【doc】庆大霉素所致家兔肾小球损伤的超微结构改变

【doc】庆大霉素所致家兔肾小球损伤的超微结构改变 庆大霉素所致家兔肾小球损伤的超微结构 改变 第16卷第6期第三军医大学 1994年12月ACTAACADEMIAEMEDICINAEMlL.ITARISTERTIAE Vo1.16.No.6 Dec.1994 一 3 庆大霉素所致家兔肾小球损伤的超微结构改变 袁置烧廖立生(第三军医大学附属新桥医院肾内科)630037 一_'2.b7.fz 丹提要为了探讨庆大霉末(GM)是否能引起肾小球的损伤.我们观察了家兔注射单荆GM(100,rig/ kg)或每天注射一荆等量GM-连续注射三天后肾皮质的超徽结构改变.对照组家兔注射等窖积生理盐水.发 现家兔注射单剂GM后1h,近端肾小管上皮细胞内即出现髓样小体,注射后24h.肾小球毛细血管内皮细 胞,足细胞.和近端肾小管上皮细胞显着肿胀,变性,细胞器有显着病变I注射三荆GM后24h,足细胞足突融 合.肾小球滤过膜增厚,部分肾小管上皮细胞出现坏死征象.资料提示GM除了挠损伤肾小管外,也船弓『起肾 小球的严重损伤. 关键词旦:!!皇/!?肾小球璺!!?兔 中围法分娄号R692.6 庆大霉素(GM)肾毒性是急性肾衰的主要病因之 一[ .有关实验性庆大霉素肾毒性研究的文献报 道0:主要描述了GM对肾小管特别是近端肾小管的 损伤,关于GM能引起成年动物或人类肾小球损伤的 问题有待进一步研究.为了探讨GM能否损伤肾小球 的问题,我们观察了注射中毒剂量的GM的家兔肾皮 质超微结构,现报道如下. 1材料和方法 24只雄性新西兰白兔.体重2.1士0.3kg,随机分为两组. 每组l2只.实验组12只家兔再分成3十亚组,每亚组4只.第 一 亚组4只家兔腹腔注射GM(四川长征毒I药厂)100mg,kg? bw.1h后活杀取标车I第二亚组4只家兔腹腔注射等量GM 后24h活杀取标本}第三亚组4只家兔腹腔注射GM100 rag/kg?bw/d,连续注射3d,于第三次注射后24h活杀取标 本.对照组l2只家兔按实验组的方法相应地分为三个亚组,每 亚组按实验组的方法给予等窖积的生理盐水注射.并于相应的 时间间隔活杀取标本. 家兔及家兔饲科均由第三军医大学动物所提供.家兔买回 后先在笼内适应3d.实验前和实验中自由进食进水. 取标本时.以3%戊巴比妥钠溶{疰于家兔耳静脉注射 (1ml/kgabw),麻醉后剖腹,于腹主动脉末端逆行插入一细尼 龙导管至肾动脉起始处下端约lcrn处,丝线结扎.钳央肾动脉 起始处上端的腹主动脉-用眼科剪剪开肾静脉或腔静脉,以约 133kPa的压力注入Kosek灌注藏,直至肾脏变白变硬为 觜,J妹损伤,葛帕驯 止.将体内灌注好的肾脏取出,用新保险刀片取肾皮质数块,切 成1tlflrn'的小块置于3戊二醛磷酸缓冲液中送检.超簿切片 前用光境定也.标本用日本产H一3oo透射电键观察. 2结果 家兔注射单荆GM后lh.近端小管上皮细胞的线粒体和 内质网即有明显肿胀.溶酵体增多,部分溶酵体内出现髓样小悼. 家免注射GM后24h,肾小球足细胞高度肿胀,其线粒体 肿胀如球状,基质变簿,嵴变步变形,内质同肿胀,扩张.变形, 粗面内质同有桩糖体颗粒脱失现象.肾小球毛细血管内皮细胞 也高度肿胀.穰形不规则,棱浆比饵增加,线粒体和内质同也有 与足细胞类似的改变.肾小球毛细血管腔狭窄(圈1).近段肾小 管上皮细胞高度肿胀,线粒体和内质网也有上述类似病变,溶 酵体更加增多,髓样小体数量显着增多.大部分髓样小体位于 敬级搭酵体内,部分髓样小体位于变性的线粒体内-部分髓样小体位于胞浆并有清晰的膜性结构与变性的内质网相连续(图 2),部分髓样小体位于胞浆正被溶酵体包围和吞噬(图3). 家兔注射三荆GM后24h.除了前述病变更加严重外-可 见肾小球足细胞足突融合.肾小球滤过膜增厚(图4)I肾小球毛 细血管内皮细胞核染色质浓集.核形不规则,部分肾近端小管 上皮细胞有核染色质浓集.细胞膜扭曲,变形.或断裂,徽绒毛 减步或脱失等细胞坏死征象.部分近端肾小管上皮细胞内髓样 小体布满视野.大部分髓样小体已不在溶酵体内而游离地散布 于胞浆中.谊些裸露游离的髓样小体周围无完整的膜性结构包 裹.溶酶体数量显着减少. 注射生理盐水的对照组家免肾皮质未发现上述病变. 第6期裒发焕,等.