出凝血201蛋白S(PS)活性测定(凝固法)(第四版)
操作规程
出凝血20.1蛋白S(PS)活性测定(凝固法)(第四版)出凝血20.2原理:
蛋白C水解由RVV激活的凝血瀑布反应中凝血因子Va、VIIIa,蛋白S作为辅因子加速此反应。凝固时间的延长可以反应样本中蛋白S的活性。
出凝血20.3标本处理:
患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5,1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20?冰箱中。-20?可保存30天。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37?水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。
出凝血20.4 试剂:蛋白S试剂盒购于天津威士达公司:试剂盒代号OPAP。试剂包括6×1ml乏蛋白S血浆;2×2mlAPC试剂;2×5ml启动试剂。乏蛋白S血浆每瓶用1ml蒸馏水复溶,室温平衡60分钟。APC试剂每瓶用2ml蒸馏水复溶,室温平衡60分钟。启动试剂每瓶用5ml蒸馏水复溶,37?水浴60分钟,用前轻轻摇匀。
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操作规程
出凝血20.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。 出凝血20.6 操作:按仪器操作步骤执行
标准
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操作。
出凝血20.,.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。 出凝血20.,.2检查消耗品:
1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000 个杯子) 2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。 3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶
出凝血20.,.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。
出凝血20.,.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入PS项目。
出凝血20.,.5输入样本号: 按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。
出凝血20.,.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。
出凝血20.7 计算:仪器自动计算出结果。
出凝血20.8 参考值:60,130%(0.6,1.3)
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操作规程
出凝血20.9临床意义:
PS是一种VitK依赖型血浆蛋白,作为PCa的辅因子,对因子Va、VIIIa有加速灭活的作用。先天性PS缺陷者常伴发严重的深静脉血栓。获得性PS缺乏,见于肝功能障碍、口服双香豆素类抗凝药物。 出凝血20.10 参考文献:
1) 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6)上海科
学技术出版社.
2) 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上
海科学技术出版社.
3) 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海
科学技术出版社.
4) 主编邓家栋 杨天楹 杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985)
天津出版社.
5) 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第
一版 1991).东南大学出版社.
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操作规程
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