，请总结植物有丝分裂各个时期的特点。请将实验报告发至邱添富邮箱（936421285@qq.com)**可编辑
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