土壤过氧化氢酶活性测定方法(完整)

土壤过氧化氢酶活性测定方法(完整)高锰酸钾滴定法1.试剂配制： (1)0.3%过氧化氢溶液： ①（1：100 30%的H2O2和水） ②（0.5molH2O2+49.5ml蒸馏水） ③（1ml30% H2O2+99ml蒸馏水） (2)3N硫酸：（10ml硫酸+50ml水） (3)0.1N高锰酸钾溶液：（1.58gKMnO4+100ml蒸馏水）高锰酸钾的标定：准确称取约0.2g在110℃干燥至恒量的基准草酸钠。加入250mL新煮沸过的冷水、10mL硫酸，搅拌使之溶解。将草酸钠溶液加热到75℃~85℃(即开始冒蒸气时的温度)，趁热用待标KMnO4...

高锰酸钾滴定法1.试剂配制： (1)0.3%过氧化氢溶液： ①（1：100 30%的H2O2和水） ②（0.5molH2O2+49.5ml蒸馏水） ③（1ml30% H2O2+99ml蒸馏水） (2)3N硫酸：（10ml硫酸+50ml水） (3)0.1N高锰酸钾溶液：（1.58gKMnO4+100ml蒸馏水）高锰酸钾的标定：准确称取约0.2g在110℃干燥至恒量的基准草酸钠。加入250mL新煮沸过的冷水、10mL硫酸，搅拌使之溶解。将草酸钠溶液加热到75℃~85℃(即开始冒蒸气时的温度)，趁热用待标KMnO4溶液进行滴定。开始滴定时反应速度很慢，待溶液中产生Mn2+后，反应速度加快，但滴定时仍必须是逐滴加入，至溶液呈粉红色，半分钟内不褪色即为终点。注意滴定结束时的温度不应低于60℃。2MnO4-+5C2O42-+16H+75~85℃Mn2++10CO2+8H2O。参考：《高锰酸钾标准溶液标定方法的改进及注意事项》王继莲3.测定：准确称取2g风干土置100mL锥形瓶→加入40mL蒸馏水和5mL0.3%过氧化氢（现配），另设对照(40mL蒸馏水和5mL0.3%过氧化氢)→在往复式振荡机上振荡20min→加入5mL3N硫酸（以稳定未分解的H2O2）→用慢速型滤纸过滤，→吸取25ml滤液，用0.1N高锰酸钾的滴定至淡粉红色 4．结果计算土壤的过氧化氢酶活性，以单位土重的0.1NKMnO4毫升数(对照与试验测定的差) 表示。备注：以容量法测H2O2的酶活：Kappen（1913）首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活。此法根据H2O2与土壤相互作用时，未分解的H2O2的数量用容量法（常用高锰酸钾滴定未分解的H2O2）测定H2O2的酶活 2 KMnO4＋5H2O2＋3H2SO4→2MnSO4＋K2SO4＋8H2O＋5O2 土壤H2O2酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作用。

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