活性污泥及其生物相的观察一、实验目的学习观察活性污泥及其生物相的方法。二、基本原理活性污泥是污水生物处理系统的主体，污泥的数量、活性和沉降性直接与生物处理系统的工作效能密切相关。污泥中的生物相是赋予污泥活性的关键因素。污泥生物相较为复杂，以细菌和原生动物为主，也有真菌和后生动物等。当水质条件或曝气池操作条件发生变化时，生物相也会随之变化。一般认为，原生动物固着型纤毛虫占优势时，污水处理系统运转正常；后生动物轮虫大量出现则意味着污泥已经老化；缓慢游动或匍匐前进的生物出现时，说明污泥正在恢复正常状态；丝状菌占据优势，甚至伸出絮体外，则是污泥膨胀的标志。发育良好的污泥具有一定的形状，结构稠密，沉降性能好。因此，观察活性污泥絮体及其生物相，可初步判断生物处理系统的运转状况，有助于及时采取调控措施，保证生物处理系统稳定运行。三、实验材料1•样品取自实验室SBR反应器的活性污泥。2．染色液石炭酸复红染色液。3．仪器及相关用品显微镜，香柏油，二甲苯，擦镜纸，微型动物计数板，目镜测微尺，镜台测微尺。4．其它用品载玻片，盖玻片，吸水纸，酒精灯，火柴，接种环，镊子，滴管。四、实验步骤（一）制片镜检1．样品准备取曝气池活性污泥。在观察活性污泥时，若曝气池混合液中的活性污泥较少，可先沉淀浓缩；若污泥较多，可先加水稀释。2．制作样片（1）水浸片：用滴管取制好的污泥混合液一滴，放在洁净的载玻片中央，盖上盖玻片，制成活性污泥标本。加盖玻片时，先使盖玻片的一边接触样液，然后轻轻放下，以免产生气泡，影响观察。（2）染色片：用滴管取制好的污泥混合液一滴，放在洁净的载玻片中央，自然干燥（或在酒精灯上稍微加热干燥），固定，加石炭酸复红染色液染色1分钟，水洗，用吸水纸吸干。3．水浸片观察（1）低倍镜观察：观察活性污泥及其生物相全貌，注意污泥絮粒大小，结构松紧程度；观察菌胶团细菌和丝状细菌的分布状况；观察微型动物的形态及其活动状况。（2）高倍镜观察：观察活性污泥中菌胶团与污泥絮粒之间的联系；观察菌胶团细菌和丝状细菌形态特征，注意两者之间相对数量；观察微型动物的结构特征，注意微型动物的外形和内部结构。4．染色片观察（1）低倍镜观察：在视野中找到丝状细菌并移至中央。（2）高倍镜观察：观察丝状细菌的形态特征。（3）油镜观察：观察丝状细菌的假分支和衣鞘，菌体在衣鞘内的排列情况，菌体内的贮藏物质。（二）污泥絮粒大小测定1．制作样片用滴管取制好的曝气池混合液一滴，放在洁净的载玻片中央。2．校正目镜测微尺按实验7的操作方法校正目镜测微尺。3．测定絮粒直径随机取视野中50颗絮粒，用经校正的目镜测微尺测量絮粒直径。4．污泥絮粒分级按平均直径，污泥絮粒可分成三个粒级：(1)大粒污泥：絮粒平均直径〉500pm;(2)中粒污泥：絮粒平均直径在150-500pm之间；(3)细粒污泥：絮粒平均直径＜150pm。根据絮粒直径，计算三个粒级所占的比例。污泥絮粒形状和结构分析1．制作样片用滴管取制好的污泥混合液一滴，放在洁净的载玻片中央。2．观察絮粒形状和结构随机取视野中50颗絮粒，用低倍或高倍镜观察污泥絮粒的形状和结构。3．污泥絮粒分型按形状和结构，污泥絮粒可分成三种类型：圆形紧密絮粒：圆形或近似圆形，菌胶团排列致密，沉降性较好;不规则疏松絮粒：形状不规则，菌胶团排列疏松，沉降性较差;无规则松散絮粒：形状无规则，絮粒边缘与悬液界限不清晰，沉降性极差根据观察结果，分析三种类型则所占的比例。四)污泥絮粒中丝状细菌数量测定1．制作样片用滴管取制好的污泥混合液一滴，放在洁净的载玻片中央，盖上盖玻片，制成活性污泥标本。2．标本镜检随机选择视野，用低倍镜、高倍镜和油镜观察污泥絮粒中的丝状细菌数量。3．丝状细菌数量分级按活性污泥中丝状细菌与菌胶团细菌的比例，将丝状细菌分成五个等级：（1）0级：污泥絮粒中几乎看不到丝状细菌；（2）±级：污泥絮粒中可见少量丝状细菌；（3）+级：污泥絮粒中存在一定数量的丝状细菌，但总量少于菌胶团细菌；（4）＋＋级：污泥絮粒中存在大量丝状细菌，总量与菌胶团细菌大致相等；（5）＋＋＋级：污泥絮粒以丝状细菌为骨架，数量超过菌胶团细菌。根据观察结果，判断样品所属的丝状细菌数量等级。（五）微型动物计数1．取样用洁净滴管，取一滴（1/20ml）污泥混合液到计数板中央的方格内，加上一块洁净的大号盖玻片，使其四周正好搁在计数板凸起的边框上（图1）。图1微型动物计数板2．计数所加的污泥混合液不一定布满100个小方格，用低倍镜进行计数时，只要计数存在污泥混合液的小方格。遇到群体，则需将群体中的个体逐个计数。3．计算假设在稀释一倍的一滴污泥混合液中，测得钟虫50只，则每毫升活性污泥混合液含钟虫数为：50x20x2=2000（只）。五、注意事项1．在观察污泥絮粒的形态和大小时，可先加水稀释或用水洗涤，否则絮粒粘连在一起，不易测定。2．在观察污泥絮粒中的丝状细菌数量时，应注意它们与菌胶团细菌的相对比例。六、问题与思考根据观察情况，评价污水生物处理装置中活性污泥质量及其运行情况。
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