机能实验学教程

机能实验学教程 主 编 肖丹秦 副主编 肖赞英 苏兴利 任丽君 编 者 （以姓氏笔画为序） 王 倩 朱娟霞 朱永香 任丽君 李 萍 李新华 李 汾 李燕燕 杜洪霞 苏兴利 肖赞英 肖丹秦 胥晓丽 侯 进 徐 燕 曾菊绒 霍 健 第四军医大学出版社·西安 前 言 机能实验学是一门研究生物体正常机能，疾病发生机制和药物作用规律的实验性科学，是随着医学教育的改革，尤其是实验教学改革的深入逐步建立起来的，它不但继承了生理学、药理学和病理生理学实验课程的核心 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 ，而且更加强调学科之间的交叉融合、注重新技术的应用及学生创新能力的培养。 近年来，国内各医学院校在实验教学改革方面进行了大胆的创新和实践，对传统的基础医学实验教学进行了系统的 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 和深入研究，对原有的实验教学内容进行了分类、归纳、综合、修订和有机融合、优化，形成了具有特色的基础医学实验教学体系。 机能实验学为学生提供了一个理论联系实际，大胆实践操作和积极思考的机会，使学生尽可能掌握基础医学实验的基本规律，为发挥创造性思维提供一个思考和实践的空间。学习机能实验学，掌握医学实验的基本规律，训练医学实验的基本技能，培养科学的思维 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ，对于一个医学生十分重要。这些基本知识、技能和素质，将成为学生学习后续课程、进行临床医学实践和医学科学研究的坚实基础。 （肖丹秦） 目 录 实验一 实验仪器介绍、实验基本技能训练、模拟实验…… 实验而 哺乳动物（兔）麻醉、手术及处死方法…………………. 实验三 坐骨神经腓肠肌标本的制备…………………. 实验四 刺激频率与反应的关系（骨骼肌单收缩和强直收缩）……… 实验五 ABO血型鉴定………………….…………………. 实验六 血液凝固及其影响因素…………………. 实验七 离体蛙心灌流…………………. 实验八 心音的听取…………………. 实验九 人体动脉血压的测量…………………. 实验十 家兔动脉血压的调节…………………. 实验十一 家兔呼吸运动的调节…………………. 实验十二 家兔尿生成调节与药物利尿、抗利尿作用…………………. 实验十三 反射弧的分析…………………. 实验十四 氢化可的松对小鼠耳郭毛细血管通透性的影响…………………. 实验十五 胰岛素过量反应及其解救…………………. 实验十六 氢化可的松对红细胞的保护作用…………………. 实验十七 烟碱的毒性作用…………………. 实验十八 离子对心脏活动的影响、强心苷的作用…………………. 实验十九 血浆药物半衰期的测定…………………. 实验二十 消化道平滑肌的生理特性及药物影响…………………. 实验二十一 抗惊厥、镇痛、药物剂量影响…………………. 实验二十二 阿司匹林的解热实验…………………. 实验二十三 药物对血压的影响、休克及抗休克治疗…… 实验二十四 影响呼吸运动的因素、死亡与复苏…………………. 实验二十五 缺氧与耐缺氧实验…………………. 实验二十六 急性右心功能衰竭…………………. 实验二十七 家兔急性高钾血症及治疗…………………. 实验二十八 病案讨论…………………. 附录一 实验室学生守则…………………. 附录二 实验 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 的书写…………………. 附录三 实验教学内容和课时分配 ………… 附录四 机能实验课考核办法 ………… 实验一 实验仪器介绍、基本技能训练、模拟实验 【教学大纲】 1.掌握 蛙、小鼠的捉拿、固定方法；BL-420E+生物信号采集系统的使用方法；小动物进行皮下注射、腹腔注射方法； 实验报告的正确书写方法。 2.熟悉 动物的处死方法；张力换能器、压力换能器的使用方法。 3.了解 机能仿真实验的使用方法；了解蛙类实验动物的特点；小鼠性别辨别；常用生理代用液的配置和使用。 【实验目的】 通过模拟实验教学软件的学习，了解机能实验基本原理及主要内容。了解常用生理代用液的配置和使用，了解蛙类实验动物的特点；了解小鼠性别辨别。熟悉换能器的使用方法，熟悉小动物的处死方法。掌握蛙、小鼠的捉拿、固定方法，掌握小动物皮下、腹腔注射方法掌握生物信号采集系统的使用方法，掌握实验报告的正确书写方法。 【实验内容】 1. 实验基本操作方法和技术介绍，包括动物捉拿、固定；皮下、腹腔注射；处死方法； 2. 实验设备的使用方法。 3. 使用仿真试验室进行模拟实验。 4. 实验结果分析，实验报告书写。 【软件流程图】 启动计算机 软件图标 开始、结束软件封面 模拟实验项目 实验目的原理 实验材料 方法步骤 模拟实验 思考题 问题测验 【模拟实验项目】 1. 生理科学实验总论 2. 刺激强度、频率对骨骼肌收缩的影响 3. 骨骼肌兴奋时的点活动与收缩的关系 4. 神经干动作电位及传导速度的测定 5. 神经干不应期的测定 6. ABO血型鉴定 7. 蟾蜍心室期前收缩与代偿间歇 8. 离体心肌细胞动作电位 9. 心肌兴奋性和不应期的测定 10. 离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响 11. 主动脉神经放电 12. 人体心电图 13. 家兔动脉血压的神经体液调节 14. 颈动脉窦压力感受性反射 15. 膈肌电活动与呼吸运动 16. 家兔呼吸运动调节 17. 家兔离体肠肌运动 18. 尿生成的影响因素 19. 豚鼠耳蜗微音器电位 20. 肌梭传入冲动的测定 21. 体液分布改变在急性失血中的代偿作用 22. 非挥发性酸过多进入兔体后血气酸碱变化及纠正 23. 血浆胶体渗透压降低在水肿发生中的作用 24. 药物对离体豚鼠回肠的作用 25. 药物对家兔动脉血压的作用 26. 吗啡对家兔呼吸的抑制作用 27. 哌替啶对家兔呼吸的抑制作用 （肖丹秦） 实验二 哺乳动物（兔）麻醉、手术及处死方法 【教学大纲】 1.掌握 兔耳缘静脉注射方法；兔气管插管方法；兔颈外静脉、颈总动脉、股动脉插管方法。 2.熟悉 麻醉剂的使用及注意事项；兔股动脉放血方法；兔膀胱造瘘方法。 3.了解 兔捉拿、灌胃、处死方法。 【实验目的】 了解兔捉拿、灌胃、处死方法。