美国羊肚菌室内栽培专利4757640 译文 译者 郭建

这项专利是关于怎么培育羊肚菌子实体和子囊果的。给羊肚菌菌丝提供足够的营养,菌丝就会发育形成富含营养的菌丝体,可以是菌核,也可以是菌丝。这些菌丝体或者菌核可以给子实体的发育提供足够的营养。要想这些经过营养生长的菌丝转向生殖生长,必须经过一定的诱导,首先要保持这些菌丝体在一个外援营养贫瘠的环境中,然后使这些菌丝体遭受大量水的刺激。经过上诉两个诱导过程,原基就会出现。原基出现到成熟这个过程非常重要。原基很容易死亡。在这个关键的时期,我们特别注意的是保持有利生长环境。如果做的够好,原基就会长大,我们就可能收获成熟羊肚菌子实体。正文这项专利是以前专利的延续,这项包括羊肚菌菌丝体的培育和子实体的培育。背景羊肚菌属于子囊菌,非常美味,有些人认为羊肚菌是菌类里面最美味的,虽然羊肚菌被很多人所知晓,尤其是那些在早春在森林里面寻觅其踪迹的羊肚菌猎手,但是有些人拒绝羊肚菌工厂化周年生产,可能在国外是吃羊肚菌是一种身份和地位的象征。我们一般是通过羊肚菌的子囊果或者是子实体来认识它的。一些认为羊肚菌既然能够在自然体条件下自然生长,那人工栽培羊肚菌应该是一件比较容易的事,但是实际情况并不是这样,虽然有人在室外能够成功栽培出羊肚菌,但是在室内还没有人能够成功实现在人工环境下羊肚菌的周年化生产。作为一种自我保护机制,羊肚菌在对其不利的环境下,其生长的菌丝会聚集形成菌核进入休眠状态。因此羊肚菌是只会在特定的环境下产生,羊肚菌猎手认为这些产生羊肚菌的地方以前肯定遭受过不利的环境因素刺激。这个专利的目标是实现羊肚菌工厂化的周年生产.专业术语ascocarp-子实体                  conidiophore-分生孢子ascospore-子囊孢子                conidium,复数conidia-分生孢子ascus-子囊                    hypha,复数hyphae-菌丝mycelium复数mycelia-菌丝体           primordium,复数primordia-原基selerotium,复数selerotia-菌核            substratum,复数substrata-培育土nutrient-richhyphae营养菌丝            nutrient-richmycelia营养菌丝总述这项发明是关于栽培羊肚菌子囊果或者是子实体的。生长的菌丝在供给充足的营养后会转变成营养菌丝,比较菌核或者是就是营养菌丝体,这些营养菌丝体能够为后期子实体的形成提供有足够的营养.在营养生长结束后,改变其生长环境诱导其进入生殖生长。去掉外援营养是其进入有性生殖的诱因之一,另一个诱因是让这些营养菌丝遭受大量的水刺激。进入有性生殖的标志是原基的出现,然后发育长大成成熟的子实体。原基出现到成熟这个过程非常重要,原基很容易死亡。在这个关键的时期,我们特别注意的是保持有利生长环境。其中关键的一个因素是保持营养菌丝在营养生长阶段储存足够的营养物质,尤其是甘油三酯。另一个关键的因素是合适的空气湿度,土壤的含水量,和良好的通风条件。还有就是保持土壤最佳空气的交换和失水量。具体描述我们采用的栽培种是营养菌丝,或者是菌核,在休眠期的菌核不仅含量足够的营养物质,还能抵御不利的外界环境,当然我们也可以采用在液体培养基里面培育的营养菌丝。外界环境的不同这些营养菌丝会继续其无性生长,或者进入有性生殖生长,发育成子实体。营养生长阶段必须储存足够的营养,尤其是中性液体甘油三酯,生殖生长阶段的营养全部来自于营养生长阶段储存的营养物质。这项发明会具体说明:怎么培育出具有足够营养物质的营养菌丝,怎么样诱导营养菌丝进入生殖生长,怎么在原基出现到子实体成熟阶段减少死亡率。