!
血管活性肠肽对肺组织!"#：
磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响
管茶香，周伏文，罗自强，秦晓群，张长青，孙秀泓
（中南大学湘雅医学院生理学教研室，长沙!"##$%）
［摘要］ 目的：观察血管活性肠肽（&’(）对肺组织微粒体中)*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响并探讨其
作用机制。方法：采用无血清成年大鼠肺组织培养，提取标记有"!)的反应产物)+(,胆碱，液闪测定"!)放射性强
度，反映)*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性。观察&’(对该酶影响的量-效关系与时-效关系以及蛋白激酶)抑制剂
.-$和钙调蛋白阻断剂/-$预处理后酶活性的变化。结果：! 浓度为01"#,%234·5,"的&’(可引起微粒体)*(：磷
酸胆碱二胞苷酰转移酶的活性增强，并随着&’(浓度增加，酶活性增加（!!#6#"）。"用01"#,$234·5,"&’(作
用%7，酶的活性开始显著增强（!!#6#"），随着作用时间延长，酶活性逐渐增加。# .-$和 /-$可显著抑制01
"#,$234·5,"的&’(对)*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的增强作用。结论：肺内神经肽&’(可促进成年大鼠肺
组织微粒体中)*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性，其细胞内信号转导途径与蛋白激酶)和钙调蛋白有关。
［关键词］ 血管活性肠肽； 肺； )*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性
［中图分类号］ 8009:9 ［文献标识码］ ; ［文章编号］"###-<=9<（9##9）#9-##>>-#0
$%%&’()*%+,)*,’(-+&-.(&)(-.,/0&0(-1&*.(2&&.345&,’(-+-(4*%
!"#：02*)02*64/’2*/-.&’4(-14/4/(6,.)%&6,)&%6*5(2&6,(/7.8
?@;A)7B-CDBEF，G.H@IJ-KLE，5@HGD-MDBEF，"#$%&
（’"($)#*"+#,-!./01,%,2/，31$+2/$45.,,%,-6"7151+"，8"+#)$%4,9#.:+1;")01#/，8.$+20.$!"##$%，8.1+$）
9:)(6,’(： ;:<&’(-+& *3DENLOPDFBPLP7LLQQLRP3QNBO3BRPDNLDEPLOPDEB4SLSPDTL（&’(）3EP7L2D-
RU3O32B4)*(：S73OS73UV4R734DELRVPDTV4V4PUBEOQLUBOLBRPDNDPV3QRJ4PJULT4JEFLCS4BEPOBETDPO2LR7B-
EDO2O6=&(2*1) *7L)+(-［W-"!)］R734DELR3EPLEPULQ4LRPDEFP7L2DRU3O32B4)*(：S73OS73UV4R734DEL
RVPDTV4V4PUBEOQLUBOLBRPDNDPV3QRJ4PJULT4JEFLCS4BEPOKBO2LBOJULTKDP74DMJDTORDEPD44BPD3E6>&)7/() !
&’(DERULBOLTP7L2DRU3O32B4)*(：S73OS73UV4R734DELRVPDTV4V4PUBEOQLUBOLBRPDNDPV3QRJ4PJULT4JEFLC-
S4BEPODEBT3OL-TLSLETLERL2BEELUBETDEBPD2L-TLSLETLERLQBO7D3E；"*7LLQQLRP3Q01"#,$234·5,"
&’(3EP7L2DRU3O32B4)*(：S73OS73UV4R734DELRVPDTV4V4PUBEOQLUBOLBRPDNDPV3QRJ4PJULT4JEFLCS4BEPOKBO
DE7DXDPLTXV.-$，BSU3PLDEYDEBOL)（(Z)）DE7DXDP3UBET/-$，BRB423TJ4DEBEPBF3EDOPULOSLRPDNL4V6
!*.’/7)-*. &’(DEP7L4JEF2BVXL3EL3QP7LYLVULFJ4BP3UODEN34NLTDEP7LOVEP7LODO3QS73O-
S7BPDTV4R734DEL2LTDBPLTXV(Z)BETRB423TJ4DE6
?&4@*61)： NBO3BRPDNLDEPLOPDEB4SLSPDTL； )*(：S73OS73UV4R734DELRVPDTV4V4PUBEOQLUBOL；4JEF
［[J44.JEBEWLT@EDN，9##9，9$（9）：##>>-#0］
肺表面活性物质（SJ423EBUVOJUQBRPBEP，(\）是
