蒽酮-硫酸比色法测定九华山地区黄精中多糖含量

蒽酮-硫酸比色法测定九华山地区黄精中多糖含量 蒽酮-硫酸比色法测定九华山地区黄精中多 糖含量 药物研究2009年第18卷第16期 蒽酮一硫酸比色法测定九华山地区黄精中多糖含量 周斌,陈菊移,忻肠,陈涛,戴莹琦 (安徽省分析测试中心,安徽合肥230031) 摘要:目的测定九华山地区黄精药材中多糖含量.方法黄精多糖溶液经超声波提取 制得,以葡萄糖为对照品,采用蒽酮一硫酸比色法测定 多糖含量.结果葡萄糖质量浓度在6.602,66.020~g/mL范围内与吸光度有良好的 线性关系,线性回归方程为Y=0.01377+0.83565z, r=0.9998(n=6),平均回收率为100.02%,RSD=0.55%(n=6).结论该方法简单快速,灵 敏准确,可用于黄精中多糖的含量测定. 关键词:黄精;多糖;含量测定 中图分类号:R284.1;R282.71文献标识码:A文章编号:1006—4931(2009)16—0024 —02 DeterminationofPolysaccharidesinPolygonatumSibiricumfromJiuhuashanAreabyof Anthrone..SulfuricAcidColorimetry ZhouBin,Chenjuyi,Xi,ChenTao,DaiYingqi (AnhuiAnalysisandTestCenter,Hefei,Anhui,China230031) Abstract:ObjectiveTodeterminethepolysaccharidecontentinPolygonatumsibiricumfrom JiuhuashanareainAnhuiwithglucoseas referencecontro1.MethodsPolygonatumsibiricumpolysaccharidesolutionwasextracteda ndpreparedbyultrasonicwaveextractionsystem, thesealwo~polysaccharidecontentwasdeterminedbytheanthrone— sulfuricacidmethod.ResultsTheglucosecontentsshowedthefine linearityrelationintherangeof6.602— 66.020~g/mL,thelinearequationwasY=0.01377+0.83565.therelevancemodulusr=0.999 8 (n:6).Theaveragerecoveryratereachedto100.02%,RSD=0.55%(n=6).ConclusionTheme thodisrapid,simple,accurateandsensitive.It canbeusedtodeterminePolygonatumsibiricumpolysaecharide. Keywords:Polygonatumsibirieum;polysaccharide;contentdetermination 黄精PolygonatumsibiricumRed.属百合科多年生草本植物,药 用其根茎.黄精多糖是黄精主要活性成分之一,具有延缓衰老,增 强免疫,抗炎,抗病毒,降血糖,调血脂等作用.黄精为药食两用中 药,味道甘甜,且具特有香气,质地滋润,将其作为保健食品进行开 发利用,对于提高人体免疫力,延缓衰老,预防心血管疾病及糖尿病 等都具有重要的意义"1.由于糖类物质可与硫酸反应,脱水生成羟 甲基呋哺甲醛,再与蒽酮缩合成蓝色化合物,溶液颜色深浅与溶液 中糖浓度成正比,故可利用此特点测定溶液中糖含量1.本试验以 无水葡萄糖为对照品,采用蒽酮一硫酸比色法对安徽九华山地区 的黄精中多糖含量进行了测定,旨在为黄精药材的质量评价和进 一 步研究开发提供检测方法和依据. 1仪器与试药 紫外一可见分光光度计;FW100型高速万能粉碎机;DZF一 6020型真空干燥箱;OYJ3—50型多功能小型切片机.黄精Polygo— naturesibiricumRed.采集自九华山地区,挑拣并切片,放于冰柜中 冷藏,待用;葡萄糖,浓硫酸和蒽酮,均为分析纯. 2方法与结果 2.1药材处理 将放入冰箱中的黄精取出,切片,并在60?下真空干燥至恒 试验后体格检查出现窦性心动过缓,经判断无临床意义;未出现严 重不良反应. 