土壤的含水量,空气湿度,土壤里空气的交换情况是确保原基不败育的关键因素。第一步是培育出营养菌丝作为栽培种,使用营养菌丝作为栽培种是本发明的独到之处。虽然我们可以从孢子开始,这样来的太慢,效率不高,对于商业化的栽培不是太可行。同时传统的固态栽培种也不是太好,因为很容易感染杂菌,遭受病虫害。其中一种方法是培育菌核作为栽培种,一个常用的培育菌核的方法如下:找一个容器,装入容器的40%到80%量的小麦,或者其他培养料,然后在上面铺上带孔的板子,最好是塑料的或者是金属的。剩下的20%到60%的空间用潮湿的土壤装满。这个容器的大少50ml到500ml都行。采用的小麦或者是其他的培育料要能够提供有机的和物机的氮源,维他命,矿物质,糖类,这些物质能够促进营养菌丝吸收足够的营养物质为后期生殖生长做准备。然后盖住容器,高压灭菌。接下就是在灭完菌的土上接种,可以使用孢子,菌丝,或者菌核,然后密封,然后放在十度到三十度之间的温度下,最好是在十八度到二十二度之间。菌丝开始在土里面生长,最后窜到小麦里生长。大约一周以后菌丝就会长满土壤层,这些菌丝细胞在显微镜下可以看到很多分支,圆筒状,具有隔膜。接下我们会观察到邻近的菌丝细胞会聚集到一起形成一个集合体,这个是菌核的菌丝会从小麦里面吸取营养储存到菌核里。成熟的菌核会很大很坚硬。最终土壤层里面会出现很多大菌核。最后我们就可以收获菌核了,这些菌核可以用来作为栽培种,也可以用来培育新菌核。另一个获得栽培种的办法是培育液体菌种,在液体培育基里面菌丝在二十二度经过三到四周的时间培育就可以了。我们一般采用马铃薯葡萄糖肉汤培养基。虽然在液体培养基中不会出现菌核,但是这样培育出来的营养菌丝体也是储存了足够的营养物质的,可以为后期生殖生长提供足够的能量。 采用营养菌丝体作为栽培种很大提高了生产效率。这样的培育菌丝生长体能够为羊肚菌栽培提供足够的营养。营养菌丝尤其是菌核能够保存相当长的一段时间。在自然条件下菌核能够度过寒冷的冬天,开春环境好了,菌核又恢复生命力。营养菌丝在温度五度的时候就能够保存很长的时间。成熟的营养菌丝体被作为栽培种接种到适合的地土里。在这项专利中我们介绍两种办法。方法一:使用营养菌丝体,尤其是菌核,作为栽培种,把他们分成一小块块的,然后接种到培育土里,然后补充外援营养,菌丝继续萌发,最后诱导其进入生殖生长,另一种方法是:直接接种足够多的营养菌丝体,不管是液体菌种还是菌核,等菌丝定植后,直接诱导其进入生殖生长,不补充外援营养。本发明的一个重要部分是诱导菌丝进入生殖生长,其中的一个步骤是拿掉肉眼可以看见的外援营养,这样菌丝就会停止吸收营养或者极大的减慢营养吸收。菌丝的生长环境就从一个营养丰富的环境变成一个营养贫乏的环境。在营养贫乏的环境中,菌丝在生殖生长的过程中只能够利用先期储存在营养菌丝里的营养。另一个重要的诱导营养菌丝体进入生殖生长的步骤是:使这些正在生长的菌丝遭受大量的水刺激。通常我们会使羊肚菌培育基质达到水饱和来诱导其进入生殖生长。要达到这种水饱和的状态,我们可以让水侵满这个培育土。虽然现在没有任何理论的证据能够 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 水刺激可以诱导其生殖生长,但是可能是水刺激触发了其自身的某种生长机制。在方法一中:菌核被掰成0.5到4cm大小不等的小块。然后接种到培育土里面,然后上面土的厚度在1到4cm之间。每平方米接种6到30立方厘米的菌种块,在接种前可以把菌核在水里泡上一段时间。培育土要求是没有什么营养的土壤,这样做的目的是为了后期能够人为的控制其营养源。营养土可以是普通的树皮,土壤,木屑组成或者是制作陶瓷的生土,有时制作陶瓷的工人会在这个土壤里面添加一些矿物质。