用反相高效液相色谱法分离和测定丁烯二酸的顺反异构体

用反相高效液相色谱法分离和测定丁烯二酸的顺反异构体 分析测试学报第 19 卷 第 2 期Vol . 19 No . 2 ()FENXI CESHI XUEBAOJournal of Instrumental Analsis 2000 年 3 月y Mar. 2000 用反相高效液相色谱法分离和 测定丁烯二酸的顺反异构体 1 2 2 1 1 李金昶 , 赫奕 , 孙颜 , 王广 , 崔秀君 ( ) 1. 东北师范大学 分析测试中心 , 吉林 长春 130024 ; 2. 吉林工业大学 应用化学系 , 吉林 长春 130025 摘 要 : 建立了分离和测定丁烯二酸的 2 个异构体 ———顺丁烯二酸和反丁烯二酸的反相高效液相色谱法 。 以( ) Shi m - ack CLC - ODS 柱为分析柱 , 以甲醇 - 水 体积比 5 ?2 , 用磷酸调至 为流动相 , 流速 0. 7 mL/ mi n , H 3. 0pp ( ) 检测波长为 220 nm , 外标法定量。 顺、反丁烯二酸的检出限分别为 0. 10 和 0. 075 m/ L S / N = 2; 相对 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 偏差 g( ) 分别为 0. 47 %和 0. 54 % n = 3。 二者的线性范围均为 10,60 m/ L 。 该法具有简便、快速、灵敏度高的特点 , g 用于实际样品测定 , 其结果令人满意。 关键词 : 反相高效液相色谱法 ; 顺丁烯二酸 ; 反丁烯二酸 ; 异构体 ( ) 中图分类号 : O623. 614文献标识码 : A文章编号 : 1004 - 4957200002 - 0072 - 03 ( ) ( ) 丁烯二酸存在顺反异构体 , 顺式丁烯二酸 ?又称马来酸 , 反式丁烯二酸 ?又称富马酸 , 它们的结构式如下 : HC —COOHHOOC —CH ‖‖HC —COOH HC —COOH ( )( )? ? 1 丁烯二酸的两个同分异构体都是重要的有机合成原料, 因此 , 它们的分离和测定具有重要意义 。2 3 顺丁烯二酸或反丁烯二酸的测定通常用电位滴定法或薄层色谱法, 但对二者同时进行分离和测定 , 尚未见报道 。 我们采用反相高效液相色谱法 , 对丁烯二酸的两个异构体进行了分离和测定 。该法具有简便 、 快速 、灵敏度高的特点 , 测定结果令人满意 。 ( ) 收稿日期 : 1999 - 05 - 30作者简介 : 李金昶1948 - , 男 , 吉林长春人 , 副教授 . ( ) 上接 71 页 Non - euili bri um Flow Inection Sectrohotometrfor Nitrite Determi nationqjpp y ZI Yan- n , CHEN Li - iuoqg ()Deartment of Chemi str, Huai bei Coal Teachers Collee , Huai bei235000 , Chi na py g Ab stra ct : The reaction of nitrite with basic fuc hsi n i n acid medium was studied b flow i nection sec2y jp trohotometr. The exeri ment conditions are oti mized. A new anal tical method for the determi nationof p yppy trace nitrite based on non- e ri ncile is established usi nself- assembled and comuterized flowuilibrium qp pg p i nection anal zer. The li near rane for nitrite is i n 0. 0,5. 0 m/ L , anal tical seed is 36/ h. The jyggypmethod was alied to direct determi nation of nitrite i n collase lake water , fishond water , ower lantppp ppp waste water and well water with satisfactorresults.y Ke rd s : Nitrite ; Flow i nection anal ; Sectrohotometr; Basic fuchsi nwosis jypp y y 1. 1 仪器与试剂 () LC - 6A 高效液相色谱系统日本岛津公司: 包括 LC - 6A 高压溶剂输送泵 ; SPD - 6AV 紫外 - 可见检测 器 ; CTO - 6A 柱温箱 ; SCL - 6B 系统控制器 ; C - R4A 色谱数据处理机 。 () 顺丁烯二酸和反丁烯二酸标准品均为分析纯 分别为天津市化学试剂一厂和北京化工厂生产; 甲醇为优 () 级纯 北京化工厂; 其它试剂均为分析纯 ; 实验用水为经离子交换树脂柱处理后再经亚沸蒸馏的纯净水 。 1. 2 色谱条件 ( ) 色谱柱 : Shi m - ack CLC - ODS6. 0 mm ×150 mm , 5m, 预柱p μ ( () 4. 6 mm ×30 mm , 5m; 流动相 : 甲醇 - 水 体积比 5 ?2 , 用磷酸调 μ ) 至 H = 3. 0; 流速 0. 7 mL/ mi n ; 柱温 40 ?; 检测波长 : 220 nm。p 1. 3 测定方法 用流动相配制顺丁烯二酸和反丁烯二酸标准溶液和样品溶液 , 外 标法定量 。 2 结果与讨论 2. 1 测定波长选择 对顺丁烯二酸和反丁烯二酸的标准溶液进行紫外光谱扫描 , 结果 甲醇含量对保留时间的影响图 1发现 , 顺丁烯二酸和反丁烯二酸分别在 206 nm 和 201nm 有最大吸收 , Fi. 1Effect of content of methanol on g 但在这两个波长下测定干扰较大 , 不宜选作测定波长 。 我们选用 220 retention ti me nm 作为测定波长 , 干扰少且吸收较强 。 ( ) 1. 顺丁烯二酸 cis- butendioic acid;( ) 2. 反丁烯二酸trans- butendioic acid 2. 2 流动相中甲醇的含量 () 选择甲醇 - 水 用磷酸调至 体系作为流动相 。 固定流动 H 3. 0p 相的流速为 0. 7 mL/ mi n , 改变流动相中甲醇的含量 , 测定丁烯二酸 2 个异构体标准溶液的保留值和峰面积 。 结果表明 , 随着流动相中甲 醇比例的减少 , 反丁烯二酸的保留值逐渐增大 , 而顺丁烯二酸的保留 () 值增大后减小 , 然后趋于稳定 。 在甲醇与水H 3. 0的体积比为 5 ?p ( ) 2 时出现最大差值 图 1。 甲醇含量的变化对二者的峰面积影响不 大 。 综合考虑保留值与灵敏度两项指标 , 我们选择流动相中甲醇与 水的体积比为 5 ?2 。 2. 3 流动相酸度 流动相 值对保留值的影响 H 图 2p 固定流动相中甲醇与水的体积比为 5 ?2 , 用磷酸调节流动相的 Fi. 2 Effect of H on retention ti megp H 值分别为 2. 0 、3. 0 、4. 0 、5. 0 、6. 0 , 测定丁烯二酸顺 、反异构体 p ( ) 1. 反丁烯二酸trans- butendioic acid;标准溶液的保留时间和峰面积 , 结果表明 : 随着流动相 值的增加 , H p ( ) 2. 顺丁烯二酸cis- butendioic acid二者的保留值均呈先增大而后减小趋势 , 但当 H > 4. 0 时 , 峰的形状 p 明显逐渐变差 。 时 , 二者又难以分开 , 比较合适的酸度范 H < 3. 0 p ( ) 围在 ,4. 0 之间 见图 2, 流动相的 值变化对峰面积影响 H 3. 0H p p 不大 。 我们选择流动相的 为 3. 0 。H p 2. 4 检出限 、精密度及标准曲线 在选定的色谱条件下 , 按实验方法测定丁烯二酸的顺 、反异构体 ( ) 标准混合溶液 , 得色谱图 图 3。 顺 、反丁烯二酸的检出限分别为 ( ) 0. 10 m/ L 和 0. 075 m/ L S/ N = 2, 相 对 标 准 偏 差 RSD 分 别 为gg 图 3 标样色谱图 Fi. 3 Chromatoram of standard samleggp ( ) 1. 反丁烯二酸 trans- butendioic acid; ( ) 2. 顺丁烯二酸cis- butendioic acid 74 分析测试学报 第 19 卷 ( ) 0. 47 %和 0. 54 % n = 3。 分别配制质量浓度为 10 、20 、30 、40 、50 、60 m/ L 的顺 、反丁烯二酸标准系列溶液 , g ( ) 按上述方法进行测定 , 以色谱峰面积 Y 与对应的质量浓度 X m/ L作标准曲线 , 求出顺 、反丁烯二酸的回归 g 4 4 ( ) 方程分别为 Y = 0. 31 + 1. 01 ×10X 和 Y = 0. 19 + 1. 19 ×10X , 相关系数 r 分别为 0. 977 3 和 0. 998 1 n = 3。 二者的线性范围均为 10,60 m/ L 。g 2. 5 回收率 向已知含量的样品中加入一定量的标准溶液 , 按上述色谱条件及实验方法测定 , 计算回收率 , 结果见表 1 。 表 1 回收率测定 ( )Table 1 Results of recoverexeri ments n = 3y p RecoverAmount i n samleAdded Found RSD y p Comoundp - 1 - 1 - 1 . . . )))( ( ( R/ % sr / % S / L A / L F / L g g g ρ ρ ρ ) 0. 