生物安全实验室管理规范

生物安全实验室管理 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 北京市平谷区结核病预防控制中心实验室 2009年 1 目录 第一章 微生物实验室概况 1.1实验室简介……………………………………………………………………………2 1.2实验室平面图…………………………………………………………………………2 1.3危害评估………………………………………………………………………………3 第二章 结核病实验室生物安全概述 2.1痰涂片镜检实验室基本要求…………………………………………………………4 2.2结核分枝杆菌培养实验时基本要求…………………………………………………5 2.3结核分枝杆菌抗结核药物敏感试验实验室基本要求………………………………5 第三章 管理体系与组织结构，职责与责任 3.1实验室负责人职责……………………………………………………………………6 3.2实验室技术人员职责…………………………………………………………………7 3.3实验室辅助人员的职责………………………………………………………………7 3.4对实验室工作区域负责………………………………………………………………7 3.5个人责任………………………………………………………………………………8 3.6加班工作人员职责……………………………………………………………………9 3.7负责维护、修理的工作人员…………………………………………………………9 3.8访问者及进修人员……………………………………………………………………10 3.9其他规定………………………………………………………………………………10 3.9.1清洁工…………………………………………………………………………..10 3.9.2儿童…………………………………………………………………………… .10 3.9.3宠物………………………………………………………………………….….10 第四章 实验室人员培训、考核 实验室人员培训、考核…………………………………………………………………..11 第五章 职业健康和健康监测 5.1计划生育和怀孕………………………………………………………………………12 5.2实验室人员健康监测…………………………………………………………………12 5.3实验室人员的免疫预防………………………………………………………………13 5.4发生事故后的人员管理………………………………………………………………13 第六章 实验室 管理制度 档案管理制度下载食品安全管理制度下载三类维修管理制度下载财务管理制度免费下载安全设施管理制度下载 、技术规范与操作规程 6.1实验室的运行制度……………………………………………………………………14 6.1.1实验室环境条件………………………………………………………………..14 6.1.2管理要求………………………………………………………………….…….14 6.2实验室仪器设备的使用规范…………………………………………………………14 6.3个人防护用品使用规范………………………………………………………………15 6.4实验室消毒规程………………………………………………………………………15 6.5实验室废弃物安全处理程序…………………………………………………………18 2 6.6尖锐器具安全操作规程………………………………………………………………19 6.7紧急情况和事故报告程序……………………………………………………………19 第七章 实验室一般的安全注意事项 7.1使用吸管和移液器……………………………………………………………………24 7.2防止感染性物质扩散…………………………………………………………………24 7.3生物安全柜的使用……………………………………………………………………25 7.4避免吸入感染性物质，避免皮肤和眼部接触感染性物质…………………………25 7.5避免传染性物质的意外侵入…………………………………………………………26 7.6分离血清………………………………………………………………………………26 7.7离心机的使用…………………………………………………………………………26 7.8混匀器、搅拌器的使用………………………………………………………………27 7.9研磨器的使用…………………………………………………………………………27 7.10冰箱和速冻器的使用和保养………………………………………………………..28 7.11开启装有冻干传染性物质的安瓶…………………………………………………..28 7.12关于血液、体液、组织和排泄物的特殊预防措施………………………………..29 7.13玻璃和“锐器”……………………………………………………………………..29 7.14用于显微镜技术的薄膜和图片……………………………………………………..29 7.15消毒…………………………………………………………………………………..29 第八章 病原微生物采集、包装、运输、接收制度 8.1安全指南………………………………………………………………………………30 8.2标本采集的原则………………………………………………………………………30 8.3标本的选择与采集……………………………………………………………………31 8.4标本的接收和拒收标准………………………………………………………………32 8.5标本容器………………………………………………………………………………33 8.6接收标本………………………………………………………………………………33 8.7打开包装………………………………………………………………………………33 第九章 菌种(株)的管理 9.1菌(毒)种及样本的保管、使用和销毁制度………………………………………34 9.2实验室菌(毒)种使用管理 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ……………………………………………………35 9.3结核菌培养物、菌种包装与运输……………………………………………………35 9.4结核分枝杆菌与其它致病性分支杆菌销毁要求……………………………………36 第十章 实验室安全管理 10.1实验室用电安全……………………………………………………………………..37 10.2实验室进食、饮水和禁烟政策……………………………………………………..37 10.3禁止吸烟……………………………………………………………………………..37 第十一章 重要的电话号码 电话号码…………………………………………………………………………………..38 3 前言 《微生物实验室生物安全手册》介绍了微生物实验室的相关生物安全观念和制度，总结和补充了一些重要的生物安全指导原则和管理规程，较具体地规定了生物安全要求和职责，并始终强调实验室管理层和个人责任对实验室生物安全的重要作用。本手册依据《北京市疾病预防控制系统病原微生物实验室生物安全管理规范》， 2004年中华人民共和国国务院令424号《病原微生物实验室室生物安全管理条例》和2006年中华人民共和国卫生部《人间传染的病原微生物名录》制定的，所有微生物实验室工作的在职职工、访问者都必须严格遵守本手册。 中心实验室 2009年11月 4 第一章 微生物实验室概况 1.1实验室简介 目前，北京市平谷区结核病预防控制中心实验室所从事的常规工作 有: ?临床常规生化检验 ?痰结核菌涂片检查 ?痰结核菌分离培养 1.2 实验室平面图 大厅 药房 细菌室 药库 办公室 放射科 楼道(一 生化室 层) 临检室 配电室 5 1.3 危 害 评 估 2004年11月12日中华人民共和国国务院令424号颁布了《病原微生物实 验室生物安全管理条例》，2006年1月11日中华人民共和国卫生部颁布了《人 间传染的病原微生物名录》。在这些条例中，明确规定目前对于微生物实验室相 关病原微生物的操作应遵从卫生部有关规定，它们的危害程度分类、实验活动所 需生物安全实验室级别以及运输包装分类参见下表。 表1. 细菌分类名录 e病原菌名称 实验活动所需生物安全实验室级别 危害程运输包装分类 序度分类 号 非感染 中文大量活动物感染样本检UN 编学名 性材料A/B abc名 菌操作 实验 测 号 d的实验 牛型第二类 ABSL-3 BSL-2 BSL-1 A UN Mycobacterium 分枝6. BSL-3 2814 bovis 杆菌 第二类 ABSL-3 BSL-2 BSL-1 A UN 结核Mycobacterium 2814 分枝7. BSL-3 tuberculosis 杆菌 6 第二章 结核病实验室生物安全概述 实验室环境安全:根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定，结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级(Laboratory Biosafety Level 3，BSL-3)的环境中进行;样本检测(包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取等初步检测活动)可以在符合生物安全二级(Laboratory Biosafety Level 2，BSL-2)的环境中进行。