维持正常呼吸功能的重要物质，(\的缺乏或异常可
引起新生儿呼吸窘迫综合征（A8+\）或成人呼吸窘
迫综合征（;8+\）而危及生命。(\是由肺泡$型细
胞合成和分泌的脂蛋白复合物，由脂质、蛋白质和糖
基组成，其中磷脂酰胆碱（S73OS7BPDTV4R734DEL，()）
是其主要组分。在成人呼吸窘迫综合征发生中活性
氧损害(\合成的机制与$型上皮细胞内()合成
的限速酶—)*(：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性降
低有关［"］。血管活性肠肽（&’(）是肺内含量颇为丰
##"
湖南医科大学学报
[@55.@A;AW]+@A’& 9##9
，9$（9）
!收稿日期：9##"-"#-90 作者简介：管茶香（">=0-），女，湖南平江人，副教授，在读博士生，从事肺的非呼吸功能研究。基金项目：国家自
然科学基金（0>%###<0）；湖南省中青年科技基金资助项目（>>^G_9#$=）
万方数据
富的神经肽，具有扩张平滑肌、增强支气管上皮细胞
抗氧化性损伤等多种作用［!］。作为效应广泛的神经
肽，"#$可能参与$%的合成调控，而国内外尚未见
相关报道。为证实该设想，本研究观察了"#$对成
年大鼠肺组织微粒体膜&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转
移酶活性的影响，并探讨其机制，以进一步了解肺内
神经肽"#$的生物学意义。
! 材料与方法
()( 材料 *+,-./大鼠由中南大学湘雅医学院实
验动物学部提供，雌雄不拘，体重（!!0102）3。
4565培养基（7+89:），"#$，*;<，=;<均为%+3>.
公司产品；(?&磷酸胆碱为@6@’5公司产品，其它均
为国产分析纯试剂。
()! 方法
()!)( 无血清成年大鼠肺组织培养［0］ 氨基甲酸
乙酯（(3·A3B(）腹腔注射麻醉大鼠，>0小块。预冷4565
洗0次，取!E!0E小块肺组织置于直径为0E>>
培养皿中，加入不含血清的4565(>F（每>F含
青霉素(EEG，链霉素(EE3·>FB(）、CD&H!，09F·MB(）"#$
培养(2J和0L(EB<>9F·MB("#$培养!J，?J，K
J，及(2J后，收集肺组织；于加入0L(EB<>9F·MB(
"#$前0E>+N分别加入钙调蛋白抑制剂*;<（(EB?
>9F·MB(）和$O&抑制剂=;<（(EBC>9F·MB(）以探
讨"#$的作用机制。
()!)! 肺组织细胞膜的&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转
移酶活性的测定［?］（(）分离提纯微粒体：对照组及
各处理组加入PQRRS/T（CE>5咪唑 ，E)(C5O&F，
!>564’T，U=<)?），按?>F·3B(湿肺组织匀浆(
EEE3和!EEEE3分别?I离心(E>+N去除未破碎
细胞和线粒体，取上清(EEEEE3?I离心2E>+N分
离微粒体；加PQRRS/P（CE>5咪唑，E)(C5O&F，!
>564’T，U=<)E）入微粒体，测蛋白质浓度，使各
组酶浓度一致，均为E)K>3／>F。（!）(?&B磷酸胆碱
掺入量的测定：加!E"3微粒体蛋白入反应液（()2
>5(?&;磷酸胆碱，0)E>5&’$，(!)E>553!V，
CE>5咪唑，!)E>564’T，0K>5O&F，U=<)E）
0+N，反应终止液（(ED三氯乙酸，(CE
>5磷酸胆碱）终止反应。2D活性碳吸附反应产
物&4$;(?&胆碱，(EEE3离心C>+N，并用微孔滤膜
（E)?C">）过滤收集活性碳，用水反复洗涤0次后加
入(>F提取液（乙醇：氢氧化铵：水为(WE：((：((K）
反复萃取?次，液闪计数测定&4$;(?&胆碱的产量。
&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶（&’）活性用每毫克
蛋白质N>9F·>+NB(表示。
()0统计学分析 实验数据以!!"#表示，采用方差
分析。若$"E)EC，组间比较则用%检验，&#E)
EC示差异有显著性意义。
" 结 果
!)( "#$对&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性影
响的量效关系 用浓度为(EBK!0L(EB<>9F·MB(
的"#$作用(2J，在浓度为0L(EBK>9F·MB(时即
可引起&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶的活性增强，
并随着"#$浓度增加，酶活性增加（’XE)W<(?，&
#E)E(）。
!)! "#$对&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性影
响的时效关系 用0L(EB<>9F·MB("#$作用!!
