血液中乙醇的测定顶空气相色谱法

SF/Z JD0107001-2010 血液中乙醇的测定 顶空气相色谱法 2010-04-07 发布 2010-04-07 生效 司 法 鉴 定 技 术 规 范 发布 中华人民共和国司法部司 法 鉴 定 管 理 局 SF/Z JD0107001-2010 I 前 言 本标准的附录A和附录B为 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 性附录。 本标准由中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所提出。 本标准由中华人民共和国司法部归口。 本标准起草单位：中华人民共和国司法部司法鉴定科学技术研究所。 本标准主要起草人：卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。 SF/Z JD0107001-2010 1 血液中乙醇的测定 顶空气相色谱法 1 范围 本标准规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。 本标准适用于血液中乙醇的定性及定量分析。 本标准的方法检出限为0.01mg/mL；定量下限为0.05mg/mL。 2 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成 协议 离婚协议模板下载合伙人协议 下载渠道分销协议免费下载敬业协议下载授课协议下载 的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD） GA/T 122 毒物分析名词术语 3 原理 本法利用乙醇的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测，经与平 行操作的乙醇对照品比较，以保留时间或相对保留时间定性，用内标法、峰面积比进行定量分析。 4 试剂和材料 除另有说明外，水为GB/T 6682规定的二级水。 4.1 乙醇 色谱纯。 4.2 乙醇标准溶液 精密称取适量乙醇，用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效 期为6个月。试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，在冰箱中冷藏密闭保存，有效 期为3个月。 4.3 叔丁醇 色谱纯。 4.4 叔丁醇溶液 精密称取适量叔丁醇，用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期 为12个月。将储备液用水稀释，得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6 个月。 SF/Z JD0107001-2010 2 5 仪器 5.1 气相色谱仪 配火焰离子化检测器(FID)。 5.2 顶空进样器 配1mL定量进样环。 5.3 样品瓶 10mL，顶空自动进样器用。 5.4 硅橡胶垫。 5.5 铝帽。 5.6 密封钳。 5.7 精密移液器。 5.8 自动稀释仪。 6 测定步骤 6.1 样品处理 用精密移液器或自动稀释仪取样品血0.10 mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液，加入样品瓶 内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。 6.2 测定 6.2.1 顶空气相色谱测定参考条件 a）色谱柱（1）：DB-ALC1（30m×0.32mm×1.8μm）石英毛细管柱或相当者； 柱温：恒温40°C； 色谱柱（2）：DB-ALC2（30m×0.32mm×1.2μm）石英毛细管柱或相当者； 柱温：恒温40°C； b）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速8mL/min； c）进样口温度：150°C； d）检测器温度：250°C； e）加热箱温度：65℃； f）定量环温度：105℃； g）传输线温度：110℃； h）气相循环时间：3.5min； i）样品瓶加热平衡时间：10.0min； j）样品瓶加压时间：0.10min； k）定量环充满时间：0.10min； l）定量环平衡时间：0.05min； m）进样时间：1.00min。 6.2.2 定性测定 样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定，以叔丁醇为内标，计算色谱峰的相对保留时间，将样品 色谱峰的保留时间（或相对保留时间）与乙醇标准对照品的保留时间（或相对保留时间）比较，相对误 差小于2%，空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰，可以认为检材中含有乙醇。如果内标物 SF/Z JD0107001-2010 3 色谱峰正常，而无乙醇的色谱峰时，可认为检验结果为阴性。乙醇对照品和内标气相色谱图，参见附录 A。 6.2.3 定量测定 本方法采用内标法－校准曲线法或内标法－单点校正法定量测定。 6.2.3.1 内标法－校准曲线法 采用内标-校准曲线法测定（见附录 B）。将乙醇对照品溶液进样，以乙醇和内标峰面积比为纵坐标， 乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，用标准曲线对样品进行定量，所测样品中乙醇的浓度 值应在线性范围内。 6.2.3.2 内标法－单点校正法 血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。 6.3 平行试验 按以上步骤对同一试样进行平行试验。 单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算，双样相对相差不得超过5％（有凝血块 的血样不超过10％）。双样相对相差按式（1）计算： | C1 - C2| 双样相对相差（%） = ⎯⎯⎯⎯⎯ × 100 ………………………………(1) ⎯C 式中： C1、C2⎯⎯两份样品平行定量测定的结果； ⎯C ⎯⎯两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2。 双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD（%）若不超过10％时（有凝血块的血样不超 过15％），结果按两份样品结果的平均值计算。 7 结果计算 血液中乙醇浓度测定采用内标法－校准曲线法定量或按式(2)计算： A× Ai′×c C = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ …………………………………(2) A′×Ai 式中： C⎯⎯血液样品中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)； A⎯⎯血液样品中乙醇的峰面积； A′⎯⎯标准溶液中乙醇的峰面积； Ai′⎯⎯标准溶液中内标物的峰面积； Ai⎯⎯血液样品中内标物的峰面积； c⎯⎯标准溶液中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)。 SF/Z JD0107001-2010 4 附 录 A （资料性附录） 乙醇对照品和内标气相色谱图 A.1 按色谱柱（1）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图 A.1。 min0.5 1 1.5 2 2.5 pA 20 25 30 35 40 45 FID1 A, (2009\09040304.D) 叔丁醇(2.09) 图 A.1 按色谱柱（1）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图 A.2 按色谱柱（2）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图 A.2。 min0.5 1 1.5 2 2.5 pA 15 20 25 30 35 40 45 50 FID2 B, (2009\09040304.D) 图 A.2 按色谱柱（2）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图 叔丁醇(2.03) 乙醇 (1.51) 乙醇 (1.43) SF/Z JD0107001-2010 5 附 录 B （资料性附录） 校准曲线 配制乙醇浓度为0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/mL的水溶液，按6.1和6.2项下分 析，每一浓度点取2份，以乙醇与内标叔丁醇的峰面积比对乙醇浓度做工作曲线。 ٛ ٛ按色谱柱（1）条件测得的工作曲线方程为 X = 1.0761 C - 0.0162（r = 0.9997），按色谱柱（2）条件 测得的工作曲线方程为 X = 1.0655 C - 0.0177（r = 0.9997）。式中 X 为乙醇与叔丁醇的峰面积比值，C 为乙醇工作溶液浓度(mg/mL)。