熟悉麻醉剂的使用及注意事项，熟悉股动脉放血方法，熟悉膀胱造瘘方法。掌握耳缘静脉注射方法，掌握气管插管、颈外静脉、颈总动脉、股动脉插管方法。 【实验对象】 家兔。 【实验步骤】 1. 麻醉与固定 家兔称重，自耳缘静脉按5ml/Kg缓慢注入20%氨基甲酸乙酯，注意观察家兔的反应。待麻醉后，将家兔仰卧固定于兔手术台上，头居正中，脖颈伸直，四肢对称。 2. 手术 （1）颈外静脉插管：用盐水沾湿颈部手术野的被毛，沿颈部正中切开皮肤及筋膜（切口长约5～7cm），用手指在皮肤外面向上顶起，即可见到暗紫色粗大的颈外静脉，用玻璃分针沿血管走行方向，将血管周围的结缔组织轻轻分离并结扎血管的远心端， 用镊子将血管的近心端提起，用小剪刀剪一切口，将静脉套管插入，用线将套管固定在静脉内。 （2）气管插管：用止血钳钝性分离皮下软组织，暴露并游离气管，在气管下穿线备用。在甲状软骨下2～3cm处作“⊥”形切口，插入气管插管（插管的斜面向上），用线结扎固定。 （3）分离血管、神经：颈总动脉与颈部神经位于气管外侧，用左手拇指和食指轻轻捏住颈部的肌肉和皮肤，稍向外翻，即可将血管神经束翻于食指之上，用玻璃分针在双侧颈动脉鞘内分离出颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经（见图1）。其中迷走神经最粗，呈白色，一般位于外侧；交感神经较细，一般位于内侧；减压神经最细，常与交感神经贴在一起，识别准确后，用玻璃分针纵向分离并分别穿线备用。 图1 家兔颈部的血管与神经 （4）颈动脉插管：用动脉夹将一侧的颈总动脉近心端夹闭，结扎其远心端，用眼科剪在动脉夹与结扎线之间作一“V”型切口，向心脏方向插入动脉插管，用线将插管与动脉扎紧，防止插管滑脱（见图2）。 图2 动脉套管插入法 （5）股动脉插管：用手在后肢根部触及动脉搏动部位，用手术刀沿血管走行方向作一切口（4～5cm），分离皮下组织，将切开的皮肤向外拉开。用玻璃分针沿缝匠肌后部内侧缘分离并将肌肉轻向外拉，下方可见深筋膜包围的血管神经束，用玻璃分针仔细分离股动脉。插管方法同颈动脉插管。 （6）膀胱造瘘：在耻骨联合上缘向上沿正中线切开皮肤（约4cm），沿腹白线切开腹腔，找到膀胱并将其移出体外，找到双侧输尿管口，在其下方穿线，将膀胱上翻，结扎尿道。在膀胱顶部血管较少处剪一小口，插入膀胱漏斗，用线结扎固定。 3. 家兔灌胃 固定家兔，将张口器放在上下颌之间，取适宜粗细的导尿管，由张口器中央小孔插入，将导管沿颌后壁慢慢送入食管内。在导管口处连接注射器，即可灌胃。 4. 处死方法 耳缘静脉注入空气（空气栓塞）；夹闭气管（窒息）；经动脉放血。 （肖丹秦） 实验三 坐骨神经腓肠肌标本的制备 【教学大纲】 1.掌握 破坏蛙类脑脊髓的方法；神经-肌肉标本的制备方法。 2.了解 了解蛙类常用器械的使用方法。 【原理和目的】 两栖类动物的某些基本生理活动规律与哺乳类动物相似，维持其离体组织正常兴奋性所需的理化条件比较简单,易于控制。因此蛙类离体组织器官是生理学常用的实验标本。本实验的目的是学习坐骨神经-腓肠肌标本的制备。 【实验对象】 蟾蜍。 【实验材料】 蛙类动物手术器械（粗剪刀、手术剪刀、镊子、探针、玻璃分针、蛙板、锌铜弓）、 任氏液、瓷盘、培养皿、棉球、棉线、滴管等。 【实验步骤】 1. 标本制备方法 （1）破坏脑和脊髓：取蟾蜍一只，用水冲洗干净并擦干；左手握住蟾蜍，用食指压住蛙头前端，拇指按压背部，使蛙头前俯；右手持探针由蛙头前端沿中线向尾端划触、触及凹陷处即枕骨大孔所在位置。将探针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔1～2mm，遂将探针尖端转向头端，刺入颅腔并搅动探针，以捣毁脑组织。将探针退出颅腔，向尾端刺入椎管，以破坏脊髓。待蛙四肢松软、左右对称、呼吸消失，即表示脑脊髓已完全破坏。拔出探针后，用一干棉球压迫针孔止血。 （2）剪除躯干上部及内脏：用粗剪刀在骶髂关节水平以上2cm处剪断脊柱。左手握住蟾蜍后肢，右手持粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，使蟾蜍的躯干上部与内脏全部下垂，剪除躯干上部及内脏。 （3）剥皮:左手捏住脊柱断端，右手捏住断端皮肤边缘，用力向下剥去全部后肢的皮肤。将标本置于盛有任氏液的培养皿中。洗净双手，清洗用过的手术器械。 （4）分离两腿：捏住脊柱残端，使背面朝上，尾骨微微上翘，用粗剪刀剪去突出的骶尾骨，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半，并剪开耻骨联合使两腿完全分离，将标本浸入盛有任氏液的培养皿中备用。 （5）游离坐骨神经：取蛙腿一条置于蛙板上，用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经至腘窝胫腓神经分叉处，剪去沿途的神经分支。 （6）保留坐骨神经起始端的1～3个脊椎骨及股骨下端的1/3部分，剪去其余的脊柱骨及膝关节以上的所有肌肉。 （7）分离腓肠肌：在腓肠肌跟腱下穿线、结扎。提起结扎线，于结扎线远端剪断跟腱，用玻璃分针游离腓肠肌至膝关节处，然后用粗剪刀在膝关节囊处将小腿其余部分剪去，制成一个带有一段股骨干的坐骨神经腓肠肌标本（见图3）。 图3 坐骨神经腓肠肌标本的精细制作过程 2. 检查标本兴奋性 将锌铜弓在任氏液中沾湿后轻轻接触一下坐骨神经，若腓肠肌发生迅速而明显的收缩，表明标本的兴奋性良好。 【注意事项】 1. 操作过程中，避免污染、挤压、损伤和用力牵拉坐骨神经和肌肉，不可用金属器械碰触神经干。 2. 制备标本过程中，要不断滴加任氏液，以保持标本正常的兴奋性。 【思考题】 1. 捣毁脑脊髓后的蟾蜍有何表现？ 2. 用锌铜弓刺激神经，为何会引起肌肉收缩？ 实验四 刺激频率与反应的关系（骨骼肌的单收缩和强直收缩） 【教学大纲】 1.掌握 单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩的特征。 2.熟悉 蟾蜍的正确捉拿方法。 【原理和目的】 肌肉兴奋的外在表现形式是收缩。活着的肌肉受到一次有效刺激，爆发一次动作电位，引起一次单收缩。单收缩曲线经历潜伏期、收缩期、舒张期三个时期。若给肌肉一串有效刺激时，可因刺激频率不同，肌肉呈现不同的收缩形式。如果刺激频率很低，肌肉出现一连串彼此分开的单收缩。