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红霉素null红霉素红霉素简介 :简介 :　红霉素是由红霉素链霉菌（Streptomyces erythreus）所产生的大环内酯（macrolide）系的代表性的抗菌素。主要对革兰氏阳性菌具有抗菌性。LD50为200―400毫克／公斤，作用机理在于与细菌的聚核糖体结合而抑制肽链的延伸。红霉素结构式红霉素结构式null红霉素，由链霉素Stretomyces erythreus所产生，是一种碱性抗生素。其游离碱供口服用，乳糖酸盐供注射用。此外，尚有其琥珀酸乙酯（琥乙红霉素）、丙酸酯的十二烷基硫酸盐（依托红霉素）供...

null红霉素红霉素简介 :简介 :　红霉素是由红霉素链霉菌（Streptomyces erythreus）所产生的大环内酯（macrolide）系的代表性的抗菌素。主要对革兰氏阳性菌具有抗菌性。LD50为200―400毫克／公斤，作用机理在于与细菌的聚核糖体结合而抑制肽链的延伸。红霉素结构式红霉素结构式null红霉素，由链霉素Stretomyces erythreus所产生，是一种碱性抗生素。其游离碱供口服用，乳糖酸盐供注射用。此外，尚有其琥珀酸乙酯（琥乙红霉素）、丙酸酯的十二烷基硫酸盐（依托红霉素）供药用。特点 :特点 :对青霉素产生耐药性的菌株，对本品敏感。作用机制主要是与核糖核蛋白体的50S亚单位相结合，抑制肽酰基转移酶，影响核糖核蛋白体的移位过程，妨碍肽链增长，抑制细菌蛋白质的合成，系抑菌剂性状 :性状 :　红霉素为白色或类白色的结晶或粉末；无臭，味苦；微有引湿性。在甲醇、乙醇或丙酮中易溶，在水中极微溶解。药理作用 :药理作用 :　本品为大环内酯类抗生素，抗菌谱与青霉素近似，对革兰阳性菌，如葡萄球菌、化脓性链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、粪链球菌、溶血性链球菌、梭状芽孢杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等有较强的抑制作用。对革兰阴性菌，如淋球菌、螺旋杆菌、百日咳杆菌、布氏杆菌、军团菌、脑膜炎双球菌以及流感嗜血杆菌、拟杆菌、部分痢疾杆菌及大肠杆菌等也有一定的抑制作用。此外，对支原体、放线菌、螺旋体、立克次体、衣原体、奴卡菌、少数分枝杆菌和阿米巴原虫有抑制作用。金黄色葡萄球菌对本品易耐药。红霉素的生产工艺红霉素的生产工艺精致工艺流程 1.材料与方法1.材料与方法1.1 菌种红霉素链霉菌P-0437 Streptomyces erythreus 本实验室选育菌株null1.2 培养基种子培养基淀粉3.5 葡萄糖3.0 豆饼粉3.0 (NH 4 ) 2 SO 4 0.5 CaCO 3 1.0 KH 2 PO 4 0.05 MgSO 4 7H 2 O0.025 发酵培养基A 粉3.0 B 粉4.5 豆饼粉1.5 葡萄糖 1.2 NH 4 2 SO 4 0.15 CaCO 3 0.6 豆油等 null1.3 实验方法 1.3.1 摇瓶培养种子培养冷冻管取红霉素菌种接种于母斜面35 培养7d 转种于子斜面35 继续培养7d后接种于一级种子瓶 33 220r/min培养48 56h 转入二级种子瓶33 220r/ min 继续培养26 30h 发酵培养将上培养好的二级种子接种于发酵瓶29 31 220r/min 培养160h 摇瓶装液量为50ml/250ml 每组结果均为5 只摇瓶的平均效价 1.3.2 3L 发酵罐培养种子培养同上的种子培养发酵培养将上培养好的二级种子接种于3L 自动发酵罐控制发酵温度pH 接种量搅拌速度和溶解氧等条件，培养160hnull1.4 分析测定方法 1 发酵液效价测定 2 pH 测定用pH 电极在线测定 3 溶解氧测定用溶氧电极在线测定 4 菌丝浓度用体积法取发酵液10ml 于离心沉淀管中在3000r/min 下离心10min 计算菌丝体百分比v/v 5 红霉素成品检验2 .