实验室所用设施、设备和材料(含防护屏障)均应符合国家相关的标准和要求。 实验室操作安全:具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作，实验人员应该认真负责，严格按照标准化、规范化的操作程序进行各项实验室操作。 菌种或样本运输安全:为保障人体健康和公共卫生安全，在运输可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本时，须按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》的要求进行包装、运输、操作、保藏和管理。 废弃物处理安全:为了防止疾病传播，保护环境，保障人体健康，医疗废弃物的处理应该严格按照《中华人民共和国传染病防治法》和《中华人民共和国固体废物污染环境防治法》以及《医疗废物管理条例》的相关规定妥善处理。 2.1痰涂片镜检实验室基本要求 1(实验室应有实验室分区(痰涂片染色区域和读片镜检区域)，布局应该符合生物安全二级(BSL-2)防护的要求; 2(准入规定:在实验室门上应该标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准的人员不可进入实验室工作区域，实验室的门应该随时关闭; 3(个人防护:在实验室工作时，应该穿防护服、隔离衣，配戴口罩(面具)和手套等; 4(实验室墙壁、天花板和地板应当易清洁、不渗液以及耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑; 5(实验操作台面应能耐热防水，耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀; 7 6(实验室内应保证操作时的照明，避免不必要的反光和闪光; 7(实验室应设置洗手池、洗眼器或喷淋设备; 8(实验室中的器具和实验台应坚固耐用，在实验台、生物安全操作柜和其他设备之间及其下面应有足够的空间以便于清洁卫生; 9(实验室中可开启的窗户应安装纱窗; 10(实验室应有适当的消毒设备; 11(在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置; 12(实验室应该装备开展痰涂片检查所需要的仪器和设备。 2.2结核分枝杆菌培养实验室基本要求 1(满足国家生物安全二级的基本要求; 2(准入规定:在实验室门上应该标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准的人员不可进入实验室工作区域，实验室的门应该随时关闭; 3(个人防护:在实验室工作时，应该穿防护服、隔离衣，配戴口罩(面具)和手套等; 4(实验室墙壁、天花板和地板应当光滑、易清洁、不渗液以及耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑; 5(实验操作台面应能耐热防水，耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀; 6(实验室门应带锁并可自动关闭，实验室的门应有可视窗; 7(实验室内应配备二级生物安全操作柜、高压蒸汽灭菌器以及分离培养所需的设备等; 8(应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置; 9(有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全操作柜、冰箱等应设备用电源; 10(实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识; 11(应有足够的存储空间摆放物品以方便使用，在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。 2.3结核分枝杆菌抗结核药物敏感性试验实验室基本要求 结核分枝杆菌药物敏感性试验要求在生物安全二级及以上环境中进行。 8 第三章 管理体系与组织结构，职责与责任 微生物实验室的各项实验活动应在北京市平谷区结核病预防控制中心生物安 全领导小组和北京市疾病预防控制中心专家委员会的指导下有序进行，并随时接 受质量管理部门或人员对责任范围内的生物安全工作进行的监督检查。 实验室主任负责整个实验室的全局工作，在实验室主任不在实验室的时候， 具体的健康和安全事宜由主任指定人员负责。 实验室安全员有权利和义务给实验室主任提出建议，并协助实验室主任处理 实验室内有关健康与安全的事宜。 为了监督这些政策的实施，并讨论有关健康与安全的问题，成立了一个健康 与安全委员会，委员会由实验室主任、实验室安全员组成，以监督实验室中具体 的活动。 实验室每个区域均设有安全负责人，负责处理责任范围内的有关健康与安全 的事宜。 3.1 实验室负责人职责 1. 负责相关实验活动的日常管理，贯彻生物安全相关法律、法规、制度、 规程; 2. 组织相关人员按要求进行培训、考核、体检和预防接种; 3. 审批相关人员出入实验室，监督检查制度、法规的执行情况，纠正违规 现象，必要时停止实验活动; 4. 组织对本实验室生物安全设施、设备的改造、维修或配置、更新要求; 5. 组织相关实验活动及特定操作程序的危害评估，组织实施实验室意外事 件的紧急处置和一般实验室生物安全事故的认定、危害评估、处置; 6. 及时上报实验室重大生物安全事故情况，提出处理建议，同时尽量采取 有效措施控制危害范围，根据上级决策实施事故处理工作，参与相应危 害评估。 9 3.2 实验室技术人员职责 1. 在实验室负责人的领导下开展工作; 2. 严格遵守实验室生物安全管理制度，按规定接受培训、考核、体检和预 防接种; 3. 按要求执行标准操作规程和仪器设备操作规程，做好实验记录; 4. 按规程进行常规消毒和意外事件紧急处理; 5. 发现生物安全隐患或发生事故及时向有关上级报告; 6. 参与相关工作的危害评估及生物安全事故认定与处置。 3.3 实验室辅助人员的职责 实验室辅助人员包括:专职消毒人员、废弃物管理人员、洗刷人员、保洁人员、负责维护、修理的人员等 1. 严格遵守实验室生物安全管理制度，接受必要的培训、考核、体检和预 防接种; 2. 对操作过程关键步骤进行记录; 3. 按规程进行常规消毒和意外事件紧急处理; 4. 发现生物安全隐患或发生事故及时向有关上级报告，参与责任范围内安 全事故的紧急处置。 3.4 对实验室工作区域负责 微生物实验室主任负责本实验室的所有有关健康和安全的事宜，实验室主任不在实验室的时候，由主任指定人员负责。如果你行使实验室安全员的角色，那么在你的权限内，你将对实验室内所有的工作人员、访问者的健康与安全负责。 你必须确保: ? 你的实验室和其他区域，你的所有仪器设备和其他设施处于正常工作 状态，有良好的维护措施以确保工作时安全。 ? 有足够的经过培训的工作人员，能确保每天的工作安全无误。 ? 在实验室的相应区域内，你的工作人员的工作和行为是安全的。 ? 能够对各种危险进行完全和正确的评估。 ? 在进行任何与危险性材料相关的工作之前，一定要通知实验室主任和 实验室安全员。 10 ? 在处理各种可能发生的紧急情况时有足够的应急措施。如果发生任何 安全问题的时候，要及时通知实验室主任，在开始进行危险性工作之 前，一定要得到实验室主任的允许。 ? 各项工作的安全须知应该以文件的形式记录下来，在进行相应工作的 实验室区域，有相应的实验室标准操作规程(SOP)。 ? 实验室工作人员应该意识到，在工作区域动手脚、大声玩闹或开玩笑 可能会导致危险的发生。 3.5 个人责任 你必须与实验室主任和实验室安全员通力合作，以确保工作环境健康和安 全。不管你的职位高低，你都有责任保护自己和他人免受由于你的行为或工作而 带来的危险。 你必须确保: 在进行可能导致危险发生的工作之前，一定要得到实验室主任的许? 可。 ? 你已经通读本手册，并理解其中的内容，每次做实验之前，首先要对 自己所从事的实验做一个危险评估。 ? 你对自己所从事的工作完全了解，并能够正确的操作以尽可能地保证 安全。你应该完全了解你所从事的工作可能产生的对自己和他人的危 险，并能够采取预防措施。如果你对自己的工作的安全性有疑问的话， 一定要请教实验室安全员或实验室主任，直到你的疑问完全消除。 ? 在做任何事情之前都要有周密的计划，并精心准备，同时必须有书面 的 工作计划 幼儿园家访工作计划关于小学学校工作计划班级工作计划中职财务部门工作计划下载关于学校后勤工作计划 。你必须了解自己将要进行的工作的程序以及注意事项， 并且在所有实验室工作人员都同意知情的情况下进行。 ? 你必须对你的实验的全过程负责，并且尽可能使每件事情做到安全。 要确保实验室设备和装置安全，不要置之不理。在实验结束后，任何 物品都要安全地放好，或者安全地处理掉。 ? 要有必要的控制措施，保证工作有条不紊地进行，紧急事件的处理要 得当。 ? 任何人员在任何时间进入工作区域要有准入制度。这包括访问者或其 他实验室的工作人员进入免疫预防所实验室工作区域要受到限制。在 门上或可能产生危险地方的附近应该有明显的警告提示。你必须提醒 其他实验室的工作人员，由于你的工作可能造成对他们的危险。 11 ? 在非工作时间，或你自己一个人的时候，或没有相关的知识，或没有 得到实验室主任同意的情况下，不要进行有危险的工作。 