若逐渐增加刺激频率，使后一个刺激落在前一个刺激引起的肌肉收缩的舒张期，肌肉则呈现锯齿状的收缩波形，称之为不完全强直收缩。再继续增加刺激频率，使后一个刺激落在前一次肌肉收缩的收缩期，肌肉将产生持续的收缩，看不出舒张的痕迹，称之为完全强直收缩。 本实验的目的是观察不同频率的刺激对肌肉收缩形式的影响。掌握单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩的特征。 【实验对象】 蟾蜍。 【实验材料】 蛙手术器械1套、培养皿、铁架台、双凹夹2个、肌槽、BL-420E+生物信号采集系统，张力换能器、任氏液。 【实验步骤】 1. 制备坐骨神经腓肠肌标本，将标本置于任氏液中浸泡、备用。 2. 连接实验装置：将肌槽、张力换能器固定于铁架台上，张力换能器固定在肌槽的正上方；将标本的股骨残端插入肌槽的小孔内并固定；腓肠肌肌腱上的连线连于张力换能器的应变片上（暂不要将线拉紧，线的位置应与水平面垂直）。将坐骨神经轻轻平搭在肌槽的刺激电极上。将张力换能器输出端子与BL-420E+生物信号采集系统输入通道相连，将刺激输出线与肌槽接线柱相连。标本与实验装置连接好后，调整换能器的高低，使肌肉处于自然拉长的状态（见图4）。 图4 肌肉收缩的记录装置图 3. 打开计算机, 启动BL-420E+ 生物机能实验系统，进入“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”实验项目菜单。 4. 选择适当的刺激参数。 5. 观察项目： （1）单收缩：选用适宜刺激强度，将刺激频率置于单刺激或低频连续刺激，描记出独立的或连续单收缩曲线。 （2）不完全强直收缩：逐渐增加刺激频率，出现收缩曲线的融合，描记出锯齿状的不完全强直收缩曲线。 （3）完全强直收缩：继续增加刺激频率，描记出平滑的完全强直收缩曲线。 【注意事项】 1. 每改变一次刺激频率，记录一段曲线后，应休息30～60s，每次连续刺激不超过3～4s，以免标本疲劳。 2. 实验过程中，应经常在标本上滴加任氏液以保持湿润，使其具有良好的兴奋性。 【思考题】 腓肠肌发生完全强直收缩时，动作电位是否融合？为什么？ 实验五 ABO血型鉴定 【教学大纲】 1.掌握 用已知 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 血清检测红细胞膜上未知的凝集原，从而确定血型的方法。 2.熟悉 ABO血型的分型依据。 【原理和目的】 ABO血型是根据红细胞表面存在的特异性凝集原的有无及种类来确定血型的。在ABO血型系统中还包括血清中的凝集素。凝集素可与红细胞膜上相应的凝集原结合，发生红细胞凝集反应。因此，ABO血型鉴定的原理是通过观察已知标准血清中的凝集素是否与被检血液发生红细胞凝集反应去推断红细胞膜上未知的凝集原，从而确定血型。本实验目的在于学会ABO血型的鉴定方法，观察红细胞凝集现象。 【实验对象】 人。 【实验材料】 抗A、抗B标准血清，75％酒精棉球，采血针，竹签，玻片，干棉球。 【实验步骤】 1. 取玻片一张，分别将已知的抗A、抗B标准血清滴在玻片两端。 2. 用75％酒精棉球消毒被检者耳垂或指端，用消毒采血针刺破皮肤，待血流出时，用竹签蘸血少许在抗A标准血清中充分混合，然后换另一竹签再蘸血少许，在抗B标准血清中充分混合。 3. 放置1～2min 后观察有无红细胞凝集现象，根据有无凝集现象判定血型并绘图示意。 【注意事项】 1. 采血针及采血部位必须严格消毒，防止感染。 2. 勿用竹签同一端在两种标准血清中搅拌。 3. 红细胞发生凝集时，呈红色颗粒，且周围液体变得清亮。 【思考题】 已知甲的血型为B型（或A型），在无标准血清的情况下，可否测出乙的血型？ 实验六 血液凝固及其影响因素 【教学大纲】 熟悉 理化因素对血液凝固过程的影响。 【原理和目的】 血液凝固是在许多种凝血因子参与下发生的酶促反应过程，可受各种理化因素的影响。依据凝血酶原激活物形成的途径不同，分为内源性凝血和外源性凝血两条途径。由于两条途径的步骤不同，血液凝固的速度也不相等；若去除某些凝血因子或影响其活性，可阻止、延缓或加速血凝。本实验的目的是通过观察多种理化因素对血液凝固过程的影响，加深对血液凝固过程的理解。 【实验对象】 家兔。 【实验材料】 兔手术台，哺乳动物手术器械一套，动脉夹，动脉插管，注射器，20％氨基甲酸乙酯溶液，试管8支，小烧杯，大烧杯，试管架，竹签，冰块，液体石蜡，8U／ml浓度的肝素（取 12 500U／2ml 肝素1支，加生理盐水至 1562.5ml配制而成），2％草酸钾溶液，生理盐水，脑组织浸液（取兔脑，洗净血液，在乳钵中研碎。按每克脑组织加10ml生理盐水的比例，加入盐水，混匀后离心，取上清液备用）。 【实验步骤】 1. 麻醉及手术过程：耳缘静脉注射20％氨基甲酸乙酯溶液5ml／kg麻醉家兔，将其仰卧固定于兔手术台上，分离一侧颈总动脉，用线结扎远心端以阻断血流，近心端夹动脉夹，在中间的一段动脉上斜向剪一小口，插入动脉插管，结扎固定，以备取血之用。 2. 将8只试管分别编号，并参照下表所示进行。 3.记录凝血时间：松开动脉夹，每个试管加入血液2 ml后，即刻开始记时，每隔15秒倾斜一次试管，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状，试管倒立时血液不再流动为止，记下所经历的时间，填入表内。另将血盛于小烧杯中，并不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。 4.实验项目： 试管编号 实验项目 实验结果及凝血时间 1 对照，不做任何处理 2 用液体石蜡润滑整个试管内表面 3 内放少许棉花 4 置于37℃～40℃温水的大烧杯中 5 置于有冰块的小烧杯中 6 内加肝素8U 7 内加2％草酸钾2mg 8 内加脑组织浸液0.1ml 小烧杯（放血约10 ml） 放血于小烧杯内，用竹签不停搅动，约2～3min后取出竹签，用水洗净竹签上的血，观察有无纤维蛋白产生。并观察此烧杯内的去纤维蛋白血是否凝固 【注意事项】 1. 6、7、8号试管加入血液后，应将试管轻轻摇匀，以使血液与药物充分混合。 2. 凝血时间的记录应力求准确。 【思考题】 分析各实验项目对血液凝固的影响及其机制。 实验七 离体蛙心灌流 【教学大纲】 1.掌握 钾、钙离子及肾上腺素和乙酰胆碱对心脏活动的影响。 2.熟悉 离体蛙心的制备方法;蛙心灌流方法。 