庆大霉紊所致家兔肾小球损伤的超馓结柄改变441 围l象兔注射单剂庆大霉素后24h,肾小球电镶照片. FI窖lAg】oDlerulus24hafteraGMinjectionshowsswoHenendothelialcells(End)andnarro~capillar ylumenCLn). MC:raesangialcell;Po:podocyte;P1:pseudo—inclusion-N:nu~eus.(TEM) 围2象兔注射单剂庆大霉素后24h,近端肾小管上皮细胞电镜照片. Wig2Anepithelialc~11oftheproximaltubule24hafteraGMinjectionshowstheconnection ofmyelinflBu~s(MF)'h degeneratedendoplasmicreticulum(ER).(TEM) 囝3象兔注射单剂庆大霉素后24h,近端肾小管上皮细胞电镶照片. Fig3Anepitheliale~lloftheproximaltubule24hafteraGMilIjectionshowsthatmyelinfigur es(MF)irll~Incontact'h orphagocyti~dbylysosomes(Ly).(TEM) 围4象兔洼射三剂庆大霉素后24h,肾小球足细胞电镶照片. FIg4Aglomerularpodocyte24hafterthe8reIGMinjectionshowsmarkedfmsionoftheproce sa~(PP)ofthepodocy (Po)andthickeningofthefiltrationmembrane.Lu:lumenofcapiIlary.(TEM) 3讨论 Leliever--Pegorier曾报道,给妊娠期的豚鼠注射 GM4mg?kg?d,,连续注射7d,其分娩的新生 豚鼠的肾小球体积显着减少,Mallie和Gilbert在大 鼠上也发现了类似情况..本研究显示家兔注射单剂 GM后24h,肾小球毛细血管内皮细胞和足细胞有显 着肿胀,多种亚细胞器有显着的形态改变,肾小球毛细 血管腔狭窄,这些病变可以导致肾小球血流量特别是 肾小球滤过率的降低}家兔注射三剂GM后24h,除 了上述病变更加严重外,足细胞足突融合,肾小球滤过 膜增厚,这些使肾小球滤过比率和肾小球滤过率更进 一 步下降,从而有可能引起氮质血症和急性肾衰.我们 第三军医大学第l6卷 曾报道家兔注射GM后,伴随着肾脏的组织学损害, 血浆尿素氮和肌酐浓度显着升高,肌酐清除率显着降 低].这些资料提示GM除了能引起肾小管的损伤 井,也能引起成年家兔肾小球的损伤. 目前还难断言这种肾小球损伤是由GM的直接 毒性作甩所引起呢,还是由其他的间接因素所引起.本 研究发现,家兔注射单剂GM后1h?肾近端小管上皮 细胞的线粒体和内质网即肿胀,溶酶体增多,并有髓样 小体出现,而小球毛细血管内皮细胞和足细胞直到注 射后24h才发现有显着病变.这种现象提示两种可能 性第一种可能是肾小球的损伤继发于肾小管的损伤, 再一种可能是因为近端肾小管上皮细胞所接触的GM 的浓度远远高于肾小球毛细血管内皮细胞和足细胞所 致,这种GM的高浓度缘于原尿流经近端肾小管时其 中的大部分水,盐等教重吸收,因而GM在肾小管内 得以高度浓缩 Wedeen报道,大鼠注射单剂GM(100mg/kg)后 6h,其近端肾小管上皮细胞内出现髓样小体",这可 能是文献报道的动物注射中毒量的GM后肾小管上 皮细胞内出现髓样小体的最短的时问间隔了.本研究 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,家兔注射单荆GM(100mg/kE?bw)后1h,其 近端肾小管上皮细胞内即出现髓样小体,比Wedeen 报道的注射后6h提前了5h,这是动物的种族差异所 致,还是别的原因,有待于进一步探讨. 髓样小体一直被认为是溶酶体吞噬变性的线粒 体,内质网等膜性结构后,在溶酶体内消化降解不全而 形成的一种脂质残余体.本研究显示,注射单剂 GM后,家兔近端肾小管上皮细胞内髓样小体绝大部 分位于次级溶酶体内,这支持上述关于髓样小体在溶 酶体内生成的说法f同时,我们也发现,部分髓样小体 位于变性的线粒体内,部分髓样小体游离于胞浆并以 清晰的膜性结构与变性的内质网相连续,部分髓样小 体游离于胞浆正被溶酶体所包围和吞噬.