血细胞计数板的结构和使用主要
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一.计数板结构◆结构◆区域划分二.计数板使用◆使用◆计数顺序与原则◆质量保证◆评价◆考核方法一、改良Neubauer计数板结构计数板上下各一个计数池1mm1mm计数板结构区域划分二、计数板使用准备计数扳稀释血液充液静置显微镜计数计数原则“数上不数下，数左不数右”计数顺序计数顺序与原则计数板使用质量保证1．计数板（1）计数板合格性鉴定鉴定周期：每隔1年，要求计数室的玻面光滑、透明、划线清晰，划线面积准确。1）盖玻片检查：包括厚度和平整度，要求盖玻片应具有一定的重量，平整、光滑、无裂痕，厚薄均匀一致。2）计数室深度：高度误差应在±2%（±2μm）以内。3）计数室划线：每个大方格边长的误差应小于1%。（2）保证计数板和盖玻片清洁：防止计数板污染，致使充液时产生气泡。如使用血液充液，计数板和盖玻片使用后应依次用95%（V/V）乙醇、蒸馏水棉球擦拭，最后用清洁纱布手揩净。（3）加盖玻片：WHO推荐采用推式法，以保证充液的高度为0.10mm。当盖玻片盖在计数板上时，若两层玻璃之间见到彩色条带（Newton环），说明计数板和盖玻片清洁良好。2．充液（1）平放计数板。充液前应适当用力、快速振荡细胞悬液30秒，使其充分混匀，但不能产生过多气泡，以免影响充液和准确计数，也要防止剧烈振荡以免破坏细胞。（2）一次完成充液，如充液过少、过多、有气泡或出现任何碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。（3）充液后不能移动盖玻片。3．静置计数板白细胞和红细胞计数一般需沉淀2～3分钟，血小板计数应沉淀10～15分钟，同时需注意保湿。（1）如果细胞严重分布不均，应重新充液计数。如白细胞总数在正常范围内时，各大方格的细胞数不得相差8个以上。两次重复计数误差：白细胞不超过10%，红细胞不超过5%。（2）计数原则计数细胞时应遵循计数原则，并注意与非细胞成分相区别。4．计数5．计数误差（1）技术误差（technicalerror）：由于操作不规范或使用器材不准确造成的误差称为技术误差。这类误差通过主观努力可以避免或显著减小，属系统误差。（2）固有误差（inherenterror）：包括计数域误差、计数室误差和吸管误差。血细胞计数常见的技术误差与原因校正后白细胞数有核红细胞数校正后白细胞数×+=100100/L1）计数域误差（fielderror）：又称分布误差，属于偶然误差。根据统计学原理，血细胞在计数室内分布的不均一性符合泊松分布：ms=（m为细胞多次计数的均值）%1001%100×=×=mmsCV计数域误差变异系数（CV）与细胞计数的数量成反比，细胞计数数量越多，计数范围越广，误差越小；反之，误差越大2）计数室误差和吸管误差：同一稀释血液采用多支吸管稀释，在多个计数板内计数，较同一稀释液在同一计数板进行多次计数所得的结果更接近真值。以白细胞计数为例，固有误差总变异系数的计数公式为：nb：计数的白细胞总数，nc：计数板使用次数，np：吸管使用次数pcbnnnCV2227.46.4100++=计数板使用评价优点：为WHO推荐的参考方法，设备简单、费用低廉、简便易行，在严格规范条件下，可用于校准血液分析仪及其结果异常的复查，多次重复（10-20次）测定的均值可作为校正血细胞分析仪的参考值。适用于日检测量少的基层医疗单位和分散检测。缺点：费时，受吸血量和血细胞计数板的质量、细胞分布状态以及检验人员技术水平等因素的影响，精密度较低。计数板使用考核方法1．两差比值法随机抽取1份标本重复计数，该份标本在短时间内2次计数细胞数之差与2次计数细胞数之和的
标准
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差平方根之比，即为两次比值。适用于个人技术考核，也可用于复查与评价结果的准确性及治疗效果。2121xxxxr+−=r:两差比值；χ1、χ2分别为两次数得的细胞数。质量得分=100-（r×20.1）质量得分质量等级意义90～100A优80～89B良70～79C中60～69D及格<60E不及格血细胞计数质量得分与评价根据统计学理论，两差比值>1.99，则2次结果有显著性差异，故失分系数为（100-60）/1.99=20.1。2．双份计数标准差评价法采用多个标本，每个标本均作双份计数，用每个标本的双份计数之差计算标准差，然后求得变异系数及质量得分。nxxx221∑∑+=()nxxs2221∑−=%100%×=xscvn:标本数；χ1、χ2分别为同一样本两次计数的细胞数。质量得分=100-（CV×2）本法适用于个人技术考核及室间质量评价。 幻灯片编号1 幻灯片编号2 幻灯片编号3 幻灯片编号4 二、计数板使用 幻灯片编号6 计数板使用质量保证 幻灯片编号8 幻灯片编号9 幻灯片编号10 幻灯片编号11 幻灯片编号12 幻灯片编号13 幻灯片编号14 计数板使用评价 计数板使用考核方法 幻灯片编号17 幻灯片编号18
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