任务一 水中菌落总数的测定习
题
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一、名词解释：
1.cfu:
2.无菌操作:
3.细菌总数:
二、填空题：
1.生活饮用水
标准
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检验方法微生物指标是 （写出GB代号）。
2.生活饮用水菌落总数不得超过 个/ml，总大肠菌群MPN不得检出。
3.菌落总数测定时对水样进行 倍递增稀释，一般选择 个连续稀释度。
4.应选取菌落数在 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数作为菌落计数标准。低于 30cfu的平板记录具体菌落数，大于300 cfu的可记录为多不可计。
5.灭菌的平板计数琼脂培养基应却至 ℃时倾注平皿。
6.菌落总数测定时培养温度 ℃，培养时间 h。
7.稀释倍数越高，平板上的菌落数应越 。
三、判断题：
1.琼脂在46℃以下会发生凝固，故常用于固体培养基的凝固剂和营养剂。（ ）
2.菌落计数时，菌落数小于 100 cfu 时，按"四舍五入"原则修约，以整数报告。（ ）
3.菌落计数时，当平板内的菌落数过多（所有稀释度均大于300），但分布很均匀，可取平板的1/4计数，再乘以4作为该平板的菌落数。（ ）
4.空白对照试验的平板上允许有菌落生长。（ ）
5.菌落总数测定时，样品如果有包装，应用无水乙醇在包装开口处擦拭后取样。（ ）
四、简答题
1.平皿计数法(GB5750.12-2006)测定的细菌数量是样品中的实际菌数吗？为什么？
2.某样品菌落总数测定时，所有稀释度平板上都无菌落生长，试分析出现此结果的原因有哪些。
五、实验题：
某种鸡厂对生产用水井的水样进行菌落总数测定时，按国家标准将水样处理及培养后，培养皿上生长的菌落数量记录如下：
菌落数 稀释倍数
皿号
10-1
10-2
10-3
1号平皿
291
31
3
2号平皿
279
35
0
请回答下列问题：
1.对水样进行处理及培养条件是指什么？
2.本次实验选择的稀释度是多少？选择依据是什么？
3.列式计算并正确地对测定结果进行报告。
4.该指标（菌落总数）的常规检验依据是什么？简要写出其检验程序。
任务一 水中菌落总数的测定习题
答案
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一、名词解释：
1.cfu:指水样经过处理，在一定条件下培养所得的1mL检样中细菌菌落的数量。
2.无菌操作:采取一切方法防止微生物进入实验操作范围的操作方法。
3.细菌总数:指一定数量或面积的食品检样经过处理，在显微镜下对细菌进行直接计数。
二、填空题：
1.生活饮用水标准检验方法微生物指标是GB/T5750.12-2006 （写出GB代号）。
2.生活饮用水菌落总数不得超过 100 个/ml，总大肠菌群MPN不得检出。
3.菌落总数测定时对水样进行 十 倍递增稀释，一般选择 3 个连续稀释度。
4.应选取菌落数在 30—300 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数作为菌落计数标准。低于 30cfu的平板记录具体菌落数，大于300 cfu的可记录为多不可计。
5.灭菌的平板计数琼脂培养基应却至 46 ℃时倾注平皿。
6.菌落总数测定时培养温度 36±1 ℃，培养时间 48±2 h。
7.稀释倍数越高，平板上的菌落数应越 少 。
三、判断题：
1.琼脂在46℃以下会发生凝固，故常用于固体培养基的凝固剂和营养剂。（ × ）
2.菌落计数时，菌落数小于 100 cfu 时，按"四舍五入"原则修约，以整数报告。（ √ ）
3.菌落计数时，当平板内的菌落数过多（所有稀释度均大于300），但分布很均匀，可取平板的1/4计数，再乘以4作为该平板的菌落数。（ √ ）
4.空白对照试验的平板上允许有菌落生长。（ × ）
5.菌落总数测定时，样品如果有包装，应用无水乙醇在包装开口处擦拭后取样。（ × ）
四、简答题
1.平皿计数法(GB5750.12-2006)测定的细菌数量是样品中的实际菌数吗？为什么？
答：不是。平板菌落计数法测定的细菌总数只是检样中部分活菌数，测定结果比检样中实际存在的活菌数值小，这主要是由于培养基的营养状况和培养条件不能满足某些细菌的
要求
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，致使这些细菌不能正常的生长繁殖。首先，不同的细菌对营养物质的要求不同，而平板菌落计数法常选用的是一种培养基，其不可能满足检样中所有细菌的营养需求；其次，不同的细菌对环境条件的要求不同，在平板菌落计数中常选择中温（一般36℃±1℃）培养，于是嗜热细菌和嗜冷细菌的生长繁殖就要受到影响。
2.某样品菌落总数测定时，所有稀释度平板上都无菌落生长，试分析出现此结果的原因有哪些。
答：（1）稀释倍数选择不正确。
（2）营养琼脂培养基温度太高，烫死检样中的细菌。
（3）检样中没有细菌。
五、实验题：
1．水样进行处理是指无菌操作条件下进行十倍递增稀释，培养条件是36±1℃，48±2h。
2.本次检验选择的稀释度是10、100、1000倍，选择依据是对样品污染情况估计。
3.(291+279)÷2=285
(31+35)÷2=33
330÷291=1.13 (3100÷2910=1.13)
∵ 1.13〈2
∴该水样菌落总数应为2850cfu/ mL。结果报告:2900 cfu/ mL
4.该指标的常规检验依据是GB5750.12-2006，其检验程序：检样 做成几个适当倍数的稀释液 选择3个适宜稀释度各取1 mL分别加入灭菌培养皿内 每皿加入适量平板计数琼脂培养基 培养（36℃、48h） 菌落计数
结果报告。
浙公网安备 33021202002483