研究药物抗炎试验方法小结

研究药物抗炎试验方法小结 抗炎实验: 1)对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 SD大鼠，普通级，体重200?209，;NIH小鼠，普通级，20?29选用200_+209SD大鼠66只，雌性，按体重随机分为6组，11只,组。模型对照组灌服等体积生理盐水;阳性对照药灌服阿司匹林0(109,kg，相当于临床等效量的1倍:穿心莲软胶囊商、中、低剂量组11(34 g，l(g、5(679,kg、2(84e,kg，分别相当于f瞄床等效量的10倍、5倍、2(5倍;穿心莲片组给药量同穿心莲软胶囊中剂量组。给药组每日灌胃给药1次，连续3天。末次给药前，排水法“’测量大鼠右后足趾正常体积(以踝关节为标志)，末次给药30min后，右后足趾皮下注射1,角叉菜胶悬液0(08ml,只，分别于致炎后l、2、3、4和6h测量右后足趾体积1次，计算致炎后不同时间足趾肿胀度。 2)对蛋清致大鼠足肿胀的影响 Wistar大鼠，雄性，体重130,1609，随机分为5组，6只,组，分别灌胃给予GQ 1(15、2(30、4(609,kg， FGC O(429,kg和等容积的蒸馏水，每天1次，连续2天。末次给药1h后，大鼠右后足跖皮下注射新鲜蛋清O(1mL,H，用排水法I测各鼠致炎前及致炎后0(5、l、2、3、4、5、6h的右后足体积，计算肿胀率和肿胀抑制率。 3)对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 选用20?29 NIH小鼠，雌雄各半，按体重随机分为6组。模型对照组灌服等体积生理盐水;阳性对照药灌服阿司匹林0(159,kg，相当予临床等效量的1倍:穿心莲软胶囊高、中、低剂量组16。389,kg、8。199,kg、4(109,kg，分别相当于临床等效量的10倍、5倍、2(5倍:穿心莲片组给药墨同穿心莲软胶囊中剂量组。给药组每日灌胃给药1次，连续3天。未次给药后30min，每鼠右耳内外两面均匀涂抹二甲苯各15 UL致炎(左耳对照不作处理，致炎3h后脱颈椎处死小鼠(剪下双耳，用直径8(5mm打孔器取左右对称耳片，电子天平拣重，左右耳重量差计为肿胀度。 4)对小鼠二甲苯性耳肿胀的影响 昆明种小鼠，雄性。体重18,229，随机分为5组，10只,组。 实验组灌胃给予GQ 1(65、3(30、6(609,kg，阳性对照组灌胃给予FGC O(609,kg，空白对照组同法给予等容积的蒸馏水(O(4rnL,109)，每天1次，连续2天。末次给药lh后，各鼠左耳廓前后两面均匀涂抹二甲苯20u L，30min后处死小鼠，剪下两耳廓，用8mm打jL器打下左、右两耳片，称重，计算肿胀度和肿胀抑制率。 肿胀度(mg)=左耳片重(mg)-右耳片重(mg) 肿胀抑制率(%)={对照组平均肿胀度(mg)-给药组平均肿胀度(mg)}/对照组平均肿胀度(mg) 5)对醋酸介导小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响 选用20?29 NIH小鼠，雌雄各半(按体重随机分为6组:模型对照组灌服等体积生理盐水;阳性对照药灌服阿司匹林0(159,kg，相当于l临床等效量的1倍;穿心莲软胶囊高、中、低剂量组8(199,1cg、4(109,kg、2(059,kg，分别相当于临床等效量的5倍、2(5倍、1(25倍;穿心莲片组给药量同穿心莲软胶囊中剂量组。给药组每目灌胃给药1次，连续3天。末次给药30rain后，尾静脉注射0(5,伊文思蓝0(1ml,109，随即腹腔注射0(6,醋酸0(1ml,109，30min后脱颈椎 处死小鼠，每鼠腹腔注射生理盐水5ml，打开腹腔收集3ml腹腔洗液，定容至10ml，3000转,min离心10min，收集上清液，用UV一260型紫外分光光度计测定D值(波长590nm)。 