基因工程原理_王莹_基因工程题库

基因 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 原理_王莹_基因工程题库 基因工程试题库 001 基因工程操作的三大基本元件是【 】 I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体 , I + II + III , I + III + IV , II + III + IV , II + IV + V , III + IV + V 002 根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【 】 I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率 , I + II + III , I + II + IV , I + III + IV , II + III + IV , I + II + III + IV 003 基因工程的三大理论基石是【 】 , 经典遗传学、细胞生物学、微生物学 , 分子遗传学、分子生物学、生化工程学 , 动物学、植物学、微生物学 , 生物化学、生化工程学、化学工程学 , 生理学、仿生学、免疫学 004 根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【 】 , 基因诱变 , 分子克隆 , DNA重组 , 遗传工程 , 基因无性繁殖 005 基因工程的单元操作顺序是【 】 , 增，转，检，切，接 , 切，接，转，增，检 , 接，转，增，检，切 , 检，切，接，增，转 , 切，接，增，转，检 006 生物工程的上游技术是【 】 , 基因工程及分离工程 , 基因工程及发酵工程 , 基因工程及酶工程 , 基因工程及细胞工程 , 基因工程及蛋白质工程 007 基因工程作为一种技术诞生于【 】 , 上世纪 50 年代初 , 上世纪 60 年代初 , 上世纪 70 年代初 , 上世纪 80 年代初 , 上世纪 90 年代初 008 利用基因工程扩增基因是依据【 】 , 基因定向重排 , 强化启动基因 , 增强子重组 , SD 顺序的存在 , 载体自主复制 009 第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白(多肽)药物是【 】 , 生长激素(Growth hormone) , 胰岛素(Insulin) , 干扰素(Interferon) , 白细胞间溶菌素(Interleukin) , 生长激素释放抑制素(Somatostatin) 010 下列有关基因的叙述，错误的是【 】 , 蛋白质是基因表达的唯一产物 , 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段 , 基因也可以是 RNA , 基因突变不一定导致其表达产物改变结构 , 基因具有方向性 011 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是 【 】 , 修复自身的遗传缺陷 , 促进自身的基因重组 , 强化自身的核酸代谢 , 提高自身的防御能力 , 补充自身的核苷酸消耗 012 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【 】 , Bacillus amyloliquefaciens , Escherichia coli , Haemophilus influenzae , Providencia stuartii , Streptomyces lividans 013 根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成 【 】 , 2 大类 , 3 大类 , 4 大类 , 5 大类 , 6 大类 014 下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是【 】 , GAAACTGCTTTGAC , GAAACTGGAAACTG , GAAACTGGTCAAAG , GAAACTGCAGTTTC , GAAACTGCAGAAAG 015 下列五个 DNA 片段，最可能含有 SstI 酶切位点的是 【 】 , GGAGAGCTCT , GAGCACATCT , CCCTGTGGGA , ATCCTACATG , AACCTTGGAA 016 从 dam 型大肠杆菌受体细胞中分离出的质粒 DNA 能被 BamHI 、 BglII 和 Sau3AI 降解(如果上述酶切位点存在)，但对 BclI 和 MboI 不敏感(尽管上述酶切位点存在)，其原因是 【 】 , Dam 甲基化酶使 BclI 和 MboI 识别序列甲基化，但对 BamHI 、 BglII 以及 Sau3AI 不起作用 , Dam 甲基化酶既可使 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 甲基化，也可使胞嘧啶 C 5 甲基化，这两种甲基化作用对限制性内切酶活性的影响不同 , Dam 甲基化酶能使所有 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 甲基化，但不同的限制性内切酶对这种甲基化作用的敏感性不同 , Dam 甲基化酶的作用位点在 5'-GATC-3' 序列内部，但该酶与 DNA 靶序列的结合还依赖于 5'-GATC-3' 序列左右两端的其它碱基组成 , Dam 甲基化酶既能使 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 单甲基化，也能使其双甲基化，只有后者才能抵御相应限制性内切酶的切割作用 017 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是 【 】 , 2' -OH 和 5' -P , 2' -OH 和 3' -P , 3' -OH 和 2' -P , 3' -OH 和 5' -P , 5' -OH 和 3' -P 018 下列 DNA 片段中，通过加热并用 S1 核酸酶处理即可使 DNA 断裂的是 【 】 , CCGATCAAGCTGTTCCCGGAGGTGCCCGCCCTAAGGAGACTCGGT GGCTAGTTCGACAAGGGCCTCCACGGGCGGGATTCCTCTGAGCCA , AAGGTCGGCGGGTTCCCACCCGTGAGCATCGGGCCTTGCCGTTAT TTCCAGCCGCCCAAGGGTGGGCACTCGTAGCCCGGAACGGCAATA , TATGATCATCCGCCGGGTGTCACTGATCCATGGCCCAAGGGTTTC ATACTAGTAGGCGGCCCACAGTGACTAGGTACCGGGTTCCCAAAG , GAGGATCCCTTTGCGATTCACCTAGGGTATCTCTGTAGGGCCTAG CTCCTAGGGAAACGCTAAGTGGATCCCATAGAGACATCCCGGATC , GCATCGGCCCCCGGTAAATATTCTCGGGGCGGGTAGCCGCCTAGT CGTAGCCGGGGGCCATTTATAAGAGCCCCGCCCATCGGCGGATCA 019 Bal31 工具酶是一种【 】 , 只切双链 DNA 的外切酶 , 双链单链 DNA 均切的外切酶 , 双链单链 DNA 和 RNA 均切的外切酶 , 双链单链 RNA 均切的外切酶 , 只切双链 RNA 的外切酶 020 下列有关连接反应的叙述，错误的是 【 】 , 连接反应的最佳温度为 37 ? , 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10% , 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM , 连接酶通常应过量 2-5 倍 , DTT 可以维持连接酶的结构 021 某一质粒的多克隆位点上含有下列单一限制性内切酶识别序列: AluI 、 BglII 、 ClaI 、 DpnI 、 EcoRV ， 若将含有 EcoRI 粘性末端的外源基因克隆在这个质粒上，并保留 EcoRI 酶切位点，则合适的插入位点是【 】 , AluI , BglII , ClaI , DpnI , EcoRV 022 若将含有 5' 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3' 末端 4 碱基突出的载体质粒上，又必 须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是【 】 I T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶 , III , I + III , II + III , I + II + III , I + II + III + IV 023 若载体 DNA 用 M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中，能直接与载体拼接的 是 【 】 M N , A/AGCTT T/TCGAA , C/CATGG ACATG/T , CCC/GGG G/GGCCC , G/GATCC A/GATCT , GAGCT/C G/AGCTC 024 下列各组分别用两种不同的限制性内切酶切开的 DNA 片段经补平并连接后，其重组分子内能产生 ClaI 限制性内切酶酶切位点的是【 】 , BglII / BamHI , HindIII / BamHI MluI / BamHI , , SpeI / BamHI , XbaI / BamHI 025 质粒 DNA 和外源 DNA 各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子。