(2J，于作用KJ时，酶的活性开始显著增强
（& #E)E(）；随着作用时间延长，酶活性逐渐增
加。但作用时间过短（#KJ），"#$对酶活性的影响
与对照组相比，差异无显著意义（&"E)EC，图(）。
图! "#$对&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性影响的
时效关系
!"#$! ’JS-+>S;YSUSNYSN-R.,J+9N9R,-+>QF.-+ZSSRRS:-9RZ.,9.:;
-+ZS+N-S,-+N.FUSU-+YS（"#$）9N-JS>+:/9,9>.F &’$：
UJ9,UJ9/[F:J9F+NS:[-+Y[F[F-/.N,RS/.,S（&’）.:-+Z+-[
!)0 =;<和 *;<对"#$促&’$：磷酸胆碱二胞苷
酰转移酶活性的影响 与对照组相比，=;<和 *;<
预处理后&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性无明
显改变（图!），而肺组织经=;<和 *;<预处理后则
能部分取消"#$所增加的酶活性（&#E)E(，图0）。
(E(血管活性肠肽对肺组织&’$：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响 管茶香，等
万方数据
图! !"#和$"#对%&’：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响
!"#$! ())*+,-)!"#-.$"#-/%&’：01-201-.34+1-45/*+3,56343"
,.7/2)*.72*（%&）7+,585,3（!9:，"!;<;=#$+-/,.-4）
图" !"#和$"#对>?’预处理后%&’：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶
活性的影响（!9@;） !与"#组比较，"";<;@
!"#$" &1*5/+.*725/A*))*+,-)>?’（BC@;D#E-4·FD@）-/,1*E5+.-"
2-E74%&’：01-201-.34+1-45/*+3,563434,.7/2)*.72*（%&）7+,585"
,3G7207.,437H-4521*6H3!"#7/6$"#.*20*+,58*43（!9@;），
!"";<;@82"#
# 讨 论
’I合成的调控可通过离体肺、肺组织块培养及
肺泡??型上皮细胞培养三个水平来研究。本实验
通过探索所建立的肺组织块培养作为研究’I合成
调控的平台，具有实验条件易于控制，模拟性好的优
点，且测定%&’：磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性即
在离体肺组织培养的基础上进行。
’I的主要成分’%是由胆碱在胆碱激酶和磷酸
胆碱胞苷酰转移酶作用下生成%J’"胆碱，然后与二
酰基甘油生成’%，而%&’：磷酸胆碱二胞苷酰转移
酶活性将直接关系到’%的合成速率，是’%合成的
限速酶［=，K］。本室的前期工作证明肺内神经肽内皮
素"@在生理浓度时能与肺泡??型上皮细胞的(&L
受体结合上调’I的合成与分泌［#］。研究表明，广泛
存在于人和动物呼吸系统内的>?’具有显著的抗
炎、抗损伤，扩张平滑肌、抑制嗜酸性粒细胞的释放
与黏附等作用［M］。在表皮生长因子或其它应激条件
下，肺泡巨噬细胞、支气管上皮细胞等分泌的>?’
明显增多［:］，而本研究结果显示，>?’能增强%&’：
磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性，表现出明显的量"效
关系与时"效关系，从而促进’I的主要成分’%的合
成，提示肺内微环境中的神经肽>?’对’I合成有
重要的调节作用。
钙调蛋白和’N%是细胞内信号转导的重要分
子。为进一步探讨>?’促%&’：磷酸胆碱二胞苷酰
转移酶活性的作用机制，本研究采用 !"#和$"#分
别阻断钙调蛋白和’N%，均显示抑制>?’对该酶的
上调作用，提示细胞内%7OP"钙调蛋白以及’N%的
激活是>?’促’I合成的细胞内信号转导的重要环
节。探讨>?’对’I的作用将有助于进一步阐明肺
内微环境自稳态的调控网络，为呼吸窘迫综合征等
临床疾病的防治提供理论基础。
参考文献：
［@］ %.5E%，F-/AE-.*!Q?’
