大蒜体外抑菌实验

大蒜体外抑菌实验 大蒜液体外抑菌作用的实验研究 摘要:研究大蒜液的体外抑菌作用。,方法,采用抑菌环试验和营养肉汤稀释法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌等致病菌进行抑菌试验，进行了最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)的实验研究。,结果,大蒜液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌等菌株的抑菌环直径均大于7 mm;对多种常见微生物均有较强的抑菌和杀菌作用。,结论,大蒜液在体外具有明显的抑菌作用。 关键词:大蒜;抑菌作用;抑菌环;最小抑菌浓度 Study of the Bacteriostatic Action Invitro of Garlic Solution Abstract:,Objective,To study the bacteriostatic action invitro of garlic solutionMethods,To use the bacterial inhibition ring assay and the nutrient broth diluted method to do minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) test for 11 kinds of pathogenic micreoor,Results,ganism,such as Staphylococcus aureus,Ecoli,Candida albicans et alResults,The average diameter of the inhibition rings of the garlic solution to 11 bacteria were all over 7 mmConclusion,Garlic solution had remarkable bacteriostatic action invitro Key words:Garlic;Bacteriostatic action;Inhibition rings;MIC 引言:大蒜营养丰富，风味独特，用途广泛，鲜食佐餐 均可，加工产品种类繁多，可作调味品、食品添加剂、 饲料添加剂及美容化妆品的原料。大蒜具有杀菌、抑 菌、抗病毒等医疗、保健功能对高血脂、高胆固醇、糖尿病、心脏病及胃、肠、肝、肺、乳腺等癌症有减轻 症状及治疗作用。蒜素是大蒜瓣和蒜精油中含硫化 合物的总称，具有不同程度的杀(抑)菌作用，被誉为 天然杀(抑)菌剂。通过本次试验解决大蒜 不同浓度下表现出对Hp的抑制作用。进一步验证大蒜对Hp的抑制作用随其溶液浓度的升高而增强，而且其抑菌作用与剂型密切相关。 1 材料与方法 1.1 材料 大蒜;实验用细菌:金黄色葡萄球菌、酵母菌、大肠杆菌等细菌。 1.2 方法 1.2.1 大蒜液的制备 将新鲜大蒜去皮洗净晾干表面水分，称取大蒜100 mg，用洁净的家用砸蒜器将大蒜捣成蒜泥(事先在砸蒜器内加氯化钠0.9 g，以减少大蒜的异味)，4 000 r/min离心10 min 吸取上清20 ml，过滤除菌，分装小瓶，放,20 ?冰箱保存。 1.2.2 细菌悬液的制备 将试验菌分别接种于营养琼脂斜面，37?培养18 h，用吸管吸取5 ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0 ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合20 s以使细菌悬液均匀。将细菌悬液按严格无菌操作程序进行101102103稀释。吸取其中混合均匀的悬液10 ml加于无菌平皿内，每一稀释度接种3个平皿，将冷至40,45?的熔化营养琼脂培养基，倾注于已加菌液的平皿中，每平皿15,20 ml随即转动平皿，使样液与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37?培养箱内培养24 h计数菌落数，以菌落数15,300 cfu的平板为准，每个稀释度3个平板生长菌落数全合乎上述 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 ，则以该3个平板的菌落平均值作为结果; 若有2个符合上述标准，则以该合格的2个平板菌落的平均值为结果。用〖CM(23〗稀释液稀释菌悬液，使菌悬液的含菌量为 5×105 ,5×106cfu/ml 1.2.3 试验菌的接种 用无菌棉拭子分别蘸取浓度为5×105,5×106 cfu/ml试验菌悬液，分别在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，将平板转动60 o，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周，盖好平皿，置室温干燥5 min。 1.2.4 抑菌片的制备 将新华一号定性滤纸，用直径5 mm的打孔器打成5 mm的圆片，经高压灭菌处理后，置120?干燥2 h,保存备用。