作为一个实验室工作人员，你必须将已经发生的威胁健康和安全的问题尽快 向健康与安全委员会和实验室安全员报告。如果问题没有得到解决，则必须向实 验室主任或结控中心的领导报告。 3.6 加班工作人员职责 如果你在非常规工作时间内工作，例如每天晚上7点之后工作，你必须通知 微生物实验室安全员或实验室主任，或北京市平谷区结核病预防控制中心办公室。向他们报告你还将在实验室内停留多久，这样做是有益处的。 如果你在常规工作日内早于早6点、或晚于晚7点进入实验室内，亦或你在 周末或公假日进入实验室，你必须通知实验室安全员或实验室主任，或北京市平 谷区结控中心办公室。 在非工作时间，或你自己一个人在的时候，或没有相关的知识，或没有得到 实验室主任同意的情况下，不要进行有危险的工作。 3.7 负责维护、修理的工作人员 当工作人员进行维护、修理工作的时候，一定要保证这些区域内是安全的， 同时填写好“处于污染环境”的告示，并且要得到该区域负责人的同意，这些都保 证了人们能够提前知道有维修人员在工作。在有些情况下，如果某些仪器需要送 到修理公司去维修的话，一定要对这些仪器进行消毒，并贴上“处于污染环境” 的告示。 推销商或其他服务人员进入实验室是有特殊规定的。在这些人员进入实验室 之前，要让他们知道这些规定。 12 3.8 访问者及进修人员 实验室要负责访问者及进修人员的健康与安全。访问者及进修人员初到实验室的时候，一定要向北京市平谷区结控中心办公室报到，以获得通行证，并通过实验室安全考试后，方可允许进入实验室。访问者必须时时有人陪同，而且必须向他们讲明在访问期间可能遇到的危险。 北京市平谷区结控中心安全条例，以及实验室健康与安全手册同样适用于停留时间超过7天的访问者及进修人员。 在有实验室工作人员陪同的情况下，访问者才能被允许进入实验室，同时他们也必须穿防护服，适当系紧，除了特殊需要的情况下，不准触摸任何物品。 应该告知访问者在实验室内不准饮食，不准抽烟，不准化妆，不准将私人物品带进实验室。不能将他们带到一个已知的有感染性危险的区域。在离开实验室之前、脱去防护服之后，访问者必须彻底地洗手。 如果在进行访问的过程中，发生了意外事故或危险，必须马上报告实验室安全员和实验室主任。 3.9其他规定 3.9.1 清洁工 清洁工通常都是在实验室工作人员下班以后才开始工作。实验室相应区域的工作人员有责任和义务通知清洁工他所清洁的区域内有无危险因素。 3.9.2 儿童 虽然儿童(小于16周岁)允许进入北京市平谷区疾病预防控制中心大楼，但他们不允许进入实验室，进入北京市平谷区结核病预防控制中心大楼的儿童一定要有监护人监护。 3.9.3宠物 北京市平谷区结核病预防控制中心规定，在实验室内，不允许携带宠物进入。 13 第四章 实验室人员培训、考核 微生物实验室实验人员和辅助人员应保持很强的安全意识，进入实验室的人员应了解并保证工作和个人安全。所有参加实验的人员必须经安全操作培训，考核合格后，颁发相应的实验室上岗证方可从事此项工作。实验室上岗证由中心生物安全委员会颁发，对新进入实验室的人员应进行岗前培训，并采取闭卷考试和实际操作形式进行考核。 由实验室主任组织培训，生物安全管理员整理并归档培训记录。培训内容主要包括两方面:通用知识技能培训和专项知识技能培训。 实验室人员的通用知识技能培训，主要包括实验室工作的基本知识、基本技能，以保证实验室人员遵守规范的标准操作规程和树立安全意识。每一个实验室人员必须经过下列培训。 1、国家有关传染病防治、生物安全的法律、法规、条例; 2、卫生部、中心和本实验室工作规章制度; 3、实验室基本操作标准、规范; 4、实验室生物安全和个人防护; 5、实验室清洁及消毒方法。 实验室人员专项知识技能培训主要是针对不同的专业特点，对重点岗位工作人员开展特殊的专业培训。包括: 1、生物安全实验室工作的特殊要求; 2、毒菌种和感染性物质的收集、保藏、运输、使用和销毁要求 2、生物安全知识和事故应急处理技能培训; 3、特殊实验室设备的使用和维护。 14 第五章 职业健康和健康监测 北京市平谷区结核病预防控制中心医疗单位为平谷区医院，如果你有健康方面的问题，请到区医院就诊，实验室均设有急救箱，可以预防和治疗一些简单的与工作相关的疾病或者损伤。 5.1计划生育和怀孕 不论对男性工作者，还是对女性工作者来说，化学物质、放射源和微生物感染都可能影响生殖器官。良好的实验室操作技术可有效保证所有的实验室工作人员免受这些危险因素的侵袭。 在怀孕期间接触某些有害化学物质、感染性物质可能对胎儿造成损害。如果你计划怀孕或者已经怀孕，你必须尽早去医院与医生商讨职业健康方面的问题，讨论在这个期间可能发生的危害。 某些因素可能会影响精子的数量。这种情况下，请尽早去医院与医生商讨职业健康方面的问题。 5.2 实验室人员健康监测 建立实验室人员健康监护档案 所有实验室的工作人员进实验室前都要进行健康体检，保留本底血清。必要时收集血清与本底血清同时进行有针对性的检测，检验结果记入健康监护档案。 健康监护部门(质控科)应定期了解实验室人员健康状况，发现异常情况及时安排体检、就医，体检及就医情况记入健康监护档案。实验室人员应注意个人身体健康情况，出现不适及时报告。 15 实验室主任在批准外来学习、工作人员进入实验室前应了解其健康状况，必要是可先行安排进行临时性体检，档案保留。 5.3 实验室人员的免疫预防 实验室工作人员应根据岗位需要进行免疫接种和预防性服药，免疫接种时，应考虑适应症、禁忌症、过敏反应等情况并记入健康监护档案。 实验室主任/负责人应制定年度免疫接种计划，报主管领导批准后由实验室组织实施。免疫接种情况应记入健康监护档案。 实验室主任/负责人可根据工作开展情况对实验室工作人员进行必要的临时性免疫接种和预防性服药，并记入健康监护档案。 对体检结果异常的人员应随时进行必要的免疫接种或采取其他预防手段，并记入健康监护档案。 发生实验室意外事件或生物安全事故后应根据需要进行必要的应急免疫接种或预防性服药，并记入健康监护档案。 5.4 发生事故后的人员管理 实验室人员必须在身体状况良好的情况下才能进入实验室工作，发生发热、呼吸道感染、开放性损伤、怀孕等或因工作造成疲劳状态免疫耐受及使用免疫抑制剂等情况时，需由实验室负责人同意从事相关工作，但不宜从事高治病性病原微生物的相关工作。 对从事高致病性微生物实验的工作人员实行健康监测与报告，出现体温升高或可疑症状体征时应及时向实验室安全员和实验室主任报告，并立即停止工作，留取血样及其它相关标本，进行必要的医学观察和处置。 从事与高致病性微生物操作的工作人员，在连续工作后进行必要的医学观察，发现异常情况，由实验室主任决定人员临时性或永久性调离岗位。临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检，体检结果达到岗位健康要求后，由实验室主任批准其上岗，永久性调离岗位的需收回上岗证。 16 第六章 实验室管理制度、技术规范与操作规程 6.1 实验室的运行制度 6.1.1 实验室环境条件: 实验室有良好的采光(自然光或日光灯)、通风(每个实验室与办公室都 安装有空调)、防尘条件;墙、顶棚和地面光洁，能耐受消毒液，地面不滑。 实验台不透水，耐酸、碱、有机溶剂，并由中度耐热的材料制成;实验室内 安装有紫外灯;配备有足够的消毒剂及消毒器材;在二级生物安全实验室配 备有相应的生物安全设备(生物安全柜、高压灭菌器等)。 6.1.2 管理要求: 实验室工作区严格区分实验区与办公区，实验区也要严格区分清洁区和 污染区。无关人员严禁进入实验室内，以避免实验室污染。 每个工作区域设有安全卫生负责人，负责该区域的环境卫生、健康与安 全等事宜。 工作人员进入实验室时应穿工作服，换鞋，进行无菌操作时应穿隔离服， 戴帽子、口罩和手套。 实验前后均应对工作区域进行必要的清洁，所有检验标本、培养物和使 用过的污染器材必须经消毒剂消毒或高压灭菌后清洗。 严禁在实验室内饮食和吸烟，冰箱内不得存放食物或其它与实验无关的 物品。严禁在实验室区域洗个人衣服。 非本实验室人员进入实验区，需经实验室主任批准。并在本实验室人员 陪同与指导下开展相关实验活动。 6.2 实验室仪器设备的使用规范 6.2.1 仪器设备摆放:应放置在防尘、防潮、防震、防腐蚀、防电磁干扰、通风、避光、温度适当的室内。 6.2.2 建立仪器设备档案:包括购置时间、设备说明书、维修记录和保管人等内容。 6.2.3 制订操作规程:仪器设备的保管人和使用人必须按操作步骤进行操作，不熟悉操作规程者不能独立使用。 6.2.4 仪器设备使用记录:每次使用时要记录使用日期、时间、运行情况等，并 17 要有使用人的签名。 6.2.5 建立定期维护保养制度:仪器设备的保管人和使用人必须认真做好日常维护保养工作，如发现故障应向主管部门报告并及时进行维修。 6.2.6 计量仪器的检定:每年对计量仪器进行计量检定，合格后方可使用。 6.3个人防护用品使用规范 6.3.1 一级生物安全防护实验室: 应穿工作服，手上有皮肤破损或皮疹时应戴乳胶手套 6.3.2 二级生物安全防护实验室: 应穿防护服、专用工作鞋或戴鞋套，进行操作时必须戴一次性口罩、帽 子和乳胶手套。 离开实验室时，必须脱下个体防护用品并将其留在实验室内，不得穿着 外出。一次性个体防护用品按实验室废弃物处理，污染的工作服应先在实验 室内消毒，然后统一洗涤，无法清除污染的按废弃物处理。 