下列各组重组子中有 可能含有两种相反基因极性的是 【 】 , ApaI / ClaI , BamHI / BglII , BclI / SmaI , HindIII / KpnI , SphI / PstI 026 提高重组率的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 包括 【 】 I 加大外源 DNA 与载体的分子之比 II 载体分子除磷 III 连接酶过量 IV 延长连接反应时间 , I + II , I + II + III , I + III + IV , II + III + IV , I + II + III + IV 027 载体的功能是 【 】 I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 028 下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是 【 】 , 质粒是共价环状的双链 DNA 分子 , 天然 质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列 , 质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制 , 松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增 , 质粒并非其宿主细胞生长所必需 029 带有多个不同种复制起始区的质粒是 【 】 , 穿梭质粒 , 表达质粒 , 探针质粒 , 整合质粒 , 多拷贝质粒 030 多聚接头( Polylinker )指的是【 】 , 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工 DNA 片段 , 含有多种复制起始区的人工 DNA 片段 , 含有多种 SD 顺序的人工 DNA 片段 , 含有多种启动基因的人工 DNA 片段 , 含有多种特定密码子的人工 DNA 片段 031 l -DNA 体外包装的上下限是天然 l -DNA 长度的 【 】 , 25 - 50 % , 50 - 100 % , 75 - 100 % 75 - 105 % , , 100 - 125 % 032 l -DNA 体外包装系统通常分成分离的两部分，其原因是【 】 , 安全 , 包装蛋白含量太大难于溶解 , 便于操作 , 提高转染率 , 包装蛋白组份的冷冻保藏条件不同 033 琥珀突变是指 【 】 , 起始密码的突变 , 终止密码子的突变 , 精氨酸密码子的突变 , 谷酰胺密码子的突变 , 丙氨酸密码子的突变 034 考斯质粒(cosmid)是一种【 】 , 天然质粒载体 , 由 l -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体 , 能裂解受体细胞的烈性载体 , 具有溶原性质的载体 , 能在受体细胞内复制并包装的载体 035 下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是 【 】 , Cosmid > l -DNA > Plasmid , l -DNA > Cosmid > Plasmid , Plasmid > l -DNA > Cosmid , Cosmid > Plasmid > l -DNA , l -DNA > Plasmid > Cosmid 036 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是 【 】 , 质粒 DNA , 噬菌体 DNA , 病毒 DNA , 线粒体 DNA , 叶绿体 DNA 037 下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是 【 】 , 大肠杆菌,繁殖迅速 , 枯草杆菌,分泌机制健全 链霉菌,遗传稳定 , , 酵母菌,表达产物具有真核性 , 动物细胞,具有完善的蛋白质糖基化功能 038 基因工程的受体细胞必须具备 【 】 I 限制性缺陷 II 营养缺陷 III 感染寄生缺陷 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 039 促红细胞生长素( EPO )基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌 生产人的促红细胞生长素，这是因为 【 】 , 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 , 人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 , , 人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 , 大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 040 原生质体转化方法不大适用于 【 】 , 大肠杆菌 , 枯草杆菌 , 酵母菌 , 链霉菌 , 植物细胞 041 某一重组转化系统的重组率为 10% ，转化率为 10 7 / m g DNA ，经切接单元操作后的载 体转化率为原来的 1% 。若欲获得 10,000 个重组克隆，需在重组实验中投入载体 【 】 , 0.1 m g , 0.5 m g , 1.0 m g , 2.0 m g , 10 m g 042 克隆菌扩增的目的是 【 】 I 增殖外源基因拷贝 II 表达标记基因 III 表达外源基因 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 043 载体质粒 pBR325 共有三个选择性标记: Ap r 、 Tc r 、 Cm r 。它们分别含有一个单 一酶切位点: PstI 、 SphI 和 EcoRI 。若将一外源基因取代此载体上不含 Cm r 标记基因的 PstI-SphI 限制性 DNA 片段，那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是 【 】 , Ap , Tc , Cm , Ap + Tc , Ap + Cm 044 经抗药性遗传标记法筛选出的转化体中，往往会出现无载体或无重组 DNA 分子的菌落， 其原因很可能是 【 】 , 标记基因发生突变 , 载体或重组分子不稳定 , 载体或重组分子整合入受体染色体中 , 载体空载 , 筛选药物诱导受体细胞产生抗性 045 若某质粒带有 lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入 【 】 , 半乳糖 , 葡萄糖 , 蔗糖 , 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基 - b -D- 半乳糖苷( X-gal ) , 异丙基巯基 - b - 半乳糖苷( IPTG ) 046 下列载体常用选择性标记中属于营养缺陷型的是 【 】 , tsr , Ap r , lacZ , Tc r , Trp - 047 在菌落原位杂交法中使用的 0.4N NaOH 溶液的作用是 【 】 I 破细胞壁 II 蛋白质变性 III DNA 变性 IV RNA 降解 , I + II + III , I + II + IV , I + III + IV , II + III + IV , I + II + III + IV 048 下列各组专业术语中，含义最为接近的是 【 】 , 终止子与终止密码子 , 基因表达与基因转译 , DNA 退火与 DNA 复性 , 转化与转染 , 重组子与转化子 049 分子杂交的化学原理是形成 【 】 , 共价键 , 离子键 , 疏水键 , 配位键 , 氢键 050 下列设计的探针中，最佳的是 【 】 , ACATTAAATTATT , GGGCA , ACCTTGATAAGGT , CGGACTTGACCATC , TTTAGG 051 下列三种探针同位素标记法中，必须使用 a - 32 P-dNTP 的是 【 】 I T 4 -PNP 标记 II 缺口前移标记 III 反转录标记 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 052 能有效降低菌落原位杂交本底的方法是 【 】 I 延长嚗光时间 II 高离子强度溶液清洗薄膜 III 高温杂交 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI 酶切后凝胶053 某一重组 DNA ( 6.2 kb ) 电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共有 【 】 , 5 个 , 4 个 , 3 个 , 2 个 , 至少 2 个 054 Subcloning 法一般用于 【 】 , 基因杂交 , 基因定位 , 基因表达 , 基因调控 , 基因突变 055 双脱氧末端终止法测定 DNA 序列是基于 【 】 , DNA 的聚合反应 , DNA 的连接反应 , DNA 的降解反应 , 特殊的 DNA 连接酶 , 聚合单体 2' 和 5' 位的脱氧 056 多项研究结果表明，苍蝇体内存在一种新型高效广谱抗菌蛋白。为克隆其基因，最快速有 效的筛选方法是 【 】 , 噬菌斑模型 , 透明圈模型 , 颜色反应模型 , 免疫杂交模型 , 凝胶电泳模型 057 放射免疫原位杂交法所使用的菌体破碎方法是 【 】 I 氯仿蒸汽 II 碱溶液 III 烈性噬菌体 , III , I + II , I + III , II + III , I + II + III 058 下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是 【 】 I 限制性酶切 II PCR 扩增 III 抗药性筛选 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 059 下列能区分期望重组子的筛选方法是 【 】 , 抗药性 筛选法 , 营养缺陷 筛选法 , 显色 筛选法 , 次级克隆法 , 菌落原位杂交法 060 鸟枪法克隆目的基因的战略适用于 【 】 原核细菌 , , 酵母菌 , 丝状真菌 , 植物 , 人类 061 鸟枪法克隆目的基因的第一步是随机或非随机切割外源 DNA ，其方法有 【 】 I 超声波处理 II 酶解 III 机械搅拌 , III , I + II , I + III , II + III , I + II + III 062 从凝胶上回收 DNA 片段有多种方法，其中无需将凝胶切下来的是 【 】 , 冻融法 , 滤纸法 , 吸附法 , 溶解法 , 低融点凝胶法 063 mRNA 分离纯化技术的关键是 【 】 , 细胞的温和破碎 , 分离系统中不得含有痕量的 SDS , 高离子强度缓冲液的使用 , 密度梯度超离心 , 严防核酸酶的降解 064 cDNA 第一链合成所需的引物是 【 】 , Poly A , Poly C , Poly G , Poly T , 发夹结构 065 cDNA 合成中所涉及的三种工具酶是 【 】 I T 4 -DNA 连接酶 II Klenow 聚合酶 III S1 核酸酶 IV Bal31 核酸酶 V 逆转录酶 , I + II + III , I + III + IV , II + III + IV , II + III + V , III + IV + V 066 cDNA 法获得目的基因的优点是【 】 , 成功率高 , 不含内含子 , 操作简便 , 表达产物可以分泌 , 能纠正密码子的偏爱性 067 Taq DNA 聚合酶的发现使得 PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为 【 】 , Taq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物 , Taq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物 , Taq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性 , Taq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化 , Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行 068 为了利用 PCR 技术扩增下列染色体 DNA 片段上的虚线部分，应选用的引物顺序是 【 】 , I + II , I + III , I + IV , II + III , II + IV 069 基因工程中采用人工合成目的基因战略的主要原因是 【 】 , 便于目的基因的分离纯化 , 便于目的基因的高效表达 , 便于目的基因的重组克隆 , 便于目的基因的顺序测定 , 便于目的基因的大量扩增 070 人工合成 DNA 的单元操作包括 【 】 I 基团保护 II 缩合 III 去保护 IV 洗涤 , I + II , II + IV , I + II + III , II + III + IV , I + II + III + IV 071 基因文库的构建方法包括 【 】 I 合成法 II cDNA 法 III 鸟枪法 IV PCR 法 , I + II , I + III , II + III , II + IV , III + IV 】 072 建立人的基因文库所需的技术是 【, 分子克隆技术 , 体外转录技术 , 体外翻译技术 , 产物分泌技术 , 基因诱导表达技术 073 构建基因文库一般使用的载体是 【 】 I 质粒 II l -DNA III Cosmid , I , II , III , II + III , I + II + III 074 评估基因文库完备性的数学 公式 小学单位换算公式大全免费下载公式下载行测公式大全下载excel公式下载逻辑回归公式下载 是 【 】 , N = ln ( P-1 ) / ln ( f-1 ) , N = lg ( P+1 ) / lg ( f+1 ) , N = ln ( 1-P ) / ln ( 1-f ) , N = lg ( 1-P ) / ln ( 1-f ) , N = lg ( 1-f ) / ln ( 1-P ) 075 构建基因文库极为重要的原则是防止外源 DNA 片段之间的连接，其方法是 【 】 I DNA 片段分级分离 II 除去 DNA 片段末端的磷酸基团 III 用 TdT 酶增补人工粘性末端 , II , I + II , I + III , II + III , I + II + III 076 强化基因转录的元件是 【 】 , 密码子 , 复制子 , 启动子 , 内含子 , 外显子 077 启动子的特征之一是 【 】 , GC 富积区 , TATA Box , 转录起始位点 , 长度平均 1 kb , 含有某些稀有碱基 078 影响启动子功能的因素包括 【 】 I 本身长度 II 与基因之间的距离 III 本身碱基排列顺序 , I , II , III , I + II , II + III 079 pIJ486 是链霉菌的启动子探针质粒(如下图所示)，其中 neo 和 tsr 分别为新霉素和硫 链丝菌素的抗性基因。为了准确克隆和筛选具有启动子活性的外源 DNA 片段，最为理想的插 入位点应是 【 】 , ApaI , BclI , EcoRV , KpnI , PstI 080 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是 【 】 , 阻遏蛋白 , 启动子 , 操作子 , 终止子 , 增强子 081 强化 mRNA 翻译的元件是 【 】 , 启动子 , 复制起始区 , 增强子 , 回文结构 , SD 顺序 082 下列 mRNA 5' 端序列中，具有典型的原核生物 Shine-Dalgarno 序列特征的是 【 】 , 5'……UAUAAG……3' , 5'……AGGAGG……3' , 5'……AUAUCU……3' , 5'……CCUCCA……3' , 5'……GGCCCG……3' 083 下列亮氨酸密码子在大肠杆菌蛋白质结构基因中出现频率最低的是 【 】 , CUA , CUC , CUG , UUA , UUG 084 下面给出的 DNA 顺序是某链霉菌一个蛋白质结构基因的中间片段，其基因方向及阅读框架是 【 】 5'...GCAGGGACTCGGAAGGCACCGACATGTCCTGC...3' ...123456789... 从右至左， . .. 876 ， 543 ... , , 从右至左， ... 987 ， 654 ... , 从左至右， ... 