氟苯尼考可溶性粉的研制及溶出度测定

· 8· 中国兽药杂志 2004，38(10)：8～12／刘永琼，等 氟苯尼考可溶性粉的研制及溶出度测定 刘永琼，祝 宏，王 尧，李平云，李从强 (武汉化工学院药物制剂及天然药物研究室，湖北武汉 430073) [收稿日期]2003—06—15 [文献标识码]A [文章编号]1002—1280(2004)10—0008—05 [中图分类号]TQ460．6 [摘 要] 选择低聚糖类辅料A并利用喷雾干燥法制备氟苯尼考可溶性粉。取氟苯尼考 100 g， 辅料 A 900 g，喷雾干燥制成规格为50 g：5 g的氟苯尼考粉剂。喷雾干燥得到的可溶性粉的溶出 速率和溶出百分率明显高于物混物，其溶出率为99．o5％，分别是氟苯尼考原料干燥品(溶出率 30．34％)和氟苯尼考原粉(溶出率2．35％)的3．26倍和42．15倍，使氟苯尼考的水溶性大大提 高。 [关键词] 氟苯尼考；喷雾干燥；可溶性粉；紫外分光光度法；溶出度 氟苯尼考(Florfenieo1)又称氟甲砜霉素，氟砜 尼可，系统名为 2，2一二氯 一N一[(1S，2R)一1一 (氟甲基)一2一羟基 一2一[4一(甲磺酰)苯基]乙 基]乙酰胺，结构如图 1所示 。 H N F o Cl2Hl4C12FNO4S=358．22 图1 氟苯尼考分子结构 C 氟苯尼考是美国 Sehering—Plough公司在7O年 代末研制开发的兽用广谱抗菌药。氟苯尼考系新 型氯霉素类广谱抗菌药物，是氯霉素类广谱抗菌药 物中甲砜霉素 3位衍生物，其特点是抗菌谱广、吸 收良好、体内分布广泛，特别是无潜在的致再生障 碍性贫血作用 ，也无致畸、致癌和致突变作用。 1990年首次在 日本上市，用于水产养殖业，商品名 AquafenⅢ 。 同年在韩国上市。1993年挪威批准 该药用于治疗鲑的疖病。1995年法国、英国、奥地 利、墨西哥及西班牙批准用于治疗牛呼吸系统细菌 性疾病，商品名 Nuf10r MI 。1996年通过美国 FDA 注册登记，批准氟苯尼考注射液用于牛呼吸系统疾 病。在日本、墨西哥，氟苯尼考还被批准用于猪的 饲料添加剂，商品名分别为 Flomcol 和 Nunor 。 目前，氟苯尼考已在亚洲、欧洲、美洲的20多个国 家上市，适用于鱼、猪、牛及其他家畜、家禽，其剂型 有注射剂、预混剂、粉剂等，最近报道称美国已有氟 苯尼考植入剂用于治疗牛呼吸道疾病 。国内所 见剂型有针剂、粉剂等 。 与同类抗生素相比，氟苯尼考性能优良，但水 溶性较差。在评价药物制剂生物利用度时存在三 个基本参数：Tm、C 和AUC。Tm体现药物的吸收 速度，AUC和c 体现药物的吸收量，无论是吸收速 度还是吸收量均与药物的溶解度有关。 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示药物 溶出速度的方程 有 Noyes—Whitney方程：dc／dt= KS(Cs—C)和 Nernst—Noyes—Whitney方程：dc／dt= DS／V8(Cs—C)。两式中 cs均为固体药物的溶解 度，dc／dt均为溶出速度。因此，药物的溶解度影响 着药物的溶出速度，药物的溶出速度对药物的生物 利用度有一定的影响。增加药物溶解度的方法很 多，但有关提高氟苯尼考溶解度的固体制剂研究尚 未见报道。本文通过配方 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 ，筛选出能显著提高 氟苯尼考溶解度的辅料 A(低聚糖类)，采用喷雾干 燥法 制备氟苯尼考可溶性粉剂，并按《中国兽药 典》 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 ，对样品进行含量、体外溶出度及初步稳定 刘永琼(1953年 ～)，女，教授，从事药物的合成、制剂及天然药物的研究。 维普资讯 http://www.cqvip.com 2004，38(10)：8～12／刘永琼，等 中国兽药杂志 ·9· 性考察等试验，以期为新药开发和临床应用研究提 供实验依据。 