20 ( 0. 20 3. 81 90. 5 cis- Butendioic acid 顺丁烯二酸0. 20 0. 20 3. 93 96. 5 1. 61 0. 20 0. 20 3. 86 93. 0 ) ( 0. 15 0. 20 3. 44 97. 0 trans- Butendioic acid 反丁烯二酸 1. 52 0. 15 0. 20 3. 32 94. 3 0. 15 0. 20 3. 40 95. 0 2. 6 实际样品测定 ( ) 按选定的试验方法对顺丁烯二酸反应液进行分离测定 , 结果顺丁烯二酸为 12. 7 % w, 反丁烯二酸为 ( ) 0. 31 % w。 参考文献 : 1 奚若明 , 张明国. 中国化工医药产品大全M. 北京 : 科学出版社 , 1990. 11710 , 11720. 2 SONG Xi n- hua , XU Ji n , Yu Ru- i n. Artificial neural networks alied to otentiometric titration of multi- comonent olbasicg qpppppy ( ) acid mi xturesJ . Mi krochi m Acta , 1993 , 111 4: 199. 3 PALAMAREVA M , KOREKOV I , J UROVA I. Chromato rahic behaviour of diastereoisomers : ?Effects of alumi na on seara- gpp ( ) tions of esters of maleic and fumaric acidsJ . J Chromato r , A , 1994 , 6701 - 2: 181.g Determi nation of Two Butendioic Aci d Isomers bReversed -hasey p Hih - erformance Liui d Chromatorahgpqgp y 1 2 2 1 1L I Ji n- chan, HE Yi, SUN Yan, WANG Guan, CUI Xi u- unggj ( 130024 , Chi na ; si s and Test , Northeast Normal Universit, Chanchun1. Center of Anal yy g )130025 , Chi na 2. Alied Chemi strDeartment , Jili n Universitof Technolo, Chanchunppy py gy g Ab stra ct : A method for the determi nation of two butendioic acid isomers b reversed - hase hih- er2y p gp formance liuid chromatorahis described.trans - butendioic acids were searatedcis - Butendioic and qgp y p () bShi m - ack CLC - ODS column , usi nmethanol - water 5 ?2 bvolumesolution adusted to H 3. 0 y pg y jp bhosmi n. The uantitative results are obtai nedhoric acid as a mobile hase with flow rate of 0. 7 mL/ y p p p q The de2 bexternal standard method. The detection wavelenth of 220 nm is alied for the samles. y gppp ( ) tection li mits are 0. 1 m/ L and 0. 075 m/ L S / N = 2, and relative standard deviations are 0. 47 % gg ) ( and 0. 54 % n = 3for cis - and t rans - butendioic acid , resectivel. Li near rane for both isomers is i npyg 10,60 m/ L. The method is si mle , raid and sensitive , and was alied to determi nation of ractical gpppppsamles with sati sfactorresults.py - B utendioic acid ; trans - B utendioic acid ; cis Ke wo rd s : Hih- li uid chromatoraerformance h;gpqgp y y Isomer