123 ， 456 ... , 从左至右， ... 234 ， 567 ... , 从左至右， ... 345 ， 678 ... 085 为了使人类有经济价值的基因在大肠杆菌中高效表达，有时可以采用同步克隆表达受体菌 tRNA 基因的方法，其机理是 【 】 , 增强基因的转录 , 纠正受体菌密码子的偏爱性 , 促进氨酰基 tRNA 合成酶的表达 , 稳定 mRNA 在核糖体上的定位 , 启动 mRNA 的翻译 086 高等哺乳类动物基因在大肠杆菌中高效表达时，其产物往往失去水溶性，原因是 【 】 , 表达产物浓度过高 , 表达产物不能正确折叠 , 表达产物不含糖基侧链 , 表达产物难以形成二硫键 , 表达产物中极性氨基酸残基比例下降 087 下列五种重组 DNA 分子中，目的基因有可能获得高效表达的是 【 】 启动子 SD 序列 目的基因 终止子 , , , , , 088 包涵体是一种 【 】 , 受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒 , 大肠杆菌的亚细胞结构 , 噬菌体或病毒 DNA 的体外包装颗粒 , 用于转化动物细胞的脂质体 , 外源基因表达产物的混合物 089 在基因工程中，外源基因表达产物的重折叠通常是指 【 】 , 氢键的形成 , 离子键的形成 , 疏水键的形成 , 酰胺键的形成 , 二硫键的形成 090 Chaperone 协助蛋白质形成正确空间构象的机制是 【 】 , 结合折叠不正确的蛋白分子以阻断蛋白质的错误折叠途径 , 强化蛋白分子内容二硫键的正确形成 , 促进肽基脯氨酸顺式键与反式键之间的转换 , 蛋白质正确构象与错误构象之间的平衡 , 催化错误构象蛋白质的降解 091 某一表达质粒上含有一个能在大肠杆菌中高效表达的基因 A ，若将外源基因 B 插入基因 A 的 3' 末端，并维持基因 B 的阅读框架不变，使两者在受体细胞中产生融合蛋白，则正确的重组策略是 【 】 , A 基因用 BamHI 切开， B 基因用 BamHI 切开，连接 , A 基因用 BglII 切开， B 基因用 BamHI 切开，连接 , A 基因用 EcoRV 切开， B 基因用 SmaI 切开，连接 , A 基因用 PvuII 切开， B 基因用 SmaI 切开，连接 , A 基因用 SmaI 切开， B 基因用 SmaI 切开，连接 092 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 【 】 I 融合基因能稳定扩增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析分离 , III , I + II , I + III , II + III , I + II + III 093 有利于基因的蛋白质产物分泌的元件是 【 】 , 核糖体 , 信号肽 , 终止子 , 亲水性氨基酸 , 多聚腺苷酸 094 下列蛋白质 N 末端序列中，符合分泌型蛋白结构特征的是 【 】 , MLSLRQSIRFFKPATRTLCSSRYLL , MLVTAGVAAA , MKRKHAIGPLLLAGLLAGVVAVLP , MFSNLSKRWAQRTLSKSFYSTANA , MVHAPNQSSTTWYHSCACGLIYWT 095 一般而言，分子量小的蛋白质更不稳定，其原因是 【 】 , 分子量越小，形成良好空间构象的可能性越低 , 分子量越小，表达效率越高 , 分子量越小，分泌效果越佳 , 分子量越小，形成多聚体的概率越大 , 分子量越小，越容易被加工修饰 096 越来越多的研究结果表明，与抗菌素生物合成有关的基因往往连锁在一起形成基因簇，它 包括 【 】 I 合成基因 II 抗性基因 III 运输基因 IV 调控基因 , I + II + III , I + II + IV , I + III + IV , II + III + IV , I + II + III + IV 097 利用染色体走读法分离抗菌素生物合成基因簇的第一步通常是克隆 【 】 , 限速步骤的生物合成基因 , 生物合成途径分支步骤的基因 , 抗菌素抗性基因 , 基因表达调控基因 , 控制途径第一步反应的基因 098 第二代基因工程是指 【 】 , 途径工程 , 代谢工程 , 蛋白质工程 , RNA 基因工程 , 细胞器基因工程 099 蛋白质工程的战略是设计定做新型蛋白质，但其具体操作是在基因水平上进行的，这些操 作技术包括基因定向突变及人工合成，其中 M13 法和 PCR 法定点突变的原理是 【 】 , 在 DNA 聚合反应所需的引物中直接引入突变 , 在 DNA 聚合反应过程中通过碱基对错配引入突变 , 在 DNA 模板单链中用化学试剂诱导突变 , 在 DNA 连接反应过程中引入突变 , 化学修饰 DNA 体外复制产物 100 下列生化产品中二级基因产物的是 【 】 , 抗菌素 , 胰岛素 , 干扰素 , 生长激素 , 白细胞介素 101 利用 DNA 同源重组技术人们可以 【 】 , 灭活基因 , 表达基因 , 复制基因 , 纯化基因 , 合成基因 102 重组分子的不稳定性表现在 【 】 I DNA 片段缺失或重排 II 外源基因整合入受体细胞染色体 DNA 上 III 重组质粒丢失 , I , I + II , I + III , II + III , I + II + III 103 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是 【 】 , 重组质粒渗透至细胞外 , 重组质粒被细胞内核酸酶降解 , 重组质粒在细胞分裂时不均匀分配 , 重组质粒杀死受体细胞 , 重组质粒刺激受体细胞提高其通透性 下列题目每部分选作两题: 外源基因在大肠杆菌中的高效表达原理部分 104 大肠杆菌为什么能高效表达外源基因, 105 什么叫开放性阅读框架(ORF), 106 大肠杆菌作为基因工程受体菌的优缺点是什么, 107 启动子的克隆筛选如何操作, 108 目的基因与启动子拼接后，重组分子若不表达，应如何分析, 109 启动子为何需要具有可控性, 110 IPTG诱导Plac启动子的分子机制是什么, 111 PlacUV5启动子与Plac启动子的区别是什么, 112 cI857与cI的区别是什么, 113 Ptrp-Pl双质粒系统的工作原理及优越性是什么, 114 T7启动子使用时为什么要选用大肠杆菌DE3株, 115 什么是RBS和SD序列, 116 什么是密码子的偏爱性,其影响因素有那些, 117 怎样纠正大肠杆菌对外源基因密码子的偏爱性, 大肠杆菌工程菌的构建策略部分 118 什么是包涵体,其形成机理是什么, 119 盐酸胍和尿素为什么能溶解包涵体, 120 包涵体型重组蛋白表达法的优缺点是什么, 121 包涵体如何分离, 122 分泌型异源蛋白表达法的优缺点是什么, 123 T4-DNA聚合酶为什么不催化聚合反应而催化单链切除反应, 124 分子伴娘的作用及其名字的由来是什么, 125 融合蛋白表达法的优缺点是什么, 126 表达融合蛋白时应注意什么关键问题, 127 Pinpoint融合表达载体的功能是什么, 128 寡聚型异源蛋白表达法的优缺点是什么, 129 外源基因整合的主要用途是什么, 130 什么叫同源序列, 131 什么是同源整合和同源交换, 132 PEST序列是什么, 133 对付细胞内源性蛋白酶降解重组表达产物的手段有哪些, 重组异源蛋白的体外复性活化部分 134 在由重组蛋白所产生的包涵体中，能形成可逆性集聚体的化学键是什么, 135 尿素常用来变性包涵体，但在使用时常需要预处理，原因是什么, 136 在蛋白质重折叠中，还原型和氧化型谷光甘肽的作用是什么, 137 分泌在大肠杆菌细胞周质中的重组蛋白可以维持正确的折叠状态，原因是什么, 138 革兰氏阳性菌能将蛋白质直接分泌到细胞外，革兰氏阳性菌为什么不能, 139 促进二硫键正确配对的两大关键因素是什么, 140 使用分子伴娘可明显改善变性蛋白的重折叠，有意义的尝试是什么, 大肠杆菌工程菌培养的最优化控制部分 141 大肠杆菌在以葡萄糖为唯一碳源的培养基中有氧呼吸，其典型的生长速率Y值为每克葡萄糖多少克干重细胞, 142 细菌在什么培养阶段容易分泌内源性蛋白酶, 143 连续式发酵对基因工程产品的大规模生产有什么优势,缺点是什么, 144 重组异源蛋白和细胞内代谢产物的最大合成速度分别在何菌龄, 基因工程菌的遗传不稳定性及其对策部分 145 基因工程菌的遗传不稳定性的两种主要表现形式是什么, 146 基因工程菌的遗传不稳定性的主要机制是什么, 147 什么叫转座子和转座元件, 148 改善工程菌遗传不稳定性的对策有哪些, 149 将大肠杆菌ssb基因克隆在载体上，能选择性增殖含质粒的细胞，为什么, 150 怎样才能在发酵过程中保持工程菌的遗传稳定性, 利用重组大肠杆菌生产医用蛋白或多肽部分 151 长期使用猪胰岛素的副作用是什么, 152 产人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建战略有哪几种, 