这个培育土有以下要求:要有足够的排水能力,具备一定的缓冲能力,还需一定的保水能力,同时壤要具有好的空气交换能力。在本专利中,我们采用的培育土是用25%的沙子和75%的有机物调制而成。有机物我们采用85%的松树皮10%泥炭藓块5%红杉树皮调制而成。培育土最好含有55%水分,其孔隙度为25%。同时我们也希望更好的培育土配方能够被调制出来。然后把培育土消毒,消毒后加水调成泥浆,然后将这些泥浆倒入底部有孔的盆里到需要的高度,然后等这个培育土自然滤干到最大含水量,一般我们以这个盆下面的孔不再滴水为标志。这样的培育土,土壤颗粒之间的空隙有一定的空气交换能力。这样做有两个好处,一个是菌核可以在培育土里面萌发生长,另一个是空隙间死水少,感染的几率大大减小。另外我们也可以先装盆再消毒。接下来我们就可以接种了菌核了,这时温度应该保持在10度到22度之间,空气湿度保持在75%到95%之间,土壤的含水量保持在50%到75%之间,在接种后一周菌丝会窜满整个盆。在菌丝生长的过程中我们不加水,保持土壤干燥,土壤的含水量要在75%以下。保持土壤干燥还有一个好处是避免其他杂菌滋生。一种简便好使的人为可控的营养源的办法是在培育土表面放上外援营养。我们可以采用培育菌核的的瓶子来作为外援营养的容器。外援营养的瓶子基本上装满营养物质,然后在这个营养上上面放上一个有空的金属板,然后在这个板上装土到瓶口的位置,然后再加上一个有空的金属板,最后密封消毒。这个装满有机物的瓶子能提供足够的营养,这些营养物质会被菌丝吸收储存在菌丝体里为后期生殖生长提供足够的营养物质。通常我们使用小麦作为营养源,当然其他的一些混合营养源也是可以的。一般一平方米要采用2斤到16斤麦子,这个变化范围较大,这个麦子量使用只是作为上限和下限的一个参考。在补充外援营养的这个过程中,我们尽可能的使这个培育土里面产生最多的菌核,因为最终收获子实体的多少和土壤里菌核的多少有着直接正比关系。培育土菌核的发育和外援营养瓶子菌核的发育是对等的,同样的营养供给瓶子的菌核的同时也会给土里菌核的发育提供营养。所以我们可以在这个外援营养里加一些维他命,矿物质,蛋白质和其他一些生长所需的营养物质。在方法一中,我们把外援营养瓶消毒后,打开盖子,把瓶子倒扣在培育土表面。然后菌丝就开始吃料,菌丝会很快窜到小麦里吸收营养然后分配到整个菌丝网络。在补充营养期间,培育土的含水量保持在45%到之间70%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。一般补充营养7到40天左右,通常16天。这个补充营养的后期一般会看到分生孢子和菌核出现在培育土表面。给供给菌丝体足够的营养后,拿掉外援营养瓶,这些原有的菌丝体和新产生的菌核就储存了足够的营养为后期子实体的发育提供支持。拿掉营养源是一个诱导有性生殖的一个关键步骤,如果还有营养供给菌丝继续生长的话,菌丝体是不会进入生殖生长的。拿掉这个外援营养瓶就是停止给菌丝体补充营养,让他们转向生殖生长。拿掉外援营养瓶以后我们可以给这个培育土补充一点水分,一平方米2升水。这时培育土的含水量保持在45%到之间70%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。过个10天左右,菌核基本就成熟了。这些成熟的菌核虽然在贫瘠的培育土里,但是已经完成了营养生长储存够了足够的营养物质,我们可以采用浸水诱导其进入生殖生长。我们最好采用渗透的方式进行水刺激,我们一般水刺激要持续12小时到36小时,我们浇水的频率和比例一般是每小时每平方米250ml到1000ml之间。在水刺激这段时间,培育土的温度和水的温度要保持在10度到22度之间。