这些资料提 示髓样小体除了能在溶酶体内生成外,也能在溶酶体 外生成. 本研究发现,家兔连续注射三剂GM后24h,近 端肾小管上皮细胞内的髓样小体几乎全部游离于胞 浆,这些裸露散在的髓样小体周围无完整的膜性结构 包绕,溶酶体数量显着减少,这些现象提示此时次级溶 酶体在胞浆内大量破裂,将髓样小体释放入胞浆,同时 大量的溶酶体内的水解酶也随之释入胞浆,导致细胞, 和组织的进一步损伤乃至坏死. 本文资料说明,GM除了能引起肾小管损伤外,也 能引起成年家兔肾小球的损伤. 参考文献 1LintonAL.AG-ARF.RenaIFailure.1987,10(2)l81~82 2WalkerPD?ShahSV.Evidencesuggestingaroleforhy- droxylradicalsingentamicin—inducedacuterenalfailurein rats.JClinInvest.1988.81(2):334~341— 3C.,iurgea-MarionL.Impairmentoflysosome-plnocTticfusion inratkidneyproximaltubulesaftertreatmentwithgentam— idnatlowdoses.ToxlcolApplpharmacol,1986.88:271 285 4Ratr~smnlnyLS,LingKT.ChristineJ?eIa1.E/feetofgen- tamicinanllpidperoxidatloninratrelIk~Icortex.Biochem Phrmacu|.198534(21):3895~3900 5SlmnleyPF,BurkeTJ.Differentialsusceptibilitytogen— tamlclntoxicitywithintheproximalconvolutedtubule.Re- halFallure,1990,12(2):83,87 6KosekJC.Nephrotoxicltyofgentamicin.LabInvest?1974, 30(L):48,57 7Leliever-PegorierM,GilbertT,SaklyR,eta1.Effectof fetalexposuretogentamlcinonkidneysofyoungguinea p|皇s.AntimlcrobAgentsChemother?1987?31(1):88,92 8MallieJP.InuteroneplarotoxicRy inratneonates.KidneyInt,1988,33:38~44 9GilbertT,NabarraB.Claudi*MB.Light-andelectron—mi— czoscoplcanalysisofthekidneyinnewbornratsexposedto g~entamicininutero.AmJPathol?1988,130(1)|33~43 .氧自由基在实验性庆大霉索肾毒性中的 10褒发焕廖立生 作用.中华医学杂志,1990.70(2):108,iii UWedeellRP,BatumanV.CbeeksC,eta1.Transportof gentamJcininratproximaltubule.LabInvest?1983,48 (2)212,船3 12HeptlnstallRP.Pathologyofthekidney.Volume3.3rd edition.USAHAL.1983:P1207,1208 (收稿:1993—12—25,修回:1994-10-04) 第6期寰发焕-等.庆大霉素所致家兔肾小球损{务的超做结构改变443 Ultrastructuralfeaturesofgentamicin—inducedglomerulardamagesin rabbits YuanFahuan,LiaoLisheng(DepartmentofNephrology,XinqiaoHospital,ThirdMllltaryMedicalCollege,Chongqing, 630037) AbstractInordertoelarifywhethergentamicin(GM)coulddamagetherenalglomeruli.theultra— structuralchangesoftherenalcortexwereobservedinrabbitsaftertheyreceivedasingleinject