分泌及>?’^ 表达的影响［Q］<湖南医科大学学报，@:::，OU
（O）：::D@;O<
（本文编辑 陈扬宝）
O;@ 湖南医科大学学报，O;;O，O#（O）
万方数据
血管活性肠肽对肺组织CTP:磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影
响
作者： 管茶香， 周伏文， 罗自强， 秦晓群， 张长青， 孙秀泓
作者单位： 中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078
刊名： 湖南医科大学学报
英文刊名： BULLETIN OF HUNAN MEDICAL UNIVERSITY
年，卷(期)： 2002，27(2)
被引用次数： 1次
参考文献(9条)
1.Crim C.Longmore WJ Sublethal hydrogen peroxide inhibits alveolar type Ⅱ cell surfactant phosphipid
biosynthetic enzymes 1995
2.秦晓群.孙秀泓.张长青 血管活性肠肽对兔支气管上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用[期刊论文]-中国应用生理学杂
志 1998(03)
3.罗自强.孙秀泓.张长青 c-fos基因在内皮素-1促肺泡Ⅱ型细胞表面活性物质合成中的作用[期刊论文]-生理学报
1999(03)
4.Weinhod PA.Charles LG.Feldman DA Microsomal CTP: choline phosphate cytidylyltransferase: kinetic
mechanism of fatty acid stimulation 1991
5.Hogen M.Zimmermann LJ.Wang JX Increased expression of CTP:phosphocholine cytidylyltransferase in
maturing type II cells 1994
6.Spragg RG.Li J Effect of phosphocholine cytidylyltransferase overexpression on phosphatidylcholine
synthesis in alveolar type II cells and related cell lines 2000
7.罗自强.孙秀泓.秦晓群 内皮素-1对Ⅱ型细胞表面活性物质合成的调控[期刊论文]-湖南医科大学学报 1999(01)
8.吴昌归.毛保龄.孙浜 血管活性肠肽对嗜酸性粒细胞释放和粘附功能的影响及机理[期刊论文]-中国应用生理学杂
志 2000(03)
9.秦晓群.孙秀泓.罗自强 表皮生长因子对气道上皮细胞VIP分泌及VIPR表达的影响[期刊论文]-湖南医科大学学报
1999(02)
相似文献(10条)
1.期刊论文 赵国荣.陈锡军.贺又舜.艾碧琛.王孟清.刘克丽.阳航 肺卫失宣与血管活性肠肽及血栓素B2水平变化的
临床研究 -中西医结合学报2004,2(5)
目的:探索肺卫失宣的病理本质,并为卫分证的辨证提供客观实验指标.方法:按完全随机设计,采用放免法共检测19例卫分证及13例气分证患者血浆血管
活性肠肽(vasoactive mtestmal peptide,VIP)、血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)浓度,观察不同病位、不同病程阶段卫分证、气分证患者血浆VIP、
TXB2水平的变化.结果:血浆VIP水平在卫分证及卫分证热退后不同病程及不同病位与气分证阶段及正常组比较均有显著性差异(P《0.01),而血浆TXB2水平仅
在卫分证热退后有显著性差异(P《0.01);不同病位的卫分证间血浆VIP、TXB2水平均无明显差异(P》0.05).结论:VIP可能为反映卫分证实质的客观实验指标
及肺卫失宣的物质基础,且与病位无关;TXB2在卫分证热退后才升高,不能作为卫分证早期辨证的依据,气分证同样不升高,其机制有待探讨.
