高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮ⅡA的含量

高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮ⅡA的含量 高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参 酮?A的含量 中药制剂工程与技术愈’霄II爹隧学诼 2008年第9卷第1期 高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮?A的含量 张广萍,何刘平,何宝平,冀小君 (山西省生物应用职业技术学院,山西太原030031) 摘要目的:建立高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮?A含量的方法.方 法:采用SymmetryC色谱柱 (4,6mm×250mm),以甲醇一水(80:20)为流动相,流速为1mL/min,检测波长270nm. 结果:丹参酮?A的线性 范围为0.064mg,0.320mg,(r=0.9998),平均回收率为99.4%(RSD=2.58%o结论: 本方法简便,准确,可作为丹芪降 糖胶囊的质量控制依据. 关键词丹芪降糖胶囊;高效液相色谱法;丹参酮?A 中图分类号:R286文献标识码:A文章编号:1671—0258(2008)O1—0047—02 DeterminationofTanshinonelIAinDanqiJiangtangCapsulebyHPLC ZhangGuangping,HeLiuping,HeBaoping,JiXioojun (ShanxiBiologicalApplicationVocationalTechnicalCollege,TaiyuanShanxi030031) AbstractObjective:ToestablishamethodfordeterminingthecontentoftanshinoneIIAinD anqiJiangtangcapsuleby HPLC,Method:HPLCwagperformedonSymmetryC{R(4,6mm×250lnln)columnwithmethanol—water(80:20)asmo— bilephageatflowrateof1mL/min.ThedetectionwavelengthWag270nm,Results111eline rrangeoftanshinoneIIAWag 0.064mg, 0.320mg(r=0.9998),theaveragerecoveryrateWag99.4%andRSDWag2.58%.Conclusion :ThemethodiS simple,sensitiveandCanbeusedfortheanalysisoftanshinoneIIAinDanqiJiangtangcapsu le. KeywordsDanqiJiangtangcapsule,TLC,tanshinoneIIA 丹芪降糖胶囊是由黄芪,丹参,生地黄,桑叶,麦冬 等12味中药经过粉碎,提取,精制等 工艺 钢结构制作工艺流程车尿素生产工艺流程自动玻璃钢生产工艺2工艺纪律检查制度q345焊接工艺规程 加工而成的硬 胶囊剂,多年临床实践证明有调补气血,益气养阴,健脾 补肾的作用.用于糖尿病引起的倦怠乏力,心悸气短,头 晕耳呜,自汗盗汗,心烦失眠,口渴喜饮,胸腹胀满,纳呆 便溏,肢体麻痛等疗效确切.方中丹参含丹参酮I,丹参 酮?A,丹参酮?B,隐丹参酮,丹参素,原儿茶酸以及丹 参酚酸A等成分[1].为控制本品质量,我们研究了丹参 中有效成分之一丹参酮?A含量的测定方法,现报道如 下. 1实验材料 I.1实验仪器 Waters(美国)高效液相色谱仪,色谱柱为Symmetry C柱(4.6mm~150mm);515泵;2996紫外检测器. l-2药品与试剂 丹参酮?A对照品(批号:0810—200004)购自中国 药品生物制品检定所;丹芪降糖胶囊制剂由山西省闻喜 县红十字会心脑血管病专科医院委托运城市安国中医 结核病医院制剂室配制,许可证号:晋Z20050039;流动 [作者简介]张广萍,女,实验师,从事中药研究 [收稿日期]2007—10—16 相所用甲醇为色谱纯,水为双蒸水,其他试剂均为分析 纯. 2方法与结果 2.1色谱条件 固定相:C色谱柱(4.6mmxl50mm);流动相:甲 醇一水(80:20),流速:1mL/min;柱温:室温;检测波 长:270nm.在此条件下丹参酮?A与样品中其他组分 能基线分离,丹参酮?A与其相邻色谱分离度大于1.5. 按丹参酮?A峰计算,理论塔板数为2000以上.阴性 对照无干扰.结果见图1,图4. 2.2溶液的制备 2.2.1供试品溶液的制备精密称取本品2g,置烧瓶 中,加人甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流1h,放 冷,密塞,称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过, 取滤液,即得. 2.2.2对照品溶液的制备精密称取丹参酮?A对照品 10mg,置50mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀对照品的色谱图 瓶中,加甲醇至刻度,摇匀;精密量取4mL,置25mL棕 色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得(每1mL中含丹参 酮?A32g);同法制成不同浓度的对照品溶液.精密吸 取不同浓度丹参酮?A对照品溶液(6.4p,g/mL,12.8 mL,l9.2I~g/mL,25.6I~g/mL,32I~g/mL)各l0乩分别进 样,测定峰面积积分值.结果见图5. 浓度【I~g/mL) 图5丹参酮?A的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线图 2.4精密度试验 精密吸取丹参酮?A对照品溶液(12.8p~g/mL)10LLL, 分别进样5次,测定峰面积积分值,其峰面积分别为 1O46237,1049356,1O51187,1052087,1O44403, 平均峰面积为1048654;平均加样回收率为0.31%. 2.5稳定性试验 取供试品溶液(批号:051211)在0h,2h,4h,8h, 12h分别进样10LLL,测得样品中丹参酮?A峰面积积 分值,分别为1317569,1322453,1298635,1356894, 1396780,平均峰面积为1338466,平均加样回收率为 2.90%.试验结果表明,供试品溶液在12h内稳定性良 好. 2.6重复性试验 : 按拟定的含量测定方法,对同一批样品(批号 051211)分别制备5份供试品溶液,精密吸取10LLL,进 样,测定峰面积积分值并计算含量,RSD:3.31%.结果见 表】. 表1样品重复性试验结果 试样号样重(g)峰面积(A)含量(mg/粒)含量均值(mg/粒)RsD(%) 2.7回收率试验 mJ d一,…,乙一L一一. 图3供试品溶液色谱图 4?6?8???I2)4?J6/10?m? 图4阴性对照溶液色谱图 采用加样回收法试验,精密称取已知含量的样品 (批号:051211)6份,分别精密添加丹参酮?A对照品溶 液(0.5mg/mL),按样品测定项下操作,结果见表2. 回收率=×OO% 表2回收率试验结果 2.6样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10L, 注入液相色谱仪测定,即得.3批样品测定结果见表3. 表3样品中丹参酮IIA含量测定结果 根据3批样品含量测定结果,规定本品每粒(每粒 装0.33g)含丹参以丹参酮?A计(c.H.0)不得少于 0.115mg. 3讨论 单味药及复方中丹参酮?A的含量测定方法已有 报道,本文参考文献方法,根据样品实际情况,首次报 道了丹芪降糖胶囊中丹参酮?A的含量测定方法.本文 采用的样品前处理及高效液相色谱测定法,经考察,方 法简便易行,准确可靠,为本品的质量控制提供了依据. 参考文献 [1]康延国.中药鉴定学[M].北京:中国中医药出版社,2003:128. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版 社,2005:52.