自拟抗弓形虫汤对小鼠急性弓形虫感染的治疗机制研究 （医学论文）

自拟抗弓形虫汤对小鼠急性弓形虫感染的治疗机制研究 （医学论文） 自拟抗弓形虫汤对小鼠急性弓形虫感染的治疗机制 研究 关键词:中药配伍;弓形虫;小鼠;超氧化物歧化酶 摘要:目的观察自拟抗弓形虫汤对急性弓形虫感染小鼠的治疗作用及其作用机理。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 将昆明雌性小鼠随机分三组,A中药抗弓形虫汤组、B复方SMZ组、C模型组,，将弓形虫RH株速殖子感染小鼠，2h后灌胃给药，A组给予中药配伍0.5ml,18mg/ml,，B组给予0.5ml复方SMZ悬浊液,12mg/ml,，治疗组疗程14d，观察至30d，记录小鼠存亡情况;肝组织病理切片采用HE染色;在感染后第3d、6d和第20d用羟胺法分别检测各组小鼠的血清、心、肝和肺组织超氧化物歧化酶,SOD,活力。结果A,16.55d,、B,23.20d,组小鼠存活时间均较C,7.85d,组差异有极显著性,P<0.01,，其中，A组与B组比较，差异有显著性,P<0.05,;病理检查A组及B组有不同程度肝细胞肿大、炎症细胞浸润等病变，但与C组相比损伤程度明显减轻，差异有极显著性意义,P<0.01,，A组与B组比较，差异有显著性,P<0.05,;A、B组小鼠各部位SOD活性较C组差异有极显著性,P<0.01,，但A组与B组比较，差异无显著性,P>0.05,。结论自拟抗弓形虫汤有显著的抗弓形虫作用，它从推迟小鼠死亡时间，保护肝细胞，增强抗氧化损伤等方面发挥重要作用。 更多精品文档,欢迎来我主页查询 关键词:中药配伍;弓形虫;小鼠;超氧化物歧化酶 Evaluationoftheefficacyofself-preparedanti-toxoplasmadecoctionagainstacutetoxoplasmainfectioninmiceandstudyonthemechanismofprotection. Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectandactionmechanismsofseif-preparedanti-toxoplasmadecoctiononmiceinfectedwithtachyzoitesofToxoplasmagondii.MethodsKunmingstrainofmiceweredividedrandomlyintofourgroups， thatwasGroupAgivenselfpreparedanti-toxoplasmadecoction， GroupBgivencompoundprescriptionSMZ， GroupCthemodelgroupandGroupDthenormalgroup.TheRHtachyzoitesoftoxoplasmawereusedtoestablishtheacuteinfectionmicemodel.Themortalityofmicewasnoted.ThepathologicslicesofliverweremadewithHE.TheSODactivityinserum，heart、 liverandlungofmiceweredetectedthree， sixandtwentydaysafterinfection.ResultsThedifferencewasrem更多精品文档,欢迎来我主页查询 arkable,P<0.05, thattheaver-agesurvivaltimeofmiceinGouppAwas16.55d， and23.20dinGrouB，30.20dinGroupC， allsignificantlylongerthanthatofmiceinGroupD,7.85d, ,P<0.01,.TheharmfulnesstoliverinGroupAandBwaslighterthanthatinGrouopC,P<0.01,.TheactivityofSODinserum， heart， liverandlungofmiceinGroupAandBwassignificantlydifferentthanthatinGroupC ,P<0.01,.ButnosignificantdifferencewasnoticedbetweenGroupAandGroupB ,P>0.05,.ConclusionSelf-preparedanti-toxoplasmadecoctioncaninhibitthegrowthoftxoplasmaininfectedmice， elongatethesurvivaltimeofthemice， protectthehepato-cytesandimprovetheimmunefunctionaswellasresistingoxidation. Keywords:Self-preparedanti-toxoplasmadecoction;Toxoplasmadondii;Mice;SOD 弓形虫,Toxoplasmagondii,是一种机会性的专性细胞内寄 更多精品文档,欢迎来我主页查询 生原虫，可侵犯人体除红细胞外任何有核细胞，是造成免疫缺陷病人致死的机会性感染或引起胎儿流产、先天性弓形虫病的重要原因,1,。目前，弓形虫病的治疗仍以磺胺嘧啶或乙胺嘧啶为首选药物，但其毒副作用大，且复发率较高，使用受到限制。拟抗弓形虫汤白术、青蒿、草果、槟榔等，治疗小儿弓形虫病50例，有效率达92.0%,2,，为探讨其抗弓形虫机制，为临床应用提供基础依据，现进行小鼠体内抗弓形虫的研究。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1动物健康昆明小鼠，雌性，体重18:22g，由江西中医学院动物实验中心提供。 1.1.2虫株弓形虫RH强毒株自中山大学中山医学院寄生虫学教研室引进。 1.1.3药物及试剂中药购自江西省中医院中药房。自拟抗弓形虫汤组方含生黄芪30g、白术20g、青蒿15g、白花蛇舍草20g、槟榔10g、苦参10g、补骨脂10g、生甘草6g、草果6g、怀牛膝10g、天葵子10g。鉴定后，常规制成水煎剂，浓度为18mg/ml，分装消毒，4?冰箱保存。复方SMZ片剂由天津力生制药股份有限公司提供，批号:H12020938，每片含磺胺甲恶唑0.4g，甲氨苄啶0.08g，更多精品文档,欢迎来我主页查询 用双蒸水配制成悬浊液，浓度12mg/ml。 1.1.4试剂SOD活性检测试剂盒购自南京建成生物 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 研究所。 1.2方法 1.2.1实验分组完全随机 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 分三组，自拟抗弓形虫汤组,A,;复方SMZ组,B,;对照组,感染不治疗，C,。 1.2.2动物模型建立用RH株弓形虫速殖子常规腹腔感染小鼠，72h后断颈处死，0.5%碘伏消毒小鼠腹部，注射0.9%生理盐水3ml洗涤腹腔，吸取冲洗液，用血细胞计数板按白细胞计数方法在高倍镜下计数，调整弓形虫速殖子浓度为2×104/ml，每只小鼠腹腔注射上述弓形虫悬液0.5ml。 1.2.3给药小鼠感染弓形虫2h后灌胃给药，每天1次。A组每只每次0.5ml自拟抗弓形虫汤,18mg/ml,;B组每只每次0.5ml复方SMZ混悬液,12mg/ml,，用双蒸水配臵药液，正常饲养，疗程14d，观察至30d。 1.2.4观察小鼠发病情况自感染弓形虫后每天观察实验鼠有无弓背耸毛、肛门拖粪;记录小鼠死亡时间、饮食及活动状况等，直到更多精品文档,欢迎来我主页查询 第30d。< 1.2.5 观测指标测定 分别在小鼠感染弓形虫后后第3d、第6d和第20d用羟胺法检测各组小鼠的血清、心、肝和肺组织超氧化物歧化酶,SOD,活力;SOD活性测定方法严格按照试剂盒 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 书操作。 1.2.6 组织病理学观察 感染弓形虫后C组于第7d、其它组于用药治疗后第20d取肝脏常规制片，观察肝组织损伤程度。病理损伤程度分级:“-”，未见明显病理改变;“+”，部分肝组织肿胀伴有散在的点状坏死，汇管区有少许炎性细胞浸润;“++”，肝细胞肿胀有点状坏死及小灶性坏死，汇管区有大量炎性细胞浸润;“+++”，肝细胞肿胀，有大片状坏死，汇管区及周围有大量炎性细胞浸润。 1.2.7 统计学处理 采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。 2 结果 2.1 A组和B组小鼠出现食量下降，活动减少，弓背耸毛;C组小鼠症状明显比A、B组严重。接种弓形虫后各组小鼠存活时间,见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1,。 更多精品文档,欢迎来我主页查询 表1 接种弓形虫小鼠不同天数,d,的死亡情况,略, :*为人工处死;※※大于30d按30d计算。A、B与C相比 注 较，差异均有极显著性,P<0.01,;A组与B组比较，差异有显著性意义,P<0.05,。 