梓葛冻干粉针对血瘀证大鼠的活血化瘀作用的研究（可编辑）

梓葛冻干粉针对血瘀证大鼠的活血化瘀作用的研究（可编辑） 梓葛冻干粉针对血瘀证大鼠的活血化瘀作用的研究 独创性声明 学位论文题目:挂蔓途王猃钍盟鱼瘀适太鼠的适应丝瘀佳思班究 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果,文中 已 加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋 友、 同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 . . / ?日 /年 易月 签字期:矽 学位论文作者:劝君确 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的 规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁 盘, 允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院筹可以将 学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用 影 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 , 保密的学位论文在解密后适用本授权书,本论文:叼不保密, 口保密期限至 年 月止。争 学位论文作者签名:伊易乙确 导师签名:何艺弓, ’ ‘ 签字日期:沙应年月日 签字日期:弘年月弓日?:一。”” 目 录 英汉缩略语名词对照 摘要??.??. 前 言??. 第一章梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究?. 材料 .实验 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ??. 一/溉 一一 实验结果?一 第二章梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠的作用研究?. 材料??. 实验方法?。 实验结果?~ 第三章梓葛冻干粉针对热毒血瘀证大鼠的作用研究? 材料??. 实验方法.结果??. .、结??. 讨论??. 结论.??: 思考与展望. 参考文献? 图??. 文献综述? 致谢??. 攻读硕士学位期间科研工作汇报西南大学硕十学位论文英汉缩 略语名词对照 英汉缩略语名词对照 中文对照 英文缩写 英文全称 活化部分凝血酶时间 出血时间 水合氯醛 脚 凝血时间 天 红细胞聚集指数 红细胞刚性指数 黜 内皮素 克 小时 红细胞压积 升 脂多糖 摩尔/升 / 一氧化氮全血黏度呐 血浆黏度 血小板聚集 凝血酶原时间 转/分 全血还原黏度秒凝血酶时间 两南大学硕士学位论文曲雨大宁硕十宁伊论文 梓葛冻干粉针对血瘀证大鼠的活血化瘀 作用研究 药物 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 学专业硕士研究生:邓礼娟 指导老师:徐晓玉教授 摘要 背景: “ 梓葛冻干粉针 是本课题组自主研制的治疗脑缺血的中药单体复方制剂,前期已对该 制剂的制备工艺和对动物脑缺血模型的改善作用进行了研究,本文观察其对脑 缺血的主要证候血瘀证作用,旨在为将其研制成治疗脑缺血的中药新药奠定主 要药效学试验基础。本课题得到重庆市科技攻关项目,的支 持。 目的: 以气虚血瘀证、阴虚血瘀证和热毒血瘀证大鼠为模型,观察梓葛冻干粉针 对种血瘀证大鼠凝血功能、血液流变学及生成的影响,以探讨梓葛冻干 粉针的活血化瘀之功效。 方法: . 造模方法 气虚血瘀证模型的制备采用饥饿、疲劳、寒湿、惊恐和高脂饮食等方法 相结合复制气虚血瘀证模型。每天造模次,连续 。以体重显著下降、出 现气虚症状、血瘀症状和血液流变学指标升高为模型成功 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。 阴虚血瘀证模型的制备大鼠肌注氢化可的松注射液 ?,连续 分别于第 及第 取血前 皮下注射 ?。肾上腺素. ?~。 摘要 热毒血瘀证模型的制备除正常组以外,其余各组大鼠给药 后,腹腔 注射脂多糖 后测肛温, 后采血测相 ?。一次造模,注射脂多糖 关指标。 .分组与给药 气虚血瘀证分组与给药将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、香丹注 射液. ?‘组以及梓葛冻干粉针. ?分、. ?‘和. ?组,每组只,经统计学分析,各组用药前各项指标无显著性差异。 尾静脉注射给药,每天次,连续 。 阴虚血瘀证分组与给药将正常大鼠按体重随机分为正常对照组、模型对 照组、香丹注射液. ?分组以及梓葛冻干粉针. ?~、. ?’ 和. 开始,尾静脉 ?。组,每组只。于注射氢化可的松注射液第 。 注射给药,每天次,连续 热毒血瘀证分组与给药将正常大鼠按体重随机分为正常对照组、 模型对 照组、注射赖氨匹林. ?