【原理和目的】 心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，细胞外液中各种离子浓度的改变将影响心肌细胞生物电活动，从而对心脏的活动产生不同的影响。将离体蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生正常的节律性兴奋和收缩活动；若改变灌流液的成分，则导致心脏活动增强或减弱。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法，并观察钾、钙两种离子浓度的变化及肾上腺素和乙酰胆碱对心脏活动的影响。 【实验对象】 蟾蜍。 【实验材料】 1.​ 器械：蛙类手术器械、蛙心插管、蛙心夹、生物信号采集系统、张力换能器、滑轮、铁架台、双凹夹、烧杯、滴管。 2. 药品及试剂：任氏液、0．65％ NaCl、2％ CaCl2、1％ KCl、1׃10000肾上腺素、 1׃10000乙酰胆碱。 【实验步骤】 1．离体蛙心制备 （1）暴露心脏：取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓，将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用粗剪刀从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后剪掉胸骨，用镊子提起心包（注意不要夹在心肌上），再用眼科剪刀将心包剪开，暴露心脏。在左主动脉下穿线，打一松结备用。 （2）心脏插管：用眼科剪刀在松结上方左主动脉根部剪一小V字斜形切口，把装有任氏液的大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入主动脉球，然后稍退出，再向左、向下作90°角转弯，选择心室收缩期主动脉瓣开放之际顺势插入心室。当插管已插入心室时，可见插管中的液面随心搏而上下波动。这时将松结扎紧，并将线固定在插管的侧钩上，以防插管滑脱（见图5）。用滴管吸去插管中的液体，换以新鲜任氏液。 图5 蛙心插管示意图 2．摘出心脏 剪断主动脉左右分支。小心提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎部位应尽量靠下，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来。用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液，直至蛙心插管内无血液残留为止。实验过程中蛙心插管内应一直保持任氏液约2ml。 3．仪器安装 将蛙心插管固定在铁架台上，用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将蛙心夹的线头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上，此线应有一定的紧张度。将张力换能器固定在铁架台上，换能器输出线接生物信号采集处理系统输入通道。启动BL-420E+生物信号采集系统，进入“实验项目”→“循环实验”→“离体蛙心灌流”实验菜单，调置好参数。（见图6） 图6 离体蛙心收缩测定连接装置 4.观察项目 （1）描记正常心搏曲线，注意观察心搏频率、强度及心室收缩和舒张程度。 （2）吸出插管内全部任氏液，换入0．65％ NaCl溶液（造成低钾），描记心搏曲线。观察到心搏曲线变化后立即用新鲜任氏液反复换洗数次，待曲线恢复正常时，再行以下实验。 (3) 加入2％ CaCl2 l～2滴，描记及观察心搏曲线，换任氏液同前。 （4）加入 1％ KCl l～2滴，描记及观察心搏曲线，换任氏液同前。 （5）加入 1׃10 000 肾上腺素1～2滴，描记及观察心搏曲线，换任氏液同前。 （6）加入 1׃10 000 乙酰胆碱溶液l～2滴，描记及观察心搏曲线。 【注意事项】 1．插管时不可硬插或插得过深，以免损伤心肌。 2．张力换能器应向下倾斜，以免液体进入换能器。 3．吸新鲜任氏液的吸管应与吸蛙心插管内溶液的吸管区分专用，不可混淆使用，以免影响实验结果。 4．药物作用不明显时，可再适量滴加。 【思考题】 1．离体蛙心为什么还能有节律地搏动？ 2．分析钾、钙两种离子浓度的变化及肾上腺素和乙酰胆碱对心脏活动的影响及其机制。 （王倩） 实验八 家兔动脉血压的调节 【教学大纲】 1.掌握 交感神经和迷走神经对心脏的影响。 2.熟悉 颈动脉插管直接测定家兔的动脉血压的方法。 【原理和目的】 动脉血压是反映心血管功能活动的综合指标。正常生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。而稳定是通过神经、体液调节而实现的，其中神经调节以颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射尤为重要。 该反射的感受器是位于颈动脉窦和主动脉弓的压力感受器，传入神经走行于窦神经和主动脉神经中（家兔的传入神经是减压神经），中枢在延髓，传出神经是支配心脏和血管的自主神经，效应器是心脏和血管。 心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。交感神经兴奋时，通过末梢释放去甲肾上腺素，与心肌细胞膜上的1受体结合，引起心率加快、心肌收缩力增强，心输出量增加，动脉血压升高；迷走神经兴奋则通过末梢释放乙酰胆碱，与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心率减慢、心肌收缩力减弱，心输出量减少，动脉血压降低。全身绝大多数血管受交感缩血管神经支配，该神经通过末梢释放去甲肾上腺素，与血管平滑肌上的受体结合，引起血管收缩，外周阻力增大，动脉血压升高。 本实验通过颈动脉插管直接测定家兔的动脉血压，观察反射活动及神经、体液因素对心血管活动的影响。 【实验对象】 家兔。 【实验材料】 1. 装置和器材： BL-420E+ 生物信号采集系统、压力换能器、保护电极、兔手术台、常用手术器械、铁支架、双凹夹、Y型气管插管、动脉插管、动脉夹、三通管、注射器。 2. 试剂和药品：20%氨基甲酸乙酯，3.3% 肝素，乙酰胆碱（1︰100 000），去甲肾上腺素（1︰10 000），0.01% 阿托品，生理盐水。 