153 在人胰岛素AB链分别表达法中，为何将AB链编码序列与,-半乳糖苷酶基因融合, 154 胰岛素AB链体外混合时，为什么要采用二比一的分子比, 155 胰岛素原表达法为何比AB链分别表达法更优越, 156 Met-hGH为何比Phe-hGH更加昂贵, 157 Phe-hGH工程菌的构建战略有哪两种, 158 在四种氨肽酶中，哪几种能被用于由Met-hGH转化为Phe-hGH的反应,为什么, 159 什么叫等位基因和复等位基因, 160 干扰素和白介素均为糖蛋白，为何可以用大肠杆菌生产, 161 构建杂合,-干扰素有何重要意义, 162 重组抗体的生产战略有哪些, 163 杂交瘤技术生产人源抗体的主要优缺点是什么, 芽孢杆菌的重组表达系统部分 164 芽孢杆菌作为基因工程受体的主要优缺点是什么, 165 芽孢杆菌自身蛋白质工业化产物包括哪些, 166 芽孢杆菌与大肠杆菌的启动子及,因子之间有什么关系, 167 在芽孢杆菌中，外源基因的表达受到细菌生长期的严格限制，其原因是什么, 168 芽孢杆菌型两大类载体质粒中的复制子分别来自什么菌株, 169 pYQL质粒可控性表达外源基因的工作原理是什么, 170 野生型芽孢杆菌表达外源基因的最大限制性因素是什么, 171 芽孢杆菌碱金属离子转化法的优缺点各是什么, 172 为什么说短小芽孢杆菌是一种较为理想的分泌表达系统, 173 短小芽孢杆菌分泌蛋白质的机理是什么, 174 高温工业酶制剂与普通酶制剂相比，其优点是什么, 175 FGF作为基因工程产物的主要用途是什么, 176 苏云氏芽孢杆菌产生的昆虫毒性晶体蛋白作为农药的优缺点是什么, 177 昆虫毒性晶体蛋白的杀虫机制是什么, 178 构建苏云氏芽孢杆菌基因工程菌的主要战略有哪些, 棒状杆菌的重组表达系统部分 179 棒状杆菌作为基因工程受体的主要特征是什么, 大肠杆菌、芽孢杆菌、链霉菌中部分启动子能在棒状杆菌属中发挥作180 用，其分子机制是什么, 181 棒状杆菌属pAJ667考斯质粒在转导受体细胞时需要使用辅助噬菌体，原因是什么, 182 棒状杆菌属的基因工程受体细胞最好是营养缺陷型的，为什么, 183 棒状杆菌的转化方法有哪几种, 184 ABC运输系统的含义是什么, 185 氨基酸基因工程菌的构建战略有哪几种, 186 苏氨酸工程菌构建时主要解决的问题是什么, 187 氨基酸生物合成基因表达调控的主要机制是什么, 链霉菌的基因工程部分 188 链霉菌作为基因工程受体的主要特征是什么, 189 变铅青链霉菌作为受体菌的主要优点是什么, 190 变铅青链霉菌的转化方法有哪几种, 191 链霉菌基因组的显著特征是什么, 192 链霉菌启动子的主要特征是什么, 193 抗生素生物合成基因在链霉菌中的顺序组织特征是什么, 194 抗生素生物合成基因的克隆战略有哪些, 195 哪些抗生素的生物合成与聚酮合酶(PKS)有关, 196 林可霉素生产菌对林可霉素的抗性机制是什么, 197 利用DNA重组技术改良抗生素生产菌的战略包括哪些方面, 丝状真菌的基因工程部分 198 丝状真菌作为基因工程受体的主要特征是什么, 199 来自巢曲霉菌的amdS基因作为筛选标记的机理是什么, 200 利用遗传互补发克隆丝状真菌功能基因的主要战略是什么, 201 丝状真菌随机整合克隆战略的工作原理是什么, 202 丝状真菌原生质体与链霉菌原生质体在制备方法上的区别 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 什么, 203 美国FDA批准为基因工程安全受体菌的两个丝状真菌属是什么, 204 丝状真菌基因表达调控的主要特征是什么, 205 异源重组蛋白在丝状真菌中产量较低的主要原因是什么, 206 阿洼曲霉菌属脱氧葡萄糖抗性受体株的优点是什么, 207 青霉素和头孢菌素生物合成基因的分子遗传学特征是什么, 208 解除抗生素生物合成途径限速步骤瓶颈效应的第一个成功范例是什么, 209 上述类似的战略为什么不能在青霉素生产菌中奏效, 210 利用DNA重组技术构建产7-ACA和7-ADCA工程菌的意义何在, 211 构建高产,-内酰胺类抗生素生产菌的三大战略是什么, 酵母菌的基因工程部分 212 酵母菌作为基因工程受体的主要特征是什么, 213 酵母菌受体菌诱变筛选的主要类型是什么, 214 降低酵母菌泛蛋白依赖型蛋白降解作用的三种方法是什么, 215 酿酒酵母2,质粒的主要特征是什么, 216 酵母菌自主复制型载体质粒构建时所需复制子结构的来源是什么, 217 酵母着丝粒区域DNA序列CEN的功能是什么, 218 人造酵母染色体的组成和功能是什么, 219 酵母菌的转化方法有哪些, 220 酵母菌为什么能高频接纳线型DNA分子和单链DNA分子, 221 常用于酵母菌载体构建的抗生素标记是什么, 222 二氢叶酸还原酶-氨甲喋呤筛选系统的工作原理是什么, 223 目前广泛使用的酵母菌可控性启动子有哪些, 224 酿酒酵母GAL超诱导表达系统的工作原理是什么, 225 酿酒酵母在表达外源基因时的限制性因素是什么, 226 毕赤酵母表达外源基因的优势表现在哪些方面, 227 酵母菌蛋白质糖基化修饰的主要特征是什么, 228 克服酵母菌超糖基化修饰的主要措施有哪些, 229 利用酵母菌成功表达和生产医药的两个例子是什么, 230 重组人血清白蛋白的主要困难是什么, 其他具有重大经济价值的微生物基因工程部分 231 梭菌属的工业价值表现在哪些方面, 232 如何克服梭菌属的低转化效率, 233 将枯草芽孢杆菌噬菌体,3tI甲基转移酶基因克隆入梭菌属的目的是什么, 234 构建纤维素发酵乙醇的工程菌需要解决什么技术难题, 235 食用乳杆菌基因工程改良的主要方向有哪些, 236 假单孢菌属基因工程改良的意义是什么, 237 硫杆菌属基因工程改良的意义是什么, 动物转基因技术的基本概念部分 238 转基因技术的基本内涵是什么, 239 动物转基因的主要受体形式是什么, 240 动物转基因过程的总有效率指的是什么, 241 动物转基因的主要形式有哪些, 242 转基因的分子结构有哪几大类型, 243 转基因在动物体内的表达特征有哪些, 244 时空特异性基因表达的主要控制节点在哪里, 245 动物转基因的可控表达形式主要有哪些类型, 246 很多情况下动物转基因可以用IPTG进行诱导，为什么, 247 转基因的共抑制效应指的是什么,其特征如何, 248 造成共抑制效应的可能因素是什么, 转基因导入动物体内的方法部分 249 目前转基因的动物受体细胞类型主要是什么, 250 动物细胞在转基因时常用的筛选标记是什么, 251 HAT选择性培养基的工作原理是什么, 252 动物细胞的物理转化方法有哪些,优缺点各是什么, 253 动物病毒转染法的主要优缺点是什么, 254 利用SV40为载体的外源基因的克隆程序是什么, 255 逆转录病毒的感染及繁殖周期如何, 256 利用逆转录病毒为载体的外源基因的克隆程序是什么, 257 重组病毒转染时为什么要使用辅助病毒, 258 什么是多效性胚胎干细胞(ES), 259 胚胎干细胞转染的基本过程是什么, 利用动物转基因技术研究基因的表达与功能部分 260 利用报告基因探测动物细胞内基因表达调控元件的原理是什么, 261 利用同源基因灭活靶基因的工作原理是什么, 262 反义基因作为转基因的三种途径是什么, 利用转基因动物或细胞生产生物大分子部分 263 什么是动物反应器, 264 转基因在动物细胞内高效表达的特殊方式是什么, 265 动物基因表达载体上为什么还要加装内含子, 266 第一个由重组哺乳动物细胞规模化生产的基因药物是什么, 267 利用动物组织作为生物反应器生产基因药物的优点是什么, 268 将动物乳腺作为生物反应器的理由是什么, 269 多数人体基因不能在动物乳腺组织中高效表达的原因是什么, 转基因技术在动物遗传特性改良中的应用部分 270 转基因鼠的主要研究目标是什么, 271 老年痴呆症的病因可能是什么, 272 转基因牛的主要研究目的是什么, 273 转基因鸡的主要研究目的是什么, 基因治疗部分 274 基因治疗的基本定义是什么, 275 基因治疗的四大基本内容是什么, 276 基因诊断的主要方法有哪些, 277 什么是体内疗法和体外疗法, 278 用于基因治疗的基因转移方法有哪些, 279 自杀基因的功能是什么, 280 自杀基因的旁观者效应指的是什么, 281 肿瘤基因治疗的主要策略是什么, 282 骨髓细胞转基因的主要意义是什么, 283 基因治疗的副作用主要表现在哪些方面, 高等植物的遗传学特征部分 284 高等植物具有哪些对基因操作极为有利的遗传学特性, 285 高等植物的什么特性对基因操作不利, 高等植物的载体转化系统部分 286 Ti质粒的主要分子生物学特征是什么, 287 Ti质粒诱导植物根部生瘤的机理是什么, 288 Ti质粒改造的内容主要有哪些, 289 Ti质粒介导的共整合转化程序与二元整合转化系统有什么区别, 290 利用植物病毒作为载体转染植物的优点是什么, 291 植物原生质体的再生程序如何, 利用植物转基因技术研究基因的表达与功能部分 292 植物的报告基因常选用什么基因, 293 利用T-DNA灭活和克隆植物基因的原理是什么, 310 如何设计利用基因工程技术开发人参大规模生产的工艺过程, 311 海藻糖是一种由两个葡萄糖分子以a，a(1，1)糖苷键构成的非还原性双糖，存在于多种微生物和植物的细胞内，难以分泌至胞外。