2.学位论文 于芳 血管活性肠肽对巨噬细胞和成纤维细胞在肺损伤修复中的作用探讨 2008
血管活性肠肽(VIP)是肺内重要的感觉神经肽，主要由非肾上腺素能非胆碱能神经纤维释放，其阳性神经纤维及受体广泛分布于肺内。VIP除扩张血管
外，还具有舒张气道平滑肌、抑制肺泡巨噬细胞吞噬和T淋巴细胞增殖、减少肺炎性介质释放、促进气道上皮的损伤修复、清除氧自由基和抗细胞凋亡等生
物学作用，其在机体内的多种效应日益受到重视。
在急性肺损伤(ALI)中，肺巨噬细胞作为炎性细胞发挥着重要作用，能分泌炎性介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)。TNF-α可
能作为始动因素参与了ALI的发生、发展，既可加重ALI的炎症反应，促进成纤维细胞的增殖和胶原的沉积，又可进一步激活巨噬细胞释放氧自由基引起恶
性循环；TGF-β可通过诱导纤维母细胞增生、成纤维细胞表型改变、胶原纤维及细胞外基质合成增加等多种机制参与肺的重塑。作为肺内重要的神经肽
，VIP具有抗肺损伤的重要作用，可能是切断ALI启动的关键因素之一。因此，探讨VIP在调整神经肽一炎症反应网络回复到生理状态中的作用具有重要意义
。
目的：研究VIP对巨噬细胞和成纤维细胞在肺损伤修复的作用。
方法：
(1)VIP对巨噬细胞(RAW264.7)株损伤修复的影响：以巨噬细胞为研究对象，观察脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞的MDA和SOD含量变化，反映肺氧化和抗氧
化损伤的程度；采用RT-PCR和Western-blot法检测TNF-α和TGF-β mRNA及其蛋白的表达。
(2)VIP对肺成纤维细胞(NIH3T3)株损伤修复的影响：以肺成纤维细胞为研究对象，采用MTT法测定其增殖活性；免疫细胞化学方法检测α-平滑肌肌动
蛋白(α-SMA)的表达；羟脯氨酸(HYP)试剂盒和RT-PCR法检测Ⅲ型胶原蛋白与mRNA的表达。
结果：
1.VIP对巨噬细胞损伤修复的影响
(1)黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定SOD活力和MDA含量的结果显示：LPS刺激后巨噬细胞SOD活性减弱，MDA生成增多，表明巨噬细胞氧化损伤加
重：而VIP可明显减轻此效应，应用VIP受体拮抗剂则可阻断VIP的抗氧化损伤效应。
(2)RT-PCR和Western-blot检测结果显示：LPS刺激后巨噬细胞生成炎性因子TNF-α mRNA及其蛋白的表达上调，VIP预处理组则可逆转该上调作用，应
用VIP受体拮抗剂后，炎性因子表达与单独应用LPS组无明显差异。TGF-β mRNA及其蛋白表达无明显变化。
2.VIP对肺成纤维细胞损伤修复的影响
(1)MTT法显示LPS刺激后，肺成纤维细胞增殖活性明显加强，VIP预处理可抑制其增殖活性，应用VIP受体拮抗剂可使抑制作用消失。
(2)LPS刺激可使肺成纤维细胞发生表型改变，生成以α-SMA为典型特征的肌成纤维细胞。免疫细胞化学检测结果表明，LPS刺激24h后，肺成纤维细胞
胞浆内出现棕黄色细颗粒状物(α-SMA)，而对照组无明显变化，表明成纤维细胞已向肌成纤维细胞转化。VIP可明显抑制肺成纤维细胞的表型改变，而其受
体拮抗剂则可逆转该效应。
(3)羟脯氨酸试剂盒和RT-PCR法检测结果显示，LPS刺激后，肺成纤维细胞Ⅲ型胶原蛋白和mRNA的表达与对照组相比均增强，VIP可显著减弱肺成纤维细
胞Ⅲ型胶原蛋白和mRNA的表达，而VIP受体拮抗剂则可逆转VIP的效应。
结论：
1.LPS刺激后巨噬细胞氧化损伤加重，TNF-α分泌增多。
2.LPS刺激后成纤维细胞增殖活动、胶原合成明显加强，向肌成纤维细胞转化。
3.VIP可逆转LPS刺激后的上述效应，提示VIP可能参与切断急性肺损伤的启动，促进损肺伤修复。
3.期刊论文 李翔.邢秀梅.张坚松.谭宇蓉.LI Xiang.XING Xiu-mei.ZHANG Jian-song.TAN Yu-rong 血管活性肠肽和
表皮生长因子对支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞黏附功能的影响 -中南大学学报（医学版）2006,31(5)
目的:观察肺内调节肽对嗜酸性粒细胞(EOS)与支气管上皮细胞(BEC)黏附功能的影响.方法:选择血管活性肠肽(VIP)和表皮生长因子(EGF)两种调节肽作
为研究对象,观察它们对BEC白细胞介素(ILs)分泌及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.结果:VIP、EGF可使O3应激的BEC分泌ILs能力下降,并下调气道
上皮ICAM-1的表达.结论:VIP、EGF抑制BEC与EOS的黏附,对气道炎症起负性调节作用,有利于减轻局部的损伤.