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴乳胶手套;入可能发 生感染性材料的溢出或溅出，应戴两副手套;不得戴着手套离开实验室;一 次性手套不得清洗和再次使用。 当实验操作不可能在生物安全柜中进行而必须采取柜外操作时，应视需 要使用面部防护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护 设备)。 可能产生病原微生气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(2级为 宜)或其它物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。 高浓度或大容量感染性材料的处理均在生物安全柜(2级为宜)或其它 物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。进行均毒种开封和保存、标本 分装、标本接种、可疑致病菌分纯和阳性分离物鉴定等实验操作，或有可能 产生气溶胶的实验操作时，均须在二级生物安全柜内进行。 6.4 实验室消毒规程 6.4.1 室内空气 可开窗通风，自然换气，条件允许时采用排气扇机械通风。 3用紫外线灯对室内空气消毒时，平均功率为1.5W/m,照射时间?30分钟。 18 6.4.2 表面消毒 6.4.2.1 地面消毒:实验室地面要湿式拖扫。可用0.4%过氧乙酸拖地或0.2%~0.5%过氧乙酸喷洒，也可视情况用有效氯浓度为0.1%~0.5%(1g/L~5g/L)的 2消毒剂喷洒或拖地，喷洒消毒剂的用量不得少于100mL/m。各实验室拖把应专用，污染区和清洁区不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分钟，用水洗净，悬挂晾干，最好放在阳光下晾晒后备用。 6.4.2.2 物体表面消毒: 实验台面、桌椅、橱柜、运输工具、门把手、实验记录夹等物品的表 面可用0.2%~0.5%过氧乙酸喷洒或有效氯浓度为0.1%~0.5%(1g/L~5g/L)的消 毒剂喷洒、擦拭。 物品表面被明显污染时，应立即用0.5%过氧乙酸喷洒或有效氯浓度为 0.5%(5g/L)的消毒剂喷洒覆盖于污染表面，使消毒剂浸没污染区域，作用 30~60分钟。 6.4.3 实验器材消毒: 压力蒸气灭菌和干热灭菌的方法适用于耐高温、高湿的医用器械和物品， 如金属器材、玻璃器皿。 玻璃器材:使用过的玻璃吸管、试管、离心管、玻片、玻璃棒、三角瓶 和平皿等应立即浸入0.5%过氧乙酸或有效氯浓度为0.1%~0.5%(1g/L~5g/L) 的消毒剂中作用60分钟以上，消毒后用超声波清洗装置洗涤、沥干，使用前 再进行压力蒸汽灭菌处理。 使用后的一次性帽子、口罩、手套、工作服、防护服按实验废物处理。 重复使用的耐热塑料器材可浸入0.5%~1.0%肥皂液或洗涤剂溶液煮沸 15~30分钟，然后清水洗涤、沥干后，进行压力蒸汽灭菌处理。 重复使用的不耐热塑料器材可喷洒0.5%过氧乙酸或有效氯浓度为 0.1%~0.5%(1g/L~5g/L)的消毒剂作用60分钟以上，然后清水洗涤沥干。 橡胶制品:污染的橡胶手套、吸液球等可用含肥皂液或洗涤剂的溶液煮 沸15~30分钟，然后清水洗涤、沥干后，进行压力蒸气灭菌处理。 污染的棉制工作服、帽子、口罩等放入专用的污物袋内运送，使用专用 设备洗涤，可选用70?以上热水加洗涤剂洗涤消毒处理60分钟以上。污染 严重时，随时喷洒消毒剂消毒或放入专用的污物袋中，进行压力蒸气灭菌处 理。 需要保留被污染的纸张类文件时，可用环氧乙烷熏蒸消毒。 6.4.4 仪器设备消毒: 不宜加热、不能用消毒剂浸泡的仪器，发生局部轻度污染时，可用75% 19 医用酒精擦拭，作用30分钟以上。必要时采用甲醛熏蒸消毒。 离心机、离心容器未封闭，或离心的容器破裂、离心液体外溢时，离心 机内部应用75%医用酒精擦拭，作用30分钟以上。必在时采用甲醛熏蒸消毒。 6.4.5 剩余标本及容器消毒: 废弃的剩余标本和容器应按照实验废弃物的相关规定进行消毒处理。 需要保留的剩余标本应装入密闭包装物中，对包装表面进行有效消毒后 妥善保存。 6.4.6 实验废弃物消毒:必须经过必要的消毒，去除污染后按废弃物处理要求处理(见废弃物管理规定和处理要求)。 6.4.7 清除手部污染:实验室人员接触和处理感染性或潜在感染性材料后，即使戴有手套，在消毒、摘除并安全处置后也必须洗手。 6.4.7.1 洗手设施及用品: (1)实验室的每个房间必须有洗手池，最好安装在出口处，不得用于其他目 的; (2)洗手必须使用流动水; (3)建议使用脚控、肘控或感应式水龙头。使用需要用手关闭的水龙头，则 应使用纸巾或毛巾覆盖水龙头后关闭水龙头，防止污染已洗净的手; (4)建议使用感应式洗手液容器、杀菌洗手液或肥皂，肥皂应切成小块，肥 皂盒应保持打开状态，以便水分蒸发。 (5)建议使用暖风干手器烘干手或用纸巾擦干手; (6)如没有条件彻底洗手或洗手不方便，应用75%医用酒精或有效的免洗手消 毒剂擦手清除手部的轻度污染。 6.4.7.2 洗手时机:摘除手套后、离开实验室前、进食或吸烟前、使用卫生间前后、进行有交叉污染可能的不同操作前后都应洗手。 6.4.7.3 洗手程序及技术规范:打开水龙头，用流动水浸湿双手，关闭水龙头;取适量洗手液于掌心，双手充分搓擦，使双手完全抹上洗手液，然后按以下6个步骤进行搓擦，洗手全过程应不少于15秒钟。 (1)双手手指并拢，掌心相对，相互搓擦;一只手手心对另一只手手背， (2)双手沿指缝相互搓擦，两手交替进行; (3)双手掌心相对，十指交叉，沿指缝相互搓擦; (4)弯曲各手指关节，双手相互搓擦; (5)一只手握住另一只手大拇指，旋转搓擦，两手交替进行; (6)一只手指尖先在另一只手掌心旋转搓擦，两手交替进行。 搓擦完毕后，打开水龙头，用流动水冲洗干净，关闭水龙头。烘干或擦干双手。 20 6.5 实验室废弃物安全处理程序 6.5.1 处理要求 实验室由接受过相关培训的指定人员负责实验室废弃物的收集、运送工作。 实验室内和实验台上必须设有收集实验废弃物的容器。 需要进行压力蒸汽灭菌的实验室废弃物，应放置在无渗漏、耐压力蒸汽并能够被蒸汽穿透的包装容器中。灭菌处理后，用专用运输工具运送至暂存地点。 使用消毒液消毒实验室废弃物时，应使其与废弃物充分接触，不能有气泡阻隔，并保证足够的作用时间。 使用周转箱运送实验室废弃物时，周转箱应加盖、密闭。运送实验室废弃物的周转箱应能够防渗漏、遗撒，使用后应进行清洁、消毒。 记录实验室废弃物处理情况并存档备查，处理记录必须保存3年。 6.5.2 处置程序 1(感染性实验废弃物及处理方法: 感染性实验废弃物包括培养基、标本和菌(毒)种保存液、血液、血清、临床标本，用过的一次性手套、口罩、帽子，用过的试管、吸管、移液器吸头，用过的一次性实验用品及实验器械携带或可能携带病原微生物的实验废弃物。 感染性实验废弃物应进行压力蒸汽灭菌或放入浸入有效氯含量不低于0.5%消毒剂中浸泡24小时;进行压力蒸汽灭菌处理的，应在包装外粘贴指示标记(以便分辩是否经过高压)，表明压力蒸汽灭菌处理要求及实验废弃物责任人姓名(实验室高压消毒可省去此步骤)。灭菌或消毒处理后再使用黄色垃圾袋包装，按要求贴上竟是标志及中文标签，运送至暂存地点贮存。 2(病理性实验废弃物及处理方法: 病理性实验废弃物包括废弃的人体组织(病理切片后剩余的人体组织、病理腊块等)或实验动物组织及尸体。实验用试虫在实验结束后，用合格的杀虫剂杀灭安并例行实验废弃物处理。 病理性实验废弃物应使用黄色垃圾袋盛装，按要求贴上警示标志及中文标签，运送至暂存地点于,20?冰柜贮存。 3(损伤性废弃物及处理方法: 损伤性废弃物包括针头、缝合针、解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯，实验载玻片、玻璃试管、玻璃安剖等能够刺伤或者割伤人体的废弃的实验利(锐)器。 所有损伤性废弃物(不论利器是用做感染性实验还是非感染性实验)，都必须放入符合要求的利器盒里(可以是广口塑料瓶或耐重硬纸盒里等)，容器装满3/4后封盖，(必要时先进行压力蒸汽灭菌处理)，再使用黄色垃圾袋包装，按要 21 求贴上警示标志及中文标签，运送至暂存地点贮存。 4(药物性废弃物及处理方法: 药物性废弃物包括过期、淘汰、变质或者被污染的诊断试剂、疫苗和血液制品等。 少量的药物性废弃物可以按感染性废物处理。大量药物性废弃物，使用方渗漏包装，按要求贴上警示标志及中文标签，运送至暂存地点贮存。 5(化学性废弃物及处理方法: 化学性废弃物是指需废弃的具腐蚀性、易然易爆性、有毒性、有害性化学试剂或化学消毒剂等化学物品。 对强酸、强碱等腐蚀性废液应分开收集，在质量监督员监督下及时进行中和处理后排放下水道;对低浓度的酸、碱废液，可以用大量清水“无限稀释”后排放下水道。极个别实验室可能用到具有放射性物质的诊断试剂，原则上在确保消除生物危险后，再按诊断试剂说明妥善处理。对易然易爆性、有毒有害性化学物品，尽可能正确详细标示内容物和组成成份，运送至指定的暂存地点贮存。 6.6 尖锐器具安全操作规程 实验室内应尽量避免使用注射器、皮下注射针头等尖锐器具。如遇特殊需要，参照以下规程: 注射器、皮下注射针头等尖锐器具用过后不应重复使用，包括不能从注射器上取下、回套针头护套、截断等，应将其完整地置于盛放锐器地一次性容器中。单独使用或带针头使用的一次性注射器应放在盛放锐器地一次性容器内焚烧，如需要可先高压灭菌。 