课题.糖脂肪蛋白质的检测doc

课题：1.检测生物组织中还原性糖、脂肪和蛋白质 使用时间： 班级：高三（ ） 姓名： 一、学习目标 学会检测生物组织中还原性糖、脂肪和蛋白质的原理和方法步骤，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理 二、课前预习 1．实验原理： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 可溶性还原糖（如 ）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色Cu 2O沉淀。 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成 色（或被苏丹Ⅳ染液染成 色）。淀粉遇碘变蓝色。 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生 色反应。 实验试剂：斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 2．实验方法步骤： （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液和乙液 配制、储存， 前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu ( OH ) 2生成。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 色（沉淀） 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯水浴加热。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 （二）脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间则可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去酒精。 酒精用于洗去 色，若不洗去，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴 ，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 （三）蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时 。CuSO4溶液不能多加。 先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察:用试管取2ml待测组织样液，向试管内加2滴碘液，观察颜色变化。 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 三、重点探究 1. 实验 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 和注意事项 （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选 ，颜色为 植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察 的颜色。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富 的种子，以花生种子为最好，实验前一般要 3~4小时（也可用蓖麻种子）。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用 或鸡蛋清。用蛋清要 ，以免反应后粘固在试管壁上，使反应不彻底，也不易洗刷试管。 2.斐林试剂和双缩脲试剂的区别： 组成： 斐林试剂 双缩脲试剂 使用方法和原理： 斐林试剂 双缩脲试剂 3.链接高考： （09广东卷）6．对下表中所列待测物质的检测，所选用的试剂及预期结果都正确的是 待测物质 检测试剂 预期显色结果 ① DNA 甲基绿 红色 ② 脂肪 苏丹Ⅲ 橘黄色 ③ 淀粉 斐林试剂 蓝色 ④ 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 A． ①③ B．② ③ C．①④ D．②④ 答案： （09江苏卷）21．下列有关实验及显色结果的叙述，错误的有 A．水浴加热条件下，蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀 B．沸水浴条件下，脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色 C．常温条件下，蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色 D．常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色 答案： （09上海卷）7.用班氏试剂鉴别健康人的下列四种液体，出现红黄色沉淀的是 A. 血清 B. 唾液 C. 胃液 D. 尿液 答案： (08广东理基)42．双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于蛋白质有 A．肽键　　　　B．氨基酸　　　　C．羧基　　　　D．氨基 答案： (07江苏生物)19．若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正确的是 A．鸡蛋蛋白液稀释不够，搅拌不匀 B．只添加了双缩脲试剂A，未添加双缩脲试剂B C．鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 D．蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长 答案： (07广东理基)37．下列健康人的4种液体样本中，能与双缩脲试剂发生紫色颜色反应的是 ①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液 A．①③ B．①④ C．②③ D．②④ 答案： 四、巩固反馈 1、将鉴定下列化合物的试剂及其颜色反应用直线连接起来。 　　 2、下列食物中能够为你提供更多淀粉的食物是 　　A、面包　　 B、西红柿　　 C、鸡蛋　　 D、奶油 3．使用苏丹III染色，能显示细胞中脂肪的存在，这是因为该染色剂 　　A、易于进入细胞　　 B、亲水而疏脂 　　C、颜色特别鲜艳　　 D、亲脂而疏水 4．使用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，必须将斐林试剂的甲液和乙液 　　A、分别加入样液中　　　 B、混匀后再加入样液 　　C、加热后再加入样液　　 D、同时加入样液中 5．某些糖遇斐林试剂能发生如下反应： 单糖+2Cu(OH)2→Cu2O↓（砖红色）+2H2O+复杂的化合物 这表明，反应过程中糖被 　　A、氧化　　 B、还原　　 C、染色　　 D、分解为Cu2O和H2O 6．先用脱色素的植物油将西红柿煸炒一会儿，再加水做成汤，西红柿的胡萝卜素就会使汤中的油滴显出橙黄色来．这说明胡萝卜素具有 　A、亲脂性和亲水性　　 B、遇热而显橙黄色的特色 　C、亲脂而疏水性　　　 D、遇热易分解的不稳定性 7．将马铃薯块茎与浸软的花生种子分别徒手切片，在载波片中央滴少许染液，再把这两种材料的切片分别浸在碘液里制成临时装片后，用显微镜观察切片上被碘染色的淀粉粒。结果应该是 A、马铃薯切片中有更多的蓝黑色颗粒 B、花生切片中显示更多的蓝黑色颗粒 　C、两种材料的切片中均术见蓝黑色颗粒 D、难以分辨出两种切片碘染色后的差别 8．现有下列生物材料：①苹果②黄豆种子③梨④花生种子⑤蛋清⑥马铃薯块茎。最适于用来鉴定还原性糖的有 　A、①③⑥　　 B、①②③　　 C、①③　　 D、③④ 9．青苹果汁遇到碘酒溶液变成蓝色，熟苹果汁则能还原银氨溶液(即发生银镜反应)，这说明 A、青苹果中只含淀粉，不含其他糖类 B、熟苹果中只含糖类，不含淀粉 C、苹果转熟时单糖聚合成淀粉 D、苹果转熟时淀粉水解为单糖 10．将面团包在纱布中在消水中搓洗，鉴定粘留在纱布上的粘稠物质和洗出的白浆分别用的试剂是： A、碘液、苏丹III溶液　　　　　　 B、双缩脲试剂，碘液 　　 C、亚甲基兰溶液、苏丹III溶液　 　D、碘液、斐林试剂 11、下列哪个实验用到显微镜 A可溶性还原糖的鉴定 B蛋白质的鉴定 C脂肪的鉴定 D淀粉的鉴定 12、斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程为（ ） A无色→砖红色（沉淀） B浅蓝色→砖红色（沉淀） C浅蓝色→蓝色→砖红色（沉淀） D浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀） 13、下列物质中，能被苏丹Ⅳ染液染成红色的是（ ） A、马铃薯块茎 B浸软的蓖麻种子 C蛋清液 D苹果 14、检验鉴定动物组织中是否含有脂肪，一般可使用下列哪种试剂（ ） A碘液 B斐林试剂 C双缩脲试剂 D苏丹Ⅲ染液 15、下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热（ ） A斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中 B苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D碘—碘化钾溶液鉴定淀粉时 16、医院确认糖尿病的常用方法及结果是（ ） A加入新制的Cu(OH)2，出现红色 B加入碘—碘化钾溶液，出现蓝色 C加入苏丹Ⅲ染液，出现橘黄色 D加入碘—碘化钾溶液，出现淡黄色 PAGE 1