4.期刊论文 沈兴平.舒昌达.何军 实验性糖尿病肺iNOS和VIP免疫组织化学观察及图像分析 -中国病理生理杂志
2001,17(10)
目的:探讨糖尿病大鼠肺诱生型一氧化氮合酶(iNOS)及血管活性肠肽(VIP)的病理变化.方法: 采用免疫组织化学方法,观察正常和四氧嘧啶诱导的糖尿
病4周大鼠肺内iNOS及VIP的变化,并进行图像分析. 结果: 糖尿病4周大鼠肺支气管上皮细胞、肺泡管上皮细胞、肺泡囊上皮细胞和动脉内皮细胞iNOS呈阳
性或弱阳性,静脉内皮细胞、毛细血管内皮细胞iNOS呈阴性.图像分析表明,糖尿病鼠肺iNOS的着色面积、积分光密度和相对含量均明显低于正常大鼠肺.糖
尿病4周鼠肺支气管纤毛上皮细胞VIP呈阳性,支气管平滑肌肌层、支气管粘膜下腺体周围、肺间隔和肺动脉壁外膜VIP呈弱阳性或阴性,图像分析显示糖尿病
鼠肺VIP着色面积、积分光密度和相对含量均明显低于正常大鼠肺.结论: 糖尿病肺病变不仅受自主神经影响,而且非肾上腺素能非胆碱能神经改变亦与之有
关,其神经递质NO和VIP可能在糖尿病肺病变中具有重要意义.
5.学位论文 李翔 血管活性肠肽对气道高反应大鼠粘蛋白分泌的影响 2008
目的：①从气道失稳态机制出发，臭氧应激大鼠，建立非变异性气道高反应性模型，并与经典变异性哮喘大鼠模型比较，寻找一种简易、可行的方法
来建立气道高反应性模型；②观察臭氧应激不同时间，动物肺内血管活性肠肽(VIP)含量的变化和气道粘液分泌量的变化，分析两者之间的相关性；③观察
臭氧应激后大鼠肺组织中粘蛋白(MUC)的三种基因(MUC1、MUC2、MU5AC)表达改变，及VIP对这三种粘蛋白基因的影响。
方法：①24只SD大鼠随机分为4组：正常对照a组；臭氧应激组；正常对照b组；卵蛋白(OVA)致敏组，每组6只。分别检测两种动物模型的呼气相气道阻
力(Re)，支气管肺泡灌洗液中细胞计数、分类，总蛋白含量测定，粘蛋白总量测定，肺、支气管病理切片等指标比较两种气道高反应大鼠模型的稳定性和
可靠性；②64只SD大鼠随机分为2组：正常对照组；臭氧应激组，每组32只。观察臭氧应激不同时间，动物肺内VIP含量的变化和气道粘液分泌量的变化
，分析两者之间的相关性；③20只SD大鼠随机分为4组：正常对照组；臭氧应激组；臭氧应激+VIP滴鼻治疗组；臭氧应激+生理盐水滴鼻治疗组，每组5只。
观察臭氧应激后大鼠肺组织三种粘蛋白基因(MUC1、MUC2、MUC5AC)表达改变，及VIP对这三种粘蛋白基因的影响，分析VIP对臭氧应激大鼠肺组织粘蛋白基
因表达谱的影响。
结果：①采用外源性损伤因子臭氧(O3)攻击支气管上皮细胞形成的非变异性气道高反应性模型，与经典变异性哮喘大鼠模型比较，各项指标(气道反应
性，总蛋白含量，粘蛋白总量，肺、支气管病理切片)的测定都证实了气道高反应性的存在；②气道损伤初期，VIP变化不明显，气道粘液分泌增加，随着
损伤加重，引起VIP代偿性分泌增加，粘液分泌量有所减少。随损伤时间的延长，损伤程度加重，肺内分泌VIP的阳性神经纤维及内分泌细胞数量减少，气
道对炎性介质的抗损伤作用下降，粘液分泌量逐渐增加；③大鼠肺内粘蛋白表达以MUC2 mRNA为主，MUC5AC mRNA的表达最低，臭氧应激数天后，MUC2
mRNA和MUC1 mRNA的表达明显增加，MUC5AC mRNA表达无显著改变，经VIP滴鼻治疗后，MUC2 mRNA较前有所下降，MUC1 mRNA和MUC5AC mRNA表达无显著改变
。
结论：外源性损伤因子O3攻击支气管上皮细胞，气道上皮细胞功能缺陷或失稳态，出现气道高反应，与经典变异性哮喘大鼠模型比较，各项检测指标
无显著差异。VIP是肺内最重要调节肽之一，在气道高反应性过程中，抵抗炎性介质引起的损伤作用，减少呼吸道粘液分泌量，与气道粘液分泌负相关。气
道高反应过程中粘液高分泌可能与MUC2 mRNA和MUC1 mRNA的表达上调有关，VIP可有效抑制大鼠肺内MUC2 mRNA的表达，对气道粘液过多分泌起到一定的抑
