清肺利咽止咳糖浆的药效学研究

清肺利咽止咳糖浆的药效学研究 第32卷第7期 2007年4月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.32,Issue7 April,2007 清肺利咽止咳糖浆的药效学研究 王文萍h,曹琦琛,李晓斌,郑忻,王华伟,汤宇,封硕 (1.辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032; 2.辽宁中医药大学,辽宁沈阳110032) 养阴清肺汤首载于《重楼玉钥》,原方8味:生 地黄,玄参,贝母,麦冬,丹皮,炒白芍,薄荷,生甘草, 本意为治疗当时的传染性疾病白喉.近代以来其应 用范围逐渐扩大至咽喉及呼吸系统疾病,尤其是对 慢性咽喉炎,小儿急性呼吸道感染等均具有非常满 意的疗效.清肺利咽止咳糖浆即是以养阴清肺汤为 基础开发而来的中药新药. 1材料 1.1主要仪器 WH一802超声波雾化器(汕头市粤华医疗器械 厂),UV一1100紫外可见分光光度仪(北京瑞利分 析仪器公司). 1.2动物 普通级昆明种小鼠,体重25,30g,雌雄兼用, 沈阳药科大学实验动物中心,动物许可证号SCK (辽)2003-008,购回后预饲养1周以剔除不健康及 不合格动物. 1.3药物 生地黄,玄参,麦冬,牡丹皮,炒白芍,川贝母,薄 荷,甘草,板蓝根,金银花,山豆根(以上中药饮片均 购于辽宁中医药大学附属医院药房,由辽宁省中医 药大学中药鉴定教研室鉴定为正品),川贝枇杷糖 浆(北京同仁堂). 2养阴清肺汤的减味研究 2.1药物组成及分组原方组:生地黄12g,玄参 9g,麦冬9g,炒白芍5g,川贝母5g,牡丹皮5g,薄 荷5g,甘草3g. 减味方组:生地黄18g,麦冬12g,川贝母8g, 牡丹皮8g,薄荷5g. 2.2受试液制备牡丹皮与薄荷粉碎混合,加入4 倍体积水蒸馏4h收集挥发油,挥发油于4o【=冰箱 【收稿日期】2006-08-20 【通讯作者】'王文萍,Tel:(024)86852889 保存.将药渣与生地黄,麦冬,甘草,玄参合并常规 煎煮.白芍,川贝70%乙醇回流提取4h,回收乙醇 后与前述水煎液混合浓缩后置于4o【=冰箱保存,于 次Ft混入挥发油作为原方组受试液.减味方制备方 法与原方相同.受试液生药质量浓度均为1.275g ?mL,. 2.3 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 2.3.1抗炎作用 采用小鼠耳肿胀法J,雄性小鼠随机分组,分 别灌胃给药,灌胃体积为20mL?kg,,每天1次, 连续6d.末次灌胃后1h,分别在各组小鼠右耳相 同部位用微量移液器各涂二甲苯20L.4h后处 死动物,剪下双耳,用打孔器分别在同一部位打下圆 耳片,称重,以二耳质量之差为肿胀度. 肿胀度(ms)=右耳片(ms)一左耳片(ms) 2.3.2镇咳作用 采用小鼠氨水引咳法J.雌雄小鼠各半随机 分组,分别灌胃给药,灌胃体积为20mL?kg,,每 天1次,连续6d.于最后一次灌胃后1h,将小鼠置 于1500mL玻璃钟罩内,通过超声波雾化器将氨水 雾化后由底部均匀地喷人钟罩内(雾化器雾化量及 排风量均设为50%,喷雾口径为1cm×1cm),持续 喷雾5S.观察小鼠的咳嗽潜伏期(喷雾开始至发生 咳嗽所需的时间)及2min内的咳嗽次数.咳嗽 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 现以腹肌收缩(缩胸),同时张大口为准. 2.3.3祛痰作用 采用小鼠气管酚红排泄法J.取雌雄小鼠各 半随机分组,分别灌胃给药,灌胃体积为20mL? kg,,每天1次,连续6d.于最后一次灌胃后1h, 腹腔注射0.5%苯酚红生理盐水溶液,0.05mL? g,.30min后处死动物,剪开颈部皮肤,分离颈前 部肌肉暴露气管,剪下甲状软骨下缘至气管分叉处 之间的部分气管并浸入3mL5%NaHCO溶液中1 h.去除固体成分,于波长546nm处测量吸光度 . 653? 第32卷第7期 2007年4月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.32,Issue7 April,2007 (A),并根据酚红 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线计算酚红排泄量. 酚红标准曲线的绘制:精密称取苯酚红0.010 g,置于100mL量瓶中,加人5%NaHCO,溶液至刻 度.分别吸取此苯酚红溶液0.05,0.15,0.25, 0.35,0.5,2.5,5tnL置于50mL量瓶中,以5% NaHCO溶液稀释至刻度,摇匀,避光放置30min,于 546nm处测定A.以浓度为横坐标,吸收度为纵坐 标做出标准曲线,计算的回归方程为:Y:0.028+ 0.008X,r:0.999. 2.4结果 2.4.1减味方对小鼠的抗炎,祛痰,镇咳作用 结果见表1,2. 表1减味方养阴清肺汤对小鼠的抗炎, 祛痰作用(元?s,n=10) 表2减味方养阴清肺汤对小鼠的镇咳作用(?s,n=10) 镇咳及祛痰作用,以下以此方为基础做进一步研究. 