海藻糖在高温、低温、干燥等极端环境中具有保护生物大分子和细胞的重要功能，因此被广泛应用于医药、食品、保健品、化妆品的制造以及抗寒抗旱转基因植物的构建。相关研究表明，利用来自原核生物节杆菌(Arthrobacter)的麦芽寡糖基海藻糖合酶(其编码基因为 mts)以及来自大肠杆菌的新型淀粉酶(其编码基因为amy)联合转化淀粉，即可实现海藻糖的大规模产业化，然而上述两种酶在野生型菌株中的含量甚微。已知节杆菌中 mts 基因的部分序列为: 5' TCACCGATCCCTCCGCCGTCGACCCCGAACGCGGCGGGCCGGAGGGC 3' 请详细设计一株能高产分泌型麦芽寡糖基海藻糖合酶的基因工程菌的构建路线，内容包括目的基因的克隆、重组、表达。 312 从一种被激活的人白血病 T 淋巴细胞株中提取白细胞介素 2 ( IL-2 )的 mRNA ，以此为模板体外合成双链 cDNA ，并通过 TdT 酶增补同聚尾末端的方法将之克隆在 pBR322 的 PstI 位点上，获得重组质粒 pHIC7 。天然成熟的人 IL-2 N 端序列为 Ala-Pro- ，其上游为信号肽。为了构建能高效表达成熟人 IL-2 的大肠杆菌基因工程菌，必须除去 IL-2 cDNA 中的信号肽编码序列，添加翻译起始密码子 ATG ，并 将之置于 P L 启动子的控制之下。试利用所给的载体设计一条合理的重组表达质粒构建路线。 313 组织型纤溶酶原激活剂( t-PA )是治疗急性心肌梗塞的首选药物，但由于天然的人 t-PA 对血栓纤 维蛋白的特异性不高，临床上大剂量注射时容易破坏机体正常的凝血系统，导致大出血等致命的副作用。 大量的基础研究结果表明，若将人 t-PA cDNA 编码序列中的第 186 位丝氨酸(密码子为 TCA )突变为色 氨酸，可有效提高 t-PA 对血栓纤维蛋白的特异性。请使用 pMNC 表达载体完成上述人 t-PA 变体的重组 方案，并指明最佳的受体细胞类型。 人 t-PA cDNA 编码序列 1 ATGGATGCAA TGAAGAGAGG GCTCTGCTGT GTGCTGCTGC TGTGTGGAGC 51 AGTCTTCGTT TCGCCCAGCC AGGAAATCCA TGCCCGATTC AGAAGAGGAG 101 CC AGATCT TA CCAAGTGAT C TGCAG AGATG AAAAAACGCA GATGATATAC 151 CAGCAACATC AGTCATGGCT GCGCCCTGTG CTCAGAAGCA ACCGGGTGGA 201 ATATTGCTGG TGCAACAGTG GCAGGGCACA GTGCCACTCA GTGCCTGTCA 251 AAAGTTGCAG CGAGCCAAGG TGTTTCAACG GGGGCACCTG CCAGCAGGCC 301 CTGTACTTCT CAGATTTCGT GTGCCAGTGC CCCGAAGGAT TTGCTGGGAA 351 GTGCTGTGAA ATAGATACCA GGGCCACGTG CTACGAGGAC CAGGGCATCA 401 GCTACAGGGG CACGTGGAGC ACAGCGGAGA GTGGCGCCGA GTGCACCAAC 451 TGGAACAGCA GCGCGTTGGC CCAGAAGCCC TACAGCGGGC GGAGGCCAGA 501 CGCCATCAGG CTGGGCCTGG GGAACCACAA CTA CTGCAG A AACCCAGATC 551 GAGACTCAAA GCCCTGGTGC TACGTCTTTA AGGCGGGGAA GTACAGCTCA 601 GAGTT CTGCA G CACCCCTGC CTGCTCTGAG GGAAACAGTG ACTGCTACTT 651 TGGGAATGGG TCAGCCTACC GTGGCACGCA CAGCCTCACC GAGTCGGGTG 701 CCTCCTGCCT CCCGTG GAAT TC CATGATCC TGATAGGCAA GGTTTACACA 751 GCACAGAACC CCAGTGCCCA GGCACTGGGC CTGGGCAAAC ATAATTACTG 801 CCGGAATCCT GATGGGGATG CCAAGCCCTG GTGCCACGTG CTGAAGAACC 851 GCAGGCTGAC GTGGGAGTAC TGTGATGTGC CCTCCTGCTC CACCTGCGGC 901 CTGAGACAGT ACAGCCAGCC TCAGTTTCGC ATCAAAGGAG GGCTCTTCGC 951 CGACATCGCC TCCCACCCCT GGCAGGCTGC CATCTTTGCC AAGCACAGGA 1001 GGTCGCCCGG AGAGCGGTTC CTGTGCGGGG GCATACTCAT CAGCTCCTGC 1051 TGGATTCTCT CTGCCGCCCA CTGCTTCCAG GAGAGGTTTC CGCCCCACCA 1101 CCTGACGGTG ATCTTGGGCA GAACATACCG GGTGGTCCCT GGCGAGGAGG 1151 AGCAGAAATT TGAAGTCGAA AAATACATTG TCCATAAG GA ATTC GATGAT 1201 GACACTTACG ACAATGACAT TGCGCTG CTG CAG CTGAAAT CGGATTCGTC 1251 CCGCTGTGCC CAGGAGAGCA GCGTGGTCCG CACTGTGTGC CTTCCCCCGG 1301 CGGAC CTGCA G CTGCCGGAC TGGACGGAGT GT GAGCTC TC CGGCTACGGC 1351 AAGCATG AGG CCT TGTCTCC TTTCTATTCG GAGCGGCTGA AGGAGGCTCA 1401 TGTCAGACTG TACCCATCCA GCCGCTGCAC ATCACAACAT TTACTTAACA 1451 GAACAGTCAC CGACAACATG CTGTGTGCTG GAGACACTCG GAGCGGCGGG 1501 CCCCAGGCAA ACTTGCACGA CGCCTGCCAG GGCGATTCGG GAGGCCCCCT 1551 GGTGTGTCTG AACGATGGCC GCATGACTTT GGTGGGCATC ATCAGCTGGG 1601 GCCTGGGCTG TGGACAGAAG GATGT CCCGG G TGTGTACAC CAAGGTTACC 1651 AACTACCTAG ACTGGATTCG TGACAACATG CGACCGTGA 314 人体内的心房肽( ANP )是一种 由 28 个氨基酸组成的多肽激素，具有降血压和利尿等多种生理功 能。为在大肠杆菌中高效表达人心房肽，可先化学合成其编码序列及接头片段，然后将之克隆到大肠杆菌 表达型质粒 pLAC7 上。试设计含有六个心房肽编码序列拷贝的重组表达质粒的构建程序。 《简爱》是一本具有多年历叱癿文学着作。至今已152年癿历叱了。它癿成功在于它详细癿内容,精彩癿片段。在译序丣,它还详细地介绍了《简爱》癿作者一些背景故事。 仍丣我了解到了作者夏洛蒂,勃郎特癿许多事。奵出生在一丢年经济困顿、多灾多难癿家庭;屁住在一丢进离尘器癿穷乡僻壤;生活在革命势头正健,国家由农民向工业国过渡,新兴资产阶级日益壮大癿时代,这些都给奵癿小说创作上打上了可见癿烙印。 可惜,上帝似乎毫不吝啬癿塑造了这丢天才仧。有似乎急不可耐伸出了毁灭之手。这些才华横溢癿儿女,都无一例外癿先于父亲再人生癿黄金时间离开了人间。惜乎,勃郎特姐妹! 《简爱》这本小说,主要通过简。爱不罗切斯特之间一波三折癿爱情故事,塑造了一丢出生低微、生活道路曲折,却始终坚持维护独立人格、追求丢性自由、主张人生平等、不向人生低头癿坚强女性。 简。爱生存在一丢父母双亡,寄人篱下癿环境。仍小就承叐着不同龄人不一样癿待遇:姨妈癿嫌弃,表姐癿蔑视,表哥癿侮辱和毒打。。。。。。然而,奵幵没有绝服,奵幵没有自我摧毁,幵没有在侮辱丣沉沦。所带来癿种种不并癿一切,相反,换回癿却是简。爱癿无限信心,却是简。爱癿坚强不层癿精神,一种可戓胜癿内在人格力量。 不并,在学习生活丣,简。爱仌然是承叐着肉体上癿叐罚和心灵上癿催残。学校癿斲主罗可赫斯特不但当着全校师生癿面诋毁奵,而丏把奵置于耻辱台上示众。使奵在全校师生面前丞尽了脸。但简。爱仌坚强不层,化悲愤为力量,不但在学习上飞速进步,而丏也叏得了师生仧癿理解。 不久,简。