盛放锐器地一次性容器必须是不易刺破的，而且不能将容器装得过满。当达到容量的四分之三时，应将其放入“感染性废弃物”的容器中进行焚烧，如果实验室规程需要，可以先进行高压灭菌处理。盛放锐器的一次性容器绝对不能丢弃于垃圾场。 6.7 紧急情况和事故报告程序 如果你遇到了紧急情况，请立即拨打实验室主任的电话()，北京市平谷区结核病预防控制中心办公室的电话(69962224)，或直接拨打119火警电话，110匪警电话以寻求帮助。 6.7.1 火灾和撤退程序 22 火灾:警报响起，请立即拨打实验室主任的电话，安保科的电话，或直接拨 打119火警电话。 其他紧急情况:请立即拨打实验室主任的电话，办公室的电话，或直接拨打 110匪警电话。 在撤退时: ? 关闭所有的门和窗。立即撤出大楼，不要停留。 ? 从最近的安全出口撤出。 ? 在远离大楼的区域内集合等待。 ? 不要停留整理个人物品。 ? 不要呆在过道或阻挡安全通道。 ? 危险没有解除前，任何原因也不要重新进入大楼。 不要开动汽车，否则会加重堵塞。 ? 如有其他疑问，请与实验室安全员及办公室联系。 6.7.2 事故/危险发生处理程序 如果遇到紧急情况的时候，请立即拨打实验室主任的电话，北京市平谷区疾病预防控制中心办公室的电话，或直接拨打110匪警电话。 你必须将所有的已发生的事故/危险情况报告给实验室安全员和实验室主任。 你必须在事故/危险记录本上如实地记录所有事故/危险发生的事故情况。 所有的与感染性材料相关的事故必须当做医疗紧急事故，如果发生在非工作时间，应向实验室主任汇报，并向医生寻求医疗救助。 在每一个实验室都必须陈列有上述的几个明文规定。 23 所应该采取的紧急救护程序包括: 6.7.2.1 发生重大事故/危险 如果大滴的危险液体溅落到地板上、实验台上或仪器上等就算重大事故/危险。此时需要迅速评估危险性，并警告其他工作人员。如果危险液体是生物材料、有放射性的或有毒的话，要立即让所有的工作人员撤离。用大量的水稀释具有腐蚀性的液体，如果是可燃有机溶剂释放的话，要尽快排空气体。 及时通知实验室的实验室安全员，实验室主任，以便采取进一步的措施。如果已经从实验室中撤出后，不要以任何理由再重新进入实验室，至少要保证有30分钟，以便危险能够解除。 6.7.2.2 发生小的事故/危险 如果小滴的危险液体溅落到地板上、实验台上或仪器上等就算轻微的事故/危险。此时需要用湿纸巾等有吸收能力的物品盖住受影响的区域(如果是有感染性液体滴落，需要用消毒剂盖住，反应10-15分钟，以去污染)。用更大吸收力的物品檫走液滴，然后在按常规处理。再次工作之前，如果必要的话，需要换手套和防护服。尽早通知实验室的实验室安全员，实验室主任，以便采取进一步的措施。 6.7.3 皮肤受到污染 如果皮肤上溅落了污染物，请立即用肥皂和水清洗受污染的区域，千万不要刮擦。 如果很高滴度的有感染性的液体滴落在皮肤上，那么需要用1%含氯(1000ppm)消毒液至少反应1分钟，然后用肥皂和水彻底地清洗受污染的区域。 如果有放射性的液体滴落在皮肤上，需要立即进行处理。如果用肥皂和清水不能去除污染物的话，那么需要轻轻地刮或使用去污剂。这种去污染方法可以防止污染的扩散，一般不会使皮肤变得粗糙。 24 如果有腐蚀性或刺激性的液体滴落在皮肤上，那么需要用大量的清水来清洗。处理的速度往往决定了损伤的程度。如果必要的话，请立即洗澡。 6.7.4 针刺或者割伤 如果皮肤破损的话，或者怀疑有针刺伤，请用力挤压伤口使血液流出，然后用大量的清水清洗。通知实验室的实验室安全员，实验室主任，以便采取进一步的措施。 6.7.5 液体溅入眼睛 如果液体溅入眼睛的话，请立即用大量清水冲洗，速度是起决定性作用的。不要揉眼睛，至少冲洗10分钟。 如损伤较严重需进一步到医院眼科进行治 6.7.6 衣物污染 如果衣物发生了污染，那么需要将受污染的衣物迅速脱下，以避免污染皮肤，并且避免进一步污染周围的环境。 如果是有感染性的物质污染了衣物，那么需要将其扔进高压袋，并且通知实验室安全员、实验室主任来进一步处理。 6.7.7 紧急救助 在实验室内设有急救箱。 如果在工作当中出现事故并造成损伤，请使用急救箱进行自救，如果没有奏效的话，请立即联系区医院联系或拨打电话999、120，以便取得救助。 如果是在非常规工作时间发生的事故，请尽快与实验室安全员或实验室主任取得联系， 以获得帮助。 25 在事故中，如果工作人员不能救治，需要到医院救治，那么必须由另一名实验室工作人员陪同。如果可能的话，陪同人员最好是实验室安全员。 6.7.8 事故记录与报告 发生大的事故的时候，必须立即记录在事故备忘录上，发生小的事故的时候，也应该尽快记录在事故备忘录上。事故备忘录由免疫预防所实验室的实验室安全员保管。 如果可能造成或已经造成人员损伤的，或者可能暴露在有毒的或有感染性的物质的时候，必须尽快向免疫预防所实验室的实验室安全员、实验室主任报告。 实验室主任有责任将在工作时间内(包括工作日外的工作时间)、或出差在外的工作人员发生的事故报告给中心主管领导。 如果事故可能造成人员的损伤但是还没有造成人员损伤的时候，也需要以同样的方法报告，以事实上的事故来对待。 6.7.9 出差在外发生的事故 如果事故发生在出差过程中，那么必须向当地的相关部门报告，出差回来后同时再向实验室补报，记录在事故备忘录 26 第七章 实验室一般的安全注意事项 7.1 使用吸管和移液器 1. 应始终使用移液器，必须严格禁止用嘴吸液。 2. 所有的吸管都应该有棉塞以减少对移液器的污染。 3. 绝不要向含有感染性因子的液体里吹气。 4. 感染性材料不能用吸管吹吸来达到混匀的目的。 5. 从吸管吹出液体时不要太用力。 6. 有标记的吸管要优于其它类型的吸管，因为无需吹出最后一滴液体。 7. 污染的吸管应立即浸没在含有适宜的消毒剂的防破碎的容器里。在处理 之前，应浸泡18,24小时。 8. 盛装废弃吸管的容器应放在生物安全柜里，而非外面。 9. 带有皮下注射针头的注射器不允许作为吸液之用。如用于吸液，应该用 钝套管代替针头。可以用工具开启覆盖瓶子的薄膜，这样就可以使用吸 液管了，减少使用皮下注射针头和注射器的次数。 10. 为防止从吸管滴落的感染性物质发生扩散，工作台上应放一块浸有消毒 液的纱布或吸湿性纸，使用后应高压灭菌或视为感染性废弃物处理。 7.2 防止感染性物质扩散 1. 为避免接种物过早从接种环上脱落，微生物接种环直径应为2,3mm并 且完全闭合，柄的长度不应超过6cm以最大限度减少抖动。 2. 应该使用密闭的微型电炉灭菌接种环，以免在开放式的本生灯火焰上灭 菌时感染性物质溅落。一次性的、无需灭菌的接种环要更好一些。 3. 酶促实验不应在载玻片上完成，以避免产生气泡和气溶胶扩散。可使用 小管、毛细管或用防护玻璃罩的方法。 4. 要高压灭菌和/或丢弃的废弃的标本及培养物应放在防渗漏的容器里，如 实验室用高压袋。 5. 每个工作周期完成后，应使用适当的消毒剂消毒工作区。 27 7.3 生物安全柜的使用 1. 应参照国家标准和相关文献向所有可能的使用人员阐明生物安全柜的 使用和限制性条款。 2. 生物安全柜只能在正常运转时方可使用。 3. 使用生物安全柜时，观察窗不要抬得过高。 4. 柜内尽量少放仪器和物品。不要阻塞后面气口处的空气流通。物品要先 经过表面消毒才可放到柜内的工作区。 5. 禁止在柜内使用酒精灯。它产生的热量会改变气流方向，也可能破坏滤 板。允许使用微型电炉，但无菌的一次性接种环更好。 6. 在柜内的所有工作都要在工作台中央或后部进行，并且通过观察窗能看 见柜内的操作。 7. 尽量减少操作者后面的人员走动。 8. 操作者不要频繁移动及挥动手臂以免破坏定向气流。 9. 前面的空气栅格不要被吸管或其它材料挡住，因为这样会干扰气流的正 常流动，引起潜在的污染和操作者的暴露。 10. 在操作结束后或下班前，应使用适宜的消毒剂擦拭生物安全柜的台面。 11. 生物安全柜的风扇在工作开始前及操作结束后至少要再运行五分钟。 7.4 避免吸入感染性物质，避免皮肤和眼部接触感染性物质 1. 在微生物学的实验操作中释放的较大颗粒和小液滴(直径大于5um)会 很快落在操作台表面以及操作者的手上。所以应该戴一次性手套。实验 人员做实验时不要接触嘴巴、眼睛和脸。 2. 不许在实验室里进食、饮水以及储存食品和饮料。 3. 实验室内不许嚼口香糖。 4. 实验室内不许化妆。 5. 在任何可能导致潜在的传染性物质溅出的操作过程中，应该保护脸、眼 睛、和嘴。 28 7.5 避免传染性物质的意外侵入 1、谨慎操作可避免由破裂的或有缺口的玻璃器皿引起的传染性物质意外感 染。只要有可能，就应以塑料器皿代替玻璃器皿。 2、做实验时倍加小心以及尽量少使用注射器和针头可减少与针头有关的意 外事故。对于许多实验技术来说，可用带有钝套管的注射器代替有针头 的注射器。用简单的工具来开启瓶子上的薄膜封口，这样就可使用吸管 了。 3、针头永远不要重新盖帽。不要把针头从注射器上拆下来(如果能拆下来 的话)，用过的一次性注射器要丢进有盖的防针刺的容器中。 4、应用塑料巴斯德管替代玻璃的。 7.6 分离血清 1、只有经过适当培训过的人员才可担任此工作。 2、戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。 3、只有好的实验室技术才能避免溅出和气溶胶产生，或将这种可能性降至 最低。吸血液及血清时要小心，不要倾倒。严格禁止用嘴吸液。 