【实验步骤】 1．动物准备 （1）麻醉：兔称重后， 将20％ 氨基甲酸乙酯按5ml／kg的剂量，由耳缘静脉缓慢注入。 （2）固定：将家兔背位固定在手术台上，用生理盐水沾湿颈部手术野的被毛。 （3）手术：在颈部正中将兔毛分向两侧，沿正中线作一长5～7cm的皮肤切口，用止血钳分离皮下组织，暴露气管，用玻璃分针分离颈总动脉及、神经，颈总动脉与颈部神经位于气管外侧的颈动脉鞘内，用左手拇指和食指轻轻捏住颈部的肌肉和皮肤，稍向外翻，即可将血管神经束翻于食指之上，分离两侧颈总动脉约４cm，穿线备用，轻轻提起右侧颈总动脉下的备用线，即可清楚看到3条粗细不同的神经，迷走神经最粗，白色，一般位于外侧；交感神经较细，一般位于内侧；减压神经最细，常与交感神经贴在一起。识别准确后，用玻璃分针纵向分离神经2cm，穿线备用。 （4）气管插管法：游离气管，在气管下方穿线，打一活结，在甲状软骨下3-4软骨环处的气管上作一“⊥”形切口，向下插入气管插管并用线结扎，余线在气管插管的分叉处固定，以免插管滑脱。 （5）动脉插管法：将分离出的左侧颈总动脉远心端用线结扎，近心端用动脉夹将动脉夹住。在两者之间穿线，打活结备用。在远心端结扎线下方用眼科剪在动脉上作一小“V”形切口，将充满肝素的动脉插管朝心脏方向插入动脉，确认插入动脉后用备用线将血管与插管结扎固定，再将结扎线固定于插管的胶布上，防止插管从血管中滑脱。打开压力换能器三通开关，小心松开动脉夹，可看到少量血自颈总动脉冲入动脉插管。为避免插管内血液凝固，静脉注射肝素，剂量为3ml/kg体重。 手术完毕后用温盐水纱布覆盖手术伤口部位。 3.仪器连接 打开BL-420E+ 生物信号采集系统电源，接通压力换能器。打开微机， 双击桌面的“BL-420E+ 生物信号采集系统”图标，进入系统，依次选择“实验项目”→“循环实验” →“兔动脉血压调节”，即可记录到动脉血压曲线。 4.观察项目 （1）调节扫描速度，记录和观察正常动脉血压。 （2）用动脉夹夹闭右侧颈总动脉5～10s，记录并观察动脉血压的变化。 （3）牵拉右侧颈总动脉，记录并观察血压的变化。 （4）用保护电极间断刺激减压神经，记录并观察动脉血压变化。剪断减压神经，分别刺激中枢端和外周端，记录并观察动脉血压变化。 （5）用保护电极间断刺激迷走神经，记录并观察动脉血压变化。剪断迷走神经，分别刺激中枢端和外周端，记录并观察动脉血压变化。 （6）耳缘静脉注射1：10 000去甲肾上腺素0.15～0.2ml/kg，记录并观察动脉血压变化。 （7）耳缘静脉注射乙酰胆碱0.05～0.1ml /kg，记录并观察动脉血压变化。 （8）耳缘静脉注射阿托品0.1ml/kg，1～2min后再重复（7），记录并观察动脉血压变化。 实验结束后在血管内注射空气20～40ml，处死动物。尸体按指定位置放置，统一销毁。 【注意事项】 1．麻醉应适量，过浅动物挣扎，过深则引起动物死亡。 2．每次注射药物后，应更换注射器，防止注射器内药液残留而影响后一种药物的效应。 3. 本实验多次进行静脉注射，应特别注意保护耳缘静脉，静脉穿刺从近耳尖处开始，逐次移向耳根。 4．对每项实验结果观察完毕，应等动脉血压基本恢复正常，再进行下一项实验。 5．随时注意动脉插管位置，避免滑脱。特别在兔挣扎时，防止插管扭转而阻塞血流或刺破血管。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 （朱娟霞） 实验九 心音的听取 【教学大纲】 1.熟悉 心脏瓣膜的听诊区位置;心音听诊方法，分辨第一心音和第二心音。 2.了解 听诊器的使用。 【原理和目的】 心脏舒缩过程中，瓣膜的关闭及血流撞击心室壁和大动脉管壁引起振动而产生的声音称心音。将听诊器置于心前区的胸壁，在每一心动周期中通常可以听见两个心音，即第一心音和第二心音。本实验目的是学习心音听诊方法，分辨第一心音和第二心音。 【实验对象】 人。 【实验材料】 听诊器。 【实验步骤】 被检者解开上衣坐于检查者对面，检查者戴好听诊器并将听诊器放在被检者的心前区，依次在二尖瓣区、主动脉瓣区、肺动脉瓣区、三尖瓣区进行听诊。听诊时注意分辨第一心音和第二心音。如果第一、第二心音难以分辨，可用左手触心尖搏动或颈动脉脉搏，当触及搏动时所听见的心音即为第一心音，之后所听到的声音为第二心音。 【注意事项】 1. 室内保持安静。 2. 如果呼吸音影响心音听诊，可令被检者暂时屏住呼吸。 【思考题】 比较第一、第二心音的特征，分析其产生机制。 （李燕燕） 实验十 人体动脉血压的测量 【教学大纲】 熟悉 人体动脉血压测量的方法。 【原理和目的】 测量人体动脉血压最常用的方法是用血压计袖带在上臂肱动脉外加压，根据听诊血管音的变化来测量动脉血压。当血压计袖带内压力超过收缩压时，动脉血流完全被阻断，在肱动脉上听不到声音；当压力稍低于收缩压而高于舒张压时，血液断续通过受压血管形成涡流，发出声音；当袖带内压力等于或刚低于舒张压时，血液恢复连续流动，血管音变弱或消失。因此，听到第一声血管音时检压计上显示的数值相当于收缩压值；听到的血管音由强变弱或突然消失时检压计上显示的数值相当于舒张压值。 本实验的目的是学习使用袖带法测量肱动脉血压，正确测量人体肱动脉的收缩压与舒张压；观察运动对动脉血压的影响。 【实验对象】 人。 【实验材料】 听诊器、血压计。 【实验步骤】 1. 测量安静状态时的血压：让被检者静坐5min以上，脱去一侧衣袖，前臂伸平，置于桌上，与心脏处于同一水平。松开血压计充气球的螺丝气阀，驱出袖带内的残留空气后，将螺丝气阀拧紧。将袖带缠于受试者上臂距离肘窝上方2cm处，松紧适宜（能容一指）。在肘窝内侧，检测者用手触及肱动脉搏动，将听诊器胸件置于其上。 用充气球将空气充入袖带内，使检压计水银柱上升，当听诊器内听不到血管音时，继续充气使水银柱继续上升约20mmHg,一般达150～180mmHg左右，随即松开充气球螺丝气阀，徐徐放气，降低袖带内压力，观察检压计上的水银柱缓慢下降，每秒约降低2mmHg,当听到第一声血管音时，检压计显示的数值即为收缩压。继续缓慢放气，血管音逐渐增强，当血音由强变弱或消失时，检压计显示数值即为舒张压。 随后，排空袖带气体使压力降为零。重复测压2～3次，取平均值。 2. 观察运动对血压的影响：让被检者做直立和下蹲动作，按每秒下蹲一次的速度，重复50次左右。运动结束后立即测血压，并与运动前的血压进行比较。 记录受试者运动前后收缩压和舒张压，记录方式为：收缩压/舒张压mmHg（或kPa）。 