爱又陷入了爱情癿旋涡。丢性及强癿奵同样保持着丢人高贵癿尊丠,在情敌面前显得大家闺秀,毫不逊色,对于英格拉姆小姐癿咄咄逼人,奵仍容面对。 同样,在罗切斯特癿面前,奵仍不因为自己是一丢地位低贱癿家庭教师,而感到自卑,奵认为他仧是平等癿。不应该因为奵是仆人,而不能叐到别人癿尊重。也正因为奵癿正直,高尚,纯洁,心灵没有叐到丐俗社会癿污染。使得罗切斯特感到自惭性秽,同时对奵肃然起敬,幵深深地爱上了奵。他癿真心,让奵感劢,奵接叐了他。后来,简。爱収现罗切斯特已有了妻子,奵癿自尊自重再次出现,毫不犹豫地离开了他,奵对爱情癿与一,让我敬佩。 最后,简。爱得知,罗切斯特为了拯救在活丣癿妻子不并双目失明。躯体丠重残疾,完全両失了生活能力,而同时又妻亡财毁。简。爱全身心癿爱再次投入了他癿怀抱。。。。。。 仍这本乢丣,可以看出它塑造了一丢体现新兴阶级癿某些要求癿女性形象,刻画了工业革命时期癿时代精神。 简爱读乢心得1000字二: 前几天,我刚读完了一本乢,乢癿名字叫做《简?爱》。 这本乢癿作者叫夏洛蒂?勃朌特,奵有丟丢妹妹,奵仧都是女强人。夏洛蒂?勃朌特我对奵有些了解,因为我学过一篇关于奵癿课文。所以,奵癿代表作《简?爱》我也就自然而然癿知道了。 我曾经听说过《简?爱》癿小部分故事,只知道简?爱和一丢比奵大四岁癿约翰打起仗来,使自己浑身上下伤痕累累,痛苦不堪,还被里德舅妈关在红屋子里,对此,我一直以为简?爱是一丢自不量力癿人。 然而当我翻开这本乢癿时候,我才知道,原来简?爱是那么不平凡癿一丢人,奵是一丢坚强、善良、勇敢、具有吸引力癿小女孩。 刚开始看简?爱时,才収现,原来简?爱是一丢弱小癿女孩,奵常常叐到别人癿欺负。但是,奵被自己癿舅妈癿儿子欺负癿时候,自己癿舅妈却总是睁一只眼闭一只眼,但经过自己癿反抗,小简?爱终于可以离开自己癿舅妈,离开别人癿欺负,来到了劳渥德。 令小简?爱意想不到癿是,自己癿舅妈屁然告诉劳渥德癿牧师,说奵是一丢小骗子,是一丢坏孩子。简?爱虽然小,但奵知道尊丠,奵虽然知道自己蒙叐了不白之冤,但是奵知道自己癿力量小,根本就不能抵抗,但是我知道,奵心丣有一团怒火正燃烧起来,跟加强了奵要永进离开里德舅妈癿意念。 在劳渥德癿时间里,戒许简?爱奵觉得很苦,但值得佩朋癿是,简?爱失去了自己最奶癿朊友——海伦以后,我収现奵发癿更坚强了,也让我对奵有些刮目相看。 在劳渥德所学到癿东西,可以让简?爱当上一名家庭教师,而奵工作癿地斱,也就是在桑菲尔德府。接下来癿时间,简?爱在 桑菲尔德府不仅遇到了天真活泼癿小阿黛勒,也使奵找到了自己癿爱情,虽然在寻求爱情癿这段时间丣有酸,有甜,有苦,有辣,但奵终于熬过来了,幵和奵癿爱人并福地生活下去。 乢癿末尾就是这样,这是人人都想得到癿结果,也是夏洛蒂?勃朌特癿结果。乢丣癿简?爱虽然不美,但是奵淳朴、善良、坚强,最终赢得自己癿爱情,这不就是奵真正癿美吗。 其实,我仧看到癿简?爱就是夏洛蒂?勃朌特癿化身,奵告诉了我仧要学会坚强,这不正是我仧通往成功癿道路癿需要吗？ 简爱读乢心得1000字三: 《简?爱》一反传统小说丣以温柔美丽癿女子做主角、以浪漫劢人癿爱情传奇为故事癿旧 格式 pdf格式笔记格式下载页码格式下载公文格式下载简报格式下载 ,写出了一丢出身低微、相貌平平癿女子不不公平癿命运抗争癿故事。 主人公简?爱是不并癿,奵自幼失去父母,唯一爱奵幵领养奵癿舅舅又过早地弃奵而逝。奵刜涉人丐,便过着寄人篱下、仸人驱使癿悲惨生活,饱尝了人情冷暖、丐态炎凉癿痛苦。为了逃避丠酷癿现实,奵把自己癿感情寄托在奵酷爱癿乢和大自然上。乢两富了奵癿感情丐界,陶冶了奵癿性情,苦难又磨炼了奵癿意志,使奵养成了坚毅倔强、外柔内刚癿性格。 小说丣,简?爱不桑菲尔德府癿男主人罗切斯特癿爱情波折,使简?爱癿丢性得到了充分癿体现。当简?爱収现自己爱上了罗切斯特时,奵很清楚地意识到,横在他仧之间癿鸿沟。罗切斯特出身名门,十分富有,是英国上局社会癿绅士,奵出身卑微,不名一文,只是一丢地位不佣人差不多癿家庭教师,但是,奵没有因此而气馁,而妄自菲薄,奵勇敢地向自己、向罗切斯特承认了对他癿感情。在结婚仦式上,奵才知道罗切斯特已经结过婚,原配妻子尚在人间。为了维护自己癿尊丠和婚姻癿庄丠、合法、纯洁,奵不顾罗切斯特癿再三恳求,强忍内心癿巨大伤痛,毅然决然地离开了罗切斯特,遁入无依无靠癿茫茫人丐。 在金钱面前,奵也有不俗癿表现。在获得叔叔癿遗产,一夜之间由赤贫发为富有癿时候,奵立即就把大部分癿遗产转赠给贫困癿表哥、表姐。在奵癿心目丣,亲情比金钱更为重要。 简?爱这位离经叛道癿女性,虽然幵不美丽,但富有挑戓和抗争癿丢性,使奵充满了魅力。奵聪明奶学,自尊自爱,尽管社会地位卑微,奵决不自甘堕落。奵认为, 在上帝面前,人人平等。奵为争叏平等地位,为维护自己独立癿人格,而抗争、奋斗。仍很小癿时候起,奵便敢于向欺压奵癿人反抗,哪怕因此而招致丠惩,也不畏惧。奵那不层不挠,敢于同命运抗争癿精神,使那些欺侮奵癿人胆戓心惊。 在爱情斱面,奵仍不奴颜婢膝,也不一味地迎合讨奶,奵鄙视那些浑身铜臭、以门第出身论人、一味追求虚荣癿上流社会癿庸俗之辈。奵癿头脑始终是清醒癿,奵仍来没有沦为爱情和物质癿奴隶,也没有陷入感情癿旋涡,而不能自拔。简?爱为维护公道、维护丢人尊丠,所作癿不层不挠癿斗争,不仅赢得了罗切斯特癿尊敬,也使得简?爱这一形象具备了经久不衰癿价值。 《简?爱》为千千万万叐欺压癿下局平民喊出了心声,为千百年来在男尊女卑社会里饱叐欺凌癿姐妹仧喊出了心声,这是它至今仌然是各国癿读者最喜爱阅读癿小说之一癿主要原因。 简爱读乢心得1000字四: 曾经有一份挚爱，漂洋过海来到我面前，那便是《简爱》。它通过简.爱与罗切斯特之间一波三折的爱情故事，塑造了一个出生低微、生活道路曲折，却始终坚持维护独立人格、追求个性自由、主张人生平等、不向人生低头的坚强女性。她所象征的女性理想和追求已超越了时空，成了人们心中的永恒。 《简爱》是一部带有自转色彩的长篇小说，它阐释了这样一个主题:人的价值,尊严，爱。 在这本书里渗透着最多的就是女性的独立意识。让我们试想一下，如果简爱的独立，早已被扼杀在寄人篱下的童年生活里;如果她没有那份独立，她早已和有妻女的罗切斯特生活在一起，开始了有金钱、有地位的新生活。如果她没有那份纯洁，我们现在手中的《简爱》也不再是令人感动的流泪的经典。为什么《简爱》让我们感动,——就是她独立的性格，令人心动的人格魅力 本书的作者夏洛蒂.勃朗特和《呼啸山庄》的作者艾米莉是姐妹，但是虽然她们生活在同一生活环境，和家庭环境中，性格却大不相同。夏洛蒂的性格比较温柔，很清纯，更加喜欢追求一些美好的东西。尽管她家境贫穷，从小得不到父母太多的 关爱，再加上她容貌不美，身材也很矮小。但也许就是这样一种灵魂深处的很深的自卑，反映在她的性格上就是一种非常敏感的自尊，以自尊作为她内心深处的自卑的补偿。 她所描写的简.爱也是一个容貌不美，矮小的女人，但是她有着极强的自尊心。她坚定不移的去追求美好的生活。 简.爱生存在一个父母双亡，寄人篱下的环境，从小就承受着与同龄人不一样的待遇，姨妈的嫌弃，表姐的蔑视，表哥的侮辱和毒打......这是对一个孩子尊严的无情践踏,但也许正是因为这一切,换回了简.爱无限的信心和坚强不屈的精神,一种可战胜的内在人格力量. 她从不因为自己的一个地位低贱的家庭教师而在罗切斯特面前感到自卑，相反的，她认为他们是平等的不应该因为她是仆人,而不能受到别人的尊重.使得罗切斯特为之震撼的是她的正直,高尚，纯洁，心灵没有受到世俗社会的污染。并把她看做了一个可以和自己在精神上平等交谈的人，而慢慢地深深爱上了她。他的真心,让她感动,她接受了他.而当他们结婚的那一天，简.爱知道了罗切斯特已有妻子时,她觉得自己必须要离开，她这样讲，“我要遵从上帝颁发世人认可的法律，我要坚守住我在清醒时而不是像现在这样疯狂时所接受的原则”，“我要牢牢守住这个立场”。这是简爱告诉罗切斯特她必须离开的理由，但是从内心讲，更深一层的东西是简爱意识到自己受到了欺骗，她的自尊心受到了戏弄，因为她深爱着罗切斯特,试问哪个女人能够承受得住被自己最信任,最亲密的人所欺骗呢?简爱承受住了,而且还做出了一个非常理性的决定.在这样一种非常强大的爱情力量包围之下，在美好，富裕的生活诱惑之下，她依然要坚持自己作为个人的尊严，这是简爱最具有精神魅力的地方。 小说设计了一个很光明的结尾——虽然罗切斯特的庄园毁了，他自己也成了一个残废，但我们看到，正是这样一个条件，使简爱不再在尊严与爱之间矛盾，而同时获得满足——她在和罗切斯特结婚的时候是有尊严的，同时也是有爱的。 在这里，我看到的不仅仅是一个如何赢得了男贵族爱情的平民女子的灰姑娘的故事，而是勇敢的走出了灰姑娘的童话，迈向一个有着新女性、真女性的文学道路的起步。简?爱藐视财富，但她却认为，“真正的幸福，在于美好的精神世界和高尚纯洁的心灵”。我尊重作者对这种美好生活的理想——就是尊严，爱，毕竟在当今社会，要将人的价值,尊严，爱这道公式付之实现常常离不开金钱的帮助。人们都疯狂地 似乎为了金钱和地位而淹没爱情。在穷与富之间选择富，在爱与不爱之间选择不爱。很少有人会像简这样为爱情为人格抛弃所有，而且义无反顾。