1 材 料 1．1 药品与试剂 氟苯尼考，含量 99．50％，批号 20030209，浙江新昌制药厂；辅料 A，低聚糖类，药 用级，国内生产；95％乙醇、甲醇，分析纯，上海振兴 化工一厂；二次蒸馏水，自制；其它试剂均为分析 纯；硅胶 C板，青岛海洋化工厂。 1．2 仪器 电子天平，AB204-N型，Mettler．Toledo 公司；紫外分光光度计，UV-VIS8500型，上海天美 科学仪器有限公司；超声波清洗器，CQ250型，上海 超声波仪器厂；喷雾干燥机，Qz．5型；水浴恒温振 荡器，常州国华电器有限公司；磁力搅拌器，JB．2，3 型，上海雷磁新泾仪器有限公司；不锈钢恒温水浴 锅，上海三申医疗器械有限公司；循环水式真空泵， SHZ-D型，河南巩义市英峪豫华仪器厂；智能溶出 试验仪，ZRS-4型，天津大学无线电厂制造。 2 方法与结果 2．1 可溶性粉剂的制备 2．1．1 处方研究 根据初始结果选择辅料 A。按 氟苯尼考与辅料 A配比1：6、1：7、1：8、1：9、1：10 (W／W)，分别称取适量的氟苯尼考和辅料 A备用。 先将辅料 A加入 100 mL的蒸馏水中，然后置于磁 力搅拌器上加热至45 ，搅拌使溶解，再于搅拌下 缓慢加入氟苯尼考直至溶液澄清，45 恒温保存。 调整喷雾干燥器达到稳定状态后进行喷雾干燥，以 产品的溶出率(溶出时间 t=45 min)作为考察指 标，结果见表 1和图2。 表 1 喷雾干燥工艺参数 注：F一氟苯尼考；A一辅料A；F原粉一未经喷雾干燥处理的氟苯尼 考原料；溶出率一指样品中氟苯尼考实测含量与理论值的百分比。 由表 1和图2可以看出，氟苯尼考原粉的溶出 率仅为2．35％，其水混悬液经喷雾干燥所得粉剂溶 出率提高到30．34％；而氟苯尼考加入水溶性辅料 A(质量比1：6～1：10)时，累积溶出率达到80％ ～ 99％，当氟苯尼考与辅料 A配比为 1：9时，溶出百 分率最高。根据试验结果，确定处方组成为：氟苯 尼考 100 g，辅料A 900 g，共制成 50 g：5 g规格的 可溶性粉剂20袋。 图2 氟苯尼考可溶性粉溶解百分率 2．1．2 制备工艺 按处方分别称取适量的氟苯尼 考和辅料 A，按 2．1．1项下方法制备氟苯尼考溶 液。调整喷雾干燥器出口温度为 80～90 、进口 温度为250～290 oC，喷头压力284 kPa，达到稳定 状态后进行喷雾干燥，滴速 130～150滴／min，收 集、分装，即得氟苯尼考可溶性粉。 2．1．3 粉剂的质量评定 参照我国农业部兽药质 量标准分别进行氟苯尼考可溶性粉剂的药物含量、 溶出度及各项鉴别、检查等测定，结果符合规定，制 备工艺合理。 2．2 有关物质检查 精密称取氟苯尼考原粉适 量，加甲醇溶解并制成每 1 mL含 10 mg的溶液，作 为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，分别加 甲醇稀释成每 1 mL含0．10、0．20 mg的溶液，分别 制成对照液(1)和(2)。照薄层色谱法(《中国兽药 典}2000年版一部附录20页)试验，吸取上述 3种 溶液各 10 ，分别点于同一硅胶 G板上，以氯仿 一 甲醇一醋酸乙酯 一水(15：6：15：1，V／V)为展开 剂，展开后晾干，置氯气中熏 10秒钟后取出，在冷 的流通空气中挥发，于点样基线以下处，用毛细管 加点含0．5％碘化钾和1％冰醋酸的淀粉指示剂至 仅显浅蓝色，即刻喷同一碘化钾淀粉指示剂，立即 检视。结果供试品溶液显一个杂质斑点，比对照液 (1)的斑点色浅。取氟苯尼考粉剂(喷雾品)同法 操作，其供试品溶液显一个杂质斑点，比对照液(1) 的斑点色浅。二者有关物质均符合规定 J。喷雾 品与原粉相比，有关物质量无增加，说明主药在喷 雾干燥制备工艺中稳定。 2．3 氟苯尼考粉剂含量测定 测定氟苯尼考含量 维普资讯 http://www.cqvip.com · 1O· 中国兽药杂志 2004，38(10)：8～12／刘永琼，等 有电位滴定法 ]、旋光法 、高效液相色谱法 ¨、 薄层色谱法【】 和紫外分光光度法 等。