3讨论 本试验以20名健康男性志愿者为研究对象,对两种左氧氟沙 星片剂从药物吸收程度和吸收速度两方面进行评价.采用荧光检 测器对样品进行检测,灵敏度高,血浆中的杂质干扰少.通过在流 动相中加入离子对及调整pH,很好地改善了色谱峰拖尾的现象, 所得数据真实准确.经统计分析,试验药物与对照药物的AUCo, AUCo一和C…均在规定范围内,无显着性差异;试验药物的 相对生物利用度为(100.7?8.4)%.因此,重庆市庆余堂制药有限 ? 24? ,粉碎,得到粉末,待用. 重,取出 2.2溶液制备 对照品溶液制备:精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖对照品 0.0330lg,置100mL量瓶中,用蒸馏水定容制得每1mL含0.330lmg 的葡萄糖对照品溶液. 黄精多糖提取及供试品溶液制备:称取于6O?干燥至恒重的黄 精生药粉末0.25g,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150mL,超声提取 15min后,置沸水浴中回流提取1h,趁热过滤,残渣用80%乙醇洗 涤3次,每次10mL,再将残渣连同滤纸置烧瓶中,加蒸馏水150mL, 置沸水浴中回流提取1h,趁热过滤,残渣及烧瓶用热蒸馏水洗涤4 次,每次10mL,合并滤液与洗液,放冷后移至250mL量瓶中,用蒸 馏水定容,摇匀即得供试品溶液. 2.3方法学考察 标准曲线绘制:取6支10mL具塞管,分别精密量取葡萄糖对 照品溶液0,0.2,0.5,1.0,1.5,2.0mL,加蒸馏水至2.0mL,摇匀, 在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮一硫酸溶液至刻度,摇匀,放冷后置 沸水浴中反应10min,取出,立即用流水冷却,室温放置,于620nm 波长处测定吸光度【3】.以吸光度为纵坐标,葡萄糖对照品质量浓度 为横坐标绘制标准曲线得回归方程Y=0.01377+0.83565,r= 公司生产的盐酸左氧氟沙星片与浙江京新药业股份有限公司生产 的盐酸左氧氟沙星片(京必妥新)生物等效. 参考文献: 【1】张莉,李家泰,吕媛,等.左氧氟沙星注射液及口服片剂在健康人 体内的药动学研究[J】.中国药学杂志,2001,36(12):834. [2]张莉,李家泰,赵彩云,等.国产左氧氟沙星片剂健康人体生物等效 性研究【J】.中国临床药理学杂志,2001,17(3):199. [3]张贵军,孙春华,李可欣,等.甲磺酸左氧氟沙星血,尿浓度测定及人体 内的药代动力学[J].中国抗生素杂志,1999,24(1):77. (收稿日期:2008—08—26) 中国药业ChinaPharmaceuticals 2009年第l8卷第l6期 0.9998(n:6).结果表明,葡萄糖质量浓度在6.602,66.02/xg/mL 范围内与吸光度呈良好线性关系. 精密度试验:精密吸取对照品溶液5份(0.3301mg/mL),各 0.2mL,按标准曲线绘制项下方法操作,测定吸光度.结果的RSD 为0.25%(IZ=5),表明仪器精密度良好., 稳定性试验:取同一供试品溶液,每隔1h测定1次,连续6h. 结果平均吸光度为0.434,RSD=1.10%(n=6),表明供试品溶液 在6h内稳定性良好. 加样回收试验:精密称取含量为136.4mg/g样品0.1221g, 依法制备供试品溶液(质量浓度为16.65Ixg/mL).精密量取葡萄 糖对照品溶液5.0,3.0和2.0mL,分别加入样品溶液10.0,5.0和 2.0mL,定容至100mL,每个质量浓度平行做2份,按"标准曲线绘 制"项下测定其吸光度,结果见表1. 表1无水葡萄糖加样回收试验结果(n=6) 样品含量(g/mL)加入量(/mL)剥得量(Ixg/mL)回收率(%)(%)RSD(~) 药物研究 2.4样品含量测定 精密量取按供试品溶液制备方法制备的溶液1.0mL,置10mL 具塞干燥管中加蒸馏水至2.0mL,摇匀,在冰水浴中缓慢滴加0.2% 蒽酮一硫酸溶液至刻度,摇匀,放冷后置沸水浴中反应10min,取 出,立即用流水冷却,室温放置,以蒸馏水为空白,在620am波长处 测吸光度.结果3批样品中多糖含量分别为136.45,137.05, 137.42mg/g. 3讨论 本试验选用0.2%蒽酮一硫酸比色法测定黄精中多糖含量,在 测定过程中显色剂应现配现用,加入时应缓慢滴加,在冰水浴中进 行,摇匀后在沸水中反应10min.