质谱定量蛋白质检时机成熟了吗

质谱定量蛋白质检时机成熟了吗 - quot quot ampquot 问与答 amp amp . 2 9 / 1 4 6 2 :2 由 -0- 3 5 78 8 4 供稿 质谱定量蛋白质检测 时机成熟了吗 1 /3 2 amp 6 / - . / 0 amp - 4amp 5 - /. 7 7 8 amp9 2 :amp 世 纪 年 代 液 相 色 谱 与 串 联 质 谱 于满足 工作流程和实验室的性能 D O D amp 的成功联用开辟出一条对低分子量 FA A 需要 符合 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 化操作 程 序 用和高分子量物质检测有着极佳特异性和灵敏度的新 质谱做蛋白定量 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 目前主要用道路 正如前面 问与答 文章中所讨论的 目前质 于研究而不是做临床常规分析之谱 A 对于检测类固醇激素 药物 维生素 氨基 D 用充其量它可以被认为是一种酸生物来源的氨基和许多其他小分子物质来说已 特 殊的分析平台 仅在有限的实经是一种常规的工具 我们现在正在进入一个依靠 验 室应用质谱做蛋白定量检测的时代 因为用质谱区分蛋白 8gtlt- A 1 3 X 人们可能 有些和小分子量物质是很容易的 在这篇 问与答 文 误解认为质谱分析很难且需要 章中 位该领域的领军人物回答了目前及将来用 非常有经验的操作者 这项技术质 谱定量蛋白 单个或多个 而不再需要用抗体或 的快速革命已经使其操作不再比其 谱分析很贵 但由于它有很他标记试剂的应用前景 临床分析仪复杂 也有人认为质 强的 一 你认为为什么基于质谱的蛋白检测方法在 分析能力并可以做多种分析 所 临床实验室还没有广泛开展呢 以其实每项分析的成本并不比 V 或其他常规 DT 方法高多少 最后 用户对于新方法还有种自然的 D8 2E :80 临床实验室的仪器设 备主要用 91 8 4 抵触情绪认为它还没有经过实践证明 考虑到这 点对于质谱分析 方法的误解就可以理解了 - : 8 D/ - F 1 有许多原因 包 I 1 . 2 9 -0- 3 5 2 8 4 7 lt8 9 :/3 8 gt 8 3 / gt / 1 4 678 :2 - 1 - .5/ 3 / 03 : 8 1 3 81 括 V 和 其 他 免 疫 分 析 方 法 DT - B A C:/ :8 E 4 / 8 2 8 - 1 - 3 F2 8 G3 94gtA 2:- 3 D2 2 3lt2 : 7 lt8 9 :/ . B 2 0- 21 / :2 B / 目前已经可以满足大部分临床医 :2 4gtE 80 - 1 : - 1 - .3 / gtA 2:-8 -2 / KL /H I1/ - J /3 8 7 lt8 9 :/3 8 1 3 81 - B 2 :5/ 23gt :2 1/ . 3 :/ 3 :/ :/ 2 8 8 8 3 H I 4gt3 M1 3 1 3 8 3 :8 6 03 -2 3 M 3 N 1 F 生感兴趣的蛋白质的基本定量和amp FA A 非标准 缩写 D O D液相色谱 P质谱联用A HN D质谱E 5 人 性能 分 析 当 然 不 是 所 有 工 作类蛋白组组织DQ E Q A单反应监测0R 人生长激素A A多反应监测S T7 食品和药物监督局F N Q 合同研究组织 7 N 最低检测限 这些分析的运行基于高度 自动化 U T N 最低定量限U 质量保证F 5 T 美国病理家学会5 TA 上市 的临床分 析仪的应用 如果准备前批准T 7 抗体DV稳定同位素稀释6 D8 2 8 4 531 E 8 A C 2 :3/4 S- E B :4: 91E :80 1 8 - 3 B 8 8 4B 1 9 - 17 2 C/ 3 02 好血浆和血清则很少需 要人工处理 相反质谱分 8 - Q 48 0 - - 8 B 1F :B1 --1 F :/ D-/- /WT 6 析需要对大量 生化样本进行处理 这些方法不是标 8 gtlt- 2 B 1 QA -3 2 1 9 L- --1 :28I : D B 22 A 1 3 X 71 / G V D G3 8 1Q 48 0 V //-2 AM 1 3S4 1 2 2B 8 1 - T 0- 9 2 DB :/2 9 2 A 6 0- - .F 准化可包装或自动化的 另外 D O D 仪器的 FA A D/ - T 8 71 / .53 3 2 G3 V /C/ 3 V 8 - : 6F 1 2 B 13 1 -9B 1 I 1 -3 / 4 8 :4/ - .A M : 2 操作需要有经验的人员才能 得到满意的结果 操作 88I F 9 2 A 6 E 1 1 8 1 - TY 人员需要明白什么时候出现了问 题 显然 质谱分 9 :C- S 5/B : V 1 -4 3 . - 4 371 / - - 13 V . 