电位滴定 法用于氟苯尼考原料药的含量测定，操作繁琐、费 时。与电位法相比，高效液相色谱法和薄层色谱法 的操作则相对较繁，对设备要求也较高；旋光法和 紫外分光光度法具有简便、快速、准确、重现性好等 优点，可用于氟苯尼考制剂含量的快速测定。本试 验选择紫外分光光度法测定主药含量。 2．3．1 测定溶剂的选择 精密称取氟苯尼考适 量，置棕色容量瓶中，分别用甲醇、95％乙醇和蒸馏 水溶解，稀释成200 g／mL，在240～300 nm波长范 围内扫描，结果表明氟苯尼考甲醇溶液、95％乙醇 溶液和水溶液均在 266 nm和 273 nm波长处有最 大吸收，与文献 ’】 相符。综合考虑药物的溶解性 和溶剂的安全性，本试验选用少量乙醇溶解，再以 蒸馏水稀释作为测定溶剂。 2．3．2 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 波长的选择 取不含氟苯尼考的空白 辅料 A同2．3，1项下方法处理，0．8 m滤膜过滤 并稀释，作为阴性对照溶液。蒸馏水作空白，在240 ～ 400 nm波长范围内分别测定氟苯尼考溶液和阴 性对照溶液的紫外吸收光谱，结果表明氟苯尼考在 266 nm处有最大吸收，辅料 A无干扰，故选择在 266 nm波长处，蒸馏水作空白测定样品中氟苯尼 考的含量。 2．3．3 标准曲线的绘制 精密称取恒重的氟苯尼 考对照品适量，以少量95％乙醇溶解后加入蒸馏水 制成0．2 mg／mL贮备液，分别用蒸馏水稀释成浓度 为20、30、50、100、150、200、250、300、350 Ixg／mL系 列溶液，以蒸馏水为空白，照分光光度法 ¨在 266 nm波长处测其吸收度 A，得标准曲线方程：A= 0．002 58 C+0．001 11，r=0．999 9(n=9)。说明在 水介质中，氟苯尼考浓度在 20～350 Ixg／mL范围 内，吸收度与浓度呈良好的线性关系。 2．3．4 回收率 依处方分别精密称取氟苯尼考适 量和辅料 A，按 2．1．2项下方法制得5批氟苯尼考 可溶性粉剂。分别取各批样品适量，精密称定，置 50 mL容量瓶中，精密加入 95％乙醇定容，密闭并 置振荡器振荡30 min，静置 1 h，过滤，弃去初滤液， 取续滤液5 mL置 50 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释 并定容，摇匀，在 266 nm波长处测定吸收度。另取 氟苯尼考对照品制备相同浓度溶液，同法测定，根 据两者吸收度计算样品含量，与加入量相比计算回 收率，平均回收率为99．46％，RSD=0．13％，见表 2。误差在允许范围内。 表 2 氟苯尼考可溶性粉回收率结果 2，3．5 含量测定 精密称取氟苯尼考可溶性粉样 品1．000 0 g，按2．3．4项下方法配制供试品溶液， 另取氟苯尼考对照品，配制成对照品溶液，在 266 nm波长处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸 收度，按对照品比较法计算供试品含量 ¨。 2．4 溶出度测定 H 试验所得喷雾干燥样品 (喷雾品)撒入水中可即刻溶解，物理混合物(物混 物)的溶解速度较慢，而未经喷雾干燥的原药(原 粉)则几乎不溶。为方便临床使用和便于比较三者 的溶解性差异，分别将 3种形式的氟苯尼考灌注在 2号胶囊中制成胶囊剂，进行溶出度测定。 2．4．1 操作 取喷雾品、物混物和原粉，分别制成 胶囊(含相同药量)，各取 6粒于预定的转篮中，分 别照溶出度第一法试验(《中国兽药典))2000年版 一 部附录)，溶出杯中加人人工胃液 1 000 mL，水浴 温度(37±0．1)oC，转速 100 r／min，依法操作，分别 于 5、8、10、13、15、18、20、30、45 min定时取样6 mL (即刻补人人工胃液6 mL)，立即经0．