‘组、梓葛冻干粉针. ?~、. .。 和. 。 ?组,每组只,每天次,连续 . 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 指标 采用玻片法测定凝血时间和断尾法测定出血时间;眼眶采血, 分离血浆,测定凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间、凝血酶 时间;股动脉采血,测定血液流变学指标:全血黏度、血浆黏度、 红细 胞压积、全血还原黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数;分 离血清,酶法 测定血清中含量。 结果: .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证模型大鼠的影响 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证模型大鼠凝血功能的影响 与正常组相比,模 型组大鼠的、、、和显著缩短.或.。与模 两南大学硕十学伸论文 型组相比,梓葛冻干粉针. ?‘能极显著延长尸.,其延长率 为.%;梓葛冻干粉针. ?~、. ?组能显著延长尸 .或.,延长率分别为.%、.%;梓葛冻干粉针.组能显著改善、尸.;梓葛冻干粉针. ?组能极显著 改善、和.或.。 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证模型大鼠血液流变学的影响 与正常组相比, 模型组全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数和刚性指数均显 著升高.或.。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?‘组 能显著改善全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数.或尸., 梓葛冻干粉针. ?以能显著改善血液流变学的各项指标.或尸 .。 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证模型大鼠的影响 与正常组相比,模型组 含量极显著降低尸.;与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?一、 . ?能极显著升高气虚血瘀证大鼠血清中的含量尸.。 .梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证模型大鼠的影响 梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证模型大鼠凝血功能的影响 与正常组相比,模 型组、和均极显著缩短尸.。与模型组相比,梓葛冻干粉 针. ?~、. ?。组显著改善、和不.或 .。 梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证模型大鼠血液流变学的影响 与正常组相比, 模型组全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数和刚性指数均显 著升高尸.或.。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?。组 能显著改善全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数.,梓葛冻干 粉针. ?能显著改善血液流变学的各项指标尸.或.。 梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证模型大鼠的影响 与正常对照组相比, 模 型组含量极显著降低尸.;与模型对照组相比,梓葛冻干粉针. ?。能极显著提高血清中的含量尸.。 ?~、. 摘要 .梓葛冻干粉针对热毒血瘀证模型大鼠的影响 与正常组相比,模型组 梓葛冻干粉针对热毒血瘀证模型大鼠体温的影响 大鼠造模前后体温的差值极显著升高尸.:与模型组相比梓葛冻 干粉针 . ?‘组极显著降低发热大鼠的体温尸.。 ?一、. 与正常组相比,模 梓葛冻干粉针对热毒血瘀证模型大鼠凝血功能的影响 型组、和均显著缩短尸.或尸.。与模型组相比,梓 葛冻干粉针. ?。组能显著改善尸.;梓葛冻干粉针. ?。组能显著改善和不尸.或.。 梓葛冻干粉针对热毒血瘀证模型大鼠血液流变学的影响 与正常组相比, 模型组全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数和刚性指数均极显著升高尸 .。与模型组比较,梓葛冻干粉针. ?。组能显著改善全血黏度 .,梓葛冻干粉针. ?能显著改善全血黏度、全血还原黏度高切 和红细胞聚集指数等指标尸.或.。 结论: 梓葛冻干粉针能显著改善血瘀证模型大鼠的凝血功能、血液流变学指标以 及升高血清中含量,表明梓葛冻干粉针具有活血化瘀之功效,可作为活血 化瘀中药新药进一步研制。 关键词:梓葛冻干粉针活血化瘀血瘀证血液流变学凝血功能 两南大学硕十学伊论文 ? ?