3 -DB :B 8 6 - 2 2 V53 4 1 . 2 2 - F 2 B 1F :/ -3 1. T 2 1 -9B 8 A C A 2:- -1 83 H I1/ 3 ltlt53 3 2 : 3 B 8 - B R 3 -A 4: :2 4gt 1 - / 4 - 1 2 - 2 析中还不可能仅依靠仪器里的 黑盒子 处理样本 8 4 Z 6 8A :844 T 进行定量蛋白分析和分析结果数据 还需要操作人员的适时处理 三 你 认为对于可以检测多种不同分析物是该 Y 9 :C- S 5/B : V 13 V 8 6 -2 2 V 与 方 法的吸引力之处吗 大部分临床免疫方法相比 即使 D 最先进的 A 技术的分析灵敏度 91 8 4 D8 2E :80是的一定对于分析物中相似成 都不高 事实上 人类蛋白组组 分的检测将会促进也需要我们分析健康和疾病两种 织所做的血浆蛋白组工作并不能 状态的情况 证明其检测到的临床最常见物质 - : 8 I 1 D/ - F 1 当然 是的 相比于传统免疫学方 的动力学范围是多少 直到我们 法质谱分析可以同时检测多种分析物主要基于多采用快速前期浓缩和分馏技术用于质谱检测 分析 反应检测通道的巨大优势 只要蛋白组分通过多种灵敏度的瓶颈才被克服然后质谱可以每天分析几 方法处理后在分析仪的测定范围内只需 千例生物样本的蛋白质成分 的患者血浆我们就可以分析成千上万种蛋白质成 分 而当前的其他免疫学方法对多种物质的同时检 二质谱技术最适于分析什么样的物质 出尚有欠缺且其特异性和分析性能尚不尽人意 A 1 3 X绝对是 通常认为大多数情况下 8gtlt- A1 3 X小分子量物质的单反应监测 8gtlt- 在复杂疾病中只监测一个生物标志物不具有特异 DQ 分析已经在临床上应用很多年了 蛋白质和 A 性多个标 志 物 联 合 分 析 可 提 高 检 测 和 分 析多肽目前正在成为目标分析物 效能 D/ - F 1 有针对性的基于质谱效 率 分析的小分 I - : 8 1 8 6 - 2 2 V 某些新的标志物单独 13 V 9 :C- S 5/B : V子量物质的定量检测正被广泛应用 质谱主要用于 可产生高的临床敏感性和特异性的时代已经结束 特别是在药学 药物代谢物的监测和药代动力学 了确实将来属于多种标志物联合检测的时代 不的分析包括激素药物和其代谢物 质谱应用于蛋 仅在质谱中需要分析多个标志物 临床实验同样也白质分析还是近年来的事从原理上来说蛋白质可 需要 特异的多反应检测通道的应用 使质谱技术以通过基于质谱的方法进行分析然而目前性能最 更适于分析已知的同工型变异体 特别是对于那些 O好的质谱主要用来分析血中低到 :9 浓度水平的 有足够 分 度 但 不 能 通 过 传 统 免 疫 方 法 区 分 的 分蛋白质 由于血中蛋白质的浓度太低 目前无法检 析物测 要实现这种低浓度的检测 在质谱检测前 需要将大量蛋白质进行有限的分馏处理 或者使用高 四你认为 V 方法将迟早让位于基于质谱 DT亲和力肽或蛋白质抗体试剂进行分析物的初始免疫 的蛋白分析方法吗沉淀反应 8 6 - 2 2 V 我们一直建议常规临 13 V 9 :C- S 5/B : V 8 6 - 2 2 V 由于分析灵敏度的原 13 V 9 :C- S 5/B : V床实验室检测小分子量肽段因为这些片段的丰量高 因这种替代还不是很快但随着快速蛋白质浓缩与于其亲体型 且其诊断价值是在亚型而不是亲体型 分馏技术的快速发展 V 方法将失去优势 免 DT中 然而商业化的 V 方法很难做到这点因为 DT 疫 质谱方法纳米收割颗粒分馏技术等的应用使工其不能区分蛋白质各亚型间的差别 如果我们需要 DT 作流程正在具体化 最终质谱会代替 V 方法成从同一个蛋白质中检测一段有诊断价值的特殊的蛋 为输出终端白质亚型常规的免疫分析方法很难做到 例如人 D/ - F 1 我认为 V 方法还会使用一段 I - : 8 1 DT类生长激素 0R 的检测 其总的激素水平并不能 E 时间但基于质谱的蛋白分析方法将会在 amp 年时 反映服用兴奋剂的情况 而其亚型的分布则是确凿 间里代替临床实验室的免疫方法 实验室中的质谱的证据质谱可能是快速区分这些亚型的惟一方式 分析最适用于易受其他免疫方法检测干扰的蛋白质 D8 2E :80浓度不受变量修饰 单核甘酸多 91 8 4 分析 如近来在 amp 年 月份 F2 B 0- 21 :2 8 F 94gt/态性 转录后修饰 选择性剪接 影响的分析物 或 上发 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 的有关甲状腺球蛋白的文章中E 3 及 :8 - 3. 