结果与讨论2 .结果与讨论2.1 发酵条件优化作为考察因素分别将发酵基础条件改变其中一种参数其它条件不变通过定时取样分析检测该条件下发酵液中菌丝浓度红霉素效价等参数 null2.1.1 温度对红霉素发酵的影响在3 升发酵罐中研究了温度27 29 31 对红霉素发酵的影响结果见图1null从图1 可知随着温度的升高菌体生长速度加快菌丝浓度增加迅速但温度过高菌体衰老自溶也快红霉素分泌期缩短发酵后期效价甚至下降29 对红霉素发酵最有利 2.1.2 pH 对红霉素发酵的影响由不同的初始pH 6.6 6.9 7.2 对红霉素发酵的影响试验结果见图2null结果表明三种不同的初始pH 对菌体生长影响不大而对红霉素合成的影响较大pH7.2 时效价最低pH6.9 时最好null2.1.3 接种量对红霉素发酵的影响接种量12% 15% 18% 对红霉素发酵的影响试验结果见图3null从图3 可见随着接种量增大菌丝浓度明显增加18% 接种量碳源和氮源的消耗过快菌体老化自溶也快红霉素效价前期增加较多后期增加较缓12% 接种量使菌种迟滞期延长也影响了红霉素效价15% 接种量在前期中期效价虽然比 18% 接种量低但在112h 后增长幅度加快发酵结束时效价最高说明15% 接种量最佳 null2.1.4 种龄对红霉素发酵的影响种龄28h 32h 36h 对红霉素发酵的影响试验结果见下页图4nullnull从图4可见随着种龄增大前期菌丝浓度增加明显效价也增加较多但到后期菌体老化自溶也快红霉素效价不再增加而28h 菌龄的种子虽然对发酵过程中菌丝浓度影响不大但红霉素效价明显高于后二者表明最佳种龄为 28h null2.1.5 溶解氧对红霉素发酵的影响在3L 发酵罐中在通气量1 1vvm 搅拌220/min 培养温度29 条件下红霉素发酵过程中溶氧DO 变化见图5a null从图5a 可见在红霉素发酵过程中当培养至40 60h 时发酵液中的溶氧量DO 达到最低值表明在40 60h 时间段中菌体大量繁殖耗氧量大幅增加通过改变通气量调节搅拌转速控制该段时间的溶氧水平进行红霉素发酵以研究溶氧对红霉素发酵的影响结果见图5b从图5b 可知当溶氧低于25% 时对红霉素生物合成有明显地抑制作用溶氧越低发酵效价也就越低当溶氧高于25% 时对红霉素生物合成基本没有影响表明只需将溶氧控制在25% 以上即可满足对红霉素生物合成的需要null2.2 10 吨发酵罐试验控制发酵培养基初始pH6.9 接种量15% 控制发酵前期温度31℃ 32℃ 40h后29℃ 控制搅拌180 240r/min、通气量1 0.8 1.5v/v/min 使发酵过程中溶氧保持在25% 以上并于培养36h 后开始补加A 粉和B 粉在10 吨发酵罐上连续试生产6 批结果见表1。nullnull发酵罐批量试验结果表明采用A 粉和B 粉替代或部分替代原工艺中的淀粉及部分葡萄糖和豆饼粉用于红霉素发酵是可行的通过工艺优化平均发酵单位达6819.3u/ml 比同期生产平均水平5882u/ml 提高了15.9% 产品质量全部合格原材料消耗成本可降低 26% 具有较高的经济效益和社会效益在试验过程中菌丝形态和主要生化指标与原工艺相比均无明显差异仅观察到使用A 粉和B粉的罐批在发酵前期产生的泡沫较多适当控制搅拌和通气量可解决在发酵后期很少出现稀化放罐时发酵液粘度明显增大对发酵单位提高稳定和对发酵液的预处理非常有利其原因有待于进一步探讨。

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