坠落性肝撞击损伤后肝功能指标和细胞因子表达的实验研究.doc

坠落性肝撞击损伤后肝功能指标和细胞因子 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达的实验研究.doc 坠落性肝撞击损伤后肝功能指标和细胞因 子表达的实验研究 作者:张洪义 孔亚林 何晓军 刘承利 张宏义 张希东 张辉 徐新保 赵刚 肖梅 【摘要】 目的:通过空中坠落性肝脏撞击伤后肝脏功能指标的检 测，探讨该型肝脏损伤的早期敏感指标。方法:采用高空动物坠落 撞击地面障碍物造成犬肝脏撞击伤模型，分别于犬伤前、伤后15、 30、45 min，1、3、6、9 h抽血检测肿瘤坏死因子ɑ(tumor necrosis factor ɑ，TNFɑ)、白细胞介素2(interleukin2， IL-2)、谷丙转氨酶 (alaninetransaminase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、乳酸脱氢酶-L(lactate dehydrogenase， LD-L)、谷氨酰基转肽酶(glutamyl transpeptidase，GGT)、碱性 磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)等肝功能指标，进行统计学分 析。结果:TNFɑ在伤后15 min、IL-2在伤后30 min开始明显升高 (P均,0.05)，至3 h开始达到并维持在高峰水平 (P<0.05,P<0.01);ALT和AST 在伤后1 h开始显著升高 (P<0.05, P<0.01)，但在伤后9 h AST浓度与伤前比较差异无 统计学意义(P,0.05);LD-L在伤后30 min开始各时相点与伤前 比较差异均有统计学意义(P<0.05);其他检测指标与伤前比较 差异均无统计学意义(P,0.05)。结论:空中坠落性肝脏撞击伤 后，TNFɑ和IL-2是反应肝功能状况的灵敏指标，结合ALT、 AST、LD-L的检测，在该型肝脏损伤的早期诊断和伤情判断方面具 有重要的临床参考价值。 【关键词】 坠落性肝损伤?肝功能?细胞因子类?狗 【ABSTRACT】 Objective: To explore the parameters used for the clinical evaluation of post-traumatic hepatic function crashing down to the ground. Methods: By establishing the animal model of liver impact injury in simulation of parachuter,blood were sampled before injuries and 15 min, 30 min, 45 min,1 h, 3 h, 6 h ,9 h after injuries. Cytokines including TNFɑ、IL-2 and liver function parameters including ALT,AST,LD-L,GGT,ALP were measured and analyzed statistically. Results: TNFɑ increased after 15 minutes, and IL-2 increased after 30 minutes(P<0.05), which all remained the high level after 3 hours(P<0.05,P<0.01). ALT and AST were increased at 30min after injuries, but no statistical significance(P>0.05). These two parameters were significantly increased all the time after injuries(P<0.05, P<0.01), except that AST showed no difference at 9 h after injuries, the wounded animal showed increased level of LD-L (P<0.05, P<0.01).There was no difference for other parameters measured following injuries. Conclusion: ALT, AST and LD-L are sensitive parameters for the detection of liver function which can be used for diagnosis of crashing liver injuries. 【KEY WORDS】 Following crashing liver injury?Liver function?Cytokines?Dog 腹部闭合性损伤中，肝脏由于其特殊的组织结构特点和血流动力学机制，成为最容易被损伤的器官;在各种致伤原因中，高空坠落导致的腹部闭合性损伤是高空作业环境和空降训练、坠机等情况下的主要致伤因素。对于高空坠落性肝脏损伤，目前缺乏针对性研究，肝脏受到创伤后，既有肝功能受损，又有全身继发性创伤反应,1,，为此，本研究通过建立坠落性肝脏撞击伤犬模型，分别于撞击伤后的不同时相点检测多项能反映肝创伤程度的指标，旨在为临床提供具有判断肝脏损伤严重程度及预后的实用指标。 1 材料与方法 1.1 主要仪器设备 自制生物空降模拟系统，主要由钢管、动物固定器、自由落体平台、高度调节器和地面固定圆形障碍物等组成。 1.2 制备动物模型 北京地区杂种健康成年犬15只(由空军总医院实验动物中心提供)，雌雄不限，犬龄14,16个月，体质量15,20 kg，将其随机编为1,15号。戊巴比妥钠(30 mg/kg)经耳缘静脉注射后麻醉，腹部垂直地面固定于自由落体平台，上腹部备皮，于颈左侧行静脉切开插管，插管深度约10 cm。按照自由落体高度为5 m，地面障碍物冲击面直径100 mm进行分组，将实验犬以自由下落的方式对动物上腹部剑突下3,5 cm处撞击致伤，障碍物高出地面4 cm，实验过程中不禁食水。