一些需要进行特殊样本采集和处理过程否则将降解 其同事发展了一 种 A A 的分析方法 使当前的临 Q的化合物 床分析方法又上了一个台阶 在一段更长的时间范 amp围内随着新的蛋白标志物出现免疫学试剂已经不 展 目前 我们正在快速发展时期 我预计 在未来能满足其质量的要求 替代当前的 V 方法可 DT 几年大多数临床实验室将通过至少一个或两个基能需要食品和药物管理局的批准反过来也需要仪 于质谱的标准化测试器厂商提高其仪器的自动化程度 可溯源性和简单性开发出更智能化的软件系统来分析大量数据而 六您还有什么要说的吗不需要专家监督 这需要与质谱的经销商合作 让他们在投资之前看到机会 也需要一些监管机构的 8 6 - 2 2 V 我一直在思考一个问 13 V 9 :C- S 5/B : V变化用新设备协助开发新的测试项目 题如果高通量的质谱方法成为临床诊断分析的基 A 1 3 X总是有些例子证明 V 方法是 8gtlt- DT 础那么需要满足更重要的标准是什么 我认为任监测分析物最省钱的方法 然而 有些情况下分析 何技术应用于临床实验室都要克服几个障碍 即使物可能被蛋白裂解或由于转录后修饰有几种不同的 一种技术显示了科学的和 或 分析的优势 如更好形式存在质谱提供了检测这些特异序 7 最低定量限 N 等 如 N U径 这提高了分析的特异列的最好途 的最低检出限 性 从而导致当前许多检 果每个样本的检测成本 启动成本或其他使用的成测项目的 V 方法将让位于质谱方法 DT 本 临床实验室技术员 过高 那么 A A 分析可能 Q 永远 都 不 会 被 采 纳 此 外 如 果 用 于 质 量 保 证 五对于蛋白质分析在常规实验室中的前景您 U O F的样本和试剂 用于定量的标准品等没 T U看起来比其他同行更乐观您乐观的基础是什么 有及时更新和推广使用 那质谱很难在临床常规应 用中开展 如果基于 A A 的蛋白检测方法的重复 Q A 1 3 X质谱可能将很快成为临床研究的 8gtlt- 性量化措施和实验室内实验室间的验证没有循序检测手段并最终用于临床常规检测 这种观点基 渐进的进行那该方法在临床常规中很难应用于极于各种因素首先以免疫分析为基础的方法在检测 微量物质的测试 一种针对常规技术检测不到的含多种形式的靶生物标志物时不够特异 在许多情况 量极低的物质或分子的检测方法 由于不同的质下不仅完整形式的蛋白质与疾病相关而且蛋白质 谱平台使用的检查方法不同 目前尚不清楚何时以裂解产物也会与疾病相关 翻译后修饰也会增加蛋 及如何将一个平台上开发的方法用于另一个平台白的异质性 通常情况下 翻译后修饰或裂解产物 7 最后鉴于目前 S T对于蛋白质生物标志物检测方与完整蛋白的比率对疾病的诊断或预后具有参考价 法 包括多变量分析A A 衍生方法 或任何基于 Q值 利用抗体对这些进行检测往往不切实际 因其 质谱的实验 的监督还不完善 因此该方法需要在无法准确区分和定量这些形式的蛋白 而质谱可以 已通过美国病理学家学会 F 5 OT认可的实验 T FV准确鉴别这些细微的差别 第二 同时检测多种复 室中进 行 评 估 还 需 要 提 交 上 市 前 批 准 文 件 如合物的能力可以降低成本和增加基于质谱分析的产 5 T或 A出使它们更符合临床实验室的环境经济学 事实 D/ - F 1 目前检测蛋白质的 V 方法或 I - : 8 1 DT上许多大型合约研究机构 F N 已经将传统的 Q4 其他免疫方法已经有足够的特异性 敏感性且不易 V 检测方法替换为质谱分析方法 另一个质谱 DT 受干扰发展质谱技术的主要目的不是要取代上述广泛应用于临床的领域是新生儿筛查 由于这些检 方法去检测它们已经可以检测到的蛋白质 相反是测变得更常规成本将进一步下降 要检测目前抗体试剂不能检测到的新的蛋白质生物 第三 技术改进和样品准备工作的改善正在迅 标志物而这些蛋白标志物又有助于临床的早期诊速提高 质谱分析的灵敏度 简单性和稳定性 对于 断和判断预后 蛋白质组学 筛选实验已经发现一些临床相关的标志物 结合了抗体富集技术的三 了许多新的蛋白质生物标志物的候选者不幸的是 DT重四极杆单反应检测分析 可提供与 V 法相同 由于缺乏精确和特异的定量免疫方法来检测所有蛋的检测范围但具有更高的特异性 这进一步促进 白质在大量的患者和相应对照组样本中的含量 因了.