现在我们介绍第二种方法,相比较于第一种方法,第二种方法就是加大菌种量到培育土里,然后不加外援营养,这个培育土和方法一的培育土是一样的。这个菌种可以是菌核也可以是液体菌种。我们一般每平方米播种1500到4000克菌丝体或菌核。这些菌种已经储存有足够的营养物质支持后期的子实体的发育。这些菌丝体可以直接接种到培育土里面或者分成小块接种。先前培养的菌核可以直接接种或者在接种之前先用水泡个18到24小时。液体培育的菌种就直接从液体培育基里拿出来用水漂洗一下就可以直接接种了。接种到营养贫乏的环境里,菌丝体就等同于被切断营养源。这个有利于其转向生殖生长。接下来我们就可以进行诱导生殖生长的第二步-水刺激。水刺激可以在接种完就开始水刺激,也可以等上一段时间。我们可以在接种时就把让培育土的含水量到达诱导生殖生长的含水量。但是从前期来看,我们还是应该是在接种后应该让菌丝体在培育土里定植一段时间。和方法一的情况相似,这个时候培育土的含水量保持在45%到之间75%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。过个7天左右,我们就可以采取水刺激诱导了,和方法一的情况相似,水刺激要持续12小时到36小时,我们浇水的频率和比例一般是每小时每平方米250ml到1000ml之间。在水刺激这段时间,培育土的温度和水的温度要保持在10度到22度之间。相比于第一种方法,第二种方法的优势在于培育土的厚度可以大大的增加,可以在6cm到16cm厚,更厚的培育土意味着单位平方米内产生的子实体就越多,也就意味着更有商业效益。但是我们更提倡方法一,因为方法一更接近于我们培育其他菌类的方式,这样我们身边的设备和材料就可以利用现成的。但是不管是那种方式,我们在水刺激后,都要通风让培养土尽快变得干燥起来。这段时间培育土的含水量保持在55%到65%之间,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。水刺激大约一天到三天后,原基就可以出现了,原基出现到长到3厘米期间是一个关键的时期。这段期间培育土的含水量保持在50%到之间60%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间,最好是在18度。条件稍有不适,原基就很容易死亡。同时我们发现原基在培养土表面有空气流动时,原基不容易死亡。尤其是在土表面空气在一分钟内有20到40秒时间是有空气交换的时候。在原基长大3厘米后,我们要保持好适当的条件让其长大成熟。这段期间培育土的含水量保持在30%到55%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间.原基会继续长大,从灰色变成金黄色,这样子实体就成熟了,在我们收获第一朵羊肚菌后,我们后续会收获一系列的羊肚菌。使用上面的办法培育羊肚菌Morchellaesculenta,我们可以每平方米可以收获25到500个子实体.虽然上面的栽培方式主要是针对Morchellaesculenta这个品种的羊肚菌,但是这个方法也适用于栽培其他的品种,Morchellacrassipes和Morchellacostata。我们同时可以采取另一种培育基培育营养菌丝,主要材料是纸和尿素,这两个材料能够提供碳源和氮源,这样培育出来的营养菌丝体的形态介于丝状的菌丝和固体的菌核形态之间。这种改良的,不规则的相对大的菌丝会窜满整个培育基,或者有时候聚集在一起形成一小撮菌丝体。用这种方式培育的菌丝体的后期栽培方式我们可以采用方法一(使用营养菌丝体作为栽培种,把他们分成一小块块的,然后接种到培育土里,然后补充外援营养,菌丝继续萌发,最后诱导其进入生殖生长),但是在这种栽培方式中,在菌丝体定植一个星期以后,我们补充的外援营养,这个里面我们采用营养袋,袋子最好是塑料的,袋子里装的全部是湿纸,一袋一般要装20英镑的碎的证券纸,含水量要低于干纸重量的50%,最好是在30%到40%之间。