撞击能量E=875 J，g,9.8 m/s2，撞击速度V=9.90 m/s，撞击动量M,173.25 kg?m/s，自由落体运动时间T=1.01 s。 1.3 动物解剖 实验动物如有死亡立即进行解剖，存活动物于9 h统一处死进行解剖，详细检查肝脏损伤的严重程度，并参照有关脏器损伤的分级 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 进行定级。 1.4 标本采集和检测项目,2, 伤前从静脉插管抽血5 mL作为正常对照。然后分别于15、30、45 min，1、3、6、9 h各抽血5 mL，检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor ɑ，TNFα)、白细胞介素2(interleukin 2， IL-2)、谷丙转氨酶(alaninetransaminase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、乳酸脱氢酶-L(lactate dehydrogenase L， LD-L)、谷氨酰基转肽酶(glutamyl transpeptidase，GGT)、碱性 磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)等肝功能指标。 1.5 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件包进行分析，数据用x?s表示，组间数据采用随时间变化单因素方法分析。P?0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 伤情特点 3号实验犬伤后2 h死亡，7号实验犬伤后55 min死亡，11号实验犬伤后4 h死亡。死亡动物即时解剖和9 h处死动物尸体解剖发现，肝脏破裂发生率达100,(15/15)，腹腔内积血100,300 mL，死亡主要原因为失血性休克。在相同的致伤条件下，肝损伤的严重程度较为接近，但腹腔出血量差别较大，有的肝损伤较严重，但出血量并不多，这主要是由于血凝块凝住伤口，从而有效止血。肝损伤的主要类型有肝包膜下血肿、肝实质裂伤、肝中心型破裂、肝实质广泛破裂及合并大血管损伤。美国创伤外科协会(ASST)分级,,,:?级1例(6.7%)，?级11例(73.3%;)，?级2例(13.3%)，?级1例(6.7%)。 2.2 肝功能指标及细胞因子的检测结果 肝功能指标ALT、AST、LD-L、GGT、ALP及细胞因子TNFɑ、IL-2的检测结果见表1。ALT和AST在伤后30 min即增高，但与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05)，1 h以后各时相点与伤前比较差异均有无统计学意义(P,0.05)，但AST在伤后9 h与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05);LD-L在伤后30 min开始，各时相点与伤前比较差异均有统计学意义(P,0.05);而GGT和ALP在伤后各时相点虽然也明显增高，但与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05)。TNFɑ在伤后15 min，IL-2在伤后30 min开始明显升高，与伤前比较差异均有统计学意义(P,0.05)，至3 h开始达到并维持在高峰水平(P,0.05，见表,)。 3 讨论 为了解肝脏各种功能状态而 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 的众多实验室检测方法，统称为肝功能试验。检测的目的是帮助临床判断和了解急、慢性肝炎、药物及某些工业化学品中毒时肝脏损害的程度，是临床最常用的检查方法，也是临床疗效判断的重要客观指标，择期肝脏外科手术以肝功能指标的正常与否作为确定手术适应证及术后治疗措施的重要依据,4,。有研究发现，在创伤后的肝损伤进展过程中，肝功能指标的变化是反应肝损伤程度的重要指标之一,,,，这在模拟交通伤撞击实验中得到了证实。对于坠落性肝脏撞击伤后的肝功能变化则缺乏相应研究，特别是临床很少做这些检查。有研究表明，高空坠落性腹部闭合性损伤患者早期致死因素主要为肝脏破裂引起的失血性休克，晚期则主要为创伤性炎症反应引起的多脏器功能衰竭,,,。肝脏具有物质代谢、合成蛋白质、解毒、分泌胆汁等许 多重要的生理功能，肝功能的异常必然会影响到机体的预后和转归;同时肝脏的血供丰富，肝窦内有大量的免疫细胞，肝脏的损伤必然引起免疫因子的产生，激活机体的免疫反应,,,。因此，将肝功能指标与细胞因子指标的检测相结合，作为坠落性肝脏撞击伤后早期诊断指标对于此类肝损伤的诊治有重要意义。 本组动物的肝损伤分级为?,?级,分别在伤后7个时相点检测了各项有关指标。结果显示, ALT和AST在伤后30 min即增高，但与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05)，1 h以后各时相点比伤前明显升高(P,0.05)，但AST在伤后9 h与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05);LD-L在伤后30 min开始各时相点与伤前比较差异均有统计学意义(P,0.05);而GGT和ALP在伤后各时相点也明显增高，但与伤前比较差异无统计学意义(P,0.05)。说明ALT、AST和LD-L是肝脏撞击伤后能反应肝功能变化的灵敏指标，肝脏撞击伤后检测ALT、AST和LD-L对诊断肝损伤有重要的参考价值。 IL,2是白细胞介素的一种，主要由活化的T细胞产生，是具有多项作用的细胞因子，可以促进淋巴细胞的生长、增殖和分化，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用;TNFɑ来源于单核细胞、吞噬细胞，可以引起肿瘤组织出血、坏死作用，以及对免疫细胞具有调节、诱导作用。两者在创伤性炎症反应发生的过程中具有重要意义,,,。本研究结果显示，TNFɑ在伤后15 min，IL-2在伤后30 min开始明显升高(,<0.05)，至3 h开始达到并维持在高峰水平。同肝功能指标比较，细胞因子的表达增高时间更早，是反应肝脏损伤更为灵敏的指标，结合ALT、AST、LD-L的检测，在该型肝脏损伤的早期诊断和伤情判断方面具有重要意义。 【