‘ ? ?? 一 ? ? :: :. . 鹪 ,. , , . : ? 。 , , 埘 、析 , , . : .?、舫也? , , ,, ,. , . .? ., , ?.? , ,, , , . ., , ,. . . , . , .谢 , 蜘 , .. , , ,. . .. ?? ?。 . ,, . , . 两南大学硕十学伊论文, , , . .. , ?~, ?~, , ?. . . ,.,. , ..: .。 ,,, , .,. ? .、析 . , ‘’ . , . %: .. ‘. 。 . .,., .%,.%: 。叫 . ,.: ’叫 锄 ,,尸.,. . ? 谢也, , , 仃.,尸., ? . .. ,., .?~ .。.. ? 、吐 伊. , ,埘也 ... , ?~,. ?~ . ? 、, . ,, .. . , ?,. ?’, .,. . 淅也 , ,.,., .、撕廿 , . 。 . ., 。。 锄 , 两南大学硕十学伊论文 .,尸.. , . .,?‘ . ?~ . . . ? 、析 . , . . . .. . . ?~ 、析?,,.,. .. ?。 . , . .; .,.. , . . , .. . 尸., ?。 ,× , .,. . : , . . . .:; ;? ;;; 口前言 梓葛冻干粉针对血瘀证大鼠的活血化瘀 作用研究 静 古 匍 昌 在中医理论中指内阻,血行不畅,以固定刺 血瘀证 痛、肿块、出血、瘀血色脉征为主要表现的证候。临床上主要症状为舌暗有瘀 点或瘀斑、舌腹静脉曲张、唇瘘舌青、口燥但欲漱水不欲咽、疼痛夜甚或痛处 不移、脉微大来迟或涩等,严重影响患者的健康和生活质量【】。其产生的原因 甚多,主要有外伤、气滞、气虚、血热、血寒【】。根据其病因可分为外伤血瘀 证、寒凝血瘀证、热毒血瘀证、气滞血瘀证、气虚血瘀证、血虚血瘀证、阴虚 血瘀证、阳虚血瘀证等类型。血瘀证是脑卒中、糖尿病和冠心病等疾病的基本 证候,且与这些疾病的发生发展都密切相关,血瘀证的有效治疗对以上疾病的 治疗有积极作用。 血瘀证贯是缺血性脑卒中最基本的证型。在临床上,其主要证型为气虚 血瘀、阴虚风动、痰热阻络、痰阻血瘀等。这些证型的划分是相对的,不是绝 对的,且都离不开血瘀证【】。因此对血瘀证进行预防和治疗,对缺血性脑卒中 的治疗有积极的作用。因气虚、阴虚、痰热与缺血性脑卒中密切 相关,故本实 验选用气虚血瘀证、阴虚血瘀证和热毒血瘀证三个模型来观察药物对血瘀证的 作用。 近年来,血瘀证的病理生理研究主要集中在血液流变学、凝血功能、血小 板聚集及释放、微循环障碍、血液动力学、/等方面。年第八次全 国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会,也将这些指标列为血瘀证实验 室诊断标准内【,是研究血瘀证的重要指标。活血化瘀及益气活血是治疗血瘀 证的主要方法。活血化瘀的中药在治疗血瘀证上取得了可喜的成绩,如:葛根 素、灯盏花素、三七、川芎嗪、桃仁、红花、牛膝、生地黄、芍药等。中药治 疗血瘀证有其多靶点多途径的优势,但也存在成分复杂,有消化系统反应、过两商大学硕十学位论文 敏反应、发热、皮肤损害、消化系统不良反应、呼吸系统不良反应以及疼痛等 不良反应的报道。 目前,临床上用于血瘀证治疗常见的中药注射剂有:灯盏花注射 液、红花注 射液、刺五加注射液、疏血通注射液水蛭、地龙、川芎嗪注射液、复方丹参 注射液丹参、降香等。通过对中药复方中有效组分进行配伍组合研究,对构 建成分清楚、作用机制基本明确、高效且低毒的现代中药具有重要意义【。 ? 梓葛冻干粉针是本课题组自主研制的中药单体复方制剂,已申报国家技术发明专利,主要由葛 根 和生地黄 中的有效单体成分葛根 素和梓醇组成。近年来研究表明,葛根素具有抗脑缺血再灌注 损伤】,改善血液流变学指标门,降血脂、抗凝血及抑制血小板聚集【】’降血糖 和抗氧化等作用【】。梓醇具有神经保护、抗炎、降血糖、利尿、抗癌以及抗肝炎 病毒等药理作用【协】,是地黄滋阴作用的有效活性成纠】。但到目前为止,尚未 见将葛根素和梓醇合用的实验报道。课题组已进行了梓葛冻干粉针剂制剂【】及其 对动物脑缺血模型的改善作用【斗】等研究。本研究观察梓葛冻 干粉针对血瘀证的 治疗作用,为梓葛冻干粉针治疗脑缺血疾病提供实验依据。 本实验选用三个典型血瘀证大鼠动物模型:气虚血瘀证大鼠模型、阴虚血 瘀证大鼠模型以及热毒血瘀证大鼠模型,经梓葛冻干粉针尾静脉注射给药后,通过对凝血功能、 血液流变学及血清中含量等指标的检测,研究梓葛冻干粉针对血瘀证的治 疗作用,探讨其活血化瘀之功效,为其治疗脑缺血提供理论支持。 梓葛冻干粉针对气虚咖瘀证大鼠的用研究 第一章梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究 气虚血瘀证是临床诸多疾病常见的中医证候之一,尤其是在心脑血管疾病 中最为常见。由于气虚推动无力,以致血液瘀滞,经脉不通,形成中风偏瘫, 故气虚血瘀证常贯穿于缺血性中风的始终。梓葛冻干粉针 ?,为课题组自主研制的治疗缺血性脑卒 中的中药单体复方制剂,主要由葛根素和梓醇组成。 