表2(3穿心莲软胶囊对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 组别 剂量(g/kg) 致炎前足趾体致炎后不同时 积ml 间足肿胀度ml 模型对照组 1h 2h 3h 4h 阿司匹林组 穿心莲(H) 软胶(M) 囊组(L) 穿心莲片组 表2-4穿心莲软胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 组别 例数 剂量(kg) 肿胀度(mg) 抑制率(%) 模型对照组 阿司匹林组 穿心莲(H) 软胶(M) 囊组(L) 穿心莲片组 昆明种小鼠:雌雄兼黑，体重18?229，普通级 昆明种小鼠60只，体重18(229，雌雄各半，按性别和体重随机分势6组，每 组10只，即:空白对照组;模型对照组;阳性药对照组为对乙酰氨基酚174(8mg,kg组;复方美沙芬50，100和200mg,kg组。 操作方法及观测指标的测定和计算 阳性药对照组和复方美沙芬各剂量组小鼠13服灌胃给药0(4ml,209体重，空 白对照组和模型对照组给以等体积5,淀粉糊。给药后1小时，除空白对照组外， 其余各组小鼠尾静脉注射l,伊文斯兰0(1 ml,209体重，5分钟后腹腔注射0(7,醋酸溶液0+2ml,209体重。于注射后20分钟将小鼠放血处死，用生理盐水冲洗腹腔，收集清洗液，并稀释至10ml，然后加入0(1ml 0(1tool NaOH，放置l小时后1000xg离心lO分钟，取上清液在510nm处比色。 复方美沙芬对小鼠腹膜毛细血管通透性的影响 组别 剂量 动物数 吸收值 空白 ------ 模型 ------ 对乙酰氨基 复方美沙芬 6)对棉球所致大鼠肉芽肿增生的影响 sD大鼠50只，体重180一2209,只，雄性。选用体重1809一2209左右大鼠50只，雄性。腹腔注射25,乌来糖(0(45ml,lOOg)进行麻醉后，在每只大鼠的左右腹股沟处先用碘酒消毒，后用75,酒精棉球脱碘后，各切开皮肤约icm长的纵切口，用眼科镊子将两个灭菌棉球(每个棉球20mg，高压灭菌，各加入氨苄青霉素每个lmg,O(Iml，50。C烘箱烤干)分别植入大鼠两侧腹股沟皮下，随即缝合皮肤，术后随机分为五组。从手术当天开始灌胃给药，每天一次，药容量为lml,lOOg，复方土牛膝剂量组(33(129,kg、16(569,kg、8(289,kg)，正常对照组给予同容量的蒸馏水，连续9天，阳性对照组给予阿司匹林(0(29,kg)。第10 天将大鼠颈椎脱臼处死，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，在70?烘箱中放置12h后称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重。统计时剔除切口处发炎者。以肉芽肿及其系数，用t检验，比较阿司匹林组、给药组与正常对照组对肉芽肿抑制的差异显著性。 棉球肉芽抑制率(,)=(给药组棉球肉芽平均净重一空白组棉球肉芽平均净重) ,空白组棉球肉芽平均净重×100, 肉芽肿系数=棉球肉芽肿净重(mg),体重(1009) ?sD，) 对棉球状所致大鼠肉芽增生的影响(x 组别 剂量动物数(n) 棉球肉芽净肉芽系数净肉芽抑制率 (g/kg) 重(mg) 重(mg)(%) /(100g) 蒸馏水 复方牛膝低剂量 复方牛膝中剂量 复方牛膝高剂量 阿司匹林 感清对大鼠棉球肉芽肿形成的影响 Wistar大鼠30只，雄性，随机分为5组。乙醚浅麻醉下，在各鼠的左右腋窝部用碘酒消毒，75,酒精脱碘后，各切开lcm长的切 口，用眼科镊子将已称重为20mg的灭菌棉球(上加青霉素和链霉素混合液0(2 mL)从切口处植入腋窝部皮下，随即缝合皮肤。术后2h开始给药，分别灌胃给予GO 1(15、2(30、4(60?kg，FGC 0(429,kg和等 容积的蒸馏水，每天1次，连续6天。第7天处死大鼠，打开原切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，于90。C烘箱干燥1h，取出称重，减去原棉球重量，即为肉芽肿重，以mg,lOOg体重表示。