8 m滤膜过 滤，弃去粗滤液，精密取续滤液3 mL置25 mL容量 瓶中，加人工滤液定容，摇匀，照分光光度法，以人 工胃液为空白，在266 am处测定吸收度，分别计算 喷雾品、物混物和原粉在各个试验点的累积溶出率 (Q)和平均累计溶出率(Q)。 2．4．2 溶出实验数据处理 2．4．2．1 以 Q％为纵轴，以溶出时间(t)为横轴， 绘制样品、物混物、原药的 ％与 t的关系曲线，见 图 3。 2．4．2．2 Weibul1分布模拟 按Weibul1分布函数表达式 lnln[1／(1一F(t))]=mint— 。，用l,an[1／(1一F(f))]对 作图。处理后得到两个模型(见图4，图5)。 喷雾干燥样品的 Weibul1分布模型为：前 20 min，lnln[1／(1一F(t))]：2．723 3 lnt一7．832 6 (r =0．983 2，n：7)，符合一级溶出模型；第20 min 维普资讯 http://www.cqvip.com 2004，38(10)：8～12／刘永琼，等 中国兽药杂志 后，lnln[1／(1一F(t))]=0．559 2 Int一1．043 5 (r =0．999 9，n=3)，也属于一级溶出模型。但 1～20 min的溶出速率明显快于20 min后。 褂 羽 赡 Ⅲ氍 露 1．5 l 0．5 0 ．O．5 ． 1 ． 1．5 口 -2 曼 ．2．5 ． 3 ． 3．5 ． 4 0 l0 20 3o 40 5o 时 间／min 图3 氟苯尼考可溶性粉、物混物及原药的 平均累积溶出率与时间的关系 ◆前20min ▲ 20min后 图4 氟苯尼考可溶性粉 Weibul1分布模型图 l 5 l O 5 一 O ． 0．5 ． 1 ． 1．5 {．2．5 ． 3 5 ． 4 O l 2 3 4 ln(t) 图5 氟苯尼考物混物 Weibul1分布模型图 物混物的 Weibul1分布模型为：前 20 min，lnln [1／(1一F(t))]：1．359 5 lnt一5．525 2(r2=0．997 1， n=7)，符合一级溶出模型；第 20 min以后，lnln [1／(1一F(t))]=2．715 5 lnt一9．313 3C=0．875 1， n=3)，属于一级溶出模型。 两者的体外溶出度参数 、 、ra见表3。 2．5 稳定性初步考察 按国标方法 ¨对氟苯尼考 可溶性粉进行了热和光稳定性考察。将样品分别置 于60℃和不同光照条件下，第 1、3、5、7天和第 10天 取样测定其紫外吸收度，其吸收值未发生变化，初步 表明其稳定l生良好。其他稳定l生观察仍在进行中。 表3 氟苯尼考可溶性粉及物混物体外溶出度参数 注：Q为累积溶出百分率；z 为累积溶出50．0％的时间； 为累积溶出63．2％的时间 m为曲线的形状参数。 3 结论与讨论 3．1 采取喷雾干燥制粒是提高难溶性药物的一个 有效途径 ¨ 因为喷雾干燥所得的粉剂多为松脆 的空心颗粒，加之经微粉化后表面积增大且处于非 晶型的高能状态，往往有较高的溶出速度和溶解 度。试验筛选出能提高氟苯尼考溶解度的辅料 A， 并利用喷雾干燥法制备氟苯尼考可溶性粉剂，得到 该剂型的较佳配方和制备工艺。实验证明，按拟定 处方制备的氟苯尼考溶液，经喷雾后所得非晶型氟 苯尼考(即氟苯尼考可溶性粉剂)溶解迅速，溶出率 为99．05％，分别是氟苯尼考原料干燥品(溶出率 30．34％)和氟苯尼考原粉(溶出率2．35％)的3．26 倍和42．15倍。样品经药物含量、溶出度、有关物 质及各项鉴别、检查等测定，结果符合《兽药典》规 定，说明本品拟定的处方和制备工艺较合理，作为 兽药新制剂开发，具有较好的使用价值。 3．2 根据氟苯尼考在溶解介质(少量乙醇溶解后 用蒸馏水稀释)中的紫外吸收光谱，选择266 nm作 为药物含量的检测波长，所得标准曲线线性回归相 关性好，平均回收率为99．46％ ±0．13％，表明本测 定方法可靠性强。 3．