本实验采用多因素相结合的方法复制大鼠气虚血瘀证模型,每天给药次, 连续天后观察梓葛冻干粉对气虚血瘀证大鼠模型的凝血功能、血液流变学和 血清中含量的影响,为梓葛冻干粉针对气虚血瘀证的治疗作用提 供参考。 材料 .实验动物 大鼠只,雌雄各半,周龄,体质量 ,级,由重庆 医科大学实验动物中心供应合格证号:渝,于西南大 学药学院级实验动物中心饲养许可证号:渝。适 应性喂养周后进入实验。实验过程中善待实验动物,严格遵守实 验动物科学 与管理的有关规定。 .实验药物与试剂 药品及试剂 厂家 梓葛冻干粉针 西南大学中药研究所制备批号,规格: /支,每支粉针剂含原料药 香丹注射液 四川升和制药有限公司批号,批准文号: 国药准字,规格: /支×支, 注射液相当于生药:丹参 ,降香 注射生理盐水 安徽双鹤药业有限公司 胆固醇 北京鼎国生物技术有限责任公司批号 号胆盐 北京奥博星生物技术有限责任公司批号西南大学硕十学 位论文 .丙二醇 重庆川东化工有限公司化纤业试剂厂批号 肝素钠注射液 天津生物化学制药有限公司批号 柠檬酸钠 成都市科龙化工试剂厂批号 凝血酶原时间 南京建成生物 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 研究所批号 测定试剂盒 活化部分凝血酶时间 南京建成生物工程研究所批号 测定试剂盒 凝血酶时间测 南京建成生物工程研究所批号 定试剂盒 一氧化氮测定南京建成生物工程研究所批号 试剂盒 其余试剂均为国产分析纯试剂 .主要试剂的配置 生理盐水 。 称取固体用纯水溶解,定容至 高脂饮料 猪油 胆固醇 号胆盐吐温.丙二醇胆固醇充分研碎后,将各原料混合,溶于纯水, 容积定容至 ,磁力 搅拌器加热搅拌混匀,临用前水浴至适温,待猪油完全融化,灌 胃。 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究 . 液 . . . . ,用.%的 按比例称量以上固体,溶解于纯水,定容至 调整至.,分装后于。储存。 .%水合氯醛 . 水合氯醛. . 液 ,提前 称取水合氯醛固体用. 液溶解,搅拌混匀,定容至 一周左右配置。 肝素钠肝素钠 生理盐水 。 将 的肝素钠注射液 用生理盐水稀释定容到 柠檬酸钠 . 柠檬酸钠 生理盐水 。 电子天平称取柠檬酸钠固体,用生理盐水溶解,搅拌混匀,定容至 .实验仪器 厂家 仪器 .全自动血液流变快测仪 重庆大学维多生物工程研究所 .半自动血液分析仪 日本东亚仪器有限公司 ..血小板聚集凝血因子分 中勤.世帝科学仪器有限公司 析仪 型电子天平 梅特勒.托利多仪器有限公司西南大学硕十学位论 文 .超低温冰箱 日本三洋电器股份有限公司 ?电热恒温干燥箱 重庆永生实验仪器厂 .台式微量高速离心机 长沙湘仪离心机仪器有限公司 . 紫外一可见分光光度计 日本日立 .电子称 凯丰集团有限公司 佳能数码相机 《,像素 .实验方法 .气虚血瘀证模型的制备及评价 采用饥饿、疲劳、寒湿、惊恐和高脂饮食相结合的方法复制气虚 血瘀证模 型【 】。方法如下:?饥饿:实验大鼠按每日 ?。体重提供饲料,每日: 给予全天量的/,:给予剩余/饲料;?疲劳:实验大鼠每日: 开始分批置入直径 ,高 水桶内水深约 ,水温与室温均保 持为?左右以木棒拨打强迫其游泳,直到疲劳动物游泳动作失 调、水淹 没鼻尖,平均为? ;?寒湿:游泳后捞出实验大鼠,不予保温措施及 擦拭水迹,关闭门窗任其暴露于空气中自然晾干;?惊恐:将未游 泳大鼠放置 水桶旁,任其倾听在游泳的大鼠挣扎声;?高脂饮食:将特制脂肪乳按灌胃给予实验大鼠。 造模 后,采用尹军祥 建立的血瘀证模型大鼠舌象评价标准进行舌象 评分,和扈新刚】提出的气虚血瘀证动物表征研究的新思路进行评价:?进行 舌象评分,即分:舌底色微青,舌静脉主干长不超过/;分:轻度紫暗, 舌底色紫暗或舌静脉主干长度超过/;分:明显紫暗,舌底色紫暗且舌静脉 主干长度超过/。?进行粪便评分,即分:正常,大便成形,粪质柔软: 分:轻度异常:稀溏部分不成形:分:明显异常,粪便稀溏完全不成形。 以符合以下标准者为成功模型:?气虚症状:饮食减少,体重显著下降, 且出现不同程度的便溏达.分,毛发易脱落且变稀少,干黄失去光泽,精 神萎顿嗜睡;?血瘀症状:大鼠眼球由鲜红色转为暗红或淡红色,大鼠尾部与 对照组相比皮下出现不同程度的瘀紫或青斑,舌体出现不同程度 的紫暗达. 分;?血流变指标异常:全血黏度,血浆黏度,红细胞压积和红细胞聚集指数 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究 与正常值相比显著升高。 造模情况判断:随机取模型和空白对照组大鼠各只,用.%水合氯醛 .。麻醉。经股动脉取血,用肝素钠抗凝,全自动血液流变仪测定 血液流变学各项指标。造模后,模型组大鼠体重极显著下降尸.,见表 。造模后,模型组大鼠血液流变学各项指标均显著升高尸.或尸., 见表。用数码相机采集大鼠舌象和尾部变化图像。从图中可以看出正常组大 鼠舌体和唇周均是鲜红色,模型组大鼠舌体色泽及唇周出现紫暗且舌下脉络变 长,见附图。