lonof100 mg/kgGMor100mg?kg?d— GMfor3consecutivedays.Theanimalsofthecontrolgroupreceivede. qualal~ountofnormalsaline.Itwasfoundthatsomemyelinfiguresappearedintheepithelialcellsofthe proximaltubulesasearlyas1hafterasingleGMnjeetinnIsevereswelling,degeneration,ando bvious changesoftheorganelleswereseenintheendothelialcellsoftheglomerularcapillaries,thepo docytesand theepithelialcellsoftheproximaltubules24hafteraninkctionofGMIandfusionoftheproces sesof podoeytes,thickeningoftheglomeamlarmembraneandnecrosisoftheepithelialcellsofapar toftheproximal tubuleswereencountered24hafterthe3rdGMinjection.ThesefindingsdemonstratethatG Mcaniniurenot onlytheproximaltubulesbutalsotheglomeruliinr~ibblts. Keywordsgentamieins/T0}kidneyglomerqIus,ULjrabbits (上接424百) 行早期剖腹产,终得健康婴儿对复发性ICP孕妇,在妊攮28 周左右即嘱住院观察,便于监护,以提高胎儿存活率.本组另一 例三胎三产的ICP孕妇-前二胎均早产新生儿死亡,第三胎于 妊娠28周即入琬观察,于第七十月早产一男婴,体重仅2200 g.但由于处理及时得当,精心护理,终于成活.晏儿生长发育接 近正常. 2.1.2皮肤搔痒的护理;癌痒为ICP的讨厌症状-为胆酸刺激 皮肤引起,多发生在妊娠28周,3o周左右,夜间癌痒为甚,影 响睡眠.为了减步外界对皮肤的刺激,须要保持被褥及表物的 清洁,常洗澡.此外,口服消胆胺以降低血胆汁酸的浓度,减轻 胆酸对皮肤的刺激,或用中药当归10g,白芍15g泽揭10g 茯苓10g,紫胡10g,黄岑10g,茵陈15g桅于10g,10剂一疗 程,一荆/日,煎服.近年来.有用利福平啪Epimodlol的,但须注 意对肝驻的损害,对皮肤的瘙痒也可用锌氧刷荆,除布局部.若 影响睡眠可酌情服用安定. 2,1.3产后出血的护理在分娩前应进行凝血酶原及凝血时 问测定-异常者作好输血准备.1CP孕妇由于胆酸排沁障碍.维 生素K吸收减少.宜常规应用维生素K注射,产时应加强第三 产程的观察和处理-准确记录出血量.胎儿娩出后应立即注射 麦每新碱加强于官收缩,促使舱盘娩出,减少出血.出血量多 者,立即{由血. 2,2围产儿的护理 ICP对胎儿可造成早产,宫内窘迫,死胎及胎儿窘迫等.因 此一且确诊ICP后,均应转入高危门诊,定期进行胎盘功能 定及胎儿监护.监护采用非激惹性监护仪(NST)较好.在35周 以前,每周进行一次监护,35~37周,每日作胎儿监护.产前,产 时及时了解胎儿宫内异常情况,使之得到及时处理,以降低围 产儿病死草.对早产儿及较重的新生儿窒息者,经急救后及时 转入新生儿病房,进行相应的治疗及处理. 关键词妊娠并发症I胆计斑积-肝内 中围法分粪号R473.71 参考文献 1江正辉,邱仲达,吴小翎,等妊娠期肝内胆汁淤积症——94 倒临床分析.中华消化杂志.1983,3(4):221,224 2陶晓靖,熊光武,谯{扭平妊娠妇女肝内胆汁凇积症血清胆 酸水平变化重庆燕药,1991,20(4);2l5,216 3扬荣成,译.利福平可治疗肝胆汁郁积引起的搔痒.中华医学 信息导报,1993,8(21)l2,13(ArchDisChid,1[}93,69(1) (收稿:1994-05-09I修回1994-10-26)