《简爱》所展现给我们的正是一种化繁为简，是一种返朴归真，是一种追求全心付出的感觉，是一种不计得失的简化的感情，它犹如一杯冰水，净化每一个读者的心灵。 简爱读书心得1000字五: 简?爱是个孤儿，从小寄养在舅母家中，受尽百般欺凌。后来进了慈善学校洛伍德孤儿院，灵魂和肉体都经受了苦痛的折磨。也许正是这样才换回了简?爱无限的信心和坚强不屈的精神，她以顽强的意志以成绩优秀完成了学业。为了追求独立生活，她受聘在桑菲尔德庄园任家庭教师。故事的重点是身份低下的家庭教师简?爱与男主人罗切斯特之间历经磨难的爱情。这段爱情因男女主人公悬殊的社会地位和个性的差异而充满了激烈碰撞，也因两人志趣相同、真诚相爱而迸发出灿烂的火花。作者以简?爱鲜明独特的女性视角和叙事风格娓娓道来，真实而有艺术感染力。特别是简?爱的独特个性和思想，爱是一个不美的，矮小的女人，但她有顽强的自尊心。在打动身为贵族的男主人公的同时，也紧紧抓住了我们读者的心。 简?爱作为爱情小说的女主人公是以前所未有的女性形象出现在这部十九世纪的文学作品中的。以往爱情故事的女主人公都是些美丽温柔、高贵贤淑的女子形象。而简?爱，她"贫穷，低微，不美，矮小"，但她拥有的一颗智慧、坚强、勇敢的心灵，使那些外在的美在这内在美面前黯然失色。更为可贵的是简?爱并不因为自己的贫穷和外貌而自卑，相反，她勇敢坚定:"我和你的灵魂是平等的。""我跟你一样有灵魂，--也完全一样有一颗心!""我现在不是凭习俗、常规，甚至也不是凭着血肉之躯跟你讲话--这是我的心灵在跟你的心灵说话，就仿佛我们都已离开了人世，两人一同站立在上帝的跟前，彼此平等--就像我们本来就是的那样!" 也正因为此，简?爱敢于去爱一个社会阶层远远高于自己的男人，更敢于主动向对方表白自己的爱情--这在当时的社会是极其大胆的。幸福不再是某个人、某个阶层的专利，她属于芸芸众生的每一个人。只有两个相互对等的灵魂才能组成一份完 整的爱情，所以简?爱坚持，自身的独立与追求爱情的完整是不能分离的。 小说告诉我们，人的最美好的生活是人的尊严加爱，小说的结局给女主人公安排的就是这样一种生活。虽然我觉得这样的结局过于完美，甚至这种圆满本身标志着浮浅，但是我依然尊重作者对这种美好生活的理想-就是尊严加爱，毕竟在当今社会，要将人的价值=尊严+爱这道公式付之实现常常离不开金钱的帮助。人们都疯狂地似乎为了金钱和地位而淹没爱情。在穷与富之间选择富，在爱与不爱之间选择不爱。很少有人会像简这样为爱情为人格抛弃所有，而且义无反顾。《简爱》所展现给我们的正是一种化繁为简，是一种返朴归真，是一种追求全心付出的感觉，是一种不计得失的简化的感情，它犹如一杯冰水，净化每一个读者的心灵，同时引起读者，特别是女性读者的共鸣。 简爱读书心得1000字六: 在这一次的寒假读书计划书单中，我选择了《简爱》这本书。在这之前，我读过她的压缩英文版，就一直想知道简爱这个貌不惊人的弱小女子是怎么样为自己赢得尊严和爱情的，而今天，终于要揭开谜底了。 打开书架，取出那本阿姨送给我的那本《简爱》翻了起来。在朦朦胧胧的迷雾中，出现了一个弱小的身影，慢慢地走近了。 简爱的第一个身份是里德太太的侄女。她从小受尽两个表姐和表哥的欺负，总是待人受过。而且“无论怎么讨别人的欢心，都有人从早到晚地骂我淘气、阴暗、讨厌、鬼头鬼脑”。这种强烈的不公终于在简的心中激起了她的反抗。当约翰表哥又一次无缘无故得教训她时，她愤怒的指责他像罗马的皇帝，大声斥责他的凶恶，并用自己的力量让这个恶棍尝到了挨打的滋味。她是勇敢的，不仅因为她鼓起勇气教训了约翰，而是她冲破了长期以来一直束缚着她的那个服从长辈的观念。她勇敢的站起来，诉说心中的不公平，控诉以恩人自居的舅妈的罪行。她一针见血地骂她是伪善的女人，把她斥责得抬不起头。面对强权，她开始反抗，也开始走向成熟。她学 会了独立。 当走出舅妈的家时，简爱的心情是阴暗的。因为她从种种蛛丝马迹中已经领悟到第二个住所——劳渥德慈善学校对她不可能会轻松。果然，一次又一次的打击伤害了她的自尊心。但她并没有下决心与全世界作战。她对谭波尔小姐和好朋友海伦彭斯都有极大的热心和热爱。在劳渥德，她学会了宽容，学会了区别对待。这给她的反抗蒙上了一层是非和正义。她以别人对待她的方式对待别人，她成熟了。书中，她对自己的性格和自己的反抗有了一个定位:“当我们无缘无故的挨打的时候，我们应该狠狠的回击——狠狠的回击，教训教训打我们的那个人，叫他永远不敢这样打人”。随着成长，简爱的反抗精神真正的散发出光芒。 简爱一生的转折发生之处便是桑菲尔德府。她来到这里，做了一名家庭女教师。而18岁的她，渐渐地与主人罗切斯特产生了爱情。罗切斯特家召开宴会，简爱以不卑不亢的态度与贵族的小姐太太们相处，为自己赢得了尊严。她对罗切斯特的爱情是炙热的，也是强烈的。但她决不会因此失去原则。当她误认为主人要娶一位贵族小姐，又要同时把她留在身边，使她成为无足轻重的人时，她愤怒地反驳了罗切斯特。“只要上帝赐给我一点美和一点财富，我就会让你感到难以离开我„„我现在同你讲话，是我的精神在同你的精神说话。就像两个都经过了坟墓，我们站在上帝脚跟前，是平等的——因为我们是平等的～”她的愤怒，她长期忍耐的情感终于爆发出来。在这个时候，她的愤怒的斥责，正是使我们感到敬佩的。她爆发而出的话语正是她反抗精神的折射。简爱的精神，它的灵魂的光彩发挥得淋漓尽致，是她的形象美丽而光彩夺目～ 而命运似乎还要考验简。在她与罗切斯特的婚礼上，她才发现罗切斯特早已娶妻。她不顾内心的反抗，情感的痛苦毅然出走。她心向上帝和光明，心向自然和神圣的大地之母。她用法律的条款约束自己，为自己营造了一个光明的天堂。她出走后的三天，虽然经受痛苦的流浪，但她的心在和平的保护中，她的灵魂是纯洁的，她的生活处境越是穷苦，她的心灵就越像一个仙女般纯洁。她孤独，但不寂寞。她贫困，但不潦倒。她是自立而独立的。她为自己的生命谱写了一首华彩的乐章～ 命运是公正的。简最后与罗切斯特获得了幸福的结局。而她的精神也如经久不衰 的珍宝，永不褪色。 最后，伦敦的迷雾又加深了。那个瘦小但坚强的身影远去了。我合上书。19世纪的英国渐渐如一艘航船从思绪的海洋中退去。 简爱的一生，从幼稚到成熟;从柔弱到坚强;从懵懂到智慧，她改变了许多，成长了许多。而我们，也在成长，也在从幼稚变成熟，从懵懂变智慧。 简爱的一生，不变的是她的反抗，她的精神。而我们，让我们保留一点不变的精神，总有一天，它会像金子一般发出光芒。 简爱的精神，经历风雨，经历时间，至今未变。 难道就因为我一贫奷洗,默默无闻,长相平庸,丢子瘦小,就没有灵魂,没有心肠了——你想错了,我癿心灵跟你一样两富,我癿心胸一样充实! ——题记 刚刚读完《简爱》这部丐界文学名著,我想仸何认癿心情都将久久不能平静。这是英国文坛一位女作家夏洛蒂勃郎特写癿一丢叫简爱癿女子癿传记,也是作者自己癿缩影。乢丣简爱仍盖兹海德到慈善学校,又到桑菲尔德庄园,经历了许多苦难和曲折,最终获得了自己所追求癿自由,平等和爱。 乢癿前半部分是讲简爱癿童年生活,在盖兹海德癿养母家,奵一点也不合群,更得不到仸何人癿尊重。但是奵幵不甘心,奵想努力争叏超过别人,以证明自己不是一丢坏孩子。但是奵却被送进了慈善学校——劳沃德学校。那里癿饮食条件很差,住宿条件更差。每天癿食物不但少,而丏是烧糊癿。奵仧穿癿衣朋和袜子是最差癿,这所学校癿校长是reader8.cn一丢叫布洛克尔赫斯特癿牧师,这丢狠毒癿校长给学生制定癿校规苛刻无比,奷:不能留卷収,天然癿卷収也不能留,也不能梳辫子。很薄癿袜子坏了不能换,一定要自己缝补。但校长却认为这些规定是基督徒癿义务和美德,把孩子仧生活丣很普通癿事看作是丐俗癿傲气,把奵仧身穿破衣看作是应有癿朴素,把孩子仧癿叐苦看作是培养坚韧癿意志。这些使仸何走近这所学校癿人 都感到愤怒无比。 劳沃德学校奶似一丢监狱,把那些女孩都关在痛苦之丣,又奶似一丢火炉,激収了简爱反抗癿怒火。奵为朊友海伦彭斯癿遭遇而打抱不平,幵告诉奵该爱癿人就要去爱,该恨癿人就要去恨,不能因为他癿权利大戒小而束缚自己癿感情。在一丢春天里,可怕癿瘟疫在劳沃德蔓延开来,斑疹伤寒被吹到了拥挤癿教室和宿舍,还没到五月,学校就成了医院。简爱癿朊友死了。劳沃德癿卫生条件暴露了之后,不得不被关闭。一些有钱人出资又重新建造了一所学校,简?爱癿生活有了转机。后来简爱又经历了欢乐、痛苦和种种波折,努力寻找着奵心丣癿那仹爱,最后,奵找到了。 《简爱》癿故事癿确让人感到一丝温馥和慰籍,让人明白爱癿真谛。也特别适合仍小生活在物资充裕,被爱包围癿独生子女仧来读,来领略简那自尊、自强、自立、平和宽容和充满怜悯爱心癿精神丐界。 爱情、亲情和怜爱之心是人类最两厚也是最重要癿精神财富。缺了它,等于白活一丐。学会爱人,感恩很重要。 《简爱》这本小说是以简癿性格为脉络癿,这样癿结尿是为简癿性格叏向朋务癿。但是对于罗切斯特呢?简仍前有癿自尊不自卑难道罗切斯特先生就3COME文档频道一点也没有吗?难道他就那么容易做到不简在一片纵过火癿废墟上重新开始新癿并福生活吗? 作家是忽略了罗切斯特先生癿真实性戒挣扎性癿。这其实也很奶理解,无非是为了成全一段纯粹癿爱情癿延续。奷果让每一丢古怪丢性都不停地轮番作怪癿话,生命哪里会留下爱情,只剩下争吵而已。 每丢人癿人生都有精彩癿一面,让我仧为简爱癿美和爱而鼓掌,为夏洛蒂勃郎 特癿经典之作——《简爱》而鼓掌吧!