从附图中可以看出正常大鼠尾部无异常,而模型大鼠尾部皮 下出现瘀紫。经血液流变学、体重和症状等指标证实造模成功。 表 造模前后大鼠体重变化?勋?? 注:与正常组比较”.”. : 表造模后血液流变学变化.孑. 注与正常组比较。.,捌户. .。. : 曲鬲大掌坝十掌伊论文 .动物分组及给药方法 ..试药配置 取梓葛冻干粉针剂用注射用生理盐水配制成浓度分别为. ?~、 . ?~、. ?’试药,其原料含药量分别为:. .~、. ?~、. ?~。大鼠每 体重尾静脉注射给药 ,换算成原料药 量,则分别为. ?~、. ?。和. ?一。 将香丹注射液. 用生理盐水稀释,定容至 ,保存避光保 .~。 存备用,浓度为. ..分组 将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、香丹注射液. ?以及梓葛 冻干粉针. ?、. ?‘和. ?’组,每组只。经. 统计分析,各组用药前各项指标无显著性差异,见表。各组尾静脉注射给药, 每天次,连续 ,正常对照组和模型对照组同时尾静脉注射等体积的生理盐 水。 表分组前实验大鼠各项指标统计分析结果?. 勇. .指标检测及检测方法 ..凝血时间的测定 实验大鼠采用眼眶采血法采血,第一滴弃去后,滴两滴于载玻片上,开始 计时,每隔 用针尖挑一次,肉眼观察直至出现血凝丝,停止计时,即为凝 梓葛冻千粉针对气虚血瘀证了:鼠的作用研究 血时间。 ..出血时间的测定 末次给药后,将实验大鼠置于固定器中,尾部向下垂直,距尾尖 处 剪断鼠尾,待血液自行流出,开始计时,每 用滤纸吸去血液一次,直至不 出血用滤纸吸无血为止,停止计时,即为出血时间。 ..凝血功能的测定 .。 末次给药后,采用眼眶取血 ,.%的柠檬酸钠按:抗凝, 离心 ,取上清液血浆,采用试剂盒方法,按照说明书要求,用血小板聚集 凝血因子分析仪分别测定、和的值。 测定 测定原理:将含钙离子的组织凝血活酶加入待测血浆中之后,凝血机制启动,凝 血酶原转化为凝血酶,使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,血浆在一定时 间内凝固,此时间即为凝血酶原时间。 测定方法:取待测样本“,加入测试珠,在孵育 后,加入已经在 中预热? 的凝血酶原试剂 ,开始测试。 测定 测定原理:将液体白陶土加入待测血浆中,在参与下,内源性凝血系统被 激活,纤维蛋白原转变为纤维蛋白,血浆凝固。从加入到血浆凝 固的的时间,即为活化部分凝血活酶时间。 测定方法:将待测样本 和液体白陶土?混合均匀后,加入测试珠,在 孵育 后,加入在预热 的 ,开始测试, 以测试珠凝固不动为测试结束,记录时间。 测定 测定原理:将凝血酶将加入到待测血浆中,使纤维蛋白原转变为 纤维蛋白,血浆 凝固,从加入凝血酶到血浆凝固的时间为凝血酶时间。 两南大学硕十学伊论文 测定方法:取待测样本 后,加入已在 ,加入测试珠,在孵育 。中预热的凝血酶试剂 ,进行测试。 ..血液流变学的测定实验组大鼠在末次给药后,用.%水合氯醛. 麻醉。经股 动脉取血,用 的肝素钠抗凝。取抗凝全血 ,用半自动血液分析仪 测 定红细胞压积;取抗凝全血 ,置于全自动血液流变快测仪中测定全血黏度; 全血黏度测定之后将抗凝血 .。离心 ,取血浆 ,用于测定血 浆黏度,并计算出红细胞聚集指数、刚性指数。 ..血清中的测定 将大鼠未抗凝的股动脉血 , ?。离心 ,取血清,参照说 明书要求,采用硝酸还原酶法测定血清中含量。 测定原理:在体内代谢为一和一。血清中两者之和代表体内的水 平。硝酸还原酶可以特异性的将一还原为,在显色剂的作 用下呈现颜色反应,在 处有最大吸收峰。 计算结果: 的含量 一测定管吸光度.空白管吸光度 标准品浓度 样品测试前 × × 标准管吸光度.空白管吸光度 / / 稀释倍数 .统计学分析 实验数据统计分析使用.软件进行,统计结果以?表示。对实 验数据进行正态性和方差齐性检验,再将各组间的比较采用单因 素方差分析 的检验分析,.为差异有统计学意义。 实验结果 .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠体重的影响 给药之前各组大鼠与正常组相比极显著降低尸.,在给药后的第 和第 分别称大鼠体重,各给药组大鼠的体重与模型组相比有所 增加,但无显 著性差异尸.。 梓葛冻千粉针对气嘘血瘀证了:鼠的作用研究 表梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠体重的影响?,?, 组别 剂量天/ 天/ 天/ .?. .?. .?. 正常 .. .?.煳 模型 .. .. . ..蝴 .. 香丹 ?. .. .. . ..坤 ?. 梓葛冻干 . ..扩 .. .. ?. 粉针 .. .. . .?. ?’ 注:与正常组比较蝴.们 即.们 : .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠凝血时间的影响 与正常组相比,模型组大鼠的凝血时间极显著缩短.,说明造模成 功。