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流式细胞仪检测细胞周期的protocol

流式细胞仪检测细胞周期的protocol流式细胞仪检测细胞周期的protocol 流式细胞仪检测细胞周期的protocol 应用: 通过流式细胞仪分析各时期的细胞百分数，可检测细胞的增殖、凋亡。原理: 通常用PI染细胞核，PI在一定波长的光下发出荧光，其强度与DNA含量成正比。绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白及其它发光基团也可作为标记物，分选细胞。方法: 1) 将细胞以1×106接种于60mm培养板，80,汇合后转染。 2) 24小时后在新鲜培养液中加入适当的抗生素(真核表达载体上的抗性标记)进行培养(该步可选)。 3) 48,72小时后用胰酶消...

流式细胞仪检测细胞周期的protocol 流式细胞仪检测细胞周期的protocol 应用: 通过流式细胞仪分析各时期的细胞百分数，可检测细胞的增殖、凋亡。原理: 通常用PI染细胞核，PI在一定波长的光下发出荧光，其强度与DNA含量成正比。绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白及其它发光基团也可作为标记物，分选细胞。方法: 1) 将细胞以1×106接种于60mm培养板，80,汇合后转染。 2) 24小时后在新鲜培养液中加入适当的抗生素(真核表达载体上的抗性标记)进行培养(该步可选)。 3) 48,72小时后用胰酶消化收集细胞，PBS洗两遍，弃上清，加入1ml 70,预冷乙醇中，吹打均匀，4?固定12小时以上。 4) PBS洗涤去乙醇，1000rpm, 5min，洗两遍。 5) 0.5mlPBS重悬细胞，加入PI和 RNaseA至终浓度50µg/ml，37? 温浴30 min。 6) 用流式细胞仪测定周期。 PI:碘化丙啶，以PBS配成1mg/ml，4?保存。 RNaseA:10mg/ml

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