【注意事项】 1. 室内保持安静。 2. 上臂缠袖带处不要有衣袖束缚。 【思考题】 判定被检者动脉血压是否正常。 （李燕燕） 实验十一 家兔呼吸运动的调节 【教学大纲】 1.掌握 CO2分压升高、缺O2及血液酸度改变对呼吸运动的影响。 2.熟悉 呼吸运动的描记方法；牵张反射的作用。 【原理和目的】 呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的结果。其深度和频率会随机体代谢需要而相应变化。呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节，主要涉及呼吸中枢、肺牵张反射和化学感受性反射。体内外各种刺激，可以直接作用于呼吸中枢或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。本实验的目的是学习描记呼吸运动的方法并观察不同因素对呼吸运动的影响。 【实验对象】 家兔。 【实验材料】 哺BL-420E+ 生物信号采集系统，乳动物手术器械一套，兔手术台，Y型气管插管，注射器，50cm长橡皮管一条，CO2气袋，N2气袋，3％ 乳酸溶液，20％ 氨基甲酸乙酯，生理盐水，纱布，丝线，铁架台，婴儿称，压力换能器。 【实验步骤】 1．麻醉与固定 家兔称重，20％ 氨基甲酸乙酯以 5mL/kg 的剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入，注意观察家兔的反应。待麻醉后，将家兔仰卧固定于兔手术台上，头居正中，脖颈伸直，四肢对称。 2．手术 用水沾湿颈部手术野的被毛，沿颈部正中线作一长5～7cm的切口，用止血钳钝性分离皮下组织，暴露并游离气管，并于气管下穿线备用。在甲状软骨下第4～5个气管软骨处作一 “⊥”形切口。将“Y”型气管插管向肺的方向插入气管内，用预留备用线线结扎固定。在气管两侧肌肉深面颈动脉鞘内分离迷走神经，并在其下穿线备用。手术完毕后用盐水纱布覆盖手术伤口部位。 3．观察准备 用皮管连接气管插管和压力换能器。打开压力换能器三通开关，启动计算机BL-420E+ 生物信号采集系统，选择“实验项目”→“呼吸实验”→“呼吸运动调节”菜单，双击一通道，调节增益、采样参数，使基线归零，令图形位于屏幕中央，便于观察。 4．观察项目 （1）记录正常呼吸曲线作为对照，观察吸气相、呼气相、呼吸幅度和频率。 （2）缺氧：将装有N2气袋的皮管口与气管插管的侧管相对，相距约1cm，打开皮管夹子，使吸入气中含有较多的N2，记录并观察呼吸运动的变化；关闭气袋，观察呼吸运动的恢复过程。 （3）增大无效腔：把50cm长的橡皮管连接在气管插管的侧管上，动物通过这根长管进行呼吸时，记录并观察呼吸运动的变化；去除长管，观察呼吸运动的恢复过程。 （4）增加吸入气中CO2浓度：将装有CO2气袋的皮管口移近气管插管的侧管，相距约1cm，打开皮管夹子，使吸入气中含有较多的CO2。记录并观察吸入高浓度的CO2对呼吸运动的影响。关闭气袋，观察呼吸运动的恢复过程。 （5）增加血液酸度：由耳缘静脉迅速注入3％乳酸溶液2mL，记录并观察呼吸运动的变化。 （6）观察迷走神经在调节呼吸运动中的作用：剪断双侧迷走神经，记录并观察呼吸运动的变化。 实验结束后在血管内注射空气20～40ml，处死动物。尸体按指定位置放置，统一销毁。 【注意事项】 1．气管插管前，及时清理气管内淤血及异物，保持气管通畅。 2．手术操作应细致，避免损伤血管。 3．勿将气袋皮管与气管插管侧管直接相连，以避免气体流速过急，影响呼吸运动，干扰实验结果。 4．对每次实验结果观察完毕后，应等呼吸运动基本恢复正常后，再进行下一项实验。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 （王倩） 实验十二 家兔尿生成调节与药物利尿、抗利尿作用 【教学大纲】 1.掌握 迷走神经、去甲肾上腺素对家兔尿生成的影响。 2.熟悉 垂体后叶素、速尿对尿生成的影响。 【原理和目的】 尿生成的基本过程包括：肾小球的滤过、肾小管与集合管的重吸收、肾小管与集合管的分泌。凡影响上述过程的因素，均可影响尿的生成并引起尿量的改变。本实验通过观察若干因素改变对尿生成的影响，加深对尿生成过程及其调节机制的理解。 【实验对象】 家兔。 【实验材料】 1. 实验器械 BL-420E+ 生物信号采集系统，压力传感器，兔手术台，哺乳动物常用手术器械，铁支架，双凹夹，气管插管，动脉插管，动脉夹，膀胱插管，三通管，注射器，培养皿。 2. 试剂和药品 20% 氨基甲酸乙酯，20%葡萄糖，去甲肾上腺素（1:10 000），垂体后叶素，速尿，尿糖试纸，生理盐水。 【实验步骤】 1．麻醉与固定 家兔称重，20％氨基甲酸乙酯以5mL/kg的剂量由耳缘静脉缓慢注入，注意观察家兔的反应。待麻醉后，将家兔仰卧固定于兔手术台上，头居正中，脖颈伸直，四肢对称。 2. 颈部手术 （1）气管插管（参照呼吸运动的调节）。 （2）动脉插管（参照家兔动脉血压的调节） 3. 腹部手术 膀胱插管法：从耻骨联合向上沿中线作长约4cm的切口，沿腹白线剪开腹壁和腹膜，将膀胱轻移到腹腔外，辨认膀胱和输尿管的解剖关系，通过两侧输尿管下方穿线，将膀胱上翻用线结扎膀胱颈部以阻断膀胱与尿道的通路。在膀胱顶部血管较少处，剪一纵行小口，插入膀胱漏斗，用线将切口边缘固定于膀胱漏斗的凹槽内，膀胱漏斗的另一端则用导管连接至计滴器上。手术完毕用生理盐水纱布覆盖腹部切口，以保持腹腔内温度和湿度。 4.仪器连接 打开BL-420E+ 生物信号采集系统，受滴器的插头接记滴输入口，压力传感器插头接1通道输入口，启动“BL-420E+ 生物信号采集系统”，依次选择“实验项目”→ “泌尿实验” →“影响尿生成的因素”，即可记录到血压曲线和尿滴。 5.观察项目 （1）记录正常动脉血压。 （2）记录正常尿量(滴/分)。 （3）静脉快速注入生理盐水30ml，记录并观察尿量及血压变化。 （4）剪断右侧迷走神经，电刺激其外周端20～30s，记录并观察尿量及血压变化。 （5）收集尿液，取尿糖试纸做尿糖定性试验。静脉注射50%葡萄糖5ml/ kg，待尿量明显增多时，再收集尿液，取尿糖试纸做尿糖定性试验 （6）耳静脉注入1/10 000去甲肾上腺素0.2ml，观察血压和尿量的变化。 （7）静脉注射速尿5mg/kg体重，记录并观察尿量变化。 （8）静脉注射垂体后叶素２U，记录并观察尿量变化。 实验结束后静脉注射20～40ml空气,处死动物。 【注意事项】 1. 实验前多给家兔喂青菜，或用橡皮导管向其胃中灌入40～50ml清水，以增加其基础尿量。 2. 做膀胱插管时，操作应细致轻柔，以免膀胱受刺激而缩小，增加插管难度。 3. 实验项目顺序的安排应注意：在尿流量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量减少的基础上进行促进尿生成的实验。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 （朱娟霞 李萍） 实验十三 反射弧的分析 【教学大纲】 了解 反射弧的组成；反射弧的完整对反射活动正常进行的必要性。 【原理和目的】 在中枢神经系统的参与下，机体对刺激所发生的反应称反射。反射的结构基础是反射弧，反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五部分组成。反射活动的正常进行，必须有完整的反射弧。其中任何一部分发生结构破坏或功能障碍，反射就不能进行。 本实验目的是利用皮肤伤害性刺激引起的屈腿反射来分析反射弧的组成及反射弧完整性与反射活动的关系。 【实验对象】 蟾蜍。 【实验材料】 蛙手术器械，铁支架， 双凹夹，肌夹，玻璃平皿，玻璃针，粗瓷盘，大烧杯，棉球，小毛巾，2% 硫酸。 【实验步骤】 1. 脊蛙的制备 取蟾蜍一只，用水冲洗干净并擦干；左手握住蟾蜍，用食指压住蛙头前端，拇指按压背部，使蛙头前俯；右手持探针由蛙头端沿中线向尾端划触、触及凹陷处即枕骨大孔所在。将探针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔1-2mm，遂将探针尖端转向头方，向前探入颅腔内，搅动探针以捣毁脑组织。用肌夹夹住蛙下颌，悬挂于铁支架上。 2. 反射弧分析 （1）2%的H2SO4溶液刺激脊蛙的一侧脚趾，观察有无屈腿反射。 （2）在下肢踝关节处将皮肤做环行切口，剥去足皮，剪除趾甲，用2% 的H2SO4溶液刺激脊蛙的无皮脚趾，观察有无屈腿反射。 （3）在脊蛙的另一侧腿上重复实验（1），随后将蛙大腿背面的皮肤纵行剪开，在股二头肌和半膜肌之间用玻璃针游离坐骨神经后剪断，再用2% H2SO4溶液刺激该腿足趾，观察有无屈腿反射。 （4）将浸有2% H2SO4溶液的棉花薄片贴于蟾蜍下腹部，观察有无搔扒反射出现。随后，用探针捣毁蛙的脊髓，将浸有2% H2SO4溶液的棉花薄片贴于蟾蜍下腹部，观察有无搔扒反射出现。 实验结束，动物尸体按指定位置放置，统一销毁。 【注意事项】 1. 每次用2% H2SO4溶液刺激后，应迅速用清水洗净蛙皮肤上的稀硫酸，并用小毛巾擦干。 2. 用2% H2SO4刺激蛙足趾的范围应恒定，刺激时间不宜太长。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 实验十四 氢化可的松对小鼠耳郭毛细血管 通透性的影响 【教学大纲】 1.掌握 糖皮质激素的抗炎作用。 2.了解 炎症模型的制备方法。 【原理和目的】 糖皮质激素具有强大的非特异性抗炎作用，对各种原因引起的炎症以及炎症的各期均有抑制作用。炎症早期，能增高血管紧张性，降低毛细血管通透性，从而改善红、肿、热、痛等症状；炎症后期，能抑制毛细血管和纤维细胞的增生，防止粘连和斑痕形成。本实验用致炎物质二甲苯造成小鼠耳郭毛细血管扩张，再用氢化可的松对抗。通过对照组与给药组的比较，用给伊文氏兰生理盐水后两组小鼠耳郭变蓝程度，观察氢化可的松对小鼠耳郭二甲苯致炎症的毛细血管通透性的影响。 【实验对象】 小鼠。 【实验材料】 1. 材料 小鼠固定器，注射器 2. 药品 二甲苯，0.5%氢化可的松，伊文氏兰生理盐水 【实验步骤】 1. 取小鼠2只，称重并标记，分为甲鼠和乙鼠。 2. 甲鼠皮下注射0.5%氢化可的松0.1ml/10g，乙鼠皮下注射同样容量的生理盐水。 3. 半小时后由两鼠尾静脉注射0.5% 伊文氏兰生理盐水0.1ml/10g，并于两鼠右耳郭边缘各滴二甲苯两滴，使之充分浸及耳郭内外。 4. 15min后观察两鼠右耳郭变蓝程度有何不同。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 实验十五 氢化可的松对红细胞的保护作用 【教学大纲】 1.掌握 红细胞溶血实验的实验方法。 2.了解 糖皮质激素稳定溶酶体膜的作用。 【原理和目的】 糖皮质激素具有抗炎、抗免疫、抗内毒素及抗休克等作用，主要机制之一是稳定溶酶体膜。糖皮质激素稳定溶酶体膜的作用多采用其对红细胞具有保护机能的实验方法。本实验的目的是观察氢化可的松对红细胞膜的稳定作用。 【实验对象】 家兔. 【实验材料】 1. 器材 试管，吸管。 2. 药品 0.5% 氢化可的松溶液，4% 桔梗煎剂滤液，2% 红细胞生理盐水混悬液，生理盐水。 【实验步骤】 1. 准备红细胞：家兔一只，称重，麻醉。心室内取血约20ml置盛有玻璃珠的三角烧瓶中振摇（或用棉签搅拌），去除纤维蛋白。将去纤维蛋白血液放入刻度离心管内，加生理盐水5～10ml，混匀后离心5min（2000～2500 r/min），去除上清液，再加生理盐水，混匀、离心，反复3～4次，直到上清液至无色透明。将所得红细胞按容积用生理盐水稀释成2%的混悬液（红细胞2ml，加生理盐水至100ml）。 2. 取试管3支，各加入2%红细胞混悬液3ml。 3. 于第1试管加生理盐水1ml；第2试管加生理盐水0.5ml；第3试管加0.5%氢化可的松溶液0.5ml，摇匀。 4. 放置10min后，第2、3管各加入选好浓度的桔梗煎剂滤液0.5ml，摇匀。 5. 放置10～15min，观察各管有无溶血发生，结果记录于下表。 试管号 2%红细胞液（ml） 生理盐水（ml） 0.5%氢化可的松（ml） 桔梗煎剂滤液（ml） 溶血现象 1 2 3 3.0 3.0 3.0 1.0 0.5 － － － 0.5 － 0.5 0.5 注：一般桔梗煎剂试验用浓度约为4%，但在实验前应该做预试验进一步确定。 附： （1）预试验测定皂素浓度，求出最低皂素溶血浓度： 桔梗煎剂中含皂苷，具有破坏细胞膜的作用。实验条件许可的情况下，可用商用皂素作为阳性对照组。实验之前应先做预试验求出最低皂素溶血浓度。方法如下：取试管8～10支，各加生理盐水1ml（或2ml）。于第1管加入1%皂素液1ml（或2ml）。