制作用。
6.期刊论文 任雁宏.秦晓群.管茶香.罗自强.张长青.孙秀泓 血管活性肠肽、降钙素基因相关肽及其受体在气道高反
应动物肺内的时空分布 -生理学报2004,56(2)
为探讨内源性神经肽在气道高反应性形成中的作用,我们以臭氧应激损伤动物气道上皮细胞,建立气道高反应性动物模型,并观察臭氧应激不同时间肺内
血管活性肠肽(vasoactiveintestinal peptide,VIP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)含量变化以及VIP受体(VIPRl)、
CGRP受体(GRPRl)mRNA在肺内表达、分布的改变.实验观察到,臭氧应激组动物吸入乙酰甲胆碱后气道阻力高于正常对照组,肺内呈现明显的炎症改变.随臭氧
应激时间延长,肺组织匀浆中VIP、CGRP浓度呈先增高后降低的双向改变,CGRP达峰值时间早于VIP.VIPRl、CGRPRlmRNA表达亦经历了双向过程,VIPRI峰值持
续时间长于CGRPRl.在无应激对照组动物,肺间质、支气管上皮细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞均有VIPRl、CGRPRl mRNA表达.随应激时间的延长,阳性细
胞呈斑片状集中于气管、血管周围,染色强度增加,至臭氧应激第8天,阳性染色细胞减少.因此我们推测,臭氧应激可以诱导动物气道高反应性的形成.在炎症
的早期,以CGRP的作用为主,与肺损伤早期炎症信号的传递有关,以清除刺激原、及时终止致病原的作用;炎症后期以保护机体、促进修复、减轻损伤为主
,VIP发挥主要作用.
7.期刊论文 王钧.孙滨.刘林英.王佐忠 不同剂量内毒素对绵羊血浆和肺淋巴液中血管活性肠肽含量的影响 -中国危
重病急救医学1999,11(8)
急性呼吸窘迫综合征(ARDS)病死率很高,诱发因素甚多,革兰氏阴性杆菌败血症为其重要发病因素之一.本实验利用清醒绵羊慢性肺淋巴瘘内毒素肺损伤
模型,对不同剂量内毒素所致肺损伤的病理生理、组织病理及血浆和肺淋巴液中血管活性肠肽(VIP)含量进行了测定和比较,旨在探讨VIP在急性肺损伤中对
神经内分泌的影响.
8.学位论文 陈锡军 肺卫失宣与肺相关生物活性物质关系及变化规律研究 2003
目的:探索肺卫失宣的病理本质,并为卫分证提供客观实验指标.方法:按完全随机设计,采用放免法检测血浆血管活性肠肽(VIP)、血栓素
B<,2>(TXB<,2>)、6-酮-前列腺素F<,1a>(6-Keto-PGF<,1a>)浓度,观察不同病位、不同病程阶段卫分证血浆VIP、TXB<,2>、6-Keto-PGF<,1a>浓度水平及
TXB<,2>/6-Keto-PGF<,1a>(T/P)值的变化.结果:①血浆VIP浓度水平在卫分证前后不同病程阶段比正常组均显著升高(P<0.01),而气分证升高不如卫分证明
显,二者之间的差异有非常显著性意义(P<0.01)(见表3和表6),提示VIP可能是一个反映证(卫分证)的指标;②血浆TXB<,2>浓度水平在卫分证后阶段才明显于
正常组和前阶段(P<0.01),而气分证的不同阶段间差异无显著性(P>0.05),且与正常组间无明显差异(P>0.05)(见表6和表7),提示TXB<,2>可能是卫分证阶段
的后期指标.与之对应的6-Keto-PGF<,1a>测定值偏低,不便观察T/P值;③不同病位的卫分证间血浆VIP、TXB<,2>浓度水平差异均无显著性(P>0.05),且气分
证前后阶段血浆VIP、TXB<,2>浓度水平差异无显著性(P>0.05)(见表5和表7),提示VIP、TXB<,2>是反映卫分证阶段的指标,并且不受病位影响;④卫分证后期
阶段VIP、TXB<,2>明显高于气分证(P<0.01)(见表4),提示VIP、TXB<,2>与调节卫气的开合运动有关.结论:VIP、TXB<,2>可能为反映卫分证病理的微观指标
及肺卫失宣的物质基础.