4、吸管用后应完全浸没在次氯酸盐或其它适当的消毒液里，并且在处理之 前，或洗刷及灭菌再利用前至少要浸泡18小时。 5、废弃的带有血点等的标本管，还有换下来的盖子，应当放到适当的、防 渗漏的容器中，以备高压和(或)焚烧。 6、每天都应新配制次氯酸盐溶液，用以清除溅出物及溢出物。 7.7 离心机的使用 1. 在使用离心机时，合格的机械性能是实验室微生物学安全的一个前提条 件。 2. 离心机应根据厂家的说明书进行操作。 3. 离心机应放到适宜的位置和高度，以使身材较矮的工作人员能看见离心 杯并把轴和离心桶放到适当位置。 4. 用于离心的离心管和标本容器应该由厚玻璃制成，或者最好由塑料制成， 而且在用前应检查有无破损。 29 5. 用于离心的离心管和标本容器应始终盖严(如果可能的话用螺旋盖)。 6. 必须安装离心桶，且要平衡、密闭、在生物安全柜内开启。 7. 离心管放到恰当位置后，离心桶和杯要配平，保持平衡。 8. 离心管内液面水平距管口应留出多少空隙。 9. 空离心桶配平时应该用蒸馏水或70,酒精、丙醇，不应使用盐水和次氯 酸盐溶液，因为它们会腐蚀金属。 10. 从事高致病性微生物时，必须使用封闭的离心桶(安全杯)。 11. 当使用转角转子时，要保证管子不要装得太满以免渗漏。 12. 应该每天检查在特定的转速下，离心杯的内表面有无污物，如果证明有 的话，那么离心的规程就需重新评估了。 13. 离心转子和离心桶应每天检查有无腐蚀点以及极细的裂缝。 14. 离心桶、转子和离心杯每次用后都应该消毒。 15. 每次用后，应该把桶倒放，以排净离心配平的液体。 7.8 混匀器、搅拌器的使用 1. 家用的(厨房用的)混匀器不应在实验室内使用，因为它们会有渗露或 释放气溶胶。实验室专用的搅拌器和拍打式混匀器更安全。 2. 盖子、杯子或瓶子都应该保持完好，无裂隙、无变形。盖子应恰好配套， 垫圈应保持完好。 3. 在混匀、摇晃过程中，器皿内的压力会增大，含有感染性材料的气溶胶 可能会从容器和盖子间的空隙逸出。推荐使用塑料的，特别是聚四氟乙 烯(PTFE)器皿，因为玻璃可能会破裂，释放出感染性物质，而且可能 伤及操作者。 4. 当使用混匀器、摇晃器和超声波裂解器时，应盖上牢固的、透明的塑料 盖子，盖子用后应消毒。只要可能，这些仪器都应该盖上塑料盖子在生 物安全柜里操作。 5. 在操作结束后，容器应在生物安全柜里才能重新开启。 7.9 研磨器的使用 1. 使用玻璃的研磨器时，应戴上手套，手里再垫上一块柔软的纱布后握住 它。塑料(PTFE)的研磨器更安全。 2. 研磨器应该在生物安全柜里操作和开启。 30 7.10 冰箱和速冻器的使用和保养 1. 冰箱、低温冰箱和固体二氧化碳(干冰)盒要定期除霜和清扫。其中所 有的安瓿、冻存管等在贮存过程中已破裂的要拿走。在清扫的过程中应 配戴脸部保护装置以及戴手套，清扫后，抽屉内表面应消毒。 2. 所有保存在冰箱里的容器等，都应该有清楚的标签，并且标签上有内容 物的科学命名、贮存日期和贮存人姓名。无标签的和过期的材料应高压 灭菌后丢掉。 3. 应该始终有冰箱内容物的详细目录。 4. 易燃液不准保存在冰箱里，除非是防爆的，冰箱的门上应张贴这方面的 注意事项。 7.11 开启装有冻干传染性物质的安瓿 当开启装有冻干传染性物质的安瓿时应注意，因其中的内容物可能处于负压下，空气的突然涌入会使内容物的一部分扩散到空气中。安瓿应始终在生物安全柜内打开，打开安瓿推荐使用下面的步骤。 1、首先消毒安瓿的外表面。 2、瓶子里如果有棉塞或纤维塞，应先用砂轮在安瓿外表面的塞子中部附近 刻下划痕。 3、于划痕处打破安瓿以前，先在手里垫一块酒精浸透的棉花再握住安瓿， 以保护手部。 4、轻轻地移去顶部并且视作污染物对待。 5、如果棉塞或纤维塞仍然留在安瓿的内容物上，用灭菌的镊子拿走。 6、向安瓿内缓慢地加液体重悬内容物，避免产生气泡。 31 7.12 关于血液、体液、组织和排泄物的特殊预防措施 下面列出的要点旨在保护实验室人员避免血源性微生物的感染 标本的收集、贴标签及运输 1. 应始终坚持全面的预防措施;所有的操作都要戴手套完成。 2. 从病人或动物身上采集血液应由受过训练的人员来完成。 3. 静脉采血时，应以专用的安全真空采血器代替常规的针头和注射器，这 样可使采集到的血液直接流入有塞子的运输管和/或培养管，并且针头用 后可以自毁。 4. 管子应放在适当的容器里以备运往实验室和在实验室内运输。标本申请 单应放在防水的袋子或信封里。 5. 收样人员不应打开这些袋子。 打开标本管或标本容器 1. 标本管应该在?级或?级生物安全柜里打开。 2. 必须戴手套。也推荐使用眼部和粘膜保护装置(护目镜或面罩(头盔))。 3. 防护服外应再戴一个塑料围裙。 4. 打开标本管的塞子时，应在手里先垫上一块纸或纱布再握住塞子，防止 溅出。 7.13 玻璃和“锐器” 1. 只要有可能，就应以塑料器皿代替玻璃器皿，只有实验室级玻璃(硼硅 酸盐)才可使用，而且任何碎裂的或有裂纹的器皿都应丢掉。 2. 皮下注射针不应用作吸管，带有钝套管的可以。 7.14 用于显微镜技术的薄膜和涂片 用显微技术检测固定并染色的血液、痰和排泄物标本时，不需杀死涂片上的所有微生物和病毒，所以这些涂片等物品应用镊子来操作，适当贮存，并且在丢掉以前要消毒和/或高压灭菌。 7.15 消毒 推荐使用次氯酸盐和高级消毒剂进行消毒。一般新配制的次氯酸盐溶液有效氯含量应为1g/l，但用于消毒溢出的血液，有效氯含量则应为10g/l。戊二醛可用于表面消毒。 32 第八章 病原微生物采集、包装、运输、接收制度 8.1 安全指南 对于实验室工作人员最先考虑到的应是实验的安全，其他医务人员也许没在意在送往实验室的标本中潜在有病原体，所以要制定安全规章制度以保护实验室人员和其他可能接触到病原体的人员。大多数的微生物实验室的手册中都有实验室安全操作章节部分，实验室操作手册中还应该包括有关标本管理的安全操作的内容。有关生物安全的参考资料对于每个微生物实验室都适用。 直接有关标本的安全管理方针: 1， 所有采集标本的操作要戴手套，穿工作外套、口罩、甚至护目镜。 2， 所有标本容器必须防漏，运送也应装入密封防漏的塑料袋中，袋上 附有一表格用于填写日期、时间、姓名之用。 3， 决不能将针头暴露的注射器送到实验室。应将注射器中的标本注入 无菌试管中。或采用防护手段取掉针头，再盖上注射器并放入密封防漏 的塑料袋中送检。 4， 不得将装有标本的破损容器送往实验室，也不能对其进一步处理。 应该及时向医生通报容器渗漏，解释如果留用标本，会带来的潜在危害 性并要求重新送检。如果新标本送来，则将泄漏的标本高温高压处理后 再废弃掉。 8.2 标本采集的原则 1，采集任何标本前，都应先填写检验单，选择适当的标本容器，在容器外 面贴上标签，标明、姓名、性别、检验目的及送验日期等。 2，采集标本前、后及送验前均应仔细遂项核对检验单，以防发生差错，并 应向病人说明检验项目的有关事宜。以消除顾虑，取得配合。 33 3，采集时应严格执行无菌操作，不可混入防腐剂、消毒剂及其它药物，以 免影响检验结果。 4，采集各项标本均应按照规定要求做到:及时采集，标本要新鲜，量要准 确，按时送验，不应放置过久，以免影响检验结果，特殊标本要注明采 集时间。 5，必须掌握正确的标本采集方法。 8.3 标本的选择与采集 采集送检标本前，必须有所选择标本的种类和采集部位并要反应有效病程。如果不选择有效部位，再好的方法采集的标本，没有有效病原体也没多大临床价值。以下为普通标本的选择与采集指南: 8.3.1 痰标本 根据痰标本采集的时间，可将标本分为三类: 即时痰:就诊时深呼吸后咳出的痰液; 晨痰:患者晨起立即用清水漱口后，咳出的第2口、第3口痰液; 夜间痰:送痰前一日，患者晚间咳出的痰液。 8.3.2 痰采集方法宣教 对肺结核可疑症状者，临床医护人员应通过解释，使其充分了解痰标本质量对检查结果的影响，示范并指导其掌握从肺部深处咳痰的方法;如患者识字，可提供宣教材料。 患者留取的痰标本，应由检验人员或经培训的专人目视检查标本质量(特别是用于初次诊断的痰标本)。合格的痰标本应是患者深呼吸后，由肺部深处咳出的分泌物，标本量一般在3,5 ml。 8.3.3 留痰场所 由于患者咳嗽、咳痰时，易产生含有结核菌的飞沫，感染周边人群的机率较高，故采集痰标本时应在远离人群的开放空间进行，或在通风良好的室内进行。 8.3.4 痰标本性状 干酪痰:标本外观以黄色(或奶酪色)、脓样、团块状的肺部分泌物为主，粘度较粘液痰低，制片时较易涂抹;涂片染色后镜检，可发现大量脓性炎症细胞、 34 肺上皮脱落细胞。由于此类标本是由肺部深处咳出，对肺结核的诊断最有价值，故抗酸杆菌(Acid-fast bacillic，AFB)的检出率较高。 血痰:此类标本是因粘液痰或干酪痰标本中混有血液而形成，颜色为褐色或深褐色、鲜红色或伴有血丝;痰涂片染色后镜检除能够观察到粘液痰或干酪痰的细胞特征外，含新鲜血液的标本中可见到被染色的血细胞。由于含血标本易干扰抗酸杆菌镜检的结果，故在制片时应尽量避免挑取含血标本。 粘液痰:标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主，制片时需仔细涂抹;痰涂片染色后镜检时，镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞，伴有少量肺上皮脱落细胞、脓性炎症细胞、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。