取处理好的滤纸片放入洁净平皿内，每4层滤纸片(厚约4mm)滴加含量为0.84 g/ml的大蒜液20μl为试验样片;阴性对照样片滴加20μl 生理盐水，将两者分别平放于清洁的无菌平皿内，置无菌室晾干，放无菌平皿内备用。 1.2.5 抑菌剂样片贴放 每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片、1片阴性对照样片放在平皿中心，共5片。无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距25 mm以上，与平板的周缘相距15 mm以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面，盖好平皿，置37?温箱，观察结果。测量抑菌环时，选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行测量，用数显游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)，并 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 测量数据。实验重复3 判定标准: 抑菌环直径大于7 mm者判为有抑菌作用，抑菌环小于或等于7 mm 者判为无抑菌作用，3次重复试验均达到有抑菌作用结果者，判为合格。阴性对照组应无抑菌环产生，否则试验无效。 1.2.6 最小抑菌浓度测定实验(营养肉汤稀释法) 用蒸馏水将大蒜液进行倍比稀释，取各稀释度受试液25 ml加入到含有双倍浓度营养肉汤的试管中;取0.1 ml含菌量约为106 cfu/ml菌悬液接种于含大蒜液的试管中，作为试验组样本。以同样的方法接种不含大蒜液营养肉汤的试管中，作为阳性对照组样本;取2支含营养肉汤的试管，作为阴性对照组样本。将试验组样本、阳性对照组样本及阴性对照组样本放37?培养箱中，培养48h,观察结果。当阳性对照管有菌生长(浑浊)，阴性对照管无菌生长(透明)，试验组以肉眼观察无菌生长的药液最高稀释度为MIC。从无菌生长的各管内取100 μl，分别加入琼脂平板，放37?培养箱中，培养48 h,观察细菌生长情况，无菌落形成的药液最小浓度为MBC。 3 结果与分析: 3.1 大蒜液的抑菌环试验结果 大蒜液在抑菌环试验条件下,试验重复4 次,大蒜液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌等致病菌均有抑菌作用,大蒜液在不同实验温度条件下抑菌效果 3.2 大蒜液最小抑菌浓度实验结果 (营养肉汤稀释法) 当用蒸馏水将大蒜液进行倍比稀释1 ?128 时,大蒜液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌等致病菌仍有抑菌作用。 4 结论: 实验失败所得结论不成规律，但表现出抑菌作用， 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 大蒜液对多种致病菌有较好的抑菌抗菌作用。 5 讨论:Aligarh Muslim Univer sty 等发现大蒜提取物能有效抑制芽孢萌发和黑植酸生长。Kirubaharan JJ 等也验证了大蒜提取液的抗菌活性[5 ] 。近几年来大蒜的药效作用被医学界所广泛认识,大蒜中的大蒜 素具有多种功能,其中广谱杀菌功能被普遍认可,但人们经常食用新鲜大蒜液的抑菌作用缺少理论依据,本研究证明,大蒜素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌等菌种均有明显的抑菌作用。 6 体会和建议: 体会了实验过程，熟悉操作，虽然手法生疏，但独立操作受益良多。 实验过程因多方面因素影响，另外准备不是很充分导致实验出现很多失误，最后结果总体无规律，实验失败。但增加了经验。 随结果总体无规律可循，但单个平皿可看出大蒜提取液对金黄色葡萄球菌，酵母菌，大肠杆菌等致病菌有较好的抗菌抑菌作用。故为保证身体健康,减少疾病,建议大家适量吃大蒜,抑制致病菌，从而促进人体健康。 7 大蒜应用的问题与展望 一直以来人们认为大蒜素是大蒜提取液中的主要活性成分。近年来 的研究技术不断进步，人们从大蒜中分离出了越来越多的活性成分包括 阿霍烯、蒜素蛋白等等。蒜素是一种很不稳定的物质，但是提取液能一直保持很长时间依然有较强的抑菌活性，大蒜中除了大蒜素之的一些物质也有较强的抗菌活性。其抑菌活性物质的研究有待于进一步深入。 我国有很丰富的大蒜资源。我国是世界上大蒜重要的生产国与出口 国。我国大蒜种植面积在30 万h ?,占亚洲种植面积的1/2,占世界植面积的1/3,产量在300 多万吨。我国许多省份适合种植大蒜，并且油各种各样的品种种子资源，非常有利于筛选专用的大蒜品种，如高大蒜素的品种，富含硒的品种等。我国大蒜出口集中在山东和江苏少数几个省，有利于发展大蒜深加工业。开发植物性杀菌剂已成为当前农业可持续发展的很重要的一个方面。大蒜作为一种很有开发潜力的植物，有着广阔的前景。 大蒜一直被认为对农作物病害病原菌有良好的抑制和控制作用。在农业生产中，尚没有成熟的大蒜制剂被用于防治植物病害。应该利用我国丰富的大蒜资源优势，加快大蒜作为植物源农药的开发。