9.外文期刊 Casibang.M.Purdom.S.Jakowlew.S.Neckers.L.Zia.F.Ben-Av.P.Hla.T.You.L.Jablons.DM.Moody.TW
Prostaglandin E2 and vasoactive intestinal peptide increase vascular endothelial cell growth factor
mRNAs in lung cancer cells.
The effects of prostaglandin E2 (PGE2) and vasoactive intestinal peptide (VIP) on vascular endothelial cell growth factor (VEGF)
mRNAs were investigated using lung cancer cells. By RT-PCR, VEGF(121), VEGF(165), and VEGF(189), but not VEGF(206) isoforms were
detected in all lung cancer cell lines and biopsy specimens examined. By Northern blot, VEGF mRNA was detected in all small cell lung
cancer (SCLC) and non-SCLC (NSCLC) cell lines examined. PGE2, VIP and forskolin caused increased VEGF expression in a time- and
concentration-dependent manner using NSCLC cell line NCI-H157. Approximately 1 microM PGE2, 0.1 microM VIP and 50 microM forskolin
caused cAMP elevation, 64-, 33- and 128-fold, respectively, using NCI-H157 cells after 5 min. The increase in cAMP caused by PGE(2) and
VIP was reversed by somatostatin (SST). Also 1 microM PGE2, 0.1 microM VIP and 50 microM forskolin increased the VEGF mRNA 2.0-, 1.5-
and 2.3-fold, respectively, after 4 h. The increase in VEGF mRNA caused by PGE2, VIP and forskolin was inhibited by H-89, a protein
kinase A inhibitor. A VIP receptor antagonist, VIPhybrid, inhibited the increase in cAMP and VEGF mRNA caused by VIP. By ELISA, VEGF
was detected in the conditioned media exposed to the lung cancer cell lines. These results suggest that VEGF synthesis in and secretion
from lung cancer cells can be regulated by agents, which cause adenylyl cyclase activation.
10.外文期刊 Leuchte.HH.Baezner.C.Baumgartner.RA.Bevec.D.Bacher.G.Neurohr.C.Behr.J Inhalation of
vasoactive intestinal peptide in pulmonary hypertension.
Pulmonary hypertension (PH) leads to an increased right ventricular workload, cardiac failure and death. In idiopathic pulmonary
arterial hypertension (PAH) the vasodilating vasoactive intestinal peptide (aviptadil) is deficient. The aim of the present study was
to test the acute effects on haemodynamics and blood gases, and the safety, of a single dose of inhaled aviptadil in chronic PH. A
total of 20 patients with PH (PAH in nine, PH in lung disease in eight and chronic thromboembolic PH in three) inhaled a single 100-
microg dose of aviptadil during right-heart catheterisation. Haemodynamics and blood gases were measured. Aviptadil aerosol caused a
small and temporary but significant selective pulmonary vasodilation, an improved stroke volume and mixed venous oxygen saturation.
Overall, six patients experienced a pulmonary vascular resistance reduction of >20%. In patients with significant lung disease,
aviptadil tended to improve oxygenation. The pulmonary vasodilating effect of aviptadil aerosol was modest and short-lived, did not
cause any side-effects and led to a reduced workload of the right ventricle without affecting systemic blood pressure. Aviptadil
inhalation tended to improve oxygenation in patients with significant lung disease. Further studies are needed to evaluate the full
therapeutic potential of aviptadil aerosol, including higher doses and chronic treatment.
引证文献(1条)
1.李翔.邢秀梅.张坚松.谭宇蓉 血管活性肠肽和表皮生长因子对支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞黏附功能的影响[期
刊论文]-中南大学学报（医学版） 2006(5)
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hnykdx200202002.aspx
授权使用：中南大学(zndx)，授权号：202c62ea-c1ad-4804-982f-9e9d00a3764a
下载时间：2011年3月5日
本文档为【血管活性肠肽对肺组织CTP磷酸胆碱二胞苷酰转移酶活性的影响】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。
该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
浙公网安备 33021202002483