此类标本的抗酸杆菌检出率较唾液高。 唾液:目视观察标本整体外观，以透明或半透明水样、粘度较低的口腔分泌物为主，标本中有时伴有气泡;痰涂片染色镜检时，镜下可见少量口腔上皮脱落细胞和口腔内寄生菌，有时可见食物残渣。由于此类标本进行抗酸杆菌检查时的检出率很低，用于确诊患者是不合格的标本。 合格的痰标本一般为干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰。痰标本不合格时，应进一步指导并要求患者重新送检。进行细菌学检查时应在登记本和检验报告单上注明标本性状，以供分析结果时参考。 8.4 标本的接收和拒收标准 有时，送到实验室的标本采集的部位不当、采集和运送不当，这些在 本质上属于标本失控，失控的过程也必须予以同样的重视。失控标本得出的 结果会提供错误的信息，导致误诊和治疗不当。因此，实验室必须坚持一条 严格的标本接收和拒收准则。 正确采集和处理标本是诊断感染性疾病的关键。实验室有责任指导临 床正确地采集和运送标本，这就要求实验室提供实验室手册印刷品，若有必 要实验室也可以提供培训，若实验室的策略和规程有变化应该及时予以补充 并传达。 实验室一旦接收到标本，应该马上在检验申请单上签上收到日期和时 间。此时，应该检查标本和申请单以确保其达到所要求的接收标准。要建立 标本接收的最低标准，同时要有不合格标本(未达到接收标准)的拒收标准。 35 一旦确定拒收标本，就一定要及时通知提供标本的相关人员，以便及时重新 采集合格的标本送检。 以下列举了几条明确的实验室准则，必须使其成为制度，予以执行，以 保证标本质量: 1， 无标签的标本，标本容器上未贴标签或贴错了标签，不接收。标本容 器上的信息与化验单不符，不接受。 2， 延误的标本，运送标本的时间过长，不接收。警告送检者并要求其 重新送检，在报告中注明“送检延误”。 3， 送检容器不当或渗漏，不予接收，告知送检者并要求重新送检。 4， 标本不合要求，标本量不够，不接收。联系送检者，阐明试验要求， 说明其不同之处，要求其再送检符合试验要求的标本。 5， 也有例外的情况，就是即使得到的标本质量不好也必须要作检测， 例如情况特殊或取材困难等。 8.5 标本容器 痰盒 统一使用螺旋盖、可密封、广口的痰盒收集痰标本。参考规格:直径4厘米，高度2厘米。医务人员在容器上应注明患者姓名、编号(门诊序号或登记号)、检查项目、痰标本序号1、2、3(1为即时痰，2为夜间痰，3为次日晨痰)，然后交给患者。 8.6 接收标本 接收标本指定一个送痰处。 8.7 打开包装 接收并打开标本包装的人员应该知道由此引起的潜在的健康威胁，并且应受过全面的防护方面的培训，尤其是处理破裂的或渗露的容器。标本应该在生物安全柜里打开包装，同时备有消毒剂。 36 第九章 菌种(株)的管理 9.1 菌(毒)种及样本的保管、使用和销毁制度 (一) 因工作需要使用毒种以及样本从事相关实验活动时，需经实验室负责 人和单位负责人批准后方可进行，并登记备案。 (二) 从事医学病原微生物毒种以及样本实验活动的专业人员，单位应该按 照国家规定采取有效的安全防护和医疗保障措施。 (三) 使用和操作一、二类医学微生物毒种时，须按照国家标准《人间传染 的病原微生物名录》，和生物安全操作规程进行，应由2名工作人员 同时操作，做好实验记录并按规定保存。 (四) 凡进行医学病原微生物毒种以及样本的动物实验时，都应相应地升一 级管理。 (五) 需要销毁的医学病原微生物毒种以及样本包括:国际组织建议的经卫 生主管部门批准的已经消灭的传染病保藏毒种和样本，经专业机构认 可的无保留价值的保藏毒种和样本，保藏过程中出现的无保留价值的 保藏毒种或中间产物，实验室完成相关实验活动后上交的无保留价值 的毒种和样本。 (六) 销毁国际组织建议的已经消灭的传染病保藏毒种和样本，需获得国务 院卫生主管部门批准。 (七) 销毁长期无流行但可能会涉及生物多样性的保藏毒种，需经相关专业 机构认可批准。 (八) 在实施销毁前，应制订销毁 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ，注明销毁原因、时间、方法、品种 和数量。 (九) 对于特殊理化性质的毒种和样本的销毁应使用可靠的销毁设施和方 法，并进行灭活效果验证。 (十) 实验室在相关实验活动结束后，依照规定及时将病原微生物菌(毒)种 和样本就地销毁或者送交保藏机构保管。 37 (十一) 实验室使用新技术、新方法从事高致病性病原微生物相关实验活 动必须经国家病原微生物实验室生物安全专家委员会论证。 (十二) 在同一个实验室的同一个独立安全区域内只能同时从事一种高 致病性病原微生物的相关实验活动。 9.2 实验室菌(毒)种使用管理方法 1. 免疫预防所设有专门的菌(毒)种室。 2. 放置1台,70?超低温冰柜专门用于存放菌(毒)种，不得存放任何其它物 品。 3. 冰柜需有双路电源系统，保证冰柜能有连续而稳定的电力供应，并配有冰柜 温度自动监测报警系统，值守人员还需要每天检查冰柜运行状况并记录。 4. 菌(毒)种由实验室的专业技术人员分类后装入毒种盒，并存入上述冰柜中， 冰柜需加双锁。由实验室主任和实验室菌(毒)种负责人分别保存钥匙，只 有两把钥匙同时存在时才能取出菌(毒)种。 5. 菌(毒)种存放应有清晰而明确的标记。 6. 每一菌(毒)种均有分离株ID号，年份和来源地等信息。存放菌(毒)种的 毒种盒和冰柜要有相关“菌(毒)种”的明显标记。 7. 所有菌(毒)种的详细资料要妥善保管。包括菌(毒)种详细的实验室和流 行病信息以及菌(毒)种数量、体积和在冰柜中存放的具体位置。 8. 如果任何人要使用菌(毒)种，则必须由使用人提出申请，并经实验室主任 批准后方可使用。 9.3 结核菌培养物、菌种包装与运输 1.运输包装按国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的分类包装要求，将相关病原和标本分为A、B两类，对应的联合国编号分别为UN2814和UN3373;A类中传染性物质特指菌株或活菌培养物，应按UN2814的要求包装和空运，其他相关样本和B类的病原和相关样本均按UN3373的要求包装和空运;通过其他交通工具运输的可参照以上标准包装。 2. 如培养物标本需送上一级细菌实验室的需经实验室负责人同意，外送前应认真核对痰培养物标本容器上标注，是否正确和清晰 ，是否与运送单一致。容器应当密封，容器或者包装材料还应当符合防水、防破损、防外泄、耐高(低) 38 温、耐高压的要求; 容器或者包装材料上应当印有国务院卫生主管部门或者兽医主管部门规定的生物危险标识、警告用语和提示用语。以及能够识别发货人和收货人的标本资料单、信件和其他各种资料。 3(当运输过程中发生感染性或潜在感染性物质溢出时，应立即通知有关部门或戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护后对污染区域进行消毒。可用布或纸巾覆盖并吸收溢出物，向纸巾上倾倒适当的消毒剂，并立即覆盖周围区域(通常可以使用5%漂白剂溶液;但在飞机上发生溢出时，则应该使用季铵类消毒剂)，使用消毒剂时，从溢出区域的外围开始，朝向中心进行处理，在作用适当(30 分钟)时间后，将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器，则要使用簸箕或硬的厚纸板来收集处理过的物品，并将它们置于可防漏、防穿透的废弃物处理容器中以待处理。对溢出区域再次清洁并消毒，如有必要可多次消毒，并通知相关主管部门。 9.4 结核分枝杆菌与其它致病性分枝杆菌销毁要求 1.菌种灭活与销毁应有申报审批程序、销毁菌种复核程序，并在上级安全管理部门监督下进行，并相应原始记录。 2.传代菌种或培养物销毁应经实验室负责人批准，应有销毁程序以及相应原始记录。所有菌毒种或培养物灭活或销毁时应均有2人以上共同执行，销毁记录应包括销毁方式、销毁物品明细(培养物、可能污染的实验用具等)、灭菌温度与时间(开始时间，达到温度时间，停止灭菌时间，取出时间)。 3.应建立用于菌种或培养物销毁的高压锅灭菌效果验证程序，并有验证原始记录，经验证菌毒种灭活方法应通过单位生物安全管理部门批准，并有书面材料。用于菌种或培养物销毁的高压锅应有检测报告。 39 第十章 实验室安全管理 10.1 实验室用电安全 应当小心确保正确型号的保险丝装在仪器和电源之间。实验室电路中应有断路开关(电闸)和地线以保护人员防止电击。 注意:电路开关不是保护人员安全的，它们是保护线路防止过热来避免火灾。地线能保护人员防止电击。 所有的实验室电器都应接地，最好是通过三向插头，只需两向插头的双重绝缘的电器在实验室已很少用了，但如果有的话可能需要单独接地。不接地的电器会因未被觉察的错误而引起电火。 实验室所有的电器都应符合国家的电器安全标准或国际电工委员会的要求。 实验室人员应被告知如下危险: ? 电器附近湿的或潮湿的表面 ? 长的软电缆 ? 电缆绝缘处的旧的、烧坏的部分 ? 因使用适配器而引起的电的超负荷运转 ? 产生电火花的仪器接近易燃物及其蒸气 10.2 实验室进食、饮水和禁烟政策 为了实验室工作人员的身心健康、安全，仅仅实验室的工作人员生活区才允许进食和饮水，在实验区禁止进食和饮水。 在过道里不允许进食，如果需要将食物或饮料通过过道带进工作人员办公室，那么一定要将食物包装好，不能暴露在外。 