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?能极显著延长凝血时间 .,其延长率为.%,见表。 表梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠凝血时间和出血时间的影响 ?趿萨? 。 出血时间/ 抑制率惕 组别 剂量 凝缸时间/ 抑制率惕 . .?. .?. 正常.?.‖ 模型 .?.舯 . . .士.? . ..? 香丹 ?. . .士. . . .士.梓葛冻干 . . .士. . .?.粉针 . . ..? . ..?注:与正常组比较蝴.;与模型组相比?尸. ?尸. : .:两商了:学硕十学位论文 .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠出血时间的影响 与正常组相比,模型组大鼠的出血时间极显著缩短尸.,说明气虚 血 瘀证大鼠造模成功。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?、. ?。 组能显著延长出血时间尸.或.,延长率分别为.%、.%, 见表。 .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠凝血功能的影响 与正常组相比,模型组、和均显著缩短.或., 说明气虚血瘀证大鼠造模成功。 表 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠血浆、和的影响?肋. 注:与正常组比较。.,”.:与模型组相比.,... ..?. : ‰.,?帆.; 与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?。组能显著改善、尸 .:梓葛冻干粉针. ?组能显著改善、不和尸.或 .,见表。 .梓葛冻千粉针对气虚血瘀证大鼠血液流变学的影响 与正常组相比,模型组全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红 细胞压积、 红细胞聚集指数和刚性指数均显著升高尸.或.,说明气虚血瘀 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究 证大鼠造模成功。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?组均能显著改 善 全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数尸.,梓葛冻干粉针. ?。能显著改善血液流变学的各项指标.或.,见表,。 表梓葛冻千粉针对气虚血瘀证大鼠血液流变学的影响士趿萨 伯 ?鹞.柚 锄 孑坯,,产 /. /% 组别 剂量 呻/‘ ‘ .’ . .士. .?. .?. .?. .?. 正常 .?.螂 .?.种 .?. .士. .?. 模型 .?.? .?.? .?.? .?. 香丹 . .士....士. .?. .?. .?. .?. 梓葛 .?. .?. . .?. .?.’ .?. 冻干 ?.’.?. .?.? 粉针 .?.? .?.? .?.? .?.‘ .?’ 注:与正常组比较黼.;与模型组相比‘.,?. 忙:?鲫阳、啊仃捌.;?批诵‘.,?. 表梓葛冻千粉针对气虚血瘀证大鼠血液流变学的影响?观萨 雒仃 淌?锄 ” 锄斟 ?,,, , 训 砌 组别 剂量 .’ .?. .?. .?. .?. .土. 正常 .?. .?.堋 .士. .?. .?. 模型 .士.? .?.? .士.?.?.’ 香丹 .士.? .? .士. . .“?. .?. .?. .士. 梓葛 .. .士. .士. . .?. .?. .士. 冻干 ?. .士.‘ .?.? .?.’.?.‘ 粉针 .士.? .?‘ 注:与正常组比较一.:与模型组相比’尸.。?. ‘户.,?. :托 .:?玳西南大学硕十学位论文 .梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠血清中的影响 与正常对照组组相比,模型组含量极显著降低.;与模型对 照组相比,梓葛冻干粉针. ?蝇~、. ?以极显著升高血清中的 含量 尸.,见图。 ? ? 加 ? ? 柏 ;; 一《:一 加 伯 。 , 图梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠血清中的影响? 印... : .小结 本实验采用饥饿、疲劳、寒冷、惊恐和高脂等多因素相结合的方法复制气 虚血瘀证大鼠模型,造模 。将造模成功的大鼠随机分组,每组只尾静脉 注射给药,每天次。观察梓葛冻干粉针对大鼠凝血功能、血液流变学和 的影响。造模过程中大鼠体重显著下降,与正常大鼠相比有极显著差异尸 .,血液流变学指标与正常值相比有显著差异.或尸.。给药 后,检测相关指标,梓葛冻干粉针各给药组大鼠的体重与模型组相比有所增 加,但无显著性差异尸.。梓葛冻干粉针. .