在这个袋子的底部戳上洞,以便于菌丝进入袋子吸收营养。大约5到7天后菌丝就会穿满这个营养袋,这个时候我们就要开始浇营养液,营养液的是由尿素(含量低于1%)和水混合调成的,尿素的含量最好是0.5%,每平方米浇营养液40ml，2天到3天补充一次营养液,持续两周,然后拿掉营养袋。这时候的培育条件和方法一是一样的(这时培育土的含水量保持在45%到之间75%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。过个10天左右,菌核基本就成熟了)。虽然本专利对于怎么栽培羊肚菌描述的非常清楚,但是也不是规定的很死,对于业内的专业人士,可以在本发明的基础上做一些自己的改进,融入一些自己的见解。例如在发明中,全文上下各个阶段对于培育环境的描述,湿度,含水量,空气的流通性,这些只是一个参考范围,不是绝对的,我们只是认为这些参数对于各个阶段是比较有利的。不是一旦超出这个范围就会造成毁灭性的后果。对于短期的条件不适合其实影响没有那么夸张,比如各个阶段低温的描述,其实温度低于这个低温的范围影响就不是很大,甚至低温接近零下时,后期子实体也会长出来。下面我们要对本发明中的一些关键点详细阐述一下1:本发明对于栽培羊肚菌主要有下面三点:怎么在液体培育基中培育出具有足够营养物质的营养菌丝;然后将营养菌丝栽培到营养贫瘠的培育土里;怎么样诱导营养菌丝进入生殖生长;怎么在原基出现到子实体成熟阶段减少死亡率,保持适合的土壤的含水量,空气湿度,  土壤里空气的交换情况；2:在上面提到的液体培养基是采用马铃薯葡萄糖肉汤培育基；3:在上面提到的诱导营养菌丝进入生殖生长的步骤有两个:去掉外援营养是其进入有性生殖的诱因之一,另一个诱因是让这些营养菌丝遭受大量的水刺激；4:在上面提到的对于接种后的生长环境具体是，培育土的含水量保持在45%到之间70%,相对干燥,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间。在水刺激前土壤要相对的干燥；5:在上面提到的水刺激后的生长环境是，保持在55%到之间65%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间；6:在上面提到的原基从出现到3厘米期间生长环境具体是，培育土的含水量保持在50%到之间60%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间,最好是在18度；7:在上面提到的原基从出现期间是在土表面空气在一分钟内有20到40秒时间是有空气交换；8:在上面提到的原基从3厘米到成熟期间生长环境具体是，这段期间培育土的含水量保持在30%到55%,空气湿度保持在85%到95%之间,温度应该保持在10度到22度之间；9:在上面提到水刺激水量具体是，浇水的频率和比例一般是每小时每平方米250ml到1000ml之间；10:在上面提到水刺激的频率和环境具体是，刺激要持续12小时到36小时,温度应该保持在10度到22度之间；11:本专利里面主要包括提供营养源培育营养菌丝体,然后接种到一个营养贫瘠的培育土,等营养菌丝定植后补充碳源的纸和氮源的尿素等营养让其继续生长；12:在上面提到的营养,包括尿素营养液；13:在上文提到的纸含水量要低于干纸重量的50%；14:在上文提到的营养液体是尿素(含量低于1%)和水混合调成的,尿素的含量最好是0.5%,每平方英尺浇营养液40ml,2到3天补充一次营养液。