【A型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.以下哪种物质在PCR反应中不需要( )
A.Taq DNA聚合酶
B.dNTPs
C.Mg2+
D.RNA酶
E.合适pH缓冲液
2.以下哪种酶可耐高温( )
A.Taq DNA聚合酶
B.Hind Ⅲ
C.T4连接酶
D.RNA酶
E.Klenow片段
3.PCR反应正确过程应为( )
A.退火→变性→延伸
B.变性→退火→延伸
C.退火→延伸→变性
D.变性→延伸→退火
E.延伸→变性→退火
4. PCR技术的本质是( )
A. 核酸杂交技术
B. 核酸重组技术
C. 核酸扩增技术
D. 核酸变性技术
E. 核酸连接技术
5.Taq DNA聚合酶酶促反应最适温度为( )
A.37℃
B.50℃~55℃
C.70℃~75℃
D.80℃~85℃
E.94℃~95℃
6.温度均一性较好的PCR仪为( )
A.水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪
B.半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪
C.压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪
D.压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪
E.水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪
7.一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为( )
A.普通PCR仪
B.梯度PCR仪
C.原位PCR仪
D.荧光PCR仪
E.实时PCR仪
8.能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为( )
A.普通PCR仪
B.梯度PCR仪
C.原位PCR仪
D.荧光PCR仪
E.实时PCR仪
9.SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术( )
A.eppendorf公司
B.MJ公司
C.Cepheid公司
D.Roche公司
E.ABI公司
10.应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪( )
A.普通PCR仪
B.梯度PCR仪
C.原位PCR仪
D.荧光PCR仪
E.实时PCR仪
11.在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数( )
A.普通PCR仪
B.梯度PCR仪
C.原位PCR仪
D.荧光实时PCR仪
E.定性PCR仪
12.以下是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多( )
A.样品A,Ct = 20
B.样品A,Ct = 22
C.样品A,Ct = 24
D.样品A,Ct = 26
E.样品A,Ct = 28
13.以空气为加热介质的PCR仪是( )
A.金属板式实时定量PCR仪
B.96孔板式实时定量PCR仪
C.离心式实时定量PCR仪
D.各孔独立控温的定量PCR仪
E.荧光实时定量PCR仪
14.以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子( )
A.ABI 7500
B.ABI 7900
C.Light CycleTM
D.SmartCyclerⅡ
E.RG3000
15.以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器( )
A.ABI 7500
B.ABI 7900
C.Light CycleTM
D.SmartCyclerⅡ
E.RG3000
16.可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是( )
A.ABI 7500
B.ABI 7900
C.Light CycleTM
D.SmartCyclerⅡ
E.RG3000
17.拥有独立智能升降温模块的是( )
A.ABI 7500
B.ABI 7900
C.Light CycleTM
D.SmartCyclerⅡ
E.RG3000
18.容纳样品量大,无需特殊耗材的是( )
A.ABI 7500
B.ABI 7900
C.Light CycleTM
D.SmartCyclerⅡ
E.RG3000
19.PCR基因扩增仪最关键的部分是( )
A.温度控制系统
B.荧光检测系统
C.软件系统
D.热盖
E.样品基座
20.“位置的边缘效应”是指( )
A.温度的准确性欠佳
B.温度的均一性欠佳
C.边缘升降温速度快
D.边缘升降温速度慢
E.梯度模式和标准模式温度不一致
21.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外( )
A.缩短反应时间
B.提高工作效率
C.消除位置的边缘效应
D.缩短非特异性反应时间
E.提高反应特异性
22.在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能的原因是( )
A.样品孔温度与设定温度不一致
B.样品孔间的温度有差异
C.样品孔位置的边缘效应较高
D.升降温速度不够快
E.不同模式温度特性有差异
23.定量PCR扩增仪的关机次序一般为( )
A.关软件→关PCR仪→关电脑
B.关软件→关电脑→关PCR仪
C.关PCR仪→关软件→关电脑
D.关PCR仪→关电脑→关软件
E.关电脑→关PCR仪→关软件
24、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A、①②③④
B、②③④⑤
C、①③④⑤
D、①②③⑥
25、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( )
A、0.3-1mmol/L
B、0.5-1mmol/L
C、0.3-2mmol/L
D、0.5-2mmol/L
26、多重PCR需要的引物对为( )
A、一对引物
B、半对引物
C、两对引物
D、多对引物
27、PCR是在引物、
模板
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和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为( )
A、模板
B、引物
C、dNTP
D、镁离子
28、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( )
A、TaqDNA聚合酶加量过多
B、引物加量过多
C、A、B都可
D、缓冲液中镁离子含量过高
29、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是
A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料
B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖
C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋
D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一
30、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:( )
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
31、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:( )
A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段
B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等
C.PCR技术需在体内进行 D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则
32、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥
33、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是
A.640 B.8100 C.600 D.8640
34、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置, 哪份标本最有可能确诊为禽流感 ( )
A.M B.N C.Q D.W
35、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序是
①降低温度,检测处理后形成的杂合DNA双链区段
②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA
③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中
④在一定的温度条件下,将巨型动物和大象的DNA水浴共热
A.②④③ B.②④③① C.③④① D.②④①
36、 PCR的发明人是
A. Mullis B. 牛顿 C.Kenny D. James
37、 退火温度一般比引物的熔解温度(Tm)低多少合适
A. 7℃ B. 10℃ C. 5℃ D. 2℃ E. 20℃
38、引物的最佳浓度为
A. 0.1-0.5 μM B. 1-2μM C. 5-10μM D. 100μM E. 200μM
39、专门用于制备单链DNA的PCR技术是
A、对称PCR
B、反向PCR
C、RT-PCR
D、不对称PCR
E、嵌套PCR
40、PCR变性温度一般为
A. 96℃ B. 85℃ C. 72℃ D. 55℃ E. 100℃
41、pre-mRNA 内含子的5'-末端一般为 ( )
A、AU
B、GU
C、AG
D、CG
E、AC
42、在大肠杆菌的DNA损伤修复时,对于填补缺口可能最重要的酶是
A、DNA聚合酶Ⅰ
B、DNA聚合酶Ⅱ
C、DNA聚合酶Ⅲ
D、RNA聚合梅
E、以上都不是
43、 可用于扩增未知序列的PCR方法是( )
A、 对称PCR
B、 反向PCR
C、 RT-PCR
D、不对称PCR
E、 嵌套PCR
44、在聚合酶链反应(PCR)中最常用的DNA聚合酶是
A.T4 DNA连接酶
B.T7 DNA聚合酶
C. Taq DNA聚合酶
D.E. coli DNA聚合酶I
E.E. coli DNA聚合酶II
45、下列关于PCR引物设计的说法错误的是( )