3减味方养阴清肺汤的均匀 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 实验 3.1考察因素及水平减味方5味中药参照辽宁 中医药大学附属医院处方临床常用剂量拟订各生药 每日每剂用量范围.生地黄:0—22g;Xz麦冬: 0—43g;X3贝母:0—43g;丹皮:0—26g;5薄荷: 0—26g.根据药味剂量的范围以及实验的可操作 性,确定实验的水平数为8. 3.2药物组成及分组选用u(8)表及其使 用表安排实验,各组均制成常规水煎液,生药剂量为 1.275g?mL,. 3.3研究内容以镇咳作用为指标对减味方进行 注:与正常组比较tP<0.05,2)p<0.01(表2同)均匀设计实验,研究方法同2.3.2. 实验结果说明减味方具有对小鼠显着的抗炎,3.4结果见表3. 表3减味方养阴清肺汤的均匀设计实验结果(?s,n=10) 注:与正常组比较P<0.01 实验结果采用软件(沈阳药科大学曾昭钧教授 提供)进行回归处理,得回归方程如下: Y1(咳嗽次数):26.5495一o.1236X1一o.0022X1 墨一o.002OX2X3一o.2012x5,P<o.05;:o.9953; Y2(潜伏期):一26.6284+0.0155X12+0.001 7X1X3+0.0215X1X5—0.0138X2+0.0116XzX5, P<0.05;R:0.9999; 因素(丹皮)在回归模型中未出现,说明它对 试验指标影响不显着.此结果提示临床仅需生地 黄,麦冬,贝母,薄荷即可达到最佳镇咳效果. 4减味方养阴清肺汤均匀设计验证实验 ? 654? 4.1药物制备原方组:组成同前.减味方组:组 成同前.精减方组(均匀设计实验计算得出):生地 黄,麦冬,川贝母,薄荷.阳性药对照组:川贝枇杷糖 浆.受试液均为常规煎煮,生药剂量均为1.275g? mL,. 4.2研究内容考察精减方(均匀设计实验计算 值)的镇咳作用,研究方法同2.3.2. 4.3结果精减方养阴清肺汤镇咳实验结果见表 4. 结果说明精减方对小鼠具有显着的镇咳作用. 4.4改良养阴清肺汤实验 第32卷第7期 2007年4月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.32,Issue7 April,2007 表4精减方养阴清肺汤镇咳实验结果 (?s,n=10) 4.4.1药物制备将动物分为原方组,精减方加山豆 根组,精减方加金银花组及精减方加板蓝根组.各组 均为常规煎煮,加热浓缩至含生药1.275g?mL,. 4.4.2研究内容向精减方中加入清热解毒类中 药,并考察其抗炎,镇咳及祛痰作用,实验方法同 2.3. 注:与正常组比较P<0.05,2)p<0.014.4.3结果见表5. 表5改良养阴清肺汤对小鼠的抗炎,镇咳及祛痰作用(?s,n=10) 注:与正常组比较P<0.01 实验结果提示,与其他各组相比精减方加金银 花组具有更好的抗炎及镇咳作用. 5讨论 养阴清肺汤疗效确切显着j,是经典的中医药 方剂.研究表明具有抗炎,杀菌,增强免疫等功能. 本次新药药效学开发研究是在保持传统方剂配伍特 点并结合现代药理研究成果基础上,应用现代科研 手段对古方进行再开发.选择在原方中占主要地 位,同时又具有抗炎,增强免疫力,杀菌,镇咳等综合 作用的君药,臣药,佐药组合为基础方,并在此之上 应用均匀设计进行优化.均匀设计方法在寻找最佳 实验条件,最佳配比等方面是选择优化条件的有力 工具.近年来开始运用于方剂配伍的研究.通 过计算机对回归方程的优化处理达到了进一步精减 的目的.为适应临床急性咽喉类疾病的治疗需要, 作者进行了改良实验,向精减方中加入清热解毒类 中药以增强其抗炎作用.实验结果提示精减方加金 银花相对于原方具有更强的抑制二甲苯引起的小鼠 耳廓肿胀的作用(P<0.01).此种抑制渗出作用的 增强却导致小鼠气管酚红分泌实验阴性结果的产 生,应该说该结果是可以接受的.故而中药新药清 肺利咽止咳糖浆的组方即确定为生地黄,麦冬,金银 花,川贝母及薄荷(精减方加金银花). 慢性咽喉炎,急性呼吸道感染等养阴清肺汤主 治的疾病均具有局部炎症改变,咽干咽痒易咳等特 点.本次精减实践便是以方剂主要作用为突破口, 以中药配伍理论与现代药理学相结合进行减方研 究,使之更简单,更有效,更符合现代制药工业的要 求,为养阴清肺汤制成现代制剂进行了有意义的探 索. [参考文献] [1]徐叔云.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社, 2002. [2]方开泰.均匀设计与均匀设计表[M].北京:科学出版社, l994:70. [3]赵志丹.养阴清肺汤加针刺廉泉穴治疗慢性咽炎[J].四川中 医,2004.22(4):86. [4]何建英.养阴清肺汤加味治虚火喉痹[J].中成药,2000,22 (4):314. [5]李云委.康复新合养阴清肺汤治疗慢性咽喉炎l临床体会[J]. 云南中医学院,2001,24(2):32. [6]王琴,宋佳梅.养阴清肺汤治疗急性咽喉炎症76例体会 [J].中华医学杂志,2002,9(19):1580. [7]刘维庆,沙涛.中西医结合治疗小儿重症肺炎100例[J].四 川中医,2002,20(10):59. [8]曾昭均.均匀设计及其应用[M].沈阳:辽宁人民出版社, l994:5. [责任编辑古云侠】 ? 655?