3 由氟苯尼考可溶性粉、物混物和原药胶囊剂 的平均累积溶出率与时间的关系曲线(图3)可以 看出，样 品在 20 min时的药物累积溶 出率达 ∞ 如 ∞ 加 0 维普资讯 http://www.cqvip.com · 12· 中国兽药杂志 2004，38(10)：8—12／刘永琼，等 84．80％，到45 min时其累积溶出率达到94．80％， 从20～45 min的25 min时间内，药物的累积溶出 率仅增加约 10％，说明氟苯尼考可溶性粉在20 min 内溶出速率较快，几乎能达到最大的溶出率；而物 混物在20 min时的累积溶出率只有21．50％，到45 min时，其累积溶出率达到88．80％，但仍小于前者； 原药由于水溶性极差，基本不溶。三者的数据对比 说明辅料 A有明显的助溶效果，喷雾干燥工艺则产 生明显的速释效果。但可溶性粉和物混物的胶囊 剂在人工胃液 45 min内均可溶出90％左右，符合 《中国兽药典》要求。 3．4 氟苯尼考可溶性粉、物混物的 Weibul1分布模 型(图4、图5)说明：二者前 20 min和20 min后的 释药动力学均符合一级溶出模型，但 1～20 min的 溶出率明显快于20 min后；可溶性粉的Weibul1分 布函数表达式的直线斜率明显大于物混物。可溶 性粉、物混物的体外溶出度参数分别为 =15．51 min， =17．74 min和 =26．97 min，To=30．86 min。说明可溶性粉在人工胃液中的释药速率明显 快于物混物。 参考文献： [1]邱银生，吴 佳．兽用广谱抗菌药物氟甲砜霉素[J]．中国兽药 杂志，1996，30(2)：47—48． [2]李秀波，石 波，粱 萍．新型广谱抗菌药——氟苯尼考[J]．国 外畜牧科技，1999，26(3)：50—52． [3 1 Animal Pharm，No．351：19—21． [4]Giordano C，Cavicchioli S， S．New strategy for racemization of 2一 amino一1，3-propanediols，key intermediates for the synthesis of anti— biotic drugs LJ]．Tetrahedron lett，1988，29(43)：5561—5563． [5]National Archives and Records Administration．Food and Drugs [s]．21 CFR，Part 522． [6]萧志梅．氟苯尼考的临床应用及市场状况[J]．中国兽药杂 志，2000，34(5)：53—54． [7]毕殿州．药剂学(第四版)[M]．北京：人民卫生出版社，2000． 163一l63． [8]中华人民共和国农业部．兽药质量标准[S]．1999，39—40． [9]余祥华，曾 勇．旋光法测定氟苯尼考原料含量[J]．福建畜牧 兽医，2002，24(1)，14一l5． [10]朱力军，赵 辉．高效液相色谱法测定氟苯尼考及其制剂的含 量[J]．中国兽药杂志，2000，34(6)：19—20． 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13发布第4O4号公告，根据《兽药管理条例》和《兽用新生物制品管理办法》的规定，经审查，批 准农业部动物检疫所申报的鸡新城疫灭活疫苗(La Sofa株)和中国农业科学院哈尔滨兽医研究所申报的鸡新城疫、传染性 法氏囊病二联活疫苗为三类兽用新生物制品，批准宁夏大学申报的犊牛、羔羊大肠埃希氏菌病、B型产气荚膜梭菌病基因工 程灭活疫苗为一类兽用新生物制品。现核发《新兽药证 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 》，并发布此三种制品的制造及检验试行规程、质量标准、使用说明 书。试行规程和质量标准自发布之13起执行。其生产、检验、经营等方面的管理工作执行《兽用生物制品管理办法》的规定。 维普资讯 http://www.cqvip.com