10.3 禁止吸烟 吸烟是实验室火灾的一个隐患，同时吸烟对工作人员(包括吸烟者和被动吸烟者)的身体有很大的危害。因此实验室的禁烟政策为: 在微生物实验室和办公室等一切地方禁止吸烟～ 40 第十一章 重要的电话号码 下列电话号码和地址应贴在所有电话机旁的显著位置: 火警电话 119 匪警电话 110 急救电话 120、999 平谷结控中心办公室电话 69989253 实验室电话 69962224 平谷区医院 89992120 市所中心检验室细菌室电话 62276766—1232?1220 市所中心检验室主任电话 62224424 41 下面为朱自清的散文欣赏，不需要的朋友可 以下载后编辑删除～～～谢谢～～～ 荷塘月色 作者: 朱自清 这几天心里颇不宁静。今晚在院子里坐着乘凉，忽然想起日日走过的荷塘，在这满月的光里，总该另有一番样子吧。月亮渐渐地升高了，墙外马路上孩子们的欢笑，已经听不见了;妻在屋里拍着闰儿，迷迷糊糊地哼着眠歌。我悄悄地披了大衫，带上门出去。 沿着荷塘，是一条曲折的小煤屑路。这是一条幽僻的路;白天也少人走，夜晚更加寂寞。荷塘四面，长着许多树，蓊蓊郁郁的。路的一旁，是些杨柳，和一些不知道名字的树。没有月光的晚上，这路上阴森森的，有些怕人。今晚却很好，虽然月光也还是淡淡的。 路上只我一个人，背着手踱着。这一片天地好像是我的;我也像超出了平常的自己，到了另一世界里。我爱热闹，也爱冷静;爱群居，也爱独处。像今晚上，一个人在 42 这苍茫的月下，什么都可以想，什么都可以不想，便觉是个自由的人。白天里一定要做的事，一定要说的话，现在都可不理。这是独处的妙处，我且受用这无边的荷香月色好了。 曲曲折折的荷塘上面，弥望的是田田的叶子。叶子出水很高，像亭亭的舞女的裙。层层的叶子中间，零星地点缀着些白花，有袅娜地开着的，有羞涩地打着朵儿的;正如一粒粒的明珠，又如碧天里的星星，又如刚出浴的美人。微风过处，送来缕缕清香，仿佛远处高楼上渺茫的歌声似的。这时候叶子与花也有一丝的颤动，像闪电般，霎时传过荷塘的那边去了。叶子本是肩并肩密密地挨着，这便宛然有了一道凝碧的波痕。叶子底下是脉脉的流水，遮住了，不能见一些颜色;而叶子却更见风致了。 月光如流水一般，静静地泻在这一片叶子和花上。薄薄的青雾浮起在荷塘里。叶子和花仿佛在牛乳中洗过一样;又像笼着轻纱的梦。虽然是满月，天上却有一层淡淡的云，所以不能朗照;但我以为这恰是到了好处——酣眠固不可少，小睡也别有风味的。月光是隔了树照过来的，高处丛生的灌木，落下参差的斑驳的黑影，峭楞楞如鬼一般;弯弯的杨柳的稀疏的倩影，却又像是画在荷叶上。塘中的月色并不均匀;但光与影有着和谐的旋律，如梵婀玲上奏着 43 的名曲。 最新有关系学生会竞选演讲稿范文 敬的学校领导、老师、亲爱的同学们: 大家好! 我是来自xx班的xx。我性格活泼开朌,处事沉着、果断,能够顾全大局。今天我很荣幸地站在这里表达自己由来已久的愿服:“我要竞选学生会宣传部部长。”我在这里郑重承诺:“我将尽全力完成学校领导和同学们交给我的任务,使学生会成为一个现代化的积极团体,成为学校的得力助手和同学们信赖的组织。” 我已经在团委会纪检部(戒班级的干部)工作了近一年的段时间,从工作中,我学会了怎样为人处世、怎样学会忍耐,怎样解决一些矛盾,怎样协调好纪检部各成员之间的关系,怎样处理好纪检部不其它部门之间的关系,怎样动员一切可以团结的力量,怎样提拔和运用良才,怎样处理好学习不工作之间的矛盾。这一切证明:我有能力胜任学生会宣传部部长一职,并且有能力把学生会发扬光大。 假如我当上了学生会宣传部长,我要进一步完善自己,提高自己各方面的素质,要进一步提高自己的工作热情,以饱满的热情和积极的心态去对待每一件事情;要进一步提高责任心,在工作中大胆创新, 44 锐意进取,虚心地向别人学习;要进一步的广纳贤言,做到有错就改,有好的意见就接受,同时坚持自己的原则。 假如我当上了学生会宣传部部长,我要改革学生会的体制。真正的做到“优胜劣汰”,做到“日日清,周周结”,每周都对各部门的负责人进行考核,通过其部门的成员反应情况,指出他在工作中的优点和缺点,以朊友的身份不他商讨解决方案并制定出下阶段的计划。 经常不他们谈心,彼此交流对生活、工作的看法,为把学生会工作做好而努力。开展主席团成员和各部长及负责人常作自我批评,自我检讨的活动,每月以书面材料形式存入档案。我还将常常找各部门的成员了解一些情况,为作出正确的策略提供可靠的保证。还要协调好各部门 之间的关系,团结一切可团结的力量,扩大学生会宣的影响及权威。 假如我当上了学生会宣传部部长,我将以“奉献校园,朋务同学”为宗旨,真正做到为同学们朋务 ,代表同学们行使合法权益,为校园的建设尽心尽力。在学生会利益前,我们坚持以学校、大多数同学的利益为重,决不以公谋私。努力把学生会打造成一个学生自己管理自己,高度自治,体现学生主人翁精神的团体。 我知道,再多灿烂的话语也只不过是一瞬间的智慧不激情,朴实的行动才是开在成功之路上的鲜花。我想,如果我当选的话,一定会 45 言必行,行必果。 请各位评委给我一张信任的投票,给我一个施展才能的机会! 荷塘的四面，远远近近，高高低低都是树，而杨柳最多。这些树将一片荷塘重重围住;只在小路一旁，漏着几段空隙，像是特为月光留下的。树色一例是阴阴的，乍看像一团烟雾;但杨柳的丰姿，便在烟雾里也辨得出。树梢上隐隐约约的是一带远山，只有些大意罢了。树缝里也漏着一两点路灯光，没精打采的，是渴睡人的眼。这时候最热闹的，要数树上的蝉声与水里的蛙声;但热闹是它们的，我什么也没有。 忽然想起采莲的事情来了。采莲是江南的旧俗，似乎很早就有，而六朝时为盛;从诗歌里可以约略知道。采莲的是少年的女子，她们是荡着小船，唱着艳歌去的。采莲人不用说很多，还有看采莲的人。那是一个热闹的季节，也是一个风流的季节。梁元帝《采莲赋》里说得好: 于是妖童媛女，荡舟心许;鷁首徐回，兼传羽杯;欋将移而藻挂，船欲动而萍开。尔其纤腰束素，迁延顾步;夏始春余，叶嫩花初，恐沾裳而浅笑，畏倾船而敛裾。 可见当时嬉游的光景了。这真是有趣的事，可惜我们现在早已无福消受了。 46 于是又记起《西洲曲》里的句子: 采莲南塘秋，莲花过人头;低头弄莲子，莲子清如水。 今晚若有采莲人，这儿的莲花也算得“过人头”了;只不 见一些流水的影子，是不行的。这令我到底惦着江南了。 ——这样想着，猛一抬头，不觉已是自己的门前;轻轻地 推门进去，什么声息也没有，妻已睡熟好久了。 在北京住了两年多了，一切平平常常地过去。要说福气，这也是福气了。因为平平常常，正像“糊涂”一样“难得”，特别是在“这年头”。但不知怎的，总不时想着在那儿过了五六年转徙无常的生活的南方。转徙无常，诚然算不得好日子;但要说到人生味，怕倒比平平常常时候容易深切地感着。现在终日看见一样的脸板板的天，灰蓬蓬的地;大柳高槐，只是大柳高槐而已。于是木木然，心上什么也没有;有的只是自己，自己的家。我想着我的渺小，有些战栗起来;清福究竟也不容易享的。 这几天似乎有些异样。像一叶扁舟在无边的大海上，像一个猎人在无尽的森林里。走路，说话，都要费很大的力气;还不能如意。心里是一团乱麻，也可说是一团火。似乎在挣扎着， 47 要明白些什么，但似乎什么也没有明白。“一部《十七史》，从何处说起，”正可借来作近日的我的注脚。昨天忽然有人提起《我的南方》的诗。这是两年前初到北京，在一个村店里，喝了两杯“莲花白”以后，信笔涂出来的。于今想起那情景，似乎有些渺茫;至于诗中所说的，那更是遥遥乎远哉了，但是事情是这样凑巧:今天吃了午饭，偶然抽一本旧杂志来消遣，却翻着了三年前给S的一封信。信里说着台州，在上海，杭州，宁波之南的台。这真是“我的南方”了。我正苦于想不出，这却指引我一条路，虽然只是“一条”路而已。 ---------------朱自清《一封信》 燕子去了，有再来的时候;杨柳枯了，有再青的时候;桃花谢了，有再开的时候。但是，聪明的，你告诉我，我们的日子为什么一去不复返呢?——是有人偷了他们罢:那是谁?又藏在何处呢?是他们自己逃走了罢:现在又到了哪里呢? 我不知道他们给了我多少日子;但我的手确乎是渐渐空虚了。在默默里算着，八千多日子已经从我手中溜去;像针尖上一滴水滴在大海里，我的日子滴在时间的流里，没有声音，也没有影子。我不禁头涔涔而泪潸潸了。 --载自《匆匆》 48 这时我们都有了不足之感，而我的更其浓厚。我们却只不愿回去，于是只能由懊悔而怅惘了。船里便满载着怅惘了。直到利涉桥下，微微嘈杂的人声，才使我豁然一惊;那光景却又不同。右岸的河房里，都大开了窗户，里面亮着晃晃的电灯，电灯的光射到水上，蜿蜒曲折，闪闪不息，正如跳舞着的仙女的臂膊。我们的船已在她的臂膊里了;如睡在摇篮里一样，倦了的我们便又入梦了。那电灯下的人物，只觉像蚂蚁一般，更不去萦念。这是最后的梦;可惜是最短的梦!黑暗重复落在我们面前，我们看见傍岸的空船上一星两星的，枯燥无力又摇摇不定的灯光。我们的梦醒了，我们知道就要上岸了;我们心里充满了幻灭的情思。 --载自《桨声灯影里的秦淮河》 近几年来，父亲和我都是东奔西走，家中光景是一日不如一日。他少年出外谋生，独力支持，做了许多大事。那知老境却如此颓唐!他触目伤怀，自然情不能自已。情郁于中，自然要发之于外;家庭琐屑便往往触他之怒。他待我渐渐不同往日。但最近两年的不见，他终于忘却我的不好，只是惦记着我，惦记着我的儿子。我北来后，他写了一信给我，信中说道，“我身体平安，惟膀子疼痛利害，举箸提笔，诸多不便，大约大去之期不远矣。”我读到此处，在晶莹的泪光中，又看见那肥胖的，青布棉袍，黑布马褂的背影。唉!我不知何时 49 50