2.2 自拟弓形虫汤对弓形虫感染小鼠肝脏病理学变化的干预 2.2.1 肉眼观察 C组小鼠肝脏普遍肿大，表面有明显的坏死斑，大小不等。A组及B组小鼠肝脏变化远较C组轻。 2.2.2 光镜观察 C组汇管区明显扩大，大量淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞呈灶状浸润，可见嗜酸样小体出现;肝细胞肿胀，胞质疏松，有的呈气球样变，嗜酸样变，可见明显点状、片状、灶性坏死，坏死区见少许细胞溶解后残物;肝窦明显扩大，可见红细胞堆积。A组及B组也有不同程度肝细胞肿大、炎症细胞浸润等病变，但与C组相比损伤程度明显减轻，差异有极显著性意义,P<0.01,;A组与B组比较，差异有显著性,P<0.05,。各组小鼠肝脏病理学变化比较,见表2,。 2.3 不同天数各组小鼠血清、心、肝和肺组织匀浆SOD活性检测 见表3。感染后第3d A、B与C相比较，差异均有极显著性,P<0.01,;A组与B组比较，差异无显著性意义,P>0.05,;更多精品文档,欢迎来我主页查询 感染后第6d A、B组分别与C相比较，差异均有极显著性,P<0.01,，A组与B组比较差异无显著性意义,P>0.05,;感染后第20d A组与B组比较，差异无显著性意义,P>0.05,。 表2 各组小鼠肝脏病理变化比较,略, 注:A、B与C相比较，差异均有极显著性,P<0.01,;A组与B组比较，差异有显著性意义,P<0.05,。 表3 各组小鼠不同天数血清及心、肝、肺组织匀浆SOD活性检测,略, 3 讨论 实验结果显示，自拟抗弓形虫汤能显著延长弓形虫感染小鼠的存活时间，但较复方SMZ效果差。自拟弓形虫汤，方中黄芪、白术补气，有较强的提高小鼠巨噬细胞吞噬能力;青蒿、槟榔、草果杀虫;白花蛇舍草、苦参、补骨脂、天葵子清热、抗炎、调节免疫;甘草调和诸药。该汤剂一方面对症清热，一方面治本抗病原体，同时调节小鼠免疫能力，故其具有抗弓形虫作用。 速殖子是弓形虫急性感染的主要致病阶段，其在细胞内增殖，更多精品文档,欢迎来我主页查询 导致细胞破坏后，逸出来的速殖子再侵入到新的细胞，如此反复，导致局部组织坏死并伴有单核细胞浸润为主的急性炎症是弓形虫病的 3, 。肝脏是急性弓形虫感染最常侵犯的主要器最基本病理变化 , 官之一。本实验显示，自拟弓形虫汤能减少炎症细胞的浸润，减轻弓形虫感染小鼠肝脏组织的坏死程度，具有保护肝细胞的作用。 自由基是生物体内具有高度活性的物质，它可在细胞代谢过程中不断产生，也不断地被清除，来维持有利无害的、生理性低水平的稳定平衡的自由基浓度 ,4, 。所以，整体上显示不出自由基对机体的损伤和破坏，但当机体清除自由基的功能下降时，自由基就会对细胞起到氧化剂的作用而造成机体损伤。机体为了防御新陈代谢及其他生命活动中自由基的损伤和破坏，在组织和细胞中建立并形成了一整套的抗自由基防御系统 ,5, 。其中具有防御功能的重要酶类就包括超氧化物歧化酶，它可以使因自由基作用而产生的毒性最强的超氧离子自由基歧化为O 2 和H 2 O 2 ，生成的过氧化氢酶等分解成水而使超氧离子解毒从而减缓自由基的损坏作用。有研究表明氧自由基参与了急性弓形虫病的病理生理过程 ,6, 。本实验结果表明，自拟弓形虫汤能非常显著地提高弓形虫感染小鼠血清、心脏、肝脏以及肺脏的超氧化物歧化酶活性，进而清除小鼠体内氧自由基，防止 氧自由基对机体的损害。 综上所述，自拟弓形虫汤对小鼠实验型急性弓形虫感染有显著更多精品文档,欢迎来我主页查询 的疗效。延长了小鼠存活时间，保护了肝脏组织，增强了机体抗氧化损伤作用。对自拟抗弓形虫汤抗弓形虫作用机理的研究为中药配伍抗弓形虫病的临床应用提供了理论依据。 致谢:对在本实验中给予指导和帮助的江西医学院病理科杜舜颖主任医师、江西省寄生虫病研究所丁贞英研究员表示诚挚的谢意! 参考文献: 1,于恩庶.弓形虫病学,M,.福建:福建科学技术出版社， , 1992，186:195. ,2,邓吉华，傅玲，陈运生，等.自拟抗弓形虫汤治疗小儿弓形虫病50例,J,.中医杂志，1996，37,2,:102:103. ,3,詹希美.人体寄生虫学,M,.北京:人民卫生出版社，2005，89:96. ,4,陈奇.中药药理研究方法学,M,.北京:人民卫生出版社，1996，920:931. ,5,陈瑗.自由基医学,M,.北京:人民军医出版社，1991，4:7. 更多精品文档,欢迎来我主页查询 ,6,向远东，欧阳颗，聂崇兴.急性弓形虫病小鼠超氧化物歧化酶活性测定与同工酶分析,J,.中国人兽共患病杂志，1998，14 :40:43.< ,3, 更多精品文档,欢迎来我主页查询