蒽酮一硫酸比色法测定黄精中多 糖的含量,方法简单快速,灵敏度高,准确性好. 参考文献: [1】张瑞宇.中药黄精的研究和开发利用途径[J】.渝州大学(自然科 学版),2002,19(4):5—8. 【2】白云娥,李青山,王毅,等.冬虫夏草多糖的含量测定【J】.山西医科 大学,2000,31(2):129—130. 【3】杨辉.蒽酮一硫酸比色法测定玉竹多糖含量的研究[J】.安徽医学, 2006.10(8):587. [4】国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)【M】.北京:化学工业出 版社.2005:215. (收稿日期:2008—02—19;修回日期:2008—05—17) 赫赛汀联合盖诺治疗炎性乳腺癌1例 刘锦燕 (河北省保定市第二医院,河北保定071051) 中图分类号:R969.4;11979.1文献标识码:D文章编号:1006—4931(2009)16—0025 —01 患者女,31岁,于2006年1月因停经诊断为妊娠.3月发现左 乳红肿,疼痛,未引起注意,亦未给予特殊诊治.6月底即孕7月时, 因左乳红肿疼痛加重及左乳肿块于某医院就诊,经细针穿刺病理 考虑为乳腺癌,后又前往北京某医院行左乳肿块粗针穿刺,病理诊 断为左乳浸润性导管癌ER+PR+cerbB2++,结合临床表现诊断 为妊娠期左乳炎性乳腺癌.7月26日即孕31周时采取剖宫产术终 止妊娠并行双卵巢切除术,病理学诊断为乳腺癌卵巢转移.术后建 议患者再作病理学检查及免疫组化检查,必要时用曲妥珠单抗(赫 赛汀,上海罗氏制药有限公司)治疗,但患者家属拒绝,遂给予TA 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 (紫杉醇270mg及表柔比星90mg)4周期,并行胸壁放射治疗 (放疗总剂量6000Gy)一疗程,疗程中出现?度白细胞减少,予对 症处理,后一直口服来曲唑(2.5mg,每日1次).2007年10月患者 出现咳嗽,轻度发憋,气短,经检查发现双肺转移,癌性淋巴管炎, 右腋下淋巴结转移,胸腔积液及心包积液,于外院行多西他赛(艾 素)120ms(第1天),卡培他滨(希罗达)3000mg(第1,14天)化 疗2周期,疗效稳定.2007年11月患者咳嗽,喘憋加重,口唇紫绀, 颜面及四肢水肿,端坐位,不能平卧,复查病理免疫组化FISH染色 示cerbB2+++.在我院给予胸腔穿刺放血性胸腔积液近1500mL, 并于胸腔内先后注入顺铂共120mg,同时全身给予酒石酸长春瑞 滨(盖诺,江苏豪森药业股份有限公司)40mg(静脉注射,第1天及 第8天),赫赛汀4mg/kg(第1周,以后每周2mg/kg),治疗第1 周期后患者症状逐渐缓解,继以盖诺联合顺铂及赫赛汀治疗,共用药 3周期,此后单独予赫赛汀每周2mg/kg联合依西美坦25mg(口服, 中国药业ChinaPharmaceuticals 1次/d),患者无明显不适,复查胸腹CT逐渐恢复正常,临床完全 缓解,且无明显用药的毒副作用.坚持用赫赛汀11个月后出现脑 肿瘤转移,始行脑部放射治疗,同时继续应用赫赛汀治疗,2个月后 疗效达临床完全缓解,随访至今. 讨论:人表皮生长因子受体一2(Her一2)是由原癌基因编码的 受体,20%,30%的乳腺癌患者Her一2受体过度表达.赫赛汀是 以Her一2为靶点治疗乳腺癌的第一个分子靶向药物,单独用药有 效率为15%,30%….临床前试验结果显示,赫赛汀和长春瑞滨具 有协同作用,因此两药联用非常具有吸引力.两药中长春瑞滨不会 引起心脏毒性,恶心呕吐或脱发等不良反应,联用可能具有很好的 耐受性,而且可以很方便地每周同时给药1次,有效率高达84%,未 见预期以外的不良反应发生l.该患者为妊娠期炎性乳腺癌,临床 ?期,且Her一2过表达,恶性程度高,化疗后缓解期短.首次就诊时 建议其应用赫赛汀被拒绝,后发生多脏器转移,再次化疗时联合赫 赛汀,取得了临床完全缓解.由此可见,应用赫赛汀治疗Her一2过 表达的患者可显着延长生存期.对于适合赫赛汀治疗的转移性乳腺 癌患者,不论是单药治疗还是联合化疗,建议将其作为一线用药. 参考文献: ,李丽庆,宋三泰,等.注射用曲妥珠单抗治疗晚期乳腺癌临床 [1]孙燕 验证结果【J】.中华肿瘤杂志,2003,25(6):581—583. [2]狄根红.赫赛汀在转移性乳腺癌治疗中的应用和进展【J】.实用癌症 杂志,2003,18(6):664—666. (收稿日期:2009—04—18) ? 25?