内科学内分泌与代谢专业毕业论文 [精品论文] 苯丁酸纳对甲状腺滤泡癌细胞侵袭能力的影响

内科学内分泌与代谢专业 毕业论文 毕业论文答辩ppt模板下载毕业论文ppt模板下载毕业论文ppt下载关于药学专业毕业论文临床本科毕业论文下载 [精品 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 ] 苯丁酸纳对甲状腺滤泡癌细胞侵袭能力的影响 内科学内分泌与代谢专业毕业论文 [精品论文] 苯丁酸纳对甲状 腺滤泡癌细胞侵袭能力的影响 关键词:甲状腺癌 苯丁酸钠 CGTHW-1细胞 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶组织 抑制剂1 摘要:目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于 、2mmol/L、3mmol/L、三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L 4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，及作用时间。 实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 正文内容 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，及作用时间。 实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视 第野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素， 实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，h 在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA )。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与的表达要比对照组低(p<0.05 CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 -1侵袭能力及基质金属蛋白目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW 酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方 -1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，法和步骤: 第一阶段:CGTHW 待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳， 在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于 、2mmol/L、3mmol/L、三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L 4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，及作用时间。 实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、 4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L 6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视组、 野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低 2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1(p<0.05)。 ( 蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA )。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与的表达要比对照组低(p<0.05 CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L 组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 -1侵袭能力及基质金属蛋白目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW 酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于 、2mmol/L、3mmol/L、三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L 4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使 ，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，用酶标仪测定光密度值(optical density 以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，及作用时间。 实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白 酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯 )，在上室放置CGTHW-1细膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel 胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，h 在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细 胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低 2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1(p<0.05)。 ( 蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 目的: 探讨苯丁酸钠对甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1侵袭能力及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响，为甲状腺癌的提供理论依据。 方法和步骤: 第一阶段:CGTHW-1细胞以含10,小牛血清的1640培养基培养，待细胞基本长满培养瓶底壁时，胰酶消化，离心，接种于2个或多个培养瓶中，继续培养，传代。 第二阶段:将处于对数生长期的CGTHW-1细胞分组接种于 、2mmol/L、3mmol/L、三个96孔板，使每组样本处于不同浓度苯丁酸纳(1mmol/L 4mmol/L、5mmol/L等)干预下，再放入培养箱中分别孵育24 h、48 h、72 h后，倒掉上清液，每孔加二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)200μl，摇匀，使用酶标仪测定光密度值(optical density，OD)，计算苯丁酸纳对细胞的抑制率，以确定细胞对苯丁酸纳的敏感程度，决定下阶段对CGTHW-1细胞干预的药物浓度及作用时间。 第三阶段:分对照组与实验组两组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。将Transwell小室放入24孔板孔洞中，小室内为上室，24孔板孔洞为下室，中间有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室侧铺盖基质胶(Matrigel)，在上室放置CGTHW-1细胞，下室加入3T3细胞(鼠成纤维细胞)上清液(具有肿瘤细胞趋化作用)，培养20-24 h，当下室底部出现穿过transwell上小孔的癌细胞时，对聚碳酸酯膜下室侧癌细胞进行HE染色。在光镜下计数穿过聚碳酸酯膜肿瘤细胞数，将5个视野的平均细胞数定义为肿瘤细胞的侵袭力。 第四阶段:将人甲状腺癌CGTHW-1细胞用不同浓度的苯丁酸钠处理，细胞分组如下:对照组、4 mmol/L组、6 mol/L组。培养72 h。免疫组化染色，光镜下摄片，每组随机测定5个视野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表达的强弱，进行统计学处理。 第五阶段:选用5份标本，每份标本同时培养2瓶，分对照组与实验组，对照组不加任何干预因素，实验组癌细胞用终浓度为4 mmol/L的苯丁酸钠处理，培养72 h。提取各组总RNA，进行逆转录反应，取扩增产物在1.0,琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察摄片并测定光密度值，以每组5个视野的平均光密度值表示mRNA表达的强弱。 结果: (1)苯丁酸钠作用下CGTHW-1细胞的浸袭能力降低(p<0.05)。 (2)苯丁酸钠作用下，CGTHW-1细胞中的MMP-9、TIMP-1 蛋白的表达下降(p<0.05)。 (3)苯丁酸钠作用下，MMP-9、T1MP-1 mRNA的表达要比对照组低(p<0.05)。 结论: 苯丁酸钠可能通过下调与CGTHW-1细胞浸润转移有关的MMPs和TIMPs的表达进而抑制CGTHW-1细胞的浸转润移。 《《《特别提醒》》》:正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。 " 垐垯櫃 换烫梯葺铑? endstream endobj 2 x滌?`U '閩AZ 箾FTP 鈦 X飼?狛]P ?燚 \? 琯嫼b?袍*，甒?]颙嫯'??4)=r宵 ?i?]j彺帖B3锝檡骹>笪yLrQ#?0鯖l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛>渓?@擗#?"? #?綫G刿# K芿${` ? ?7.耟? 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