组能显著改善 、和.,能显著改善全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚 集指数.,能升高血清中的含量.。梓葛冻干粉针. ?组能显著改善、、、和尸.或.,能改 梓葛冻干粉针对气虚血瘀证大鼠的作用研究 善血液流变学的各项指标尸.或.,以及升高血清中的含量 尸.。结果表明,梓葛冻干粉针有改善气虚血瘀证大鼠凝血功能、血液 流变学指标以及升高血清中含量的作用,为探讨梓葛冻干粉针对 气虚血瘀 证的治疗作用,提供实验基础。两南大学硕士学伊论文 第二章梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠的作用研究 中医理论认为阴虚生内热,灼伤血脉,致血液黏稠瘀滞,运行不畅,形成 阴虚血瘀证。血瘀日久,碍气机,气机郁滞,碍肝之疏泄而损肝体,肝体被伤, 则肝阴自损,阴虚阳亢便动风,引起中风的发生。中风的病机关键为肝肾阴虚, 其成于中风之先,是中风病发病的根本,也贯穿于中风病的整个病理过程【捌。 现代研究表明,皮质激素在体内增多与阴虚有关,儿茶酚胺增多与火旺有 关【。本文采用注射氢化可的松注射液及盐酸肾上腺注射液的方法复制慢性阴 虚火旺血瘀证模型,以研究梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证凝血功能、血液流变学 及的影响。 材料 .实验动物 大鼠只,雌雄各半,周龄,体质量 ,级,由重庆 市中药研究院供应合格证号:渝,于西南大学药学院 级实验动物中心饲养许可证号:渝。适应性喂养周 后进入实验。实验过程中善待实验动物,严格遵守实验动物科学 与管理的有关 规定。 .实验药物与试剂 药品及试剂 厂家 梓葛冻干粉针 西南大学中药研究所制备批号,规格: /支,每支粉针剂含原料药 香丹注射液 四川升和制药有限公司批号,批准文号: 国药准字,规格: /支×支, 注射液相当于生药:丹参 ,降香 安徽双鹤药业有限公司 注射生理盐水 盐酸肾上腺素 / 武汉远大制药集团有限公司,批号,规格: 梓葛冻干粉什对阴虚【瘀证大鼠的作用研究 ??皇??奠皇皇量置量?量鼻量鼍曼曼置量??皇置曼量??量置 ??皇皇量皇薯量???量?量量?????量量?置量??????? ????量?罾量量舅?一 支,支/盒 / 天津金耀氨基酸有限公司,批号,规格: 氢化可的松注射液 支,支/盒 肝素钠注射液 天津生物化学制药有限公司批号 成都市科龙化工试剂厂批号 柠檬酸钠 南京建成生物工程研究所批号 凝血酶原时间 测定试剂盒 南京建成生物工程研究所批号 活化部分凝血酶时间 测定试剂盒 凝血酶时间测 南京建成生物工程研究所批号 定试剂盒 一氧化氮测定南京建成生物工程研究所批号 试剂盒 其余试剂均为国产分析纯试剂 .主要试剂的配置同第一部分 .实验仪器 厂家 仪器 重庆大学维多生物工程研究所 .全自动血液流变快测仪 日本东亚仪器有限公司 .半自动血液分析仪 中勤.世帝科学仪器有限公司 ..血小板聚集凝血因子分 析仪 梅特勒.托利多仪器有限公司 型电子天平 .超低温冰箱 日本三洋电器股份有限公司 重庆永生实验仪器厂 .电热恒温干燥箱 长沙湘仪离心机仪器有限公司 .台式微量高速离心机 日本日立 .紫外.可见分光光度计 凯丰集团有限公司 .电子称 两南大学硕士学伊论文 实验方法 .动物分组及给药方法 ..试药配置同第一部分 ..分组及给药方法 只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、香丹注射液.组;梓葛 冻干粉针分. ?、. ?和. ?组,每组 只。除正常组外,其余各组大鼠肌肉注射氢化可的松注射液 ?~。于注射 氢化可的松注射液第 开始,尾静脉注射给药。正常对照组和模型对照组注 射等体积的生理盐水;香丹注射液组注射. ?;梓葛冻干粉针分组注射 . 。除正常组 。一、. ?和. ‘~,每 注射液 外其余各组继续肌肉注射氢化可的松注射液 ,并于第 及次日取 血之前 皮下注射.%盐酸肾上腺素注射液. .。瞄。 .相关指标检测及检测方法 ..凝血功能测定 实验大鼠末次给药后,经眼眶取血 ,以.%的枸橼酸钠抗凝, 。离心 ,取血浆测定、和。 ..血液流变学的测定 实验组大鼠于末次给药后,用.%水合氯醛麻醉。经股动脉采血, 用肝素 钠抗凝,用于测定血液流变学各项指标。 .. 的测定 将未抗凝股动脉血, .‘离心 取血清。采用硝酸还原酶法测 定血清中含量。 .统计学分析 实验数据统计分析使用.软件进行,统计结果以了表示。对 梓葛冻干粉针对阴椎血瘀证大鼠的作用研究 实验数据进行正态性和方差齐性检验,再将各组间的比较采用单 因素方差分析 的检验分析,尸.为差异有统计学意义。 实验结果 .梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠体重的影响 和第 称大 注射氢化可的松注射液之前称各组大鼠之后,分别于第 鼠体重。正常组大鼠的体重随着周龄的增加,第 造模大鼠的体重 与正常组 相比极显著下降.;第 模型组大鼠的体重与正常组相比极显著下 降尸.,梓葛冻干粉针. ?。组的体重与模型组相 ?、. 比显著增加尸.,见表。 表梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠体重的影响, ?肋,, 组别 剂量天/ 天, 天, .?. .?. .?. 正常 .士. .士.期 .?.卅 模型 . .?. .?.眇 .?. 香丹 . .?. .?. .?. ?. 梓葛冻干 .?. .?.坤 .?. . ?. 粉针 .士. .?.眇 .?. .?’ 注:与正常组比较坤.:与模型组相比. ?尸. : .: .梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠凝血功能的影响 与正常组相比,模型组、和均极显著缩短.,说明 造模成功。与模型组相比,梓葛冻干粉针. ?一、. ?’组能显著 改善、和尸.或尸.,见表。两南大学硕十学伊论文 表梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠血浆中、和的影响,, 、历廿?, 注:与正常组比较埔.;与模型组相比‘尸.,?. ..?尸. : 即.: .梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠血液流变学的影响 与正常组相比,模型组全血黏度、全血还原黏度、血浆黏度、红细胞聚集指 数和刚性指数均极显著升高尸.,说明阴虚血瘀证大鼠模型造模成功。与 模型组相比,梓葛冻干粉针. ?菩组能显著改善全血黏度、血浆黏度、全 血还原黏度尸.,梓葛冻干粉针. ?。能显著改善全血黏度、血浆 黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数尸.或.,见表,。梓葛冻干粉针对阴虚瘀证大鼠的作用研究 表 梓葛冻千粉针对阴虚血瘀证大鼠血液流变学的影晌??,萨 ?. /‘ 组别 剂量 /。 ‘ . 觞 注:与正常组比较抻.:与模型组相比‘.,?. 瑚尸.;.,??尸. : 表梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠血液流变学的影响?配,?. 组别 分组 . ‘ .士. .?. .?. .?. .士. 正常..坤.. .. ..棚 ..瑚 模型 . .?. .?. .士.? .?.? .?.? 香丹 . .. .士.‘.?. .. .. 棒葛 .?‘. ..‘ ..’.. . .. .. 冻干 ?’ .. .. ..? ..? 粉针 . ?一.. 注:与正常组比较蝴.;与模型组相比’尸..?户...?’尸. : 尸.;两南大学硕士学伊论文 .梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠的影响 与正常对照组组相比,模型组含量极显著降低尸.;与模型对 照组相比,梓葛冻干粉针. ?~、. ?分极显著升高血清中的 含量尸.,见图。 ?墨 量.生 曼:墨 / 图梓葛冻干粉针对阴虚血瘀证大鼠血清中的影响孑?。 ,萨 . . ;??. . .小结 本实验采用肌肉注射氢化可的松注射液和皮下注射肾上腺素注 射液的方法 建立阴虚血瘀证模型。在造模的第 开始尾静脉注射给药,每天次, 连续 给药 ,给药的同时也继续注射氢化可的松,采血前皮下注射盐酸肾上腺素。 梓葛冻干粉针. ?一、. ?百组的体重与模型组相比显著增加 . 梓葛冻干粉针. ?。组能显著改善、和., 改善全血黏度、血浆黏度和全血还原黏度以及升高血清中的含量. 或.。梓葛冻干粉针. ?。能显著改善、和 .,改善全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数以及升高血 清中的含量.或.。结果表明,梓葛冻干粉针具有改善阴 虚血瘀证大鼠凝血功能、血液流变学指标以及升高血清中含量的作用,为 梓葛冻干粉针进一步研究提供前期实验基础。杵葛冻干粉针对热毒【?瘀证大鼠的作用研究 第三章梓葛冻干粉针对热毒血瘀证大鼠的作用研究 祖国医学认为热毒亢奋,邪热灼津,津液不足,使血液瘀滞,运行不畅, 致热毒血瘀证。近年来的研究表明,热毒与中风的发生、发展和变化的关系十 分密切。热毒内炽,痰瘀交阻,相激相助,犯脑损络,发为中风病发生的主导 病机,即热毒为本,风乃其标。故临床给予患者清热解毒,生津养阴的药物, 达到活血化瘀的治疗效果,也为治疗中风开拓了新思路、新途径【】。 脂多糖,是革兰氏阴性菌外壁层中的一种成分, 具有广泛的活性,常用来制作热毒血瘀证的动物模型。本实验通过腹腔注射脂 多糖引起大鼠发热,播散性血管内凝血和微循环障碍等,较好的模拟了热毒血 瘀证的病理变化过程。 材料 .实验动物同第二部分 .实验药物与试剂 厂家 药品及试剂 西南大学中药研究所制备,批号,规 梓葛冻干粉针 格: /支,每支粉针剂含原料药 赖氨匹林 吉林敖东洮南药业股份有限公司批号 ,批准文号:国药准字, 规格:.‖支,支/盒 脂多糖 公司,批号 凝血酶原时间测定试剂盒 南京建成生物工程研究所批号 南京建成生物工程研究所批号 活化部分凝血酶时间 测定试剂盒 凝血酶时间测定试剂盒 南京建成生物工程研究所批号 甘油 北京鼎国生物技术有限责任公司批号