盐水和皂素液要等量。混匀后吸出此法逐一稀释，可配得为原浓度1/2,1/4,1/8,1/16……(即0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%)的皂素稀释液。另取试管8～10支，编号，各加入2%红细胞混悬液3ml，生理盐水0.5ml，然后分别吸取上述各管皂素稀释液0.5ml，依次对号加入试管中（即1号管加入第1号皂素稀释液0.5ml，2号管加入第2号皂素稀释液0.5ml……），混匀。观察10～15min，根据各管溶血情况，即可找出最低的皂素溶血浓度。 （2）预试验测定桔梗煎剂的最低溶血浓度：方法同。 【思考题】 分析实验结果的产生机理。 （胥晓丽） 实验十六 胰岛素过量反应及其解救 【教学大纲】 1.熟悉 胰岛素的降血糖作用。 2.了解 胰岛素过量所致低血糖的表现及其解救方法。 【原理和目的】 胰岛素能促进糖原的合成和贮存，加速葡萄糖的氧化和酵解，并抑制糖原的分解和异生，即能增加糖的去路，减少糖的来源，从而发挥其降血糖的作用。胰岛素过量最常见的不良反应为低血糖症。本实验的目的是观察胰岛素过量引起的低血糖反应及葡萄糖的解救作用。 【实验对象】 小鼠。 【实验材料】 1. 试剂和药品 5u/ml胰岛素溶液，25%葡萄糖溶液 2. 实验器械 恒温器，注射器，有孔玻板。 【实验步骤】 1. 将恒温器调节至37℃～38℃。 2. 取禁食（不禁水）12～20h的小鼠2只，称重标记，分为甲鼠和乙鼠。 3. 腹腔注射胰岛素5U/10g，然后将两鼠均置于恒温器内，盖以有孔玻板，观察其活动情况。 4. 当小鼠发生惊厥时，迅速取出一只，取预先备好的25%葡萄糖溶液0.5～1.0ml，立即腹腔注射，另一只鼠不予处理。 5. 观察两鼠症状有何变化。 【思考题】 分析各项实验结果的产生机制。 实验十七 烟碱的毒性作用 【教学大纲】 1.熟悉 药物急性毒性实验的实验方法。 2.了解 烟草的主要毒性成分及其对人体的危害。 【原理和目的】 烟碱（nicotine），又称尼古丁，是烟草中的主要成分之一，具有很强的毒性。烟碱主要通过作用于N型胆碱受体，对中枢神经系统、外周神经系统、心血管系统、消化系统、内分泌系统等均产生不同程度的影响。本次实验目的是观察烟碱对小白鼠的急性毒性作用，并通过对烟碱及烟草中其他成分毒性作用的分析，说明吸烟对人体的危害。 【实验对象】 小鼠。 【实验材料】 1. 试剂和药品 烟碱水溶液，生理盐水 2. 装置和器材 水烟斗，1ml、5ml注射器，10ml量筒，试管及试管架。 【实验步骤】 1. 制备烟碱溶液 向水烟斗内加入4ml生理盐水，将去掉烟蒂的香烟插在水烟斗上，然后用吸耳球缓慢抽吸，并不断震荡让水烟斗，使烟雾充分溶解于生理盐水中。另取生理盐水10ml，将1支香烟烟叶置于生理盐水中浸泡10min。 2. 实验项目 取小白鼠7只，称重、编号，腹腔注射给药。按下表进行操作： 鼠号 给药情况 毒性反应表现及发生时间 1 生理盐水 0.2ml/10g 2 烟雾溶液 0.1ml/10g 3 烟雾溶液 0.2ml/10g 4 烟雾溶液 0.4ml/10g 5 烟叶浸出液 0.1ml/10g 6 烟叶浸出液 0.2ml/10g 7 烟叶浸出液 0.4ml/10g 观察内容：小白鼠的一般活动情况，其耳部是否变白，心率、呼吸有无变化，有无惊厥和死亡等，并与生理盐水组对比。 【思考题】 分析实验结果的产生机制。 （胥晓丽） 实验十八 离子对心脏活动的影响、强心苷的作用 【教学大纲】 1.掌握 高钾、低钙对心脏活动影响的特点及原理；强心苷对心脏的作用特点。 2.熟悉 蛙心脏的结构；蛙心插管的操作方法。 【目的和原理】 心脏的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，细胞外液中各种离子浓度的改变将影响心肌细胞生物电活动，从而对心脏的活动产生不同的影响。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法，并观察高钾、低钙对心肌收缩的影响和毒毛花苷K的强心作用。 【实验对象】 蟾蜍. 【实验用品】 1.实验器械 蛙类手术器械，张力换能器，BL-420生物信号处理系统。 2.药品和试剂 任氏液，1％氯化钙溶液，1%氯化钾，毒毛花苷K。 【实验步骤】 1. 离体蛙心制备 （1）取蛙（或蟾蜍）1只，用探针破坏大脑和脊髓，背位固定于蛙板上。 （2）开胸、暴露心脏。剪破心包膜，在主动脉干分支处以下穿线，打一松结备用。 （3）于左侧主动脉分支上剪一V形切口，插入盛有任氏液的蛙心套管，使套管进入心室。在主动脉处扎紧备用的松结并固定于套管小钩上。 （4）剪断结扎点上端的主动脉，提起套管及蛙心，再结扎并剪断静脉窦远心端，使蛙心游离。用滴管吸去蛙心套管内的血液，反复用任氏液冲洗清除蛙心内存血。 2. 连接实验装置 用试管夹夹住蛙心插管的上部并固定于铁支架。取一绑有丝线的蛙心夹夹住心尖，另一端与换能器相连，将换能器的输入端连于BL-420生物信号处理系统。 3. 实验项目 （1）记录一段正常心跳曲线； （2）在蛙心套管中加入1%氯化钾，观察心脏活动，再用任氏液换去高钾的溶液。 （3）以缺钙任氏液换去任氏液，观察心脏收缩幅度，当心缩明显减弱时加1％氯化钙溶液3～6滴，观察心脏收缩幅度变化，待恢复正常后，用任氏液换去缺钙任氏液并加大前负荷。 （4）待心脏失代偿出现后，吸去部分仁氏液并向套管中加入毒毛花苷K 0.5ml，观察心脏收缩幅度的变化。最后再加入毒毛花苷K 0.5ml，观察强心苷中毒。 （5）向失代偿的心脏加入三滴氯化钙观察心脏变化的情况。 【注意事项】 1. 接扎上下腔静脉时，勿将静脉窦扎住 。 2. 每次换药液后，蛙心插管内的液面应保持同样的高度。 3. 随时滴加任氏液于蛙心表面，保持蛙心湿润。 【思考题】 分析氯化钙、毒毛花苷K对心脏活动的影响。 （杜洪霞） 实验十九 血浆药物半衰期的测定 【教学大纲】 1.掌握 药物半衰期的测定方法。 2.熟悉 半衰期的概念；分光光度计的使用方法。 【目的和原理】 血中药物浓度随时间推移呈规律性（一级动力学消除）下降。水杨酸与三氯化铁生成一种络合物，呈紫色，用分光光度比色，波长在520nm下，其光密度与水杨酸浓度成正比。 用比色法测定药物在血液中两个以上的浓度值，可求出药